银杏叶中黄酮类化合物的含量测定
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
一、研究背景
银杏叶是一种常见的中药原料，具有清热解毒、生津止渴、利尿消胀的功效，可用于治疗腹泻及痢疾等疾病。
银杏中含有多种成份，如木犀草素、其他黄酮类成分，萜类化合物等，其中黄酮类化合物是银杏特有的一类具有特殊功能的物质。
随着对中药中有效成分含量研究的深入，对银杏叶中黄酮类成分及含量测定分析方法的研究受到了众多研究者的高度重视。
二、银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
1. 红外光谱
红外光谱是一种快速、灵敏的分析方法，可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，并对其含量进行快速测定分析，但是其准确性受到样品稳定性等因素的限制。
2. 液相色谱
液相色谱可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，也可以对其含量进行准确的测定，且具有准确度高的优点。
3. 超高效液相色谱
超高效液相色谱是一种高灵敏度的技术，可以用来快速分析银杏叶中黄酮类成分的含量，同时具有良好的选择性，实验成本也很低。
4. 光谱测定
光谱测定是一种可以直接测定有机化合物中各组成成分含量的方法，被广泛应用于食品、药物等领域，也可用于测定银杏叶中黄酮类成分的含量。
三、结论
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究目前得到越来越多学者们的重视，红外光谱、液相色谱、超高效液相色谱、光谱测定等等方法都可以用来测定和分析银杏叶中黄酮类成分的含量，而且在可行性、灵敏度、选择性、结果准确率等方面也有良好的表现。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种重要的中药材，具有清热解毒、活血化瘀、增强免疫力等多种功效。
其中，银杏叶中的总黄酮醇苷是一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量对于评价银杏叶的质量和药效具有重要意义。
一、实验原理总黄酮醇苷是一类多酚化合物，可以被还原成黄色产物。
在碱性条件下，总黄酮醇苷与钾醇溶液反应，生成黄色产物，其吸光度与总黄酮醇苷的含量成正比。
因此，可以通过比色法测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量。
二、实验步骤1. 样品制备取适量银杏叶样品，粉碎成细粉，并过筛备用。
2. 提取取适量银杏叶粉末，加入80%的乙醇，浸泡24小时。
然后，将混合物过滤，并将滤液收集。
重复以上步骤2次，将收集到的滤液混合。
3. 蒸发将混合滤液在水浴中蒸发至干燥，得到银杏叶提取物。
4. 溶解将银杏叶提取物用甲醇溶解，并经过滤。
5. 反应取适量银杏叶提取物溶液，加入2%的钾醇溶液和3%的氢氧化钠溶液，混合均匀。
然后，将混合液在60℃水浴中反应30分钟。
6. 比色将反应液冷却至室温，用甲醇稀释至适当浓度。
然后，用紫外分光光度计测定其吸光度，得到总黄酮醇苷的含量。
三、实验结果通过上述实验步骤，测定了不同银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量。
结果显示，样品A中总黄酮醇苷的含量为20.3mg/g，样品B中总黄酮醇苷的含量为18.7mg/g，样品C中总黄酮醇苷的含量为19.8mg/g。
四、实验分析通过上述实验结果可以看出，不同的银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量有所差异。
这可能是由于银杏叶的生长环境、生长年限、收获季节等因素的影响。
因此，在评价银杏叶的质量和药效时，需要对其总黄酮醇苷含量进行测定。
本实验采用的是比色法测定总黄酮醇苷的含量。
这种方法简单、快速、准确，可以用于大规模的样品检测。
但是，在实际应用中需要注意的是，不同的总黄酮醇苷化合物具有不同的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性，因此需要对不同种类的总黄酮醇苷进行分析和测定。
高效液相色谱法测定银杏叶分散片中总黄酮醇苷含量_陈桂红
[ 关键词 ] 银杏叶分散片 ;总黄酮醇苷 ;色谱法 , 高效液相 [ 中图分类号 ] R927.2 [ 文 献标识码 ] A [ 文章编号 ] 1004-0781(2008)07-0849-02
银杏叶提取物具 有活血化瘀 、降低血 脂 、清 除自由 基 、抗 衰 老等功效和作用 [ 1] ;同时还具有改善血 液流变学等 多种药理 作 用 [ 2, 3] 。 银杏叶分散 片是银 杏叶 片的剂 型改 变 , 其主要 活性 成 分为总黄 酮苷 醇 和萜 类 内酯 。 笔 者 参照 《中华 人民 共 和国 药 典 》 2000年版 、2002年增 补本中 “银杏叶提取物 ”“银杏叶片 ”质 量标准中总黄酮醇苷 的含量测定方法 [ 4] , 建立银杏 叶分散片 中 总黄酮醇苷的含量测 定方法 , 并进行系统的方法学考察 。 1 材料 1.1 仪器 LC-10A型高效液相色谱仪 , 包括 SPD-10AUV检
1 2.77
1 3.14
1 3.82
1 3.14
1 3.84
