免疫荧光检测呼吸道病毒
上海市儿童下呼吸道感染常见病毒诊断方法比较

上海市儿童下呼吸道感染常见病毒诊断方法比较王春;赵百慧;张泓;张曦【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2011(026)009【摘要】目的应用直接免疫荧光法(DFA)和多重逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对呼吸道感染患儿鼻咽分泌物的常见病毒进行检测,比较2种方法的符合率并评估其临床应用价值.方法选取急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物540例,分别用DFA和多重RT-PCR进行检测,分析其结果.结果 DFA检测阳性率为43.9%(237/540),多重RT-PCR检测阳性率为55.7% (301/540),多重RT-PCR阳性检出率显著高于DFA 的阳性检出率(x(2)=29.093,P<0.01).DFA和多重RT-PCR同时阳性163例,DFA 阳性而多重RT-PCR阴性74例,多重RT-PCR阳性而DFA阴性138例,DFA和多重RT-PCR同时阴性165例.DFA和多重RT-PCR同时为阳性的163例标本中,有15例标本两者检测结果不一致,符合率为91.0%.结论 DFA快速、简便、特异性及敏感性高,适用于临床检测.多重RT-PCR的敏感性高,检测病毒谱广,且可以做亚型鉴定,适用于呼吸道病毒流行病学的调查.【总页数】4页(P589-592)【作者】王春;赵百慧;张泓;张曦【作者单位】上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院检验科,上海,200040;上海市疾病预防控制中心,上海,200336;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院检验科,上海,200040;上海市疾病预防控制中心,上海,200336【正文语种】中文【中图分类】R373【相关文献】1.儿童急性下呼吸道感染7种常见病毒检出情况分析 [J], 郭黎英2.婴幼儿下呼吸道感染病毒病原诊断方法比较 [J], 胡芙蓉;苗正友3.南通地区2014年急性下呼吸道感染儿童常见病毒病原学分析 [J], 苏建友;孙宝兰;沈荣春;宋红花;倪红兵;杨春兰4.儿童急性下呼吸道感染642例常见病毒流行病学分析 [J], 周虹;邹洪兴;黄明德;周辉5.2002~2007年重庆儿童医院住院儿童常见呼吸道病毒感染流行特点与临床特征比较分析 [J], 白华;刘恩梅;陆彪;邓昱;王莉佳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
1304例学龄前儿童呼吸道感染病毒五联检结果分析

1304例学龄前儿童呼吸道感染病毒五联检结果分析作者:王新华来源:《中国实用医药》2015年第04期【摘要】目的分析1304例学龄前儿童呼吸道感染病毒检测情况。
方法采用荧光免疫法对1304例学龄前儿童血液中呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)、副流感病毒(PIVS)进行检测,分析各种病毒的检出情况。
结果在1304例标本中,病毒检测阳性率为57.52%(750/1304),单项病原体检出率为49.08%(640/1304),依次为IFB 43.44%(278/640), PIVS 26.41%(169/640), RSV 19.53%(125/640), ADV 9.38%(60/640), IFA 1.25%(8/640);混合感染检出率为8.44%(110/1304);IFB、PIVS、RSV在不同季节检出率,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论本地区学龄前儿童呼吸道感染病毒以IFB、PIVS、RSV为主,冬季是病毒感染的好发季节。
【关键词】学龄前儿童;呼吸道感染;间接免疫荧光法;病毒DOI:10.14163/ki.11-5547/r.2015.04.187病毒感染是引起儿童呼吸道感染常见原因,由于其临床症状不典型,极易被误诊或忽视,从而引起疾病的延误。
为了解本地区学龄前儿童呼吸道感染患者的病毒分布情况,作者采用间接免疫荧光技术对1304例学龄前儿童呼吸道感染患者进行了检测分析,现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料 2013年7月~2014年6月本院儿科呼吸道感染患者1304例,其中男823例,女481例,年龄最小8 d,最大6岁7个月。
1. 2 仪器与试剂仪器为日本奥林巴斯BX51TR-32FB3-F01型正荧光显微镜,试剂为西班牙VIRCELL公司生产的荧光免疫分析试剂盒,严格按照说明书进行操作。
1. 3 试验方法抽取调查对象静脉血2 ml, 2 h内分离血清,采用IFA法检测血清中RSV、ADV、IFA、IFB、PIVS等5种病毒抗体。
甲型流感的分子诊断技术与实验室检测方法
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甲型流感的分子诊断技术与实验室检测方法甲型流感是一种由甲型流感病毒引起的急性呼吸道传染病,其传播迅速且易感染大量人群。
为了准确诊断和及时干预,科学家们开发出了多种分子诊断技术和实验室检测方法。
本文将介绍几种常用的技术与方法,以提高对甲型流感的检测效率和诊断准确性。
一、聚合酶链式反应(PCR)技术PCR技术是一种灵敏度高、特异性强的分子诊断技术,已被广泛应用于甲型流感的检测中。
该技术通过放大甲型流感病毒基因组中特定的DNA片段,从而使其能够被检测到。
