16实验十六 复方磺胺甲恶唑片的含量测定
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定课件
结果与讨论
结果总结
对实验结果进行总结，概述复方磺胺甲恶唑片的含量测定结果。
结果解释
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量进行解释，分析可能的 影响因素。
讨论
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量测定方法、实验过程等 方面进行讨论，提出改进意见和建议。
05 实验结论
实验总结
实验原理
通过高效液相色谱法，利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶解 能力不同，在流动相与固定相之间，将不同的物质分离出来。
色谱条件设置
根据实验原理和仪器说明书，设置色谱柱、流动相、检 测波长等参数。
样品测定
分别进样对照品溶液和样品溶液，记录色谱图，测量各 组分的峰面积或峰高。
数据处理
根据峰面积或峰高，计算各组分的含量。
02 实验材料与设备
实验材料
对照品：磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶
实验用水：超纯水
流动相：磷酸盐缓冲液
试剂：氢氧化钠、盐酸、 甲醇等
胺甲恶唑片的含量。
误差分析
03
对计算过程中可能产生的误差进行分析，评估结果的准确性。
结果可靠性分析
重复性实验
为了验证结果的可靠性，需要进行重复性实验， 并对多次实验结果进行比较和分析。
对照实验
通过设置对照组，对比实验组和对照组的结果， 判断实验结果的可靠性。
数据检验
采用合适的统计方法对实验数据进行检验，如t检 验、F检验等，以确定结果的可靠性。
测定步骤
3. 根据吸光度和标准曲线，计算出复 方磺胺甲恶唑片中主要成分的浓度。
4. 根据浓度计算出样品中药物的含量。
04 结果分析与讨论
数据处理与结果计算
数据处理
01
将实验过程中收集的数据进行整理、筛选和清洗，确保数据的
双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中两组分的含量
双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中两组分的含量王乐婷;郭秀琴;李珂【摘要】Objective:A dual wavelength determination of sulfamethoxazole and trimethoprim in compound sulfamethox-azole tablets by spectrophotometry. Methods:Determined by dual wavelength spectrophotometry. Wavelength determination of sulfamethoxazole was 257nm,the reference wavelength was 305nm. Taking 0. 4% sodium hydroxide solution as SMZ blank solvent. Wavelength determination of trimethoprim was 239nm,the reference wavelength was 293 nm. Hydrochloric acid potassium chloride solution as the TMP blank solvent. Results:The results showed that both the standard curve of sul-famethoxazole concentration ranging from 2 to 10 μg·ml - 1 and trimethoprim concentration ranging from 0. 2 to 1. 0 μg· ml - 1 was in correspondence with Beer′s law. The absorptivity difference and the concentration showed a good linear relation-ship. The average recoveries and RSD were 97. 84% 、0. 25% for sul-famethoxazole,and were 97. 91% 、0. 2% for trime-thoprim. Conclusion:The method is simple and accurate,which can be used as one of methods for quanlity control of the tables.%目的：建立复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶含量测定的双波长分光光度法。
复方磺胺甲恶唑片的质量分析
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薄层鉴别实验
供试品溶液：取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑 0.2g），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液即为。 对照溶液：另取磺胺甲噁唑0.2g与甲氧苄啶40mg，加甲醇 10ml溶解，即得。 展开：点样量各5μ l，硅胶ＧＦ254 薄层板，展开剂：氯仿－ 甲醇－二甲替甲酰胺(20:2:1) ，展开后， 结果：晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视。供试品溶液所 显两种成分的主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同。
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4、磺胺甲噁唑稀释液的配制和测定
稀释液的配制：精密量取供试品母液与对照品溶液(1)、
(2)各1ml ，分别置50ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶 液稀释至刻度，摇匀，即得。 参比波长和测定波长的确定：照分光光度法，取对照品溶 液(2)的稀释液，以257nm 为测定波长（λ 2 ），在 304nm 波长附近（每间隔0.5nm ）选择等吸收点波长为 参比波长（λ1 ），要求△Ａ＝Ａλ2 －Ａλ1 ＝0 。 样液的测定：再在λ2 与λ1 波长处分别测定供试品溶液的 稀释液与对照品溶液(1) 的稀释液的吸收度，求出各自的 吸收度差值（△Ａ）计算，即得。
1 2 1 A A2 A1 ( A2 A2 ) ( A1 A12 ) 1 1 1 1 A2 A1 E2 CL E1 CL ECL
从以上的推导可以看出，用△A作为定量的一句，可以消除 干扰组分的干扰；又由于在一定条件下，△E为一常数，所以 △A和浓度（C）有线性关系，因此可以用对照品比较法测定 药物的含量。
实验注意事项
注意取样量的换算 注意配制稀释液的溶剂
测定时，参比溶液不得混淆，比色皿一定要清洗
干净
复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定
验证性试验实验十八复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量测定一、实验目的1.掌握双波长法的基本原理。
2.掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量的方法。
3.熟悉紫外分光光度仪的使用。