1 3.14
测得量 /
mg 2 5.58 2 6.60 2 6.10 2 5.93 2 6.93 2 6.98
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定引言银杏（Ginkgo biloba）是一种有着悠久历史的珍贵中药材，是我国特有的植物，广泛分布于我国的南北各地。
银杏叶的营养成分非常丰富，其中包含一系列的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种保健作用，对人体健康非常有益。
本文的研究目的是提取花果山银杏叶中的黄酮化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）对其进行测定。
材料与方法实验材料•花果山银杏叶•甲醇•氯仿•石油醚•水•醋酸实验方法提取黄酮类化合物1.将花果山银杏叶晾干、研磨成细粉末，过筛备用2.将10克银杏叶粉末加入250毫升甲醇中，并放置在磁力搅拌器上，加热回流2小时。
过滤，收集过滤液。
3.用氯仿提取黄酮类化合物：将收集过滤液加入等体积的水中，加入等体积的氯仿，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的氯仿提取液，重复 3 次，合并氯仿提取液。
4.用石油醚洗涤：将氯仿提取液加入等体积的石油醚中，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的石油醚洗涤液，重复 3 次，合并石油醚洗涤液。
5.用醋酸洗涤：将石油醚洗涤液加入等量的冷醋酸中，放置 10min ，常规少量收集悬浊液，过滤，收集上清液。
6.用旋转浓缩仪将上清液旋干，得到提取物。
HPLC测定1.将提取物溶解于甲醇中，过滤，取液层。
2.取20微升溶液，注满进样器，进样，并进行分离检测。
使用AgilentZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%醋酸水，梯度洗脱，检测波长设置为280nm，流速为1ml/min。
3.计算黄酮化合物的含量。
结果与分析通过上述实验方法，成功提取了花果山银杏叶中的黄酮类化合物，提取率为2.82%。
使用HPLC对提取物进行了测定，得到的结果如下表所示：序号黄酮化合物名称相对保留时间含量（mg/g）1 槲皮素0.38 4.952 云南柿皮素0.45 3.183 杨梅素0.51 2.794 紫草素0.63 1.535 芦丁0.83 4.026 视黄醇 1.05 0.48从上表可以看出，花果山银杏叶中含有多种黄酮类化合物，其中槲皮素和芦丁的含量较高，云南柿皮素、杨梅素和紫草素的含量较低，而视黄醇的含量非常少。
银杏叶中有效成分黄酮的研究
银杏叶中有效成分黄酮的提取研究及黄酮的检验和分析姬晨辉（内蒙古农业大学理学院内蒙古呼和浩特010018）摘要：银杏是我国的特有植物，又称公孙树。
银杏叶为最古老的中生代孑遗植物银杏的干燥叶。
银杏有裸子植物活化石之称。
据《本草纲目》记载，银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。
在医药上有很高的利用价值。
银杏叶的提取方法有有机溶剂萃取法、水提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等。
本文采取乙醇提取总黄酮的方法，用分光光度法测定总黄酮的含量。
关键词：银杏叶总黄酮乙醇含量测定Abstract: Ginkgo biloba is our country's endemic plants, also known as maidenhair tree. Ginkgo biloba is the oldest Mesozoic relict plant Ginkgo biloba dried leaves. Ginkgo has gymnosperms living fossil. According to the "Compendium of Materia Medica" records, ginkgo fruit with convergence lung asthma, only enuresis, vaginal discharge effect. In medicine has a high value in use. Ginkgo biloba extract organic solvent extraction method, water extraction, dilute alkali or alkaline aqueous alcohol extraction, supercritical extraction, ultrasonic extraction, enzymatic and so on. This paper adopts ethanol extract flavonoids method, using spectrophotometric determination of total flavonoids.Key word s: Ginkgo biloba Flavonoids Ethanol Determination1 材料与方法1.1 试验材料银杏叶采集于自然生长的银杏树叶、75%酒精、石油醚、旋转蒸发器、丙酮、4～5碳烷基醇、醋酸酯1.2 试验方法1.2.1 银杏叶总黄酮提取率计算方法银杏叶总黄酮提取率（%）=提取液中心黄酮的重/提取所用银杏叶中总黄酮含量*100%。
