常见病原微生物标本的送检

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《临床微生物学 检验》2015
采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90%以上的感染为 需氧菌或兼性需氧菌感染。
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采集部位?
• 从静脉取血; • 不宜从静脉导管或静脉留置口取血; • 如必须从留置导管内采血,应同时从外周 静脉采集另外一个血培养标本,以帮助阳 性结果判读。
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注意事项
• 为减少皮肤、培养瓶口等对血培养造成的污染,在穿刺前, 应对皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥,以减少假阳性 的发生机率。 • 血液标本采集后应立即送检,最好在2小时内送达实验室。 不能及时送检者,应置室温暂存。血培养瓶接种前后都禁 止放冰箱。 • 如果实验室收到采血量不足的标本仍需进行培养,则需在 报告单上注明:“送检血液标本量未达到要求,会影响结 果的灵敏度”。 • 运送的装置要足够安全,避免血培养瓶的运送过程中因碰 撞发和破裂。
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采血量?
采血量是影响灵敏度最关键因素,抽足量的血标本比抽血 时机更重要。
成人:一套标本2个培养瓶(需氧+厌氧),每瓶8-10ml, 共20ml;要求至少采两套标本,即40ml。 儿童:0.5-2.0ml/瓶/套 原因:成人菌血症血液含菌量通常≤10CFU/ml,多数不到 1CFU/ml;儿童可达100~1000CFU/ml 体重>36.3kg的儿童=成人
满足前两项条件,但现实 不可行,则只能等待时机
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标本采集的目的要明确!
医生开具的检查不应是盲目的 撒网式检查:不明原因发热,经验治疗无效或
取得不可复制的标本时。(强烈建议与微生物实 验室进行充分沟通后开具!)
标本的临床信息
标本性质(分泌物:渗出液?深部伤口?脓汁?坏死组 织?新鲜边界?) 采集部位(分泌物:皮肤?口腔?生殖道?肌肉层?器 官组织?)
CLSI M47-A
NHS quality improvement Scotland:blood culture 2011 《血流感染实验室诊断与临 床诊治》2014
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表皮葡萄球菌的临床意义
阳性套数 采集套数 临床意义
% 污染可能 无法确认 % %
采集1套无法判 断是病原菌还 是污染菌
1 1 2 1 2 3
1 2 2 3 3 3
0 2 60 0 75 100
97 95 3 100 0 0
3 3 37 0 25 0
2-3套血培养,有助于污染的判断
Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333
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标本须间隔多久采集?
“通常的操作是同时或短时间内采集2-3套血培养”
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血培养
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影响血培养采样因素
• • • • •
血液采样人员训练 采集部位 穿刺部位的准备工作 血液采样设备 采样数量与时机
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怀疑患者有血流感染的指征:
不明原因的发烧(>38℃)或体温过低(<36℃)
白细胞增多( >10,000/ul),粒细胞减少( <1,000ul) 休克,寒颤,僵直 严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部 术后感染,…) 心率>90次/分,呼吸加快 低血压或高血压
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呼吸道标本
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“口腔中定植菌包括21个属200种以上的微生物…a”
棒杆菌属 / 艾肯菌属 / 埃希菌属 -大 肠埃希菌/ 嗜血菌属 - 流感嗜血杆菌 / 奈瑟菌属-卡他布兰汉氏菌 / 消化链球 菌属 / 变形杆菌属 / 葡萄球菌属 - 金 黄色葡萄球菌/ 链球菌属 - 肺炎链球 菌 / 念珠菌属 - 白色念珠菌
Hale Waihona Puke Baidu
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病原微生物感染的复杂多样性 检测手段的多样性
要求临床医师开具申请单时要考虑: 取什么标本?作什么检验项目?什么时候 留取标本最合适?怎样留取标本?对检验 果的综合分析(污染?定植?病原菌?)
联系实验室至关重要!