PCR技术可在短时间内,从患者的样本中检测到甲型流感病毒的存在,并确定其亚型。
此外,PCR 技术还能够对病毒的基因组进行序列分析,从而确定其突变情况和传播途径。
二、实时荧光定量PCR(qPCR)技术实时荧光定量PCR技术是PCR技术的一种改进版本,其主要优势在于可实现对病毒数量的精确测量和即时定量。
该技术结合了PCR和荧光探针技术,使得可以在PCR反应过程中实时监测目标序列的扩增情况。
实时荧光定量PCR技术能够快速检测出甲型流感病毒的数量,并对病毒载量进行准确测量,帮助医生判断病情的严重程度,指导治疗决策。
三、免疫荧光技术免疫荧光技术是一种通过特定的抗体和荧光探针对病毒进行检测的技术。
在甲型流感的实验室检测中,科学家们通常采用免疫荧光技术检测病毒的抗原。
该技术的原理是将含有甲型流感病毒的标本与特异性荧光标记的抗体结合,然后通过荧光显微镜观察是否有荧光信号出现。
免疫荧光技术能够准确、快速地检测出甲型流感病毒的存在,并且可以对其亚型进行鉴定。
四、核酸测序技术核酸测序技术是一种可以解析病毒基因组序列的方法,可以帮助科学家们了解甲型流感病毒的基因组结构和功能。
通过高通量测序技术,科学家们可以在较短的时间内获取大量的病毒基因组序列信息。
这些信息有助于了解甲型流感病毒的变异情况,筛选药物治疗靶点,并指导疫苗的设计与开发。
五、免疫学检测方法除了分子诊断技术,免疫学检测方法也发挥着重要作用。
直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病诊断中的应用
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患者感染人数 6 7 例。
3 讨 论
笔 者所在 的医 院所 使用 的呼吸道 病毒抗 原检测试 剂盒 是 由 美国 D i a g n o s t i c H y b r i d s 公 司生产并 通过美 国质监 局通 过 的一 种
试 剂 。直接免疫 荧光法 病毒抗 原测定 呼吸道 感染 的方 法 主要 如
【 关键词 】 直接免疫荧光 法 ; 抗原 ; 病毒 ; 呼吸道感染性疾 病 ; 诊断
中图分类号 R 4 4 6 . 6 文献标识码 B 文章编号 1 6 7 4 — 6 8 0 5 ( 2 0 1 3 ) 3 1 - 0 0 5 3 — 0 2 .
儿 童呼 吸道 感染是 当前 常见 的一种疾 病 ,一般 来说 ,儿童 悬浮 液。f 3 ) 观察 反应。在 已经处 理到位 的标本 中加入每份标 本 呼吸道感染 的疾 病是 由病毒 引起的。随着 临床 医学 的不断应 用 , 直接免 疫荧光 法病毒抗 原测定 在 呼吸道感染 性疾病 诊断 中起着 越 来越 重要 的作用 。为进一 步明确直 接免疫 荧光法 病毒抗 原测 定在 呼吸道感 染性疾 病诊 断 中的应 用 ,本文 就笔 者所在 医院患 者的实际情况进行分 析 、总结 ,现将结果报道如下 。
3 . 1 直接免疫荧光法病毒抗原检测 的重要性 从 临床医学 的角度来 看 ,通过 直接免疫荧 光法病毒 抗原检
下: ( 1 ) 采 集标本 。采集 患者鼻 咽深处 的分泌 物。 医生 需要将 配 套 的绒 植拭 子经患者 的鼻腔 部位插 入到达鼻 咽部 ,距 离大 约在 7  ̄ 8 c m。反 复 3次后抽出绒植拭子 , 放人塑料试管 中 , 进行送检 。 在采集标本 的过程 中,需要掌 握好 鼻腔部位及 鼻炎部位 的距离 。 f 2 1 处 理标本 。将 采集到 的患者的拭子标 本放在 已经准备好 的漩
介绍几种新的感染标志物
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1-3-ß-Ð 葡聚糖旳临床意义
迅速检测血液等体液中酵母菌、丝状真菌等细胞 壁成份,不但检测曲霉菌,还能够检测念珠菌、
镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属。
另据文件报道,检测葡聚糖含量不能用于隐球菌 感染旳诊疗,可能因为隐球菌在免疫缺陷患者体 内生长缓慢,并形成厚荚膜。有体外试验表白, 新生隐球菌产生旳1-3--β-D葡聚糖量比念珠菌 和曲霉菌少。
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G试验在下列情况可出现假阴性
之前使用过抗真菌药物、 标本放置时间过长,造成分解代谢。 试验操作过程中离心时间过长。
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GM试验在下列情况可出现假阳性
饮用牛奶或高蛋白食物; 血液透析; 本身免疫性肝炎等; 食用污染旳大米等。
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G试验与GM试验比较
三种方法检测真菌
GM
曲霉菌属A. fumigatus
+
镰刀霉Fusarium
-
接合菌纲Zygomycetes
-
念珠菌属Cadida
-
隐球菌Cryptococcus
+
青霉菌Penicillium
+
拟青霉菌Paecilomyces
+
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GP + + - + - + +
GM试验在下列情况可出现假阴性
释放入血循环中旳曲霉GM(涉及甘露聚糖) 并不连续存在而是会不久清除;
此前使用了抗真菌药物; 粒细胞缺乏旳患者。
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G试验、GM试验成果与临床诊疗不符合时 旳原因分析
呼吸道病原体检测金标准

呼吸道病原体检测金标准呼吸道病原体检测是临床诊断和治疗呼吸道感染的重要步骤。