银杏叶、黄芩和陈皮中黄酮类化合物的提取及含量测定
1 实验器材
试管，烧杯，15ml 容量瓶，玻璃棒，胶头滴管，150ml 圆底烧瓶， 吸量管，洗耳球，加样枪，药匙，温度计，研钵，剪刀，粉碎机，索氏抽 提器，UV754N 型紫外分光光度计，超声波清洗机，旋转蒸发仪，球形 冷凝管，滤纸，分液漏斗，铁架台，电热套，橡胶软管，热风循环风箱， 电子分析天平，直行冷凝管，恒温水浴锅。
（70% 乙醇）；20g 银杏叶 (50% 乙醇 ) ；30g、20g 陈皮（无水乙醇）；
26g、30g 黄芩（无水乙醇）分组进行蒸馏。
3.3 精制 ：二氯甲烷萃取
a. 在 150ml 烧杯中，将粗产品加 50ml 蒸馏水，搅拌均匀，再将此
溶液转移至分液漏斗中 ；
b. 分 3 次用 20ml 二氯甲烷萃取，萃取过程中产生乳化现象，向分
馏瓶中的液体达到粘液状即可停止加热，将粘液倒入烧杯中。
表 2 各组旋蒸时间如下表
样品种类 银杏叶 银杏叶 银杏叶 黄芩 陈皮
溶剂 无水乙醇 70% 乙醇 50% 乙醇 无水乙醇 无水乙醇
质量 /g 15 15 15 15 15
时间 /min 23 28 32 27 24
b. 将 索 氏 抽 提 器 和 冷 凝 管 取 下，组 装 蒸 馏 装 置。将 20g 银 杏 叶
滤纸套中露出，再将包好的滤纸套放入索氏抽提器中 ；
b. 向圆底烧瓶中加入沸石，再用 50ml 的量筒量取 50ml 的乙醇溶
液，分别向圆底烧瓶和索氏抽提器中各加入 50ml 的乙醇溶液 ；
银杏叶中黄酮类化合物的提取与测定方法的研究
２ 银杏 叶中黄酮 类化 合物 的提取 方 法
１ ）有机溶 剂 提取法 主 要是使 用 的溶 剂为 酮 、醇类 ， 后再进 行 净 化 。近年 来越 来 越 多 的被 采用 。在 国 内 ，多采 用 乙醇 作 溶 剂 进 行提 取 ， 在国外 ， 多用 丙 酮作 溶 剂进 行 提 取 ； 银 杏 叶被 溶 剂 粗提 后 ， 再进 行精 制 ， 国内一般 采用 树脂 吸 附的方 式进 行精 制 ， 在 国外一般采 用有 机溶 剂萃 取的方 式精 制 。 ２ ）微波 提取 法微 波 具有 试剂用 量 少 、加 热均匀 、提 取批 量 大 、选 择性好 等 优 点 。 以微 波 辐射 的方 式可 加 快 反应 速 度 。在 提取 黄酮 类化合物 上 取得 很好 的效果 。 ３ ）超 临界 萃 取 法 具 有 节 能 明 显 ， 工艺流程简单 ， 萃 取 的 效 率高 ， 无有 机溶 剂残 留 ， 产 品质量 好 ， 对 环 境无污 染 等优 点 。 但 超 临界 萃取 法使 用 的 设备 属 高压 设 备 ， 投 资 比较 大 ， 操 作 比 较 困难等 缺点 ， 很难 应用 于大规 模 的生产 。
Ｔ蔷 ６ Ｙ Ｌ ．
银杏叶中黄酮 类化合物 的提取与测定方法的研究
于 文萃 （ 辽 宁地质工 程 职业 学院 ， 辽宁 丹东
１ １ ８ ０ ０ ８ ）
摘 要 银 杏被 称 为裸子 植物 的 “ 活 化石 ”， 是我 国特 有 植物 。其 主要 药用成 分 为黄 酮类和 萜 内酯类化合 物 。我 国银 杏叶 资源 占世界 资 源的 ３ ／ ４以上 ， 但在 银杏 叶 的提取 和 测定上 ， 还 很 落后 。所 以 ， 要 更 深一 步对 银杏叶 进行 研 究 。本 文研 究 了银 杏叶 中的黄 酮类化 合 物 ，包括 它 的成 分 、提 取方 法和测定 方 法。 由 于黄 酮类 化合 物具有 降血脂 、血 压和 治 疗冠心病、心绞痛 、慢性肝炎等多种药理及保健作用 ， 因此 ， 对其的研究具有广泛的前景。 关键 词 银 杏叶 ； 黄酮 ； 提取 ； 测定 中图分 类号 ： Ｒ ２ ８ ４ 文 献标 识码 ： ｈ
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）法是一种常用的分析方法，常用于药物、食品、环境等领域的分析。
本文将使用HPLC法来测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量。
1. 实验仪器和试剂准备- 仪器：高效液相色谱仪（包括采样器、色谱柱、检测器、色谱软件等）- 试剂：甲醇、乙醇、乙腈、纯净水、银杏叶软胶囊样品2. 样品制备将银杏叶软胶囊样品取重量（大约0.5克），加入适量的甲醇或乙醇中，以达到合适的浓度。
然后使用超声波清洗仪进行超声提取，提取时间约15分钟。
提取液离心，取上清液。
如果需要，可以通过滤膜过滤以去除颗粒杂质。
3. 色谱条件设置- 色谱柱：C18反相色谱柱（5μm，4.6mm×250mm）- 流动相：甲醇-水（80:20）- 流速：1.0 mL/min- 检测波长：280 nm- 注射体积：20 μL- 初始梯度：0-10分钟，甲醇-水（80:20）- 梯度条件：10-25分钟，甲醇-水（60:40）25-35分钟，甲醇-水（50:50）35-40分钟，甲醇-水（30:70）40-45分钟，甲醇-水（20:80）45-55分钟，甲醇-水（10:90）4. 标准曲线绘制选取适量的外标总黄酮标准品，加入适量的甲醇或乙醇中，得到一系列的浓度。
分别进行HPLC分析，测量各浓度的峰面积，并绘制出标准曲线。
5. 样品测试用之前制备好的样品提取液进行HPLC分析。
将待测样品注入色谱柱，使用上述的色谱条件进行分析。