二、仪器与试药1.仪器Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪研钵定量滤纸（直径10cm）胖肚移液管规格：25mL容量瓶规格：25mL 、100mL 刻度移液管规格：10mL2.试药复方磺胺甲噁唑片规格：含磺胺甲噁唑（SMZ） 0.4g、甲氧苄啶（TMP） 0.08ｇ95%乙醇氢氧化钠硫酸三、实验原理1.双波长分光光度法（1）双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。
用数学式表达如下：ΔA（λ1λ2）=A a+b1-A a+b2=A a1-A a2+A b1-A b2=ΔE.a C a.L+ΔE b.C b.L若b为干扰物，所选波长λ1λ2处的E b相等，所以ΔE b=0则ΔA混=ΔE a.C a.L与干扰物浓度无关。
（2）双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理复方磺胺甲噁唑片是含磺胺甲基异噁唑（SMZ）及甲氧苄啶（TMP）的复方制剂。
在0.1mol/L 氢氧化钠液中，SMZ在257nm波长处有一最大吸收峰，TMP在257nm和304nm波长处为等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大，见下图。
所以测得样品在257nm和304nm波长处的吸收度差值ΔA与SMZ浓度成正比，与TMP浓度无关。
四、实验内容1.工作曲线的制备（1）标准贮备液的配制分别精密称取磺胺甲基异噁唑对照品0.1g ，置100mL 容量瓶中，加入50m L 95%乙醇溶解后，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，吸取10mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，得标准贮备液（100μg /mL ）。
复方磺胺甲恶唑片含量测定
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磺胺嘧啶片的溶出度测定
检查方法：
取供试品照溶出度测定浆法，以盐酸溶液
(9→1000)1000ml 为 溶 剂 ， 转 速 为 100r/min ， 依 法 操 作 ， 经
60分钟，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液1ml，置50ml量瓶
➢ 与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随N1取代 基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺 胺类药物的鉴别。
➢ 芳伯氨基反应：可发生重2 氮化-偶合反应，产生有 色沉淀
2
➢ N1上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂 反应：生成沉淀。
➢ 乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后（即乙酰化）， 在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴 别反应。
14
计算公式：
25.03V cNaNO2 103
磺胺嘧啶含量%
0.1
100%
W
主要条件：（1）加入适量KBr
（2）酸的种类及用量
芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6
（3）室温条件下15滴定 （4）滴定速度
（5）指示终点的方法 药典采用永停法
15
2．非水溶液滴定法
含磺酰亚氨基－SO2－NH－R，其N上的H具有 一定酸性（R吸电子效应越强，N上的H越易失去， 酸性越强），故可用非水酸碱滴定法测定。
5
（2）重氮化-偶合反应
A r N H2 HClN ,a NO2 重 氮盐OH ,β 萘酚 橙黄色— 猩红色的偶氮染料
6
6
（3）芳伯氨基与芳醛的缩合反应
Ar NH 2 芳醛 H 有色希夫氏碱
芳醛： 对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等
高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量_熊久林
续表1序号保留时间t /min化合物名称分子式分子量相对含量(%)79.3213-octadecenoic acid(Z)(Z)-13-十八碳烯酸C 18H 34O 228221.6289.73octadecan oic acid 十八烷酸C 18H 36O 228433.46910.6210,13-octadecadienoic acid 10,13-十八碳二烯酸C 18H 32O 22800.131010.7910-noadecen oic acid 10-十九烯酸C 19H 36O 22960.091111.26noadecanoic caid 十九烷酸C 19H 38O 22980.281212.7211-eicosenoic acid 11-二十碳烯酸C 20H 38O 2310 2.101313.23eicosanoic acid 二十碳烷酸C 20H 40O 2312 1.771417.42docosanoic acid 二十二碳烷酸C 22H 44O 23400.18由表1可以看出,从中药材木鳖子中共鉴定出14种脂肪酸,占脂肪酸总含量的89.23%,其中饱和脂肪酸7种,占总脂肪酸含量的47.32%不饱和脂肪酸7种,占脂肪酸总量的41.91%。
3 讨论木鳖子中不饱和脂肪酸以亚油酸(19.85%)、(Z)-13-十八(碳)烯酸(21.62%)、11-二十(碳)烯酸(2.10%)为主。
近年来的研究表明不饱和脂肪酸对人体有降低血脂、胆固醇和血压,抗血栓、抗动脉硬化,预防心血管疾病,增强记忆力,预防老年痴呆症,防癌等多种作用[3]。
木鳖子是一种常见的中药,对中药木鳖子的研究已较深入,但对其脂肪酸的研究还未见报道。
本实验方法具有简单、准确、脂肪酸检出率高等优点,其结果将对木鳖子的深层次的开发和应用提供科学依据。
参考文献:[1] 宋立人,洪 恂,丁绪亮,等.现代中药大辞典,上册[M ].北京:人民出版社:349-351.[2] S.R..Heller ,G.W.A.M iline.EPA/NIH M ass Spectral date[M ].U .S.Washington D.C.,1978:1-4.[3] 周永红.火麻仁油中脂肪酸的GC-M S 分析[J ].中国油脂,2004,29(3):72-72.收稿日期:2004-11-12; 修订日期:2005-02-12作者简介:熊久林(1956-),男(汉族),湖北黄梅人,现任湖北省黄石市药品检验所副主任药师,主要从事药品检验工作.高效液相色谱法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶的含量熊久林,孙仲葆,黎 源,马锦星,运 委,张 晶(湖北省黄石市药品检验所 435000)摘要:目的:建立同时测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶含量的高效液相色谱法。
二阶导数分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量
2. 4 样品的测定 取复方磺胺甲卟恶唑片 10 片 ,精
密称定 。研细后 ,精密称取适量 ,以无水乙醇溶解 , 配成浓度约为 100 μg·ml - 1 的溶液 ,过滤 。取续滤 液 ,以无水乙醇制成浓度约为 20 μg·ml - 1 的溶液 。
以无水乙醇为空白 ,在 220～400 nm 波长处绘制二
Determination of sulfamethoxazole in compound sulfamethoxazole tablets by secondary derivative spectrophotometry
Dai Min ( Yijishan Hospital ,Wannan Medical College ,Wuhu 241001)
The test f or bacterial endotoxins of infatmuli injection
