细菌的分布消毒与灭菌.doc
细菌的分布与消毒灭菌
第2章细菌的分布与消毒灭菌学习要点一、细菌的分布1. 土壤主要存在一些自营菌和腐物寄生菌，在自然界物质循环中起重要作用。
土壤中也有一些随着人及动物的分泌物、排泄物及尸体、残骸进入土壤的致病菌，但只有能形成芽胞的致病菌，如破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌等可长时间存活。
处理被泥土污染的创伤时要特别注意防止破伤风梭菌、产气荚膜梭菌等的感染。
2.水如被人和动物粪便污染，就可能带上伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、致病性大肠埃希菌、钩端螺旋体等。
通过水源易引起各种感染，特别是消化道传染病的暴发流行。
3.空气空气中的细菌是吸附在尘埃微粒上，常见的致病菌有结核分支杆菌、白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、脑膜炎奈瑟菌、军团菌等，可引起呼吸道传染病或伤口感染。
4.有生命物体的表面和与外界相通的腔道中这些部位能为细菌生长繁殖提供条件，存在着复杂的细菌群及其它微生物，包括致病菌和非致病菌。
5.无生命物体的表面和与外界相通的内表面其细菌均来源于土壤、水、空气以及人和动物的污染。
二、消毒与灭菌是指用物理或化学方法来抑制或杀死外环境中及机体体表的微生物，以防止微生物污染或病原微生物传播的方法。
以下术语常用来表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度。
消毒指杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀灭芽胞或某些非23 病原微生物。
用以消毒的药品称为消毒剂(disinfectant )。
灭菌指杀灭物体上所有微生物的方法。
包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。
经过灭菌的物品称“无菌”物品。
需进入人体内部的医用器材要求绝对无菌。
防腐防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。
细菌一般不死亡。
无菌不存在活菌的意思。
防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。
清洁是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。
是物品消毒、灭菌前必须经过的处理过程，有利于提高消毒、灭菌的效果。
1.物理消毒灭菌法热力灭菌法高温对细菌具有明显的致死作用。
细菌的分布与消毒灭菌资料
细菌素：是某些细菌产生的，只对产生菌亲缘关系相近的细菌有抗菌 作用的一类蛋白质。
中草药：一些中草药有抑菌、杀菌作用。
复习思考题
一．解释热原质、菌群失调、消毒、灭菌、防腐、无菌操作等 概念 细菌有哪些代谢产物？它们分别有哪些医学意义？ 了解细菌的分布与护理工作有什么关系？ 何种情况下正常菌群可转变为条件致病菌？ 请为下列物品或部位选一种最理想的消毒灭菌方法： 手术室 、手术 器械、注射器、排泄物、碗筷、牛奶。
消毒剂
环境
种类
作用时间
菌龄
有机物
温度
数量
表面张力
细菌 浓度 种类 酸碱度 穿透力
来苏： 煤酚皂液的杀菌能力与苯酚相似，其石炭酸系数随 成分与菌种的不同而异，处于1.6～5之间。含0.3%～0.6% 本品溶液10分钟能使大部分致病菌死亡，杀灭芽孢需要较高 浓度和较长时间。本消毒剂中主要杀菌成分为甲酚，三种异 构体的杀菌作用相似，其石碳酸系数介于2.0～2.7之间。
胃 一般无菌 肠 道 大肠埃希菌、产气肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、
肠球菌、类杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、乳杆 菌、白假丝酵母菌 尿 道 葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、非致病性分枝杆菌。 阴 道 乳杆菌、大肠埃希菌、类白喉棒状杆菌、白假丝酵母菌。
三、人体正 常菌群及其 意义
参与
人体常见的正常菌群
部位
主要菌群
皮 肤 葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、铜绿假单胞菌、丙酸杆菌、白假丝酵 母菌、非致病性分枝杆菌。
口 腔 葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌、类 白喉棒状杆菌、放线菌、螺旋体、白假丝酵母菌、梭菌。
鼻咽腔 葡萄球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌。 外耳道 葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌。 眼结膜 葡萄球菌、干燥棒状杆菌、类白喉棒状杆菌。
细菌的分布与消毒灭菌
用途
主要用于不耐高温无菌的血清、毒素、抗生素、药液，以及空气的除菌 。
特点
仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、衣原体和有些L型细菌等。
促进菌体蛋白质变性或凝固，如酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）等；
干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化剂、重金属盐类（低浓度） ；
损伤细菌的细胞膜，如酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂等。
巴氏消毒法：杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐热成分不被破坏。61.1~62.8℃30min或71.1℃15~30s，一般用于酒类、牛乳等的消毒。
对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁饮料、豆乳、茶、酒及矿泉水等）
1
最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值。
2
超高温杀菌 ：135～150℃和 2～8s
菌群失调症:由于菌群失调而出现临床症状.