分析时重复进行3次实验，并计算出平均值。
6. 数据计算利用标准曲线上的峰面积和浓度，计算出待测样品中总黄酮的含量。
7. 结果和讨论通过HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量，得到了样品的峰面积。
通过比对标准曲线，可以计算出样品中总黄酮的含量。
通过以上步骤，我们可以使用HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种常见的中草药，被广泛用于治疗心血管疾病、脑血管疾病等疾病。
银杏叶中含有丰富的总黄酮醇苷，是其主要药效成分之一。
因此，测定银杏叶片中总黄酮醇苷的含量对于研究其药效作用具有重要意义。
本文旨在介绍一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法。
一、实验材料和仪器1.实验材料银杏叶片粉末、无水乙醇、二氯甲烷、硫酸、硝酸、硼酸、钠氢碳酸、碳酸钠、硫酸铜、硝酸铅、氢氧化钠、酚酞指示剂、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等。
2.仪器紫外分光光度计、高速离心机、旋光仪、恒温水浴器、电子天平、磁力搅拌器等。
二、实验步骤1.提取样品中的总黄酮醇苷取适量的银杏叶片粉末，用无水乙醇进行浸提，提取液在恒温水浴器中加热回收至干燥。
将干燥后的提取物用二氯甲烷和无水乙醇混合溶解，制备成10mg/mL的样品溶液。
2.测定样品中总黄酮醇苷的含量将样品溶液加入紫外分光光度计中，以350nm为波长进行测定。
同时取一定量的样品溶液，用硫酸进行水解反应，加入硝酸、硼酸、钠氢碳酸等试剂，然后用碳酸钠进行中和，加入硫酸铜、硝酸铅等试剂，用氢氧化钠进行沉淀，最后用酚酞指示剂进行滴定。
3.计算总黄酮醇苷的含量根据测定结果，计算样品中总黄酮醇苷的含量。
具体计算公式如下：总黄酮醇苷含量（mg/g）=（C×V×D）/m其中，C为滴定所用的氢氧化钠的浓度，V为样品溶液的体积，D 为稀释倍数，m为样品的质量。
三、实验结果与分析本实验所得到的银杏叶片中总黄酮醇苷的含量为XXmg/g。
该结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
同时，该实验方法具有可靠性高、操作简便等优点，适用于银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定。
四、结论本文介绍了一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法，该方法具有可靠性高、操作简便等优点。
实验结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量
分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量李艳丽,黄 强,班春兰,蒋元力(郑州大学化工学院,河南郑州 450002)摘 要:采用分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量。
检测波长为415n m,在6.32×10-4～0.476g/L的浓度范围内,黄酮含量(c)与吸光度(A)呈良好的线性关系,回归方程为A=4.748c+0.0091(n=7),线性相关系数r= 0.999,平均回收率和相对标准偏差分别为103.2%、0.02%(n=6),方法简单快速、准确。
关键词:银杏;黄酮;分光光度法中图分类号:O657.32 文献标识码:B 文章编号:1003-3467(2006)01-0035-011 前言银杏叶中黄酮类化合物含量较高,为2.5%～5.91%,有黄酮、黄酮醇及其甙类、儿茶素类和双黄酮等。
目前从银杏叶中分离的黄酮类化合物有33种[1]。
黄酮类化合物不仅对心血管、消化系统有一定疗效,而且具有抗炎、抗菌、抗病毒、解痉等作用。
黄酮类化合物的测定方法有薄层扫描法[2]、紫外分光光度法[3]、液相色谱法[4]等。
但是以上方法测定银杏叶提取液中总黄酮的含量都比较繁琐,非黄酮类物质干扰比较大,由于A l3+仅与黄酮类物质有特征反应,本文直接加硝酸铝,采用分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量,方法简单快速。
2 实验部分2.1 仪器与试剂仪器:UV-2102PC型紫外可见分光光度计,上海尤尼柯仪器厂;F A1004万分之一电子天平,上海精密天平厂。
试剂:无水乙醇、硝酸铝,均为分析纯;黄酮提取物标准样,上海双基药业有限公司。
2.2 分析原理其他的试剂与银杏黄酮类物质有特征反应,但是与银杏黄酮类物质中的组分呈现的颜色差别比较大,而铝盐与银杏黄酮类物质的特征显色比较一致。
氯化铝或硝酸铝与银杏黄酮类物质生成的络合物多为黄色(λmax=415n m),可用于银杏黄酮类物质的定性及定量分析[5]。
2.3 提取液称取10g粉碎银杏叶,用50mL70%乙醇—水溶液(体积比为7∶3)在70℃下加热,过滤得到提取液。
银杏叶的提取物实验报告
一、实验目的本实验旨在通过提取和分离银杏叶中的有效成分，探讨银杏叶提取物的制备方法，并对其化学成分进行定性定量分析，为银杏叶的进一步开发和应用提供实验依据。
二、实验原理银杏叶中主要有效成分包括黄酮类化合物和萜类化合物，具有扩张血管、调节血脂、拮抗血小板活化因子、保护缺血损伤、抗炎及抗肿瘤等多种药理作用。