Zhong Fuqing ,Zhu J iangxiang ( The Second Hospital of Jianghua ,Jianghua 425500)
ABSTRACT OBJECTIVE: To inspect on t he feasibility of bacterial endotoxin test for infatmuli injection. METHODS : Inhibition and enhancement test & contrast test . RESUL TS : The test was not disturbed by t hese samples ,as was t he same as rabit test . CONCL U2 SIONS : Infatmuli injectio could be tested wit h t he tachypleus amebocyte lysate t hat sentivity was 0. 5 EU·ml - 1 . KEY WORDS infatmuli injection ,tachypleas amebocyte lysate ,bacterial endotoxin
[重点]复方磺胺甲恶唑的含量测定
![[重点]复方磺胺甲恶唑的含量测定](https://img.taocdn.com/s3/m/4b4157c13086bceb19e8b8f67c1cfad6195fe9cd.png)
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量［实验目的］1掌握高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2掌握高效液相色谱仪的操作及注意事项［实验原理］结构特点：苯环（紫外吸收）、芳伯胺基（重氮化-偶合反应）、磺酰胺基上的活泼氢有一定酸性，可与碱成盐或与重金属离子反应。
分子式：C10H11N3O3S 分子质量：253.28。
本品为白色结晶性粉末。
熔点167℃，易溶于稀盐酸；氢氧化钠溶液或氨水，几乎不溶于水。
无臭，味微苦。
外标法是以待测组分的纯品作为对照品，以供试品中待测组分的峰面积或峰高进行定量分析，本实验采用峰面积进行定量。
分别精密量取一定量的对照品和供试品配制成溶液，分别进相同的体积的对照品溶液和供试品溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测定峰面积。
［实验仪器、试剂］仪器：75-4型紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂 )，高效液相色谱仪，色谱柱，超声波清洗仪，紫外吸收检测器，无油隔膜真空泵，抽滤装置，电子分析天枰，称量纸，研钵，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml），漏斗，滤纸，烧杯，玻璃棒，移液枪试剂：复方磺胺甲噁唑片(山东新华制药股份有限公司 ,批号 0412073 )，甲氧苄啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色谱纯）,水（超纯水），乙腈(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，醋酸溶液（1→100），［实验步骤］1.色谱条件与系统适用性试验：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相：水-乙腈-三乙胺（799∶200∶1）（用醋酸溶液（1→100）调节pH值至5.9±0.1）检测波长：254nm流速：1.0mL/min进样量：20ul理论塔板数：按甲氧苄啶计算应不低于2000，甲氧苄啶与磺胺甲噁唑峰之间的分离度应大于5.0。
甲氧苄啶峰与磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得过2.0。
2.测定法2-1溶液的配制2-1-1对照品储备液的配制：取磺胺甲噁唑200mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
复方磺胺甲恶唑片中间产品检验操作规程
目的：为检验复方磺胺甲噁唑片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于复方磺胺甲噁唑片中间产品的检验。
职责：检验员，检验室主任对本规程实施负责。
规程：1 性状：本品为白色片.2 鉴别：2.1 试剂与仪器2.1.1 稀盐酸 2.1.2 0.1mol/L亚硝酸钠溶液2.1.3 碱性B-萘酚试液 2.1.4 稀硫酸2.1.5 甲醇 2.1.6 氯仿-甲醇-二甲基酰胺(20:2:1)2.1.7 碘试液 2.1.8 硅胶GF254薄层板2.1.9 烧杯、量筒、试管 2.1.10 微量进样器2.1.11 层析缸 2.1.12 漏斗、漏斗架2.1.13 电炉2.2 项目与步骤2.2.1 取本品细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg)，显芳香第一胺的鉴别反应：取供试品约50mg，加稀释盐酸1ml，必要时缓缓煮沸便溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性B-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到桔红色,为符合规定。
2.2.2 取本品的细粉适量(约相当于甲氧苄啶50mg)，加稀硫酸10ml微热溶解后，放冷、滤过、滤液加碘试液0.5ml，即生成棕褐色沉淀，为符合规定。
2.2.3 取本品的细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑0.2g)，加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液，另取磺胺甲噁唑0.29g、甲氧苄啶40mg，加甲醇10ml溶解，作为对照溶液；照薄层色谱法 (SOP-QC-304-00)试验，吸取上述两种溶液各5ml，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇-二甲基甲酰胺(20：2：1)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)检视，供试品溶液所显两种成分的主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同为符合规定。
3 检查：3.1 试剂与仪器3.1.1 电子天平（万分之一克） 3.1.2 片剂崩解仪3.1.3 片剂脆碎度仪 3.1.4 吹风机3.2 项目步骤3.2.1 崩解时限:取本品6片,照崩解时限检查法(SOP-QC-330-00) 检验，应在15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片用样方法复试，全部崩解完全为符合规定。
复方磺胺甲恶唑片中间产品(素片)检验操作规程
XXXXXXXXX有限公司复方磺胺甲噁唑片中间产品（素片）检验操作规程1. 性状取本品，外观检查应为白色片、完整光洁、色泽均匀。
2. 检查2.1 重量差异2.1.1 仪器与用具分析天平(感量0. 1mg)，称量瓶。
2.1.2 操作步骤2.1.2.1 照重量差异检查法项下方法，取本品20片，精密称定总重量，求得平均片重。
2.1.2.2 再分别精密称定各片的重量，与平均片重相比较。
2.1.3 计算2.1.3.1 平均片重 = 20片总重量/20。
2.1.3.2 允许片重差异范围 = 平均片重±平均片重×重量差异限度(±5％)。
2.1.4 结果与判定本品的重量差异限度为±5％。
超出重量差异范围的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。
2.2 崩解时限2.2.1 仪器与用具升降式崩解仪，1000ml烧杯，温度计(分度值1℃)。