二重感染:因菌群失调症往往是在抗菌药物治疗原有感染性疾病过程中产生的另一种新感染.
菌群失调:由于某种原因使正常菌群的种类.数量和比例发生较大幅度的改变,导致微生太失去平衡.
第二节 消毒与灭菌
无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
机制
(二)、化学消毒灭菌法
常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织 都有危害，所以只限于外用或环境消毒。
局限于：
表3-2 常用消毒剂
种类
使用浓度
用途
石炭酸
3-5%
地面、器具表面、皮肤消毒
乙醇
70-75%
皮肤、体温计消毒
高锰酸钾
0.1%
皮肤、尿道消毒
红汞
2%
皮肤、粘膜、小创伤消毒
硫柳汞
0.1%
细菌的分布与消毒灭菌课程
二、紫外线和电离辐射灭菌法
2 电离辐射
包括高速电子、χ射线和γ射线等 具有较高的能量和穿透力，对微生物有致死作用。 常用于一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。
辐射杀菌法
紫外线
杀菌机理：
波长200~300nm的紫外线具有杀菌作用，其中265—266nm最强
选择适当的消毒剂
01
低毒
02
价廉
03
低破坏
04
方便
05
易贮藏
06
有效
07
第三章 细菌的分布与消毒灭菌
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第一节 细菌的分布
一、细菌在自然界的分布
细菌在自然界的分布极为广泛，江河、湖泊、海洋、土壤、空气中都有数量不等、种类不一的细菌存在。在人类、动物、植物的体表，以及与外界相通的腔道中，也有大量细菌存在。
土壤
细菌在自然界的分布
一、细菌在自然界中的分布
消毒剂的应用（二）
手：一般用2%来苏；0.2%-0.4%过氧乙酸浸泡1min～2min后流水冲洗；2%碘酊涂擦后用70%酒精擦洗。 厕所、阴沟：生石灰。 空气：甲醛（实验室）12.5～25ml/m3加热熏蒸12～24hr或甲醛40ml+高锰酸钾30g/m3混合熏蒸12～24hr，肝炎病房用过氧乙酸3g/m3熏蒸90min。
01
抑癌作用:动物实验发现在致癌剂作用下，无菌大鼠比普通大鼠的癌症诱发率高2倍。正常菌群的抑癌作用可能是其能将致癌物质转化为非致癌物质，此外与其激活巨噬细胞活性及提高免疫功能有关
02
抗衰老作用:肠道双歧杆菌有抗衰老作用。健康乳儿肠道中的细菌约80%是双歧杆菌，成年后这类菌逐渐减少，老年后产生有害物质的芽胞杆菌类增多。机体吸收有害物质后，加速机体衰老。正常菌群可产生超氧化物歧化酶（SOD）， 能保护细胞免受活性氧的损伤，有抗衰老作用
细菌分布与消毒灭菌实验报告
细菌分布与消毒灭菌实验报告实验目的：探究细菌在不同环境中的分布情况，并了解消毒灭菌方法的效果。
实验材料：- 细菌培养基- 培养皿- 无菌棉签- 酒精- 消毒液（如漂白粉溶液）- 显微镜实验步骤：1.准备工作：(a) 确保实验环境干净、无菌。
(b) 在净化柜中消毒培养器具，确保无菌。
(c) 配制细菌培养基。
2.取一块无菌棉签，在实验环境的空气中拭取样本，将棉签悬浮于细菌培养基中。
3.将培养皿分为三组，标记为对照组、酒精处理组和消毒液处理组。
4.将无菌棉签均匀地在对照组的培养皿上擦拭。
5.用含有70％酒精的棉签将酒精处理组的培养皿表面擦拭。
6.用含有消毒液的棉签将消毒液处理组的培养皿表面擦拭。
7.将分别进行处理的培养皿密封，放置于恒温箱中进行培养。
8.观察培养皿中菌落的生长情况，并记录每组的菌落数量。
9.对于菌落数量较多的培养皿，可以取一部分菌落进行涂片染色，并在显微镜下观察细菌的形态特征。
10.对实验结果进行分析和总结。
实验结果：根据观察，可以得出下列结果：- 对照组中，培养皿上有较多菌落生长，说明环境中存在细菌。
- 酒精处理组中，培养皿上的菌落数量明显减少，但仍有个别菌落生长。