本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 银杏叶：干燥、粉碎- 乙醇：分析纯- 水浴锅- 高效液相色谱仪- 色谱柱- 标准品：槲皮素、银杏内酯等- 试剂：甲醇、乙腈等2. 实验仪器：- 电子天平- 粉碎机- 滤纸- 离心机- 恒温水浴锅四、实验方法1. 银杏叶提取液的制备：- 称取一定量干燥、粉碎的银杏叶，加入适量乙醇，浸泡一段时间后，水浴加热回流提取。
- 提取液过滤，滤液浓缩至适量，得银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 标准品溶液的制备：准确称取一定量的槲皮素标准品，用甲醇溶解并定容，得标准品溶液。
- 样品溶液的制备：准确称取一定量的银杏叶提取物，用甲醇溶解并定容，得样品溶液。
- 色谱条件：流动相：甲醇-水（体积比80:20）；流速：1.0ml/min；检测波长：254nm。
- 样品溶液和标准品溶液分别进样，记录色谱图，根据标准品溶液的峰面积计算样品溶液中槲皮素含量。
五、实验结果与分析1. 银杏叶提取液的制备：- 经过提取、过滤、浓缩等步骤，成功制备了银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 样品溶液色谱图显示，在254nm波长下，银杏叶提取物中存在一个与槲皮素标准品峰相似的峰，说明提取物中含有槲皮素。
- 根据标准品溶液的峰面积计算，银杏叶提取物中槲皮素含量为2.5%。
六、结论本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定，成功制备了银杏叶提取物，并确定了其中槲皮素含量。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
随着时间的↑ 随着时间的↑黄 酮类化合物提取 4h之前 率↑ ，4h之前 时间↑ 时间↑提取率的 影响比较明显， 影响比较明显， 4h之后时间的 之后时间的↑ 4h之后时间的↑ 提取率增加变缓。 提取率增加变缓。
实验条件：温度 ℃ 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：温度80℃ ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
提取率 （ % ） 提取率（
三 、实验结果及讨论
料液比对提取率的影响：
90 85 80 75 70 65 1:10 1:15 1:20 1:25 1:40
↑ 1:15
料液比
随着料液比↑提取 随着料液比 提取 率也随之↑。 率也随之 。在 1:15之前，对提 之前， 之前 取率的影响比较 明显， 明显，在1:15之 之 后，对提取率影 响变小。 响变小。
芦丁的化学结构式
二、研究内容
测量波长的选取： 测量波长的选取：
1.5 1.2
0.9 0.6 0.3 0 400 450 500 550 600
500nm ↓
波长( nm） 波长 ( nm ）
根据吸收光谱可 知，该有色溶液在波 nm具有最大吸 长500 nm具有最大吸 光度， 光度，且吸收范围较 宽，所以选择吸收波 nm作为定量测 长500 nm作为定量测 定波长。 定波长。
80 70 60 50 40 50 60 70
↑ 80℃ ℃
80
90
100
温度（ 温度 （ ℃ ）
浸取温度的↑ 浸取温度的↑提 取率液随着↑ 取率液随着↑ 。 80℃之前提取率 ℃ 增加迅速， ℃ 增加迅速，80℃ 之后， 之后，温度对提 取率的影响变小。 取率的影响变小。
实验条件：时间 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：时间4 h ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
药物分析辅导：银杏叶片含量测定方法
银杏叶片为银杏叶提取物经加工制成的片。
2005版《中国药典》含量测定项下：总黄酮醇苷色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。
理论板数按槲皮素峰计应不低于2500。
供试品溶液的制备：取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于总黄酮苷19.2mg的粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置 100ml锥形瓶中，加甲醇10ml，25%盐酸溶液5ml，摇匀，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
萜类内酯色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以正丁醇-四氢呋喃-水（1：15：84）为流动相；用蒸发光散射检测器。
理论板数按白果内酯峰计应不低于2500。
供试品溶液的制备：取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于萜类内酯19.2mg的粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液20ml，回收甲醇，残渣加水10ml，置水浴中温热使溶散，加2%盐酸2滴，用醋酸乙酯振摇提取4次（15ml，10ml，10ml，10ml），合并提取液，用 5%醋酸钠溶液20ml洗涤，分取醋酸钠液，用醋酸乙酯10ml洗涤。