2.2.2 操作步骤2.2.2.1 照片剂崩解时限检查法项下方法，将升降式崩解仪的吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度为37℃±1℃的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在液面下15mm处；2.2.2.2 取本品6片，分别置吊篮的玻璃管中，启动崩解仪进行检查。
2.2.3 结果与判定2.2.3.1各片均应在15分钟内全部崩解；2.2.3.2如有1片崩解不完全，应另取6片，按上法复试，均应全部崩解。
2.2.4 注意事项2.2.4.1 在测试过程中，烧杯内的水温应保持 37℃±1℃。
2.2.4.2 每测试一次后，应清洗吊篮的玻璃管内壁及筛网、档板等，并重新更换水。
2.3 脆碎度2.3.1仪器与用具脆碎度检查仪，分析天平(感量0.1 mg)，吹风机，称量瓶。
2.3.2 操作步骤2.3.2.1 照片剂脆碎度检查法项下方法，调节脆碎度检查仪的转数每分钟25±1转，设定试验时间为4分钟，则片剂滚动的总数次为100次；2.3.2.2 取本品若干片(约相当于总重量6.5g)，用吹风机吹去脱落的粉末；2.3.2.3 取空称量瓶，精密称定，将上述本品置称量瓶中，精密称定，两次称量之差即为本品的重量；2.3.2.4 将上述称定重量后的本品置脆碎度检查仪圆筒中，开动仪器电动机进行检查试验；2.3.2.5 取试验结束后的本品外观检查，不得出现断裂、龟裂或粉碎现象；2.3.2.6 外观检查完毕后，再用吹风机吹去粉末后，置上述称定重量的称量瓶中，精密称定，两次称量之差值即为试验后本品的重量。
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量之迟辟智美创作一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法.2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法.二、实验内容取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg（20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液.精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对比品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对比品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对比品溶液(1)与对比品溶液(2).3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对比品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.取对比品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为介入波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0.再在λ2与λ1波长处罚别测定供试品溶液的稀释液与对比品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得.精密量取上述供试品溶液与对比品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[取盐酸液(0.1mol/L)75ml与氯化钾，加水至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀.取对比品溶液(1)的稀释液，以239.0nm为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔0.2nm)选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0.再在λ2与λ1波长处罚别测定供试品溶液的稀释液与对比品溶液(2)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得.本品每片中含磺胺甲噁唑(C10H11N3O2S)应为0.360～0.440g，含甲氧苄啶(C14H12N4O3)应为72.0～88.0mg.三说明1.磺胺甲噁唑与甲氧苄啶的结构分别为：SMZ与TMP的紫外吸收图谱分别为：1 TMP(2.0μg/ml)；2 SMZ(10.0μg/ml) 1 TMP(5.0μg/ml)；2 SMZ(25.0μg/ml)3 SMZ＋TMP；4 辅料3 SMZ＋TMP； 4 辅料2.复方磺胺甲噁唑片的处方为：磺胺甲噁唑400g甲氧苄啶80g制成1000片3.本实验采纳双波长分光光度法测定SMZ和TMP的含量.由于干扰组分在测定波长和参比波长处吸收度相等，可在计算△A时消去，所以应用本法可以不经分离，直接测定复方制剂中SMZ和TMP的含量.四、思考题1.试简述双波长分光光度法的原理.2.试查阅本品的其它分析方法，从中了解复方制剂分析的特点及发展趋势.注意：1、取20片后要算一片的平均重量，然后根据这一片来取八分之一重量.2、1,2步伐作为母液配制，可以叫专门三组完成，3步伐由双数组完成，4步伐由双数组完成.3、利用紫外测按时每次换一个波长就要将空白对比液吸收值重新归零，防止呈现负数值情况.。
复方磺胺甲恶唑片的全检
方法名称：复方磺胺甲恶唑片—磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的测定—高效液相色谱法
【应用范围】：该方法采用高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量。
该方法适用于复方磺胺甲恶唑片。
【方法原理】：供试品加甲醇稀释，最终用流动相定量稀释后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长240nm处检测磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的吸收值，计算出其含量。
复方磺胺甲噁唑片的全检
【性状】本品为白色片。
【规格型号】100s
【主要成份】本品为复方制剂，每片含活性成份磺胺甲恶唑0.4g和甲氧苄啶80mg。
1.甲氧苄啶：化学名：5[(3,4,5-三甲氧基苯基)甲基]-2,4-嘧啶二胺分子式：C14H18N4O3 分子量：290.32
2.磺胺甲恶唑：化学名：3-对氨基苯磺酰
【简介/商品功效】近年来由于许多临床常见病原菌对本品常呈现耐药，故治疗细菌感染需参考药敏结果，本品的主要适应症为敏感菌株所致的下列感染： 1.大肠埃希杆菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、奇异变形杆菌、普通变形杆菌和莫根菌属敏感菌株所致的尿路感染。 2.肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致2岁以上小儿急性中耳炎。 3.肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致的成人慢性支气管炎急性发作。 4.由福氏或宋氏志贺菌敏感菌株所致的肠道感染、志贺菌感染。 5.治疗卡氏肺孢子虫肺炎，本品系首选。 6.卡氏肺孢子虫肺炎的预防，可用已有卡氏肺孢子虫病至少一次发作史的患者，或HIV成人感染者,其CD4淋巴细胞计数≤200/mm3或少于总淋巴细胞数的20％。 7.由产肠毒素大肠埃希杆菌（ETEC）所致旅游者腹泻。
【磺胺甲噁唑的鉴别】芳香第一胺的鉴别反应
取本品的细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg),加稀盐酸1ml,必要时缓缓加热煮沸溶解,放冷,加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴,滴加碱性的β-萘酚试液,观察变化.