- 消毒液处理组中，培养皿上几乎没有菌落生长，表明消毒液能有效杀灭细菌。
实验结论：- 本实验的结果表明，细菌分布广泛存在于我们的日常环境中。
- 酒精能够对细菌进行一定程度的抑制，但并不能完全杀灭细菌。
- 消毒液具有较强的杀菌作用，能够有效灭菌，具有消毒和净化环境的能力。
实验的局限性和改进方向：- 实验中只观察了细菌的数量和生长情况，没有进行细菌种类的鉴定。
- 实验中只使用了一种消毒液，可以尝试使用其他不同种类的消毒液来对比效果。
- 实验需要进一步复制和扩大样本数量，以提高实验结果的可靠性和代表性。
总之，这项实验为我们了解细菌的分布情况和消毒灭菌方法的效果提供了基础数据，对我们的生活和卫生保健具有一定的指导意义。
14-细菌的分布与消毒灭菌
5.挥发性消毒液应存放有盖容器内。
（三）生物学方法
抗生素 噬菌体
思考题
解释：正常菌群、条件致病菌、菌群失调 菌群失调症、消毒、灭菌、无菌？
常用的湿热消毒灭菌方法有哪几种及主要 用途？
紫外线杀菌的原理及用途？ 化学消毒灭菌剂使用注意事项?
（三）空气中的细菌 真菌孢子、结核杆菌、白喉杆菌、脑膜炎
球菌、金葡菌、链球菌等
二.细菌在人体的分布 正常菌群： 存在于正常人体，在人体免疫功能正常时
对人体无害的微生物。
正常成人机体由1013细胞组成，人体携带的细菌 相当于人体细胞的10倍即，达1014。
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
紫外线：波长200~300nm有杀菌作用。 265~266nm杀菌作用最强。机制：破坏细 菌的DNA结构致细菌死亡
过滤除菌：只能除掉大的细菌，病毒、支 原体等小的微生物不能除掉。常用于不耐 热的血清，抗毒素，生物药品等的除菌。
干燥与低温抑菌法： 低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用于
保存菌种。如冷冻真空干燥法是目前最好 的保存菌种的方法。
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
一.概念：消毒、灭菌、无菌、防腐
细菌的分布与消毒、灭菌
★了解学细菌的分布，树立有菌观念、无菌
观念，严格无菌操作
★掌握目正常菌群、灭菌等概念
★掌握热力灭菌法，了解其他物理灭菌法
★掌握标常用化学消毒剂的种类及其用途
第一章
一、细菌的分布
（（
二一
））
人细
体菌
正 常 菌
在 自
群然
及界
其的
意分
义布
微生物 的分布
土壤
伤寒杆菌 痢疾杆菌 破伤风杆菌 结核杆菌等
室内空气消毒、浸
环氧乙烷 有毒易爆 皮毛、食品、医药、 敷料
食醋
5~10ml/m3
手术醋器械酸等消毒
生石灰 1:4或1:8
熏蒸空气消毒 排泄物、地面消毒
尼泊金 0.05~0.1%
生物制品、中药、
滴眼
乙龙酯胆）紫 2%~4%
浅表创伤消毒剂防腐
3. 影响消毒剂作用的因素
消毒剂 种
类 浓 度
作用时间
环境
(三) 方法— 化 学消毒法
1.消毒剂的作用原理 (1) 使菌体蛋白质变性或凝固。 如红汞、酒精、福尔马林、醋酸等。
(三) 方法— 化学消毒法
(2) 破坏细菌的 酶系统如双氧水、 碘液。
(三) 方法— 化学消毒法
(3) 改变细菌细 胞壁或细胞膜的通 透性，如新洁尔灭、 肥皂等
2. 常用消毒剂的种类和用途
凡能耐高热和潮湿的物品，如普通培养 基、生理盐水、手术器械、敷料、手术 衣、橡皮手套、注射器、玻璃器材等， 都可应用高压蒸气灭菌法灭菌。
(三) 方法— 物理灭菌方法
⑤ 巴氏消毒法： 加热62℃经30min或 71.7℃经15～30秒，可杀死物品中的无 芽胞病原菌。
细菌的分布与及消毒灭菌
大肠埃希菌*
乳酸杆菌 大肠埃希菌* B群链球菌
表皮葡萄球菌 粪链球菌 甲型和丙型链球菌 类白喉杆菌 消化链球菌 耻垢分枝杆菌 解脲脲原体
消化链球菌 产黑色素普氏菌 阴道加德纳菌 甲型和丙型链球菌 脆弱类杆菌 类白喉杆菌 解脲脲原体 白假丝酵母菌
