叶绿素实验报告
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叶绿素铜钠的合成、分离、分析及结构测定
食品092
一、实验目的:
1、从蚕沙中提取叶绿素并计算提取率。
2、初步研究叶绿素合成叶绿素铜钠的工艺条件。
3、分析叶绿素铜钠产品的纯度并计算其产率。
4、通过试验提高综合能力及练习巩固各种相关操作。
二、产品验收指标
项目和指标
───────────────┬──────────
项目│ 指标
───────────────┼──────────
pH │ 9.0~10.7
1%│
E 405nm ≥ │ 568
1cm │
消光比值│ 3.2~4.0
总铜(Cu),%│ 4.0~6.0
游离铜(Cu),%≤ │ 0.025
砷(As),%≤ │ 0.0002
铅(Pb),%≤ │ 0.0005
干燥失重,%≤ │ 4.0
硫酸灰分,%≤ │ 36.0
───────────────┴──────────
三、实验原理:
叶绿素是一种含有卟吩环的天然色素,它与蛋白质结合存在于植物的绿叶和绿色的茎中,是植物进行光合作用所必须的催化剂,叶绿素难溶于水,而易溶于极性有机溶剂。叶绿素有a和b 两种,a为蓝黑色结晶
叶绿素是一种含有卟吩环的天然色素,在叶绿素的结构中,含有一个由四个吡咯环和四个次甲基交替相联形成的卟吩环.卟吩环闭合的共轭体系提供了包围镁离子(或其它相似离子)的刚性平面.
叶绿素的结构如图l所示:
蚕沙中含有丰富的叶绿素,其纯含量达0.8—1.0%,居所有天然色素之首,故可用蚕沙来提取叶绿素,由于叶绿素易溶于乙醚、苯、丙酮、乙醇的脂性溶剂,故可用乙醇、丙酮混合液来提取。所得的叶绿素由于遇热、光、酸、碱等易分解,且又不溶于水。110度左右会分解,故把叶绿素制备成叶绿素铜钠,其性质更稳定溶解性也会有所提高。
叶绿素分子中的镁原子和四个吡咯上的氮原子相结合,环上是双羧酸的酯,一个被四所酯化,另一个被叶醇基所酯化,故可以发生皂化反应生成钠盐:
C
55H
72
O
5
N
4
Mg + 2NaOH = C
34
H
30
O
5
N
4
MgNa
2
+ CH
3
OH + C
20
H
39
OH
C
55H
70
O
6
N
4
Mg + 2NaOH = C
34
H
28
O
6
N
4
MgNa
2
+ CH
3
OH + C
20
H
39
OH
在酸性条件下,叶绿素钠盐分子中的镁极易被氢原子取代生成褐色的叶绿酸:
C
34H
30
O
5
N
4
MgNa
2
+ 4H+ = C
34
H
34
O
5
N
4
+ Mg2+ + 2Na+
C
34H
28
O
6
N
4
MgNa
2
+ 4H+ = C
34
H
32
O
6
N
4
+ Mg2+ + 2Na+
叶绿酸可与铜盐在加热条件下生成叶绿素铜酸析出,将叶绿素铜酸溶于丙酮,再与碱反应生成叶绿素铜钠:
C
34H
34
O
5
N
4
+Cu2+ = C
34
H
32
O
5
N
4
Cu+ 2H+
C
34H
32
O
6
N
4
+Cu2+ = C
34
H
30
O
6
N
4
Cu+ 2H+
C
34H
32
O
5
N
4
Cu + 2NaOH = C
34
H
30
O
5
N
4
CuNa
2
+ 2H
2
O
C
34H
30
O
6
N
4
Cu + 2NaOH = C
34
H
28
O
6
N
4
CuNa
2
+ 2H
2
O
蚕粪叶绿素铜钠盐的光谱特性蚕粪叶绿素铜钠盐水溶液在360~700之间有2个吸收峰在波长440处有一最大吸收峰,其吸光度为114;在630处有一较小的吸收峰,其吸光度为017"在波长440的吸收峰为叶绿素铜钠盐特有,而在630处的