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定(精)
二、仪器与试药
试剂
复方磺胺甲噁唑片 规格：磺胺甲噁唑（SMZ）0.4g/片
甲氧苄啶（TMP） 0.08g/片 氢氧化钠 95%乙醇
三、实验原理
双波长分光光度法-消除干扰
干扰组分吸收光谱中两个波长处有吸收系数相同 在干扰组分等吸收波长处被测组分吸收系数有显著
差异 可用于消除干扰吸收 直接测定混合物溶液在等吸收波长处的吸收度之差
药物分析实验
实验六 复方磺胺甲噁唑片含量测定
一、实验目的
掌握双波长分光光度法的基本原理 掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量
的方法 熟悉紫外分光光度仪的使用
二、仪器与试药
仪器
Mettler AL204电子天平 752型紫外-可见分光光度仪 胖肚移液管 规格：25mL 研钵 定量滤纸（直径10cm） 容量瓶 规格：25、100 mL
记录
磺胺甲恶唑片测定记录
编号
A257 A304
空白
（ 在仪器上用空白溶剂调零）
供试品1
ΔA 标示量% 标示量% 相对
偏差
供试品2
思考题
1.当确定参比溶液时，干扰物如TMP溶液是 否需要精确配制？为什么？
2.在选择实验条件时，是否应考虑赋形剂等 辅料的影响？如何进行？
（2）SMZ的标准曲线及回归方程制作
1、工作标准曲线的制备
（2）SMZ的标准曲线及回归方程制作
取贮备液0,3, 6,9,12,15ml
100ml量瓶， 0.1mol/L NaOH稀释
测定波长: 257nm 参比波长：304nm
作标准曲线
测ΔA（λ1λ2）
管号 1
2
3
4
5
6
复方磺胺甲恶唑片
复方磺胺甲噁唑片汉语拼音Fufang Huang an Jia ezuo Pian英文名Compound Sulfamethoxazole Tablets药物组成磺胺甲噁唑400g，甲氧苄啶80g，/制成1000片，性状本品为白色片。
鉴别（1）取本品的细粉适量（约相当于甲氧苄啶50mg），加稀硫酸10ml，微热溶解后，放冷，滤过，滤液加碘试液0.5ml，即生成棕褐色沉淀。
（2）取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑0.2g），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取磺胺甲噁唑0.2g与甲氧苄啶40mg，加甲醇10ml溶解，作为对照溶液。
照薄层色谱法（附录ⅤH）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-二甲基甲酸胺（20:2:1）为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
供试品溶液所显两种成分的主斑点的颜色与位置应与对照溶液的主斑点相同。
（3）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液两主峰的保留时间应与对照品溶液相应的两主峰的保留时间一致。
（4）取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑50mg），显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）。
以上（2）、（3）两项可选做一项。
备注：（1)为甲氧苄啶的鉴别，（4）为磺胺甲噁唑的鉴别，（2）和（3）为甲氧苄啶与磺胺甲噁唑的综合鉴别，详见收藏。
检查溶出度取本品，照溶出度测定法（附录ⅩC第二法），以0.1mol/L盐酸溶液900ml为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液10μl，照含量测定项下的方法，依法测定，计算每片中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的溶出量。
限度均为标示量的70%，应符合规定。
其他应符合片剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。
含量测定照高效液相色谱法（附录ⅤD）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-乙腈-三乙胺（799:200:1）（用氢氧化钠试液或冰醋酸调节pH值至5.9）为流动相；检测波长为240nm。
复方磺胺甲恶唑片的含量测定
对照品溶液的制备:
精密称定经干燥至恒重的磺胺甲恶唑对照品50mg， 置100ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇 匀，作为对照品溶液（１）． 精密称定经干燥至恒重的甲氧苄啶对照品10mg， 置100ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇 匀，作为对照品溶液（２）．
ＳＭＺ的含量测定：精密量取供试品溶液
五
含量பைடு நூலகம்定结果的计算
A供 m对 平均片重 A对 SMZ含量 m供
( mg/片)
由于供试品和对照品是在完全平行的条件下操作的， 所以稀释的倍数可以不考虑．
课后思考题
1.对于吸收光谱重叠的两组分混合 物,测定其中一个组分,选择的 1、 2必须符合什么条件? 2.双波长分光光度法进行定量分析 的依据是什么?
复方磺胺甲恶唑片的含量测定
一
实验目的
• 1.熟悉复方制剂的分析方法．
• 2.掌握双波长分光光度法的基本原理及操
作要点. • 3.正确使用UV-1102型分光光度计.
二
仪器和试剂
UV-1102型分光光度计 等
仪器：电子天平、100ml容量瓶、移液管、
试剂: 复方磺胺甲恶唑片、磺胺甲恶唑对照品及
甲氧苄啶对照品、０.４％氢氧化钠溶液 、 乙醇
三 原理(双波长分光光度法)
分光光度法定量分析
（1）单组分分析：吸光系数法,标准曲线法或标准比较法
[朗伯－比尔(Lambert－Beer)定律]
（2）多组分的分析： ①当各组分的吸收光谱不重叠时，如单组分测定。 ②若两组分的吸收光谱互相重叠时，可以根据Beer定 律和吸光度的加和性，在多个波长下测定吸光度并 利用解联立方程方法求解。
2013-7-11
双波长分光光度法(双波长等吸收法) 当光谱重叠时，在其光谱中选择两波长，在 选定的波长处，干扰组分有相同的吸收；被测组 分与干扰组分的吸收有足够大的差别。则两波长 处吸光度的差值与被测组份的浓度成正比。
双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中两组分的含量
空白 溶剂 ； 甲氧苄啶 的测定波长 为 ２ ３ ９ ｎ ｍ ， 参 比波长为 ２ ９ ３ ｎ ｌ ｎ ， 以盐酸一 氯化钾溶 液作 为 Ｔ Ｍ Ｐ的空 白溶剂。结果
磺胺 甲嗯唑浓度在 ２—１ ０ ・ Ｉ Ｉ ｌ ｌ Ｉ １ 之间 ， 甲氧苄啶浓度在 ０ ． ２～１ ． ０ Ｉ ， ｔ ｇ・ ｍ ｌ － １ 之 间， 符合 比尔定律 ， 浓度与吸 收
ＷＡ ＮＧ Ｌ ｅ — ｔ ｉ ｎ ｇ ＧＵ Ｏ
— ｑ ｉ ｎＬ ＩＫ ｅ