Medical microbiology
02
物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 影响消毒灭菌效果的因素
巴 氏 消 毒 法：61.1-62.8℃ 30 min or 71.7℃ 15-30sec 煮 沸 消 毒 法：100℃ 5min - 10min 流通蒸汽消毒法：100℃ 15min - 30min 间歇蒸汽灭菌法：100℃ 15min - 30min 37℃过夜（3次） 高压蒸汽灭菌法：103.4kPa（121.3℃）15min - 20min
粘膜：1%硝酸银、3%过氧化氢、0.1%高锰酸钾等 皮肤：2%碘酊、70%酒精、2%红汞、2%碘伏 手： 2%来苏儿、2%碘酊、70%酒精、84消毒液 饮水: 氯气、漂白粉 空气: 甲醛熏蒸、紫外线 病人的排泄物：等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2% 来苏儿 环境：病人居住的房间、地面、墙壁（过氧乙酸喷洒） 厕所（生石灰）
Medical microbiology
2 消毒与灭菌
物理学方法
热
辐
滤
力
射
过
灭
杀
除
菌
菌
菌
法
法
法
超
低
声
温
波
干
燥
杀
抑
菌
菌
法
法
常用消毒灭菌的方法
化学方法
熏
浸
喷
擦
第三章细菌的分布与 消毒灭菌
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
热力灭菌法包括： 1.湿热灭菌法 2.干热灭菌法。
1．湿热消毒灭菌法
湿热消毒灭菌法包括： （1）煮沸法 （2）流通蒸汽消毒法 （3）间歇蒸汽灭菌法 （4）巴氏消毒法 （5）高压蒸汽灭菌法
2.干热灭菌法
干热灭菌法主要包括： （1）干烤 （2）烧灼 (3) 焚烧 (4) 红外线
四、生物因素对细菌的影响
（一）抗生素 （二）噬菌体 （三）中草药
3.无菌（asepsis）
无菌是指无活菌存在的意思， 多是灭菌的结果。 防止微生物进入机体或其它物 品的操作技术，称为无菌操作。
4.防腐（antisepsis）
防腐是指体外防止或抑制微生 物生长繁殖的方法。用于防腐的化 学药品称为防腐剂。
5.抑菌（bacteriostasis）
抑菌是指抑制体内外细菌生长 繁殖的方法。 常用的抑菌剂为各种抗生毒。
Байду номын сангаас
（四）条件致病菌 和菌群失调
1.条件致病菌
在一定条件下（ 免疫功能低下 ； 正常菌群寄居部位的改变 ；菌群失 调），正常菌群中的细菌也能致病， 即转化为条件致病菌。
2.菌群失调
在正常情况下，人体和正常菌 群之间，以及正常菌群中各细菌之 间，保持一定的生态平衡。 如果生态平衡失调，机体某一 部位的正常菌群中各细菌的比例关 系发生数量和质量上的变化，称为 菌群失调。
（二）紫外线与电离辐射
1.日光与紫外线 2.电离辐射:电离辐射包括α 、β 、 γ 和X射线等。
（三）滤过除菌法
常用滤菌器的种类： ①薄膜滤菌器 ②蔡氏（Seits）滤菌器 ③玻璃滤器
（四）超声波与微波灭菌法
1.超声波 不被人耳感受的高于20kHz /s的声波，称为超声波。 2.微波 可穿透玻璃、塑料薄膜与陶 瓷等物质，但不能穿透金属表面。
细菌的分布、消毒灭菌
(二) 机会致病菌和医源性感染
(opportunist and nosocomial infection)
机会致病菌：opportunist
医源性感染：nosocomial infection
正常菌群(normal flora) Colonization: 人的皮肤表面： 1012 ， 口腔： 1010 ， 胃肠道：1014
口腔正常菌群的形成： 1. 出生时无菌，随着母亲的第一次喂食，细菌
开始定居; 2. 在出牙之前（6-9月），Streptococcus salivarius