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适当的标本得以确保诊断正确性 以降低医疗错误及费用的风险
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微生物检验标本采集的基本原则
适应证
没有某项检测的适 应证,不必检测
1社区患者无泌尿系统感染 表现,则不必进行尿培养 2血导管,不怀疑导管相关 感染,不必进行导管培养
必要性 可行性
社区获得泌尿系感染
初诊,症状轻微 不必进行尿培养 重症或经验治疗无效 必须进行尿培养 细菌性中枢神经系统 感染,提示需CSF培 养,但颅内高压。
医院感染病原体的特性
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医院感染病原体的特性
4.医院感染与储菌所关系:人体最大的储菌所为肠道 ,其次为鼻咽部。医院环境中适合细菌生长的非生物性 储菌所(环境储源)也很多,如水槽、氧气湿化瓶、拖 布、潮湿的器材和容器等。许多种医院感染细菌能在体 外生长,其中有一些细菌还具有耐受消毒剂能力。有人 曾做过一个试验,将绿脓杆菌种入新鲜蒸馏水中,经48 小时培养发现有繁殖,经蒸馏水传代后的细菌对戊二醛 、醋酸、二氧化氯具有抵抗力。储菌所不仅是细菌生长 繁殖场所,更重要的是成为细菌基因交换基地,包括耐 药性基因及一些与产毒素和侵袭力有关的基因。因此在 储菌所居留较久的细菌,不仅会发展成多重耐药菌株, 而且也增强了毒力和侵袭性,常常成为医院感染共同来 源或持续长期存在的流行菌株
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医院感染流行病学
• 来源:人类、环境 • 传播途径:以空气、接触及媒介传播更重要 • 易感人群
–年龄 –免疫状况 –基础疾病 –其他感染 –特殊药物 –创伤
• 医院感染的预防
–去除传染源 –切断传播途径 –增强宿主抗感染能力
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常见医院感染
• • • • •
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常见病原微生物的检测手段
• 形态学检验:标本染色及不染色的检验 • 培养+药敏试验:一般细菌培养、厌氧培养、 真菌培养、常规药敏定量试验…… • 免疫学方法:病原体的抗原、抗体检测等 • 特异性产物的检测:G试验、γ 干扰素…… • 分子生物学方法:检测病原体的DNA、 RNA…… • 质谱分析:病原体的检测
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下呼吸道标本
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物
支气管肺泡灌洗液
保护性毛刷 支气管灌洗液
肺部组织
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痰液标本
• 采集时间:用抗生素前 • 采集方法: 自然咳痰:必须用清水漱口3次,应包括咽喉部, 立即用 力咳出痰,于灭菌容器或运送培养基中。 支气管镜或支气管毛刷:由医生采集,建议直接种 入运送培养基。 • 运送要求 :于2小时内送达检查,如无法马上送出, 标本置于4℃保存
血培养的污染问题
污染是必然的 “即便进行严格的皮肤消毒以及在接种传代过程中严 格遵守无菌操作,仍有3-5%的血培养结果来自皮肤 或周围环境的污染菌,如芽孢杆菌、丙酸杆菌、棒 状杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、气球菌、微球菌。”
污染率至少应控制在3%以下
即使严格的无菌操作采集血 怎样判断污染? 标本也很难将污染率控制在 2%以下
泌尿道感染 呼吸道感染 外科伤口感染 血流感染 其他:烧伤、皮肤和软组织感染,眼和结膜感 染、子宫内膜炎、产后生殖道感染,胃肠炎、 肝炎等。
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1.医院感染的病原体大多数为人体正常菌群或条件致病 菌。这些细菌包括皮肤、消化道、呼吸道及泌尿生殖道的 正常菌群。它们对于健康人则无致病性,但对于免疫力低 下的人,菌群失调的病人则具有高度致病性。 2.医院感染的病原菌大多数具有耐药性。在广泛使用抗 生素的病房里细菌最容易产生耐药。这些细菌在免疫力低 下的病人中常替代正常菌群。往往成为以后发生院内感染 的病原体。 3.免疫力低下病人发生的感染中以革兰阴性杆菌较多( 占1/2~3/4)。一部分真菌性感染为病人入院前感染的复 发。白色念珠菌感染特别容易发生在留置导尿管或血管导 管的病人。巨细胞病毒感染常导致肺炎,病死率极高。卡 氏肺囊虫不感染健康人,只在免疫力低下的病人中发生感 染感染,如艾滋病。
不正确的检验结果 错误诊断
错误标本
错误治疗
医疗费用增加 耐药菌株增加 影响病人安全
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• 找到病原菌才能有效预防、控制医院感染 • 找到真正病原菌必须正确采集、送检标本
• 正确采集、转运与保存微生物标本直接关 系到致 病微生物培养的正确性与阳性率, 是从临床微生物检验获得正确结果的最关 键一步
皮肤粘膜出血
多器官衰竭 肝脾肿大 关节疼痛 CRP、PCT升高 ……
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发热要做血培养!