（ Ｔ ａ ｉ ｓ ｈ ａ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｔ ａ ｉ ａ ｎ ２ ７ １ ０ １ ６， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｉ ｔ ｖ ｅ ： Ａ ｄ ｕ ａ ｌ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ ａ ｚ ｏ ｌ ｅ ａ ｎ ｄ ｔ ｒ ｉ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｐ ｉ ｆ ｍ ｉ ｎ ｃ ｏ ｍ ｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ —
２ ７ １ ０ １ ６ ） （ 泰山医学院药学院 ， 山东 泰安
摘要 ： 目的 建立复方磺胺 甲嗯 唑片中磺胺 甲嗯唑和 甲氧苄啶含量测定 的双 波长分光光 度法。方法 采用双 波长分光光度法测定。磺胺 甲嗯唑的测定波长为 ２ ５ ７ ｎ ｍ， 参比波长为 ３ ０ ５ ｎ ｉ ｎ ， 以０ ． ４ ％ 氢氧化钠溶液作 为 Ｓ Ｍ Ｚ的
中图 分 类 号 ： Ｒ ９ １ ７ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ４ － ７ １ １ ５ （ ２ ０ １ ６ ） １ ２ — １ ３ ３ ６ － ０ ４ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ４ － ７ １ １ ５ ． ２ ０ １ ６ ． １ ２ ． ０ ０ ７
荧光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中的磺胺甲恶唑含量_何树芸 (1)
暴露资料,故难以与环境致病因子进行综合分析.本研究对我国食管癌高发的河南省林州市食管癌标本中p 53基因第五外显子进行了DNA 序列测定,突变发生率为20%,突变大多发生在G ∶C 碱基对,G ∶C ※A ∶T 的置换最多,占5/9,A ∶T ※T ∶A 的颠换占3/9,G ∶C ※C ∶G 的占1/9.从突变类型看,10个突变中9个为点突变,1个为插入突变,与文献报道基本一致.突变位点较分散,可能与该地区多种危险因素暴露有关.这一结果与我室前期研究相吻合[4].既往宏观流行病学研究发现,食管癌家族史、食用酸菜不仅是林州市食管癌的危险因素,也与p 53蛋白高表达密切相关[5].我们的研究结果显示,p 53基因第五外显子突变与性别、年龄无关,与食管癌家族史、吸烟也未见关联,可能与本研究分组后样本量尚少有关.但与食用酸菜有明显联系,其OR 值为5.95(1.13～31.26).酸菜中含有包括亚硝酸胺在内的多种致癌的亚硝基化合物,p 53基因突变可能由于包括酸菜在内的多种外源性致癌物的暴露而诱发,从而诱导肿瘤形成.由于DNA 测序费用较高,在经费有限的情况下,本研究仅对p 53基因第五外显子进行了检测和分析,尚不能全面反映p 53基因的突变情况及影响因素,但为进一步研究奠定了基础.【参考文献】[1]Bennett WP ,Hol lstein M C ,M etcalf R A ,W elsh JA ,He A ,ZhuSM ,Kusters I ,Resau JH ,T rump BF ,Lane DP .p 53mutation and protein accumulation during multistage human esophageal Carcino -genesis [J ].Canc er Res ,1992;52(21):6092-6097.[2]Hussain SP ,Harris CC .p 53mutation spectrum and load :The gen -eration of hypotheses linking the exposure of endogenous or exoge -nous carcinogens to human cancer [J ].Mutation Res ,1999;428:23-32.[3]Zheng ZY ,Wang LD ,Shi Stephanie T ,Yang GY ,Xue ZH ,GaoS ,Li YX ,Yang CS .p 53gene mutation in multifocal esophageal precancerous and cancerous les ions in patiens w ith esophageal cancer in highrisk Northern China [J ].Sh ijie Huaren Xiaohua Zaz hi (Wor ld Chin J Digestol ),1999;7(4):280-284.[4]Li LS ,Sun CS ,Zhang XL ,Qiao GB ,Xu DZ ,Han CL ,YangWX ,Chang GS ,Yan M X ,Wang Y ,Zhang H Y .A comparative molecular epidemiological study on esophageal cancer between Xi an and Linzhou [J ].Jiefangjun Yu fang Y ixue Zazhi (Prevet Med PLA ),1999;17(4):255-258.[5]Zhang XL ,Li LS ,Xu DZ ,Sun CS ,Yang WX ,Zhao HZ ,ChangGS ,Yan M X ,Wang Y .A cas e -control study on relationship be -tw een overexpression of p 53protein and esophageal cancer in Linxi -an [J ].Di -si Junyi Da xue X uebao (J Fourth Mil Med Univ ),1997;18(4):330-332.编辑 何扬举收稿日期:2003-04-17; 修回日期:2003-05-01作者简介:何树芸(1952-),女(汉族),陕西省西安市人.副主任药师.Tel .(029)5239845·经验交流· 文章编号:1000-2790(2003)14-1330-01荧光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中的磺胺甲恶唑含量何树芸1,冯 云2,郭欢迎1(1陕西省药品检验所,陕西西安710061,2西安市药品检验所,陕西西安710054)【关键词】荧光光度法;复方磺胺甲恶唑片;磺胺甲恶唑【中图号】R927.2 【文献标识码】B 0 引言 复方磺胺甲恶唑片为《中国药典2000年版二部》所载的品种.临床运用较为广泛.其中磺胺甲恶唑的含量测定,药典采用双波长分光光度法,操作费事且要求条件较高.我们利用荧光光度法测定磺胺甲恶唑含量结果令人满意.1 一般资料1.1 仪器和试药 RF -540荧光分光光度计(日本岛津).磺胺甲恶唑对照品由中国药品生物制品鉴定所提供(批号98-2);复方磺胺甲恶唑片样品由陕西省西安妇幼制药厂提供;其他试剂均为分析纯.1.2 对照溶液的配制 取磺胺甲恶唑对照品12.5mg ,精密称定,置100mL 容量瓶中,加0.2mol ·L -1硫酸甲醇液溶解并稀释至刻度.