为优势菌，占98%； 3. 随着出牙， S. mutans 和 S. Sanguis（血）
开始定居，厌养菌定居于牙垠与牙根的空隙 中，口腔菌群趋于复杂。 4. 到青春期，类杆菌及螺旋体开始定居
口腔正常菌群的作用： 1． 占领口腔，使其它微生物不能定居 2． 合成营养物质 3． 刺激交叉抗病原体免疫 4． 产生细菌素、脂肪酸、过氧化物
佶抗细菌
正常菌群与宿主的生态关系
(Ecologic relationship) 1. 共生 synbiosis
病源与非病源的微生物及芽胞。 灭菌后的物品为无菌(asepsis)状态。
防腐(antisepsis)─ 用物理或化学的方法防止和抑制
微生物 的生长繁殖, 称为防腐或抑菌。
消毒剂与防腐剂的区别在于tics： microbicidal 但必须对皮肤及黏膜无害 Preservatives： static agents 通常用于食物，食入无毒。 Disinfectants： Microbicidal 不一定杀芽孢。
细菌分布与消毒灭菌实验报告
细菌分布与消毒灭菌实验报告一、实验目的1. 研究不同环境条件下细菌的分布情况；2. 探讨常见消毒灭菌方法对细菌的杀灭效果；3. 建立科学的消毒灭菌操作规范。
二、实验材料与方法1. 材料：a. 培养基：用于培养和检测细菌的典型营养富集培养基；b. 不同环境样本：包括但不限于空气、水、土壤、食品表面等；c. 常见消毒灭菌剂：如酒精、过氧化氢、紫外线等。
2. 实验步骤：a. 采集不同环境样本，制备相应的稀释液；b. 涂布法或滴布法将样本均匀涂布在不同培养基上；c. 细菌培养：将涂布好的培养基培养在适宜的温度下，定时观察并记录细菌的生长情况；d. 消毒灭菌试验：将已经培养好的细菌接种到不同消毒灭菌剂处理后的培养基上，观察并记录细菌生长情况。
三、实验结果与分析1. 细菌分布情况：a. 空气中：培养基上出现多种常见细菌，主要为空气中悬浮细菌；b. 水中：水样品中出现的细菌种类较多，表现为波动的生长曲线；c. 土壤中：土壤样品中的细菌种类丰富，生长繁茂；d. 食品表面：食品表面附着的细菌种类较多，主要为耐热菌和耐寒菌。
2. 消毒灭菌效果：a. 酒精：对大部分细菌有较好的消毒效果，但并不是所有细菌都能被完全杀灭；b. 过氧化氢：对细菌有较好的杀菌效果，多数细菌培养基上的细菌均被消毒；c. 紫外线：对细菌也有比较好的杀菌效果，但需注意照射时间和距离。
四、实验结论1. 不同环境中细菌的分布情况各异，需要根据实际情况选择合适的消毒灭菌方法；2. 酒精、过氧化氢和紫外线是比较常见的消毒灭菌方法，但对于不同细菌种类有不同的杀灭效果；3. 实验结果为建立科学的消毒灭菌操作提供了参考，为日常生活和工作中的消毒灭菌提供了技术支持。
五、参考文献1. 胡伟，刘静. 生物实验指导. 北京：北京大学出版社, 2017.2. 何亚平，李明. 微生物学实验技术. 北京：清华大学出版社, 2018.六、致谢在本研究中，我们由衷感谢指导老师对我们的悉心指导和支持，也感谢提供实验设备和场地的相关部门和同事。
第4章 第三节_细菌的分布与消毒灭菌
表皮葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、耻垢分枝杆菌等
阴道 乳杆菌、大肠埃希菌、类白喉棒状杆菌等
11
肠道的正常菌群
健康青年 粪便涂片
健康老年粪便涂片 健康壮年 粪便涂片
12
正
常
生物拮抗作用
建议：不要引用生水！
4
肠埃希菌E.Coli
军团杆菌LegionellaPneumophila5
（三） 空气 空气中的细菌来源于人畜呼吸道的飞沫及飘扬
起来的尘埃。室内空气中的细菌比室外多，尤其 在人口密集、空气不流通的公共场所空气中细菌 的种类和数量明显增多，易引起呼吸道传染病的 传播。空气中的细菌也是培养基、生物制品、医 药制剂以及手术室等的污染来源。
包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原 微生物。 无菌(asepsis)：不存在任何活菌。 防腐(anticorrosion ): 防止或抑制微生物生长繁殖的方法