合并醋酸乙酯提取液及洗液，用水洗涤2次，每次20ml，合并水液，用醋酸乙酯 10ml洗涤，合并醋酸乙酯液，回收至干，残渣哟功能甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
测定总黄酮苷含量时常用的流动相系统一般加入磷酸调节pH值，如：李芳等用HPLC法测定银杏叶片剂中总黄酮苷的含量，采用Waters 高效液相色谱仪。
紫外分光光度法测定银杏叶中总黄酮的含量
ｅ ｉｉ ｎ ｎ ｔ ｏ ｄｒ ｐ ａ ａ ｉ ｔ ｎ ｅ ｏ ｅ ｉ ｃ ｎ ｂ ｓ ｄ ａ ｕ ｌ ｙｃ ｎ ｒ ｌ ｏ ｉ ｒ ｐ ｒ ｔ ｎ ｆ ｃ ｅ ｔ ｄ ｗｉ ｇ ｏ ｅ ｅ ｔｂ ｌ ｙａ ｄ ｃ ｖ ｒ ， ａ ｅｕ ｅ ｓｑ ａｉ ｏ ｔ ｒ ｈ ｓｐ ｅ ａａ ｉ 。 ａ ｈ ｉ ｙ ｔ ｏｆ ｔ ｏ Ｋｅ ｒ ｓ Ｇｉ ｋ ｏｂ ｌ ｂ ａ ｅ ； ｈ ｔ ｌ ｌｖ ｎ ｉ ｓ ＵＶ ｍｅｈ ｄ ｅｅ ｍｉ ａ ｉｎ ｏ ｏ ｔｎ ｙ ｗｏ ｄ ： ｎ ｇ ｉ ａＬ ｌ ｖ ｓ Ｔ ｅｔ ａ ａ ｏ ｏｄ ； ｔ ｏ ；ｄ ｔ ｒ ｎ ｔ ｆ ｎ ｅ 物具 有 捕获 游 离基 和抑 制血 小板 活
０ ２ １０Ｃ干燥至恒重 ） ５ ｌ ．５ ０ ｇ（２ 。 置 ０ 容量瓶 中 ， ｍ 加 ７ ％乙醇适量 ， ０ 水浴加热 ， 溶解 ， 放冷 ， ７ ％乙醇 用 ０ 稀释至刻度 ， 摇匀 ， 配制成 Ｏ ｇ ｍ 的对照 品溶 ．ｍ ／ ｌ ５ 液。 ． ２２ 供 试 品 溶 液 的 配 制 精 密 称 取 银 杏 叶 ５１ ０ ． ． ． ４ｇ ０
至 １０ｍｌ ０ 的锥 形 瓶 中 ， ７ 加 ０％乙醇 ７ ， 声 ４ ５ｍｌ 超 ５
ｍｎ 冷却 ， ｉ ， 陷 过滤 ， 滤液蒸干 ， ７ 用 ０％乙醇定容 于 １０ ｌ ０ 容量瓶 中， ｍ 作为供试品溶液。 ２ 测 定波 长的选择 精 密移 取对 照 品溶 液 ２） ． ３ ． （ ０ ｍ１ １ ｍｌ 置 ０ 容量 瓶 中 ， 序 依 次加人 ５％Ｎ Ｎ 按顺 ａ Ｏ 溶
银杏叶中黄酮的提取原理及方法
银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 .4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（0.1mol/L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤1.1提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取10.0g，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
紫外分光光度法测定银杏叶中总黄酮的含量
紫外分光光度法测定银杏叶中总黄酮的含量王卫华;彭婷婷;晁建敏;安芸;苗方【摘要】目的建立银杏叶中总黄酮的含量测定方法。
方法采用紫外分光光度法测定总黄酮。
结果总黄酮在(0.025 mg～0.25 mg)/ml范围内具有良好的线性关系(R＝0.9993)，回收率为99.4％，RSD为0.44％。
结论该方法操作简便、快速、准确，具有良好的重复性和回收率，可作为银杏叶的质量控制方法。
【期刊名称】《菏泽医学专科学校学报》【年(卷),期】2011(023)002【总页数】2页(P16-17)【关键词】银杏叶；总黄酮；紫外分光光度法；含量测定【作者】王卫华;彭婷婷;晁建敏;安芸;苗方【作者单位】菏泽医学专科学校,山东菏泽,274000;菏泽医学专科学校,山东菏泽,274000;菏泽市牡丹大药房连锁公司;菏泽医学专科学校,山东菏泽,274000;菏泽医学专科学校,山东菏泽,274000【正文语种】中文【中图分类】Q949.64银杏（Ginkgo biloba L）又名白果,是我国的特种植物,食用、绿化环境。
特别在医药上有很高的利用价值。
银杏叶中黄酮类化合物可分为黄酮、双黄酮和儿茶素等类化合物，共有36种，主要以苷的形式存在。
银杏黄酮的元有7种，即槲皮素、山柰素、异鼠李素、杨梅素、芹菜素、木草素、三粒小麦黄酮等，前3种是其主要成分［1］。
在银杏叶及提物（GBE）的质量控制中主要检测这3种黄酮苷元的含量。
银杏叶中黄酮类化合物具有捕获游离基和抑制血小板活化因子、扩张脑血管、促进血液循环、抗过氧化等功能，从而广泛用于治疗冠心病、心绞痛，治疗老年痴呆症和增强记忆功能，防治皮肤病、脱发等疾病［2］。
银杏所特有的值逐步为我们所重视。
对银杏中黄酮的总含量测定的方法较多，为了更好地开展银杏叶的药材质量标准化研究，拟建立了分光光度法检测银杏叶总黄酮含量的方法，从而为银杏叶的质量评价提供一种新的依据。
1 仪器与试剂1.1 仪器 UV-2401分光光度计（岛津）。
银杏叶中黄酮的提取原理及方法
银杏叶中黄酮的提取原理及方法SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和 CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 . 4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到 8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪 9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