摇匀取出适量,用0.2mol ·L -1硫酸甲醇液稀释成0.5μg ·mL -1即可.1.3 样品溶液的配制 取样品适量,精密称定(相当于含磺胺甲恶唑30mg ),置200m L 量瓶中,加0.2mol ·L -1硫酸甲醇液溶解并稀释至刻度.摇匀、过滤.弃去初滤液,取续滤液适量,用0.2mo l ·L -1硫酸甲醇液稀释成与对照溶液一致的浓度.1.4 标准曲线的制备 精密吸取对照溶液,0,0.2,0.4,0.6,0.8和1.0m L 分别置10m L 量瓶中各加1mol ·L -1的硫酸液和10mL ·L -1邻苯二甲醛液各2mL ,摇匀,在60℃水浴中加热30min .放冷后用甲醇稀释至刻度.摇匀,测定其激发光谱和发射光谱.结果激发波长为365nm ,发射波长425nm .在此条件下,测定其荧光光谱.以对照溶液的浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标作回归曲线.回归方程为:Y =16.1+13.8X ,r =0.997(n =3),可见磺胺甲恶唑浓度在0.01～0.05μg ·mL -1范围内浓度与荧光强度的线性关系良好.1.5 精密度实验 精密吸取对照溶液1mL 共4份分别置10mL 量瓶中,照2.3法测定,按测定的荧光强度计算其精密度RSD =1.3%(n =4).其结果表明该方法精密度良好.1.6 回收试验 按处方配制成复方磺胺甲恶唑片的粉末,精密称取一定量,照2.3法测定,计算其回收率.平均回收率为98.5%(n =4),RSD =1.0%.样品其他成分与辅料均无干扰.1.7 供试品的测定 精密吸取样品溶液1mL ,置10mL 量瓶中,照2.3法测定,计算样品的含量(表1).表1 供试品测定结果(n =3)批号荧光法(g /片)药典方法(g /片)20020405010.3760.38120020605020.3860.38920020104010.3790.3902 讨论 用荧光法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑含量与双波长分光光度法测定结果基本一致,说明此方法准确可行.荧光法的灵敏度高,因而对试剂要求也高,故所用的甲醇需加一定量的金属钠,放置4h 后经重蒸馏即可.样品稀释后,在1h 内测定其荧光强度.否则,结果偏低.编辑 黄良田1330第四军医大学学报(J F our th M il M ed Univ )2003;24(14)。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定
03 实验步骤
仪器与试剂的准备
高效液相色谱仪
用于复方磺胺甲恶唑片的含量测定， 确保仪器性能良好，能够满足实验要 求。
试剂
甲醇、乙腈、磷酸、三乙等，确保 试剂的质量和纯度符合实验要求。
样品处理与溶液制备
样品处理
取复方磺胺甲恶唑片适量，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲恶唑0.25g），置 50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理使溶解，放 冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
除高效液相色谱法外，可探索其他适用于复 方磺胺甲恶唑片含量测定的方法，如紫外可 见分光光度法等。
扩大应用范围
本实验方法可应用于其他类似药物制剂的含 量测定，为药物质量控制提供更多技术支持 。
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药理作用
复方磺胺甲恶唑片是一种广谱抗菌药， 主要用于治疗敏感菌引起的感染。
组成
复方磺胺甲恶唑片由磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶组成。
高效液相色谱法的基本原理
01
02
03
分离原理
高效液相色谱法基于不同 物质在固定相和流动相之 间的分配平衡差异进行分 离。
检测器
常用的检测器有紫外检测 器、荧光检测器、电化学 检测器等，用于检测分离 后的物质。
03
04
分别精密吸取对照品溶 液与供试品溶液各10μL， 注入液相色谱仪，记录 色谱图。
按外标法以峰面积计算 出供试品中磺胺甲恶唑 （C10H9N3O3S）的含 量。
04 结果分析
实验数据记录与处理
实验数据记录
在实验过程中，我们详细记录了每组样品的称量数据、吸收度数据以及波长数据。这些数据均经过了 严格的核对，以确保准确性。
实验十五、磺胺甲恶唑(SMZ)的含量测定
实验十五、11011020124一、目的1、 通过实验进一步掌握Beer 定律的基本原理。
2、 通过实验进一步掌握多波长法测定多组分含量方法的基本原理及使用法则。
二、 原理H 2N SOONHNOCH 3OMeMeO MeONNNH 2NH 2 磺胺甲噁唑(SMZ) 甲氧苄啶（TMP ）本品为磺胺甲噁唑（SMZ ）与甲氧苄啶（TMP ）[5:1]的复方剂，为常用的抗菌药物。
采用双波长紫外分光光度法，无需分离，可直接测定SMZ 和TMP 的含量。
SMZ 在257nm 波长处有最大吸收，TMP 在此波长吸收最小，并在304nm 波长附近有一等吸收点，故选定257nm 为测定波长，在304nm 波长附近选择供测定的参比波长。
TMP 在239nm 波长处有较大吸收，此波长又是SMZ 的最小吸收峰，可消除SMZ 的干扰，并在295nm 波长附近有一等吸收点，故选定239nm 为测定波长，在295nm 波长附近选择供测定的参比波长。
三、 操作1、 磺胺甲噁唑(SMZ)含量测定：精密量取样品溶液，与磺胺甲噁唑和甲氧苄啶对照 液1ml ，分别置50ml 容量瓶中各加0.4%NaON 稀溶液稀释至刻度，摇匀，取磺胺甲噁唑对照液的稀释液依据自己的机器在257nm 附近找到最大吸收波长（λ2），取甲氧苄啶对照液的稀释液以λ2为测定波长，在304nm 波长附近选择等吸收波长为参比波长（λ1），要求△A=A λ2—A λ1=0。
再在λ1波长处测定样品溶液的稀释液与磺胺甲恶唑对照品溶液的稀释液的吸光度，求出各自吸收度的差值△A 。
SMZ%=%100W A △W A △⨯⨯⨯⨯⨯标示量平均片重样品对照对照样品（平均片重=0.5340g ，W 样品=0.0668g ，W 对照=0.0500g ，标示量=0.4）2、甲氧苄啶（TMP ）的含量测定:精密量取样品溶液与磺胺甲恶唑和甲氧苄啶对照品溶液各2.5ml ，分别置于50mi 容量瓶中，各加HCl —KCl 溶液稀释至刻度，以239nm 为测定波长（λ2），在295nm 波长附近选择等吸收点波长为参比波长（λ1），要求△A=A λ2—A λ1=0，再在λ2和λ1波长分别测定样品溶液的稀释液与甲氧苄啶对照溶液的稀释液的吸光度，求出各自吸收度的差值△A 。
复方磺胺甲恶唑片的质量分析
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实验注意事项
注意取样量的换算 注意配制稀释液的溶剂 测定时，参比溶液不得混淆， 测定时，参比溶液不得混淆，比色皿一定要清洗 干净 注意确定参比波长的方法