19
无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
20
二、消毒灭菌的方法
消
毒
物理法
热力 辐射
灭
滤过
菌
方
法
化学法：各种消毒剂
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消毒剂的应用（二）
手：一般用2%来苏；0.2%-0.4%过氧乙酸浸泡1min～ 2min后流水冲洗；2%碘酊涂擦后用70%酒精擦洗。
厕所、阴沟：生石灰。 空气：甲醛（实验室）12.5～25ml/m3加热熏蒸12～
24hr或甲醛40ml+高锰酸钾30g/m3混合熏蒸12～24hr， 肝炎病房用过氧乙酸3g/m3熏蒸90min。
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2.水中的细菌
(1)水体中微生物的来源 土壤、空气、动植物尸体、人和动物的排泻物、工业及
生活污水。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ(2)水体中的病原微生物 通过水体传播的病原微生物主要有沙门氏菌属、志贺氏
菌属、霍乱弧菌等。可引起消化系统传染病，甚至爆发流行。
因此，做好水的卫生学检查对预防疾病至关重要。
3.空气中的细菌
（1）空气中缺乏营养物质与水分，且受日光照射，细菌不易繁殖。 （2）但由于人群和各种动物的呼吸道及口腔中的细菌可随唾液、
。
抹布和砧板上的 细菌模式图
针头上的细菌模式图
第一节 细菌的分布
一、细菌在自然界的分布 二、人体正常菌群及分布
一、细菌在自然界中的分布
1.土壤中的细菌
☆ 土壤是细菌生存的天然场所（因为土壤中有水分、营养物 质、空气、一定的PH环境和温度）。
☆ 自然界中，以土壤的含菌量（种类）最多，土壤素有“天 然培养基”之称。
{ 消毒（disinfection）：杀死物体上病原微生物的方法，
但不一定杀死细菌芽胞。 { 灭菌（sterilization）：杀死物体上包括芽胞在内的所 有病原性和非病原性微生物的方法。 { 防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法， 细菌一般不死亡。 { 无菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物进入机 体或物体的操作方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生 物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的 无菌操作。
{煮沸法：水温100℃经5分钟可杀死细菌繁殖体，常用 于食具、刀剪、注射器等的消毒，细菌芽胞需煮沸1～ 2小时才被杀灭。水中加入2%碳酸氢钠，可使沸点达 105℃，既可促进杀灭芽胞，又能防止金属器械生锈。
细菌的分布与消毒灭菌
第十二章细菌的分布与消毒灭菌种类繁多的细菌在自然界的分布极为广泛，它们与外界环境及宿主一起构成相对平衡的生态体系，大多数细菌对人体是无害的，但有些细菌侵入人体或因某些原因导致人体内微生态平衡失调时，可以引起疾病。
因此，了解细菌在自然环境及正常人体的分布，认识正常菌群的作用及微生态平衡与失调的关系，对加强无菌观念、正确使用消毒灭菌方法、防止医院感染、传染病及菌群失调的发生均有十分重要的意义。
第一节细菌的分布一细菌在自然界的分布土壤含有细菌生长繁殖必需的营养物质、水分、适宜的pH及气体环境。
因此，细菌的种类和数量很多，一般离地面10cm～20cm耕作层的土壤中，细菌含量最多。
土壤中的细菌多数为非病原菌，在自然界的物质循环中起着重要的作用。
土壤中的病原菌可来自人和动物的排泄物以及死于传染病的人畜尸体，多数病原菌在土壤中容易死亡。