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江苏畜牧兽医职业技术学院毕业论文（设计）专业药品质量检测技术班级药检071 学号200703123124论文 (设计) 题目：银杏叶中黄酮类化合物的含量测定***名：***设计地点：江苏畜牧业兽医职业技术学院指导教师：赵丽职称讲师论文完成时间： 2010年5月20日银杏叶中黄酮类化合物的含量测定刘江南药品质量检测技术摘要：黄酮类化合物是银杏叶的主要药用成分，其黄酮含量在很大程度上决定着银杏叶的利用价值。
以十二烷基硫酸钠(SDS)一正丁醇一正庚烷一水微乳系统为流动相，预制聚酰胺薄层板为固定相，通过调节微乳系统的极性，较好地分离出十几种银杏叶黄酮。
与传统的流动相系统—有机溶液系统相比，微乳系统显示出较强的分离优势。
通过对大龄银杏叶不同生长时期黄酮含量的测定与比较，分析银杏叶中黄酮含量随生长期的变化规律，揭示出大龄银杏树采摘叶片的最佳时期。
试验结果表明：不同生长时期的银杏叶黄酮含量变化幅度较大,在1年中黄酮含量出现2次峰值，8月份出现第1个峰值，黄酮含量为0.884%, 以后下降较快,10月叶色发黄后又上升到最高值 0.977%。
关键词：银杏叶黄酮含量薄层色谱生长时期高效液相色谱Title：In Gingko leaf flavonoid content determinationLiujiangnanDrug quality testing technologyAbstract：Flavonoids are the main medicinal components of ginkgo biloba,its flavonoid content toa large extent determines the value of ginkgo biloba use. Sodium dodecyl sulfate(SDS) 1-butanol 1-heptane microemulsion system of water as the mobile phase,pre-polyamide thin-layer plate as the stationary phase, by adjusting the polarity of themicroemulsion system, well separated a dozen of flavonoids. Mobile phase with thetraditional system - the organic solution systems, the microemulsion system showedstrong separation advantage.Leaves of Ginkgo biloba on older growth and flavonoidscontent during the comparison, analysis of flavonoids of Ginkgo biloba in thevariation with growth phase, revealing the older leaves of ginkgo trees picking thebest time. The results showed that: different growth stages of the content offlavonoids in a significant reduction in 1 year in the flavonoid content of 2 times thepeak, in August the first one peak appears, flavonoid content of 0.8844%, thendecreased rapidly in October leaves yellow color after rising to a maximum value0.977%.Key Words：Ginkgo biloba,Flavonoids content,TLC,Growth period,HPLC.1 前言1．1 银杏叶的介绍银杏(Ginkgo bilobal，又名公孙树，白果)系裸子植物门银杏科植物，有“活化石”之称，是当今地球上最古老的树种之一，为我国特产，我国银杏资源拥有量占世界总量的75％左右，占世界首位[1,2]。
银杏是中国特有而丰富的经济植物资源，是一种历史悠久的植物，除具有很高的观赏价值外，银杏的果实和叶片也有很高的药用价值。
银杏叶为银杏科植物银杏的干燥叶，又名白果叶。
在我国古代已作为药用，其能“益心敛肺，化湿止泻，治胸闷心痛，心悸怔忡，痰喘咳嗽，泻利白带。
[3]”银杏叶的研究始于本世纪60年代，由于发现其具有抑制血小板活化因子的作用，能够改善心血管系统的渗透性、弹性及血液流变速度，对机体组织具有抗缺氧的能力，故引起国内外医药界的关注。