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血流感染时血培养采血时机
细菌浓度
体温
0
30
60 时间 (min)
尽可能在寒战或开始发热时; 尽可能在接受抗生素治疗前; 尽可能在下一次用药前
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在同一时间抽取血培 养时,每次抽取均应 完成采血的所有步骤
一般是指<10min
通常情况下,完成2-3套血培养后,2-5天不必重复进行血培养
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血培养次数
1.怀疑菌血症的成人患者:采集2-3套血培养标 本(不同部位)。 2.婴幼儿患者:采集2次血培养标本(不同部位) 3.除特殊情况外,在采取血培养后的2-5天内, 无需重复采取血培养。 4.可疑为持续性菌血症:如心内膜炎、导管相关 血流感染,间隔(1--24h)几次取血监测、捕捉、 指导治疗。
• 痰培养标本中病原体种类繁多而复杂使下 呼吸道感染病原诊断成为难题
a:李兰娟《感染微生态学》第二版,人民卫生出版社
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痰培养的临床指导价值小,可造成误导……在临床工作采集和 送检痰培养应非常慎重。 临床在采集痰培养之前需要思考: 有无必要取痰培养:患者是否有下呼吸道感染?如果有,其 下呼吸道感染是否由细菌或真菌感染所致? 是否可以取临床指导价值更大的其他标本以明确病原诊断 (如血培养、胸水培养、呼吸道病毒检测等)? 是否能取到合格的痰标本?(患者是否配合?) …… 痰液不是诊断细菌性肺炎的最佳标本,血培养、支气管肺泡灌洗、 气管吸取物能够提供更可信的病原菌信息-《临床微生物标本送检指南》
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痰培养采集要求
• 由于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等苛养菌 是最常见的肺部感染病原体,标本盒内细菌在室温环境 下很容易自溶死亡,如不能在采集标本后2小时内接种将 明显影响检出率。因此痰标本的采集时机十分关键,应 严格遵循以下原则采集标本: 1.争取首剂抗菌药物治疗使用前及更换抗菌药物前采集; 2.标本采集后保证2小时内送达实验室并得到接种; 3.只要有可能得到合格的痰标本,应马上采集、送检; 4.宜在医护人员直视下留取合格痰标本; 5.送检痰标本后三天内不主张再次送检。
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临床微生物标本规范化采集 和送检中国专家共识
牵头专家: 胡必杰、倪语星、马小军、肖永红
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微生物标本采集及运送的基本原则
• 在抗菌药物使用前采集标本 • 无菌部位的标本更具有临床价值,有菌部位采集 的标本需要清除正常菌群和定植细菌才有意义 • 标本的标签和申请单信息要完整 • 严格无菌操作 • 所有标本采集后都应尽快送往实验室,多数标本 应在2小时内送达 • 保证必要的运送条件
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注意事项
• 痰培养仅用于下呼吸道感染,主要是肺部感染的诊 断。但它不是诊断肺部感染的最佳标本。血培养、 肺泡灌洗液或经气管吸取物的培养结果更加准确。 痰标本不能进行厌氧菌培养。 • 痰标本采集前,要判断患者是否有能力配合完成深 部咳痰。要向患者充分说明口腔清洁、深咳、避免 口咽部菌群污染的意义,指导患者如何正确留取痰 标本。患者应在医生或护士直视下留取痰液标本。 实验室要建立痰标本的质量控制流程,对于被口咽 部菌群污染的标本,要予以拒收,并建议临床再次 采集合格标本送检。
常见病原微生物标本的送检
何先伟 2018年11月
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医院感染病原体
几乎所有病原体都可以导致医院感染 • 细菌:多重耐药细菌分离率升高 。 • 病毒:病毒感染季节,儿科及老年病区易发生 相应病毒的医院传播。 • 真菌:免疫功能低下患者,或因侵入性操作感 染。常见白假丝酵母菌、曲霉菌属、新 型隐球菌、隐孢子虫属、放线菌、球孢 子组织胞浆菌 • 其他:支原体、寄生虫等。
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