但有一些能形成芽胞的细菌，如破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌等，它们在土壤中可存活几年或几十年，并能通过伤口感染，因此，当伤口被泥土污染时，应采取清创等必要的措施进行预防和治疗。
水也是细菌生存的天然环境，水中的细菌主要来自土壤和人、动物的排泄物等，水中细菌的数量通常是地面水多于地下水，静止水多于流动水，沿岸水多于中流水，由于水容易受人和动物的粪便及多种排泄物的污染，所以水中可含有伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌等病原菌。
水源被污染可引起多种消化系统传染病的流行，因此，保护水源，加强水和粪便的管理，是预防和控制肠道传染病的重要环节。
空气中缺乏营养物质与水分，且受日光照射，细菌不易繁殖。
但由于人群和各种动物的呼吸道及口腔中的细菌可随唾液、飞沫散布到空气中。
土壤中的细菌也随尘埃飞扬在空气中，因此空气中可存在不同种类的细菌。
尤其在人口密集的公共场所或医院，空气中细菌种类和数量显著增多。
常见的病原菌有金黄色葡萄球菌、链球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌及脑膜炎奈瑟菌等，可引起伤口或呼吸道感染。
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实验报告
课程名称：实验名称：医学微生物学
细菌的分布、消毒和灭菌
指导老师：
实验类型：
________________ 成绩： __________________
_______________同组学生姓名：_____ _____
一、实验目的
1.了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及
医学实践的重要性。
2.了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。
熟悉外界
因素对细菌的影响，掌握常用的消毒和灭菌方法
3.观察细菌鞭毛的变异
4.熟悉生物因素对细菌的作用
二、实验材料
三、普通琼脂平板培养基、大肠杆菌肉汤培养液、枯草杆菌肉汤培养液、无菌毛细吸管、肉汤培养基管、
电炉、锅子、高压灭菌器、接种环、酒精灯、紫外线灯、大肠杆菌培养物
四、操作方法
装
细菌的分布
1.
1) 空气中的细菌 (8 人一组 )
订2) 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于空气中约15-30 分钟，然后盖好，放 37℃温箱孵育 24 小时后观察结果，计算有多少个菌落。
3)手指皮肤上的细菌 (8 人一组 )
4)用手指直接涂于普通琼指平板上，放 37℃温箱孵育， 24 小时后观察结果，记录有多少种不同特
征的菌落。
2.消毒和灭菌
1)煮沸与高压灭菌法 (2 人一组 )
2) ●菌液：大肠杆菌 / 枯草杆菌uv30’
培养箱
3)●甲组：煮沸（ 100℃， 5min）
4)●乙组：高压灭菌法（ 121 ℃， 20min）
5)●丙组：不作任何加热处理
6) 紫外线灭菌 (8 人一组 ) 图 1 图 1
①以灭菌接种环挑取大肠埃希菌培养物，于琼脂平板上作来回密集划线接种。
②半启皿盖 (将皿盖遮住涂面的1／ 2)，置于紫外线灯下 lm 以内接受照射30 分钟。
③盖上皿盖，于 37℃培养 24 小时后观察结果。
3. 抗生素的抗菌试验图 2
4. ●菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌 1 号、 2 号
5.示教
1)化学消毒剂对细菌的影响
2)●观察抑菌圈抑菌圈
3)细菌鞭毛的变异
迁徙生长（H ）变形杆菌0.1%石炭酸图
点状生长、单个菌落（
2
O）
五、实验结果
1.细菌分布的实验结果