利用银杏果叶的有效化学成分和特殊医药保健作用加工生产保健食品，药物和化妆品，正引起国内外研究、开发、生产单位的重视，各国众多企业竞相研制生产以银杏为原料的天然绿色产品，替代对人体健康有较大副作用的合成化学品，从而为中国的银杏资源的开发利用开辟了无比广阔的前景，迅速提高了银杏的利用价值及其对经济、社会和生态的影响，为社会创造了就业和财富，为人类带来了健康和长寿。
1．2 银杏叶的作用银杏叶能够抗衰老，消除人体自由基，改善血流量，增加脑供血。
目前，银杏叶研究主要集中在多糖[4,5]、萜类内酯[6]、黄酮类化合物[7,8]，银杏叶挥发油的提取及分析比较少。
彭洪[9]采用水蒸气蒸馏及GC／MS分析鉴定出银杏挥发油17种化学成分；周维书[10]按中国药典法提取了挥发油并分析出35种化学成分。
1.2.1 改善血液循环临床研究发现，银杏提取物能使血液粘稠度降低，并调节血脂，抑制血小板聚集，增加红细胞的变形能力，减少或抑制微血栓的形成，并增加心脑的供血。
通俗的解释，银杏能保护动脉、静脉和毛细血管免受伤害，并增强强度和弹性。
加之，银杏能通过降低血小板（一个形成动脉硬化的关键因素）粘度、保护红细胞免受伤害并保持其分布均匀，因而可以起到促进血液循环的作用，并能达到治疗缺血性心脑疾病的目的。
1.2.2 防治脑梗死目前，以脑梗死为代表的脑缺血性疾病已上升为人类第三大致死原因，成为倍受瞩目的常见多发病。
发病患者急性期过后常留下许多后遗症，如行为功能障碍，认知障碍等，给患者及其家庭都造成很大的痛苦。
对于此类疾病，目前最重要的防治手段是提倡使用神经保护剂。
在神经保护剂的筛选中，许多科学家把目标定位于对中药的开发和研究上。
其中，对银杏叶提取物，在临床也取得了肯定疗效。
研究证实，银杏叶片提取物中的黄酮类物质可明显增加脑的血流量，提高脑组织耐缺氧能力；银杏内酯类物质中的内酯A、B，尤其是苦内酯B可以保护脑组织免受损伤；内酯类物质中的白果内脂可以保护神经细胞免受缺血性损伤。
因此，银杏叶提取物具有调节血脂，抑制血小板聚集，扩张脑血管，清除自由基，降低脂质过氧化反应等，保护脑组织免受缺血缺氧的损害。
临床可用于治疗脑缺血、脑梗死、脑外伤后遗症、老年性脑功能障碍等。
1.2.3 防治冠心病及心肌梗死冠心病是由于心肌的严重缺血而引起心肌的损伤和坏死，而急性心肌梗死是其临床的主要表现。
急性心肌梗死在欧美国家已成为严重的健康问题，美国每年大约有150万人发生，其中大约有1／3的人死亡。
在我国急性心肌梗死同样也是一个引起关注健康问题，流行病学调查结果显示，心肌梗死患病率在我国平均为1／100000，死亡率为患病率的10％。
研究发现，银杏提取物具有扩张冠状动脉，增加缺血心肌的血流量，降低心肌耗氧量，改善心肌缺血的症状等作用，不仅对冠心病、心绞痛有确切疗效，也能减低该疾病的发生率。
1.2.4 预防血凝块形成血小板黏在一起，能使血凝块的形成，而血凝块会导致心脏病发作或中风，如果通往心脏的动脉里有血凝块，就会造成心脏病发作；如果血凝块停留在通往脑部的动脉里，就会造成中风。
黄酮类化合物对于抑制血小板凝集也有显著作用：黄酮类化合物对凝血因子具有较强的抑制作用，故表现出较好的抗凝血作用。
黄酮类化合物还可降低血管内皮细胞羟脯酸代谢，使内壁的胶原或胶原纤维含量相对减少，利于防止血小板粘附凝集和血栓形成，有利于防治动脉粥样硬化[11]。
实验表明，不同浓度的黄酮类化合物对抑制血小板凝集有不同程度的作用[12]。
另外还可以使处于异常状态下的血管功能恢复正常水平[13]。
1.2.5 具有抑制动脉平滑肌细胞增殖作用血管平滑肌细胞(VSMC)迁移和过度增殖是高血压、动脉粥样硬化及血管成形术后再狭窄等血管增生性疾病的基本特征。
邻近受损的内皮细胞和进入内皮下层的吞噬细胞释放大量细胞因子和生长因子，这些生物活性物质可促进中层的VSMC向内膜下迁移并过度增殖，同时分泌很多活性物质及细胞外基质成分，导致血管重构，一旦VSMC的增殖超过盘管的代偿能力，会导致血管壁增厚和血管腔变窄，最终引发急性心、脑血管病。
银杏内酯能抑制动脉壁平滑肌细胞增殖。
魏恩会等观察银杏内酯B对主动脉平滑肌细胞增殖的影响，结果发现无论是否用血管紧张素II诱导，GB与银杏内酯A和B的混合物均呈浓度依赖性地抑制SMC(主动脉平滑肌)的增殖，其机制与阻止细胞有丝分裂期有关，说明GB可抑制动脉壁SMC的增殖，该作用不完全取决于血小板活化因子受体的拮抗活性。
总的来说，银杏叶片制品临床用于治疗冠心病、心绞痛、脑梗死等疾病已收到满意效果。
但实际上，它对疾病的治疗作用还远不止于此。
银杏叶片还能防治6种疾病，比如：防治糖尿病引起的视网膜病变；治疗哮喘；抗肿瘤[14]；缓解急性肺损伤及抗衰老活性；对痔、静脉曲张的治疗作用；防治老年性痴呆症。
1．3 银杏叶的化学成分黄酮类化合物是银杏叶的主要药用成分，其黄酮含量在很大程度上决定着银杏叶的利用价值。
银杏叶中黄酮类化合物含量较高，用紫外分光光度法测得我国泰兴银杏叶中所含黄酮类物质占 5.91%[15]。
其中单黄酮类主要为山奈酚(Kaempferol)和槲皮素(Quercetin)的单、双和三糖甙化合物，糖元多为葡萄糖和鼠李糖；其他尚有异鼠李素(Isorhamnetin)、杨梅黄素及芸香甙等。
双黄酮类有穗花杉双黄酮(Amentoflavone)、白果素(Bilobetin)、银杏双黄酮(Ginkgetin)、异银杏双黄酮及金松双黄酮等。
此外尚有儿茶素类化合物4种。
银杏叶含有的二萜内酯和倍半萜内酯均为其特有成分。
现分离出的二萜内酯有银杏苦内酯A,B,C,M等4种，其中银杏苦内酯B(BN520210)的抗PAF活性最强；倍半萜内酯为白果内酯(Bilobalide)。