比格犬 心脏取材

比格犬心脏组织取材

1.实验材料

1.1实验对象：比格犬

1.2实验试剂：4℃生理盐水、10%中性福尔马林等

1.3实验器材：解剖刀、刀片、锯子、肋骨剪、血管钳、拉钩、肾蒂钳、手

术剪、止血钳、电子秤、游标卡尺、弯盘、眼科剪、手术镊、冻存管、

液氮罐、广口瓶、标签、记号笔、泡沫盒、冰等。

2.实验方法

2.1取材前准备

l)麻醉:术前12h禁食，但給予充足饮水,腹腔推注戊巴比妥钠30mg/kg 麻醉,麻醉后经尾静脉注入100IU肝素，使血液肝素化。然后将狗仰卧位固定于操作台上。

2）胸部备皮,常规消毒,铺无菌巾。

2.2 取材

l) 自胸骨柄颈静脉切迹沿前正中线向下做一纵行切口至剑突，逐层解剖浅层筋膜以及深层肌肉，锯断胸锁关节，剪断肋骨、剪开肋间组织，暴露心脏；

2) 解剖上纵膈，包括上腔静脉、头臂静脉；主动脉弓及其分支；

3) 解剖中纵膈剪开位于中纵膈内的心包，找到膈神经（膈神经与心包

膈血管相伴行，经肺根前方下降，继而贴心包侧壁下行至膈），于膈神经和心包膈血管的稍前方个隔上1.5cm处做“U”形剪口，向上翻开心包前壁；暴露心脏，注意心包的光泽度及心包内液体的情况，心脏的大小、外形、心外膜情况。

4) 在心包内，近纤维性心包处剪断与心脏相连的大血管，将心脏取出

5）取出心脏迅速放入4℃生理盐水中停博，15-20s后将心脏取出，心脏在4℃生理盐水中自律性收缩并排除心腔内的血液，且还能降低心脏代谢，防止缺血损伤。

6）解剖心脏：注意检查右心房、右心室、三尖瓣、肺动脉瓣、腱索有否病变；检查二尖瓣、主动脉瓣、腱索有无病变，左心房、左心室内壁有无出血和感染；观察血管有无粥样硬化和血栓等。

解剖左心房：分别在左肺静脉口和右肺经脉口稍内侧作垂指切口，然后在两切口上端之间做横行切口，将左心房后壁翻向后下方，测量左房壁的厚度；

解剖左心室：沿前室间沟左侧0.5cm处自心尖至主动脉口稍下方，在左心室前壁和下壁交界处自心尖至左房室口稍前方，分别做切口，然后在冠状沟下方0.5cm处做切口，与上述两切口相连，将左心室外侧壁翻向左侧，测量左心室壁的厚度；

解剖右心室：用手触摸和确定室间隔前缘的位置，沿室间隔右侧

0.5cm处自心尖至肺动脉口稍下方，再沿冠状沟前方0.5cm处自前壁和下壁

交界处至肺动脉口稍下方分别作切口，然后，连接两纵行切口上端做横行切口，将右室前壁翻向下方，测量右心室壁的厚度；

解剖右心房：平上腔静脉口作横行切口，再沿右侧壁前缘做弧形切口，两切口至交界沟稍前方，将右心房右侧壁翻向后方，测量右心房壁的厚度；

解剖房间隔和室间隔：沿心脏长轴自心尖向心底做四腔切面，在两半心脏心脏观察房间隔及室间隔，并测量房间隔及室间隔的厚度。

3.注意事项

1）最好在活体狗上取材，取出的心脏迅速投入4℃生理盐水中停博（15-20s）。脏器的上皮组织易变质，争取在死后半小时内取材完毕，否

则免疫组化染色时会产生背景染色。

2）切取组织使用的刀、剪要求锋利，避免来回挫动组织。因动物组织质脆，因此夹取组织时切勿用力过重，以免挤压损伤组织。

3）取材用的刀剪应锋利，避免挤压组织；组织的切面应平整，组织切忌过大、过厚，否则不仅浪费试剂，而且会造成固定、脱水不良而影响镜下观

察。

4）PCR组织准备时，应严格戴口罩、手套操作，实验器材应提高高温消毒准备，以防RNA酶污染。

特点：犬的心脏结构特点与人的大致相同，但狗的静脉窦只有前后腔静脉两个入口，后腔静脉口腹侧有冠状窦口，左心房背侧壁上有肺静脉入口，它有6支肺静脉注入心脏，入口处位于左心房后壁与左侧壁。