检查材料
细菌生长情况菌落个数
表 1 细菌分布的实验结果
空气
平板培养基表面或多或少
有菌落生长。
手指
培养基表面涂抹处
有菌落生长。
2. 消毒和灭菌实验结果
表 2 煮沸和高压灭菌实验结果
细菌名称甲组 100 ℃ 5 分钟乙组 121 ℃ 20 分钟丙组未加热 ( 对照 )
枯草芽胞杆菌混浊澄清混浊
大肠埃希菌澄清澄清混浊
3. 紫外线灭菌结果
平板上用皿盖遮盖部分的琼脂表面有灰白色菌苔生长，而未遮盖暴露于紫外线部分无菌生长。
说明紫外线具有灭菌作用，但穿透力弱。
4.化学消毒剂对细菌的影响实验结果
表3化学消毒剂对细菌的影响
化学消毒剂
大肠埃希菌金黄色葡萄球菌
抑菌圈直径 (cm) 敏感度抑菌圈直径 (cm) 敏感度
1%龙胆紫 2.7 ﹢﹢﹢ 1.6 ﹢﹢
2%碘酒 3.0 ﹢﹢﹢0.7 ﹢
2%红汞 1.2 ﹢﹢ 1.4 ﹢﹢1:1000 新洁尔灭 1.0 ﹢﹢ 2.1 ﹢﹢﹢
5.细菌鞭毛的变异
0.1%石炭酸培养基上变形杆菌只在点种处生长，而在普通培养基上变形杆菌呈迁徙性生长。
六、结果分析
1.细菌广泛分布于自然界及正常人体。
2. 高温对细菌有明显的致死作用，主要机制是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA 单螺旋断裂、
细菌细胞膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
高压蒸气灭菌，因增加压力而提高沸点，灭菌效
果最佳。
有芽胞的细菌由于对热的抵抗力比无芽胞细菌强，所以只有采用高压蒸气灭菌法才能将
芽胞彻底杀灭。
本实验中大肠杆菌无芽孢结构，沸水即可杀灭，而枯草芽孢杆菌具芽孢结构，普
通沸水杀不死芽孢，需要使用高压蒸汽灭菌。
3.波长 240nm~280nm 的紫外线，因与 DNA 吸收光谱一致，而具有明显的杀菌作用。
其机制是使细
4. 菌 DNA 链中两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，从而破坏DNA 构型，干扰其正常复制，导致细菌死亡。
本实验中暴露于紫外线的培养基中无菌生长被杀灭，而未暴露的菌可以生长实验支持理
论。
从表 3 可知不同化学剂对同种细菌产生的抑制作用不同，不同菌种对同种化学消毒剂的反应也存在差异。
5.普通培养基中的菌落呈现扩布式，可知菌体具有鞭毛，能够移动，另外对比发现 0.1%石炭酸能够抑制
该菌的生长。
七、讨论心得
1.在正常人身体的皮肤、毛发以及与外界相通的器官中都存在着—定数量的微生物。
在正常情况下，它们
对人体是有益而无害的，称为正常菌群。
机体正常寄居的微生物是互相依存，互相制约的，
保持着动态平衡，与人体之间表现为互生关系。
2.高压蒸汽灭菌在实验室是最常用、最有效的灭菌方法。
3.利用紫外线杀菌限于物体表面的杀菌，比较有效，但对内部效果不佳。
4.实验中新洁尔灭属季铵盐类消毒剂，它是一种阳离子表面活性剂，在消毒学分类上属低效消毒剂。
其
杀菌作用机制主要有：①改变细胞的渗透性，使细菌破裂；②使蛋白质变性；③抑制细菌体内
某些酶，使之失去活性；④因其有良好的表面活性，可高浓度聚集于菌体表面，影响细胞的新陈
5. 代谢。
一个理想的化学消毒剂，应具备以下几个特点：（1）杀菌谱广；（2）使用有效浓度低；（3）杀菌作用速度快；（4）性能稳定；（5）易溶于水；（6）可在低温下使用；（7）不易受各种物理化学因素影响；（8）对物品无腐蚀性；（9）无臭无味，无色；（10）毒性低，消毒后无残留
毒害；（ 11）使用安全，不易燃烧；（ 12）价格低廉；（ 13）运输方便；（ 14）可大量生产供应。
目
前的化学消毒剂中，没有一种能够完全符合上述要求的。
因此在使用中，只能根据被消毒物品性质、工作需要及化学消毒剂的性能来选择使用某种消毒剂。
6.实验要有效率必须在实验开始前对实验大体步骤了如指掌从而合理安排实验顺序达到不浪费时
间而且保证实验顺利快速进行。