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讨论与思考题
1、分别说明本品中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶双波 分别说明本品中磺胺甲噁 长法测定含量时波长选择的依据。 长法测定含量时波长选择的依据。 2、为何甲氧苄啶含量测定时供试液的稀释倍数 与磺胺甲噁唑测定时的要不同？ 与磺胺甲噁唑测定时的要不同？
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测定磺胺甲噁唑片中的磺胺甲噁唑时，因为磺胺甲噁 测定磺胺甲噁唑片中的磺胺甲噁唑时，因为磺胺甲噁唑在 257nm的波长处有最大吸收,甲氧苄啶在此波长处吸收较小， 257nm的波长处有最大吸收,甲氧苄啶在此波长处吸收较小， 的波长处有最大吸收 并在304nm波长附近有一等吸收点，故选择257nm为测定波 并在304nm波长附近有一等吸收点，故选择257nm为测定波 304nm波长附近有一等吸收点 257nm ），在304nm波长附近选择等吸收波长贼为参比波 长（λ2），在304nm波长附近选择等吸收波长贼为参比波 长（λ1）。测定甲氧苄啶时，由甲氧苄啶紫外吸收图谱 ）。测定甲氧苄啶时 测定甲氧苄啶时， 可知， 239nm波长处甲氧苄啶有较大吸收， 可知，在239nm波长处甲氧苄啶有较大吸收，而次此波长 波长处甲氧苄啶有较大吸收 是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波长附近有一等吸 是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波长附近有一等吸 295nm 收点，故选择239nm作为甲氧苄啶的测定波长， 295nm波 收点，故选择239nm作为甲氧苄啶的测定波长，在295nm波 239nm作为甲氧苄啶的测定波长 长附近秀安在等吸收波长作为参比波长。 长附近秀安在等吸收波长作为参比波长。
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实验九复方磺胺甲噁唑片的含量测定
实验目的：
1、掌握双波长分光光度法消除干扰的原理和波长选择原则。
2、掌握紫外-标准对照法测定药物含量及计算方法。
3、熟悉紫外分光光度仪的构造和使用操作。
实验原理：
复方磺胺嘧啶片系由磺胺嘧啶和甲氧苄啶组成的复方制剂。
两者在紫外区有较强的吸收。
在盐酸溶液（9→1000）中，磺胺嘧啶在308nm处有吸收，而甲氧苄啶在此波长处无吸收，故可在此波长处直接测定磺胺嘧啶的吸收度而求得含量。
甲氧苄啶在277.4nm波长处有较大吸收，而磺胺嘧啶在277.4nm处与308nm处有等吸收点。
故可采用双波长法以277.4nm 为测定波长，308nm为参比波长，测定甲氧苄啶在该两波长处的ΔA（ΔA=A277nm-A308nm）值来计算含量。
复方氨基比林注射液又称安痛定注射液，系氨基比林、安替比林和巴比妥组成的复方制剂，采用双波长分光光度法测定安替比林的含量。
根据巴比妥在酸性溶液中不呈解离状态，而无明显紫外吸收；安替比林在233nm处有较强的吸收；氨基比林在233nm和268nm处有等吸收，选择安替比林的吸收峰波长233nm为测定波长λ1，氨基比林的等吸收波长268nm为参比波长λ2，则△A =A233nm-A268nm只与安替比林的浓度有关，而巴比妥、氨基比林及其他辅料不干扰测定。
实验器材：
试药：磺胺嘧啶对照品，甲氧苄啶对照品，复方磺胺嘧啶片，安替比林对照品，安痛定注射液。
仪器：紫外分光光度仪，石英比色皿，100mL容量瓶，移液管。
实验内容与方法：
（一）复方磺胺嘧啶片（Compound Sulfadiazine Tablets）
本品每片中含磺胺嘧啶（C10H10N4O2S）应为0.360~0.440g；含甲氧苄啶（C14H18N4O3）应为45.0~55.0mg。
[处方]
[含量测定]
磺胺嘧啶取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺嘧啶0.2g），置100mL量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液适量，振摇使磺胺嘧啶溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置另一100mL量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录），在308nm的波长处测定吸收度；另取105℃干燥至恒重的磺胺嘧啶对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（9→1000）溶解并定量稀释制成每1mL中约含40μg的溶液，同法测定；计算，即得。
甲氧苄啶精密称取上述研细的细粉适量（约相当于甲氧苄啶40mg），置100mL量瓶中，加冰醋酸30mL振摇使甲氧苄啶溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另精密称取甲氧苄啶对照品40mg与磺胺嘧啶对照品约0.3g，分置100mL量瓶中，各加冰醋酸30mL溶解，加水稀释至刻度，摇匀，前者作为对照品溶液（1），后者滤过，取续滤液作为对照品溶液（2）。
精密量取供试品溶液与对照品溶液（1）、（2）各5mL，分置100mL 量瓶中，各加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法测定。
取对照品溶液（2）的稀释液，以308.0nm为参比波长λ1，在277.4nm波长附近（每间隔0.2nm）选择等吸收点波长为测定波长（λ2），要求ΔA=Aλ2-Aλ1=0。
再在λ2和λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（ΔA），计算，即得。
（二）、复方氨基比林注射液（Compound Aminopyrine Injection）
本品每1mL注射液中含氨基比林（C13H17N3O）应为47.5～52.5mg，含安替比林（C11H12N2O）应为18.0～22.0mg，含巴比妥（C8H12N2O3）应为8.55～9.45mg。
[处方]
[含量测定]精密量取本品注射液1mL，用0.1mol/L盐酸稀释至100mL，摇匀，精密量取此液2mL，用0.1mol/L 盐酸稀释至100mL，摇匀，即得供试液。
另精密称取安替比林对照品约0.08g，用0.1mol/L 盐酸溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量取此液1mL，用0.1mol/L 盐酸稀释至100mL。
摇匀，即得对照液（约为8μg/mL）。
实验注意事项：
1. 石英比色皿的正确使用和吸收度校正。
2. 吸收度读数三次，取平均值计算含量。
3. 读数后及时关闭光闸以保护光电管。
4. 片剂取样量应是根据平均片重和片剂规格量，计算出来的相当于规定量主药的片
粉重量（片粉重量=平均片重 / 标示量×规定的取样量）。
5. 片剂的含量计算（相当于标示量的百分含量）。
根据药品获得的难易情况，任选一个内容进行实验。