以下是呼吸道病原体检测的几种金标准:1. 病原学检测病原学检测是呼吸道病原体检测的金标准之一。
它通过细菌培养、病毒分离、支原体和衣原体检测等方法,直接检测呼吸道样本中的病原体。
病原学检测具有较高的特异性,但需要一定的时间,通常需要2-3天才能得到结果。
2. 血清学检测血清学检测是另一种呼吸道病原体检测的金标准。
它通过检测血清中的特异性抗体,如IgM和IgG抗体,来诊断呼吸道疾病。
血清学检测具有较高的灵敏度和特异性,能够提供病原体的感染史和免疫状态等信息。
但需要注意的是,血清学检测需要在疾病发生后一段时间内才能检测到抗体,因此不能用于早期诊断。
3. 分子生物学检测分子生物学检测是近年来发展起来的呼吸道病原体检测方法。
它通过检测病原体核酸,如PCR(聚合酶链式反应)和基因测序等方法,快速、准确地检测呼吸道样本中的病原体。
分子生物学检测具有高灵敏度和特异性,能够早期诊断疾病,但需要昂贵的设备和专业的技术人员。
4. 免疫学检测免疫学检测是通过检测人体免疫系统对病原体产生的特异性免疫反应来诊断呼吸道疾病。
免疫学检测包括免疫荧光、免疫印迹和酶联免疫吸附试验等方法。
免疫学检测具有高特异性和灵敏度,能够提供病原体的感染史和免疫状态等信息。
但需要注意的是,免疫学检测可能会受到其他因素的影响,如交叉反应和自身免疫等。
综上所述,呼吸道病原体检测的金标准包括病原学检测、血清学检测、分子生物学检测和免疫学检测。
具体使用哪种方法取决于病情、实验条件和技术人员的水平。
在选择检测方法时,应考虑其灵敏度、特异性和可操作性等方面的因素。
呼吸道感染实验室诊断流程
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呼吸道感染IgM九项联检试剂使用说明终稿

呼吸道感染IgM九项联检试剂盒(间接免疫荧光法)说明书【产品名称】通用名称:呼吸道感染IgM九项联检试剂盒(间接免疫荧光法)英文名称:PNEUMOSLIDE IgM商品名称:PNEUMOSLIDE IgM【包装规格】10人份/盒【预期用途】采用间接免疫荧光法(IFA),同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体,可检的病原体包括:嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。
已报道的非典型性肺炎的病原体有很多,其中最常见的有:嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型,非典型性肺炎常伴随有全身症状。
10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。
在血清学诊断中,间接免疫荧光法(IFA)是唯一的标准技术。
肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见,由于很难将其固定在载玻片上,因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
Q热立克次体Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病,会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。
血清学诊断中,IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染,特别是支气管炎和肺炎。
在老年人中发病率较高,它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。
微量免疫荧光法(MIF)是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒腺病毒是一种重要的呼吸道病原体,能引起上呼吸道疾病,伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。
呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒(RSV)是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体,在冬季爆发流行。
流感病毒它是流感的病原体,在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。
由于它易于与其它呼吸道疾病混淆,所以在流行期临床诊断很困难。
因此,实验室诊断就显得非常重要。
副流感病毒副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎(哮吼)。
3型具有流行性,1和2型具有地域性。
【检测原理】间接免疫荧光法(IFA)是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。
呼吸道病毒检测方法
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呼吸道病毒检测方法呼吸道病毒是引起呼吸道感染的主要病原体之一,包括流感病毒、腺病毒、冠状病毒等。
及时准确地检测呼吸道病毒对于临床诊断和治疗至关重要。
本文将介绍几种常见的呼吸道病毒检测方法,希望能对相关人员有所帮助。
首先,常见的呼吸道病毒检测方法包括病毒培养、免疫荧光染色、PCR技术等。
病毒培养是一种传统的检测方法,通过将患者样本接种到细胞培养物中,观察是否出现细胞破坏现象来判断病毒是否存在。
免疫荧光染色则是利用特异性抗体与病毒抗原结合的原理,通过荧光显微镜观察样本中是否有病毒颗粒存在。
而PCR技术则是通过扩增病毒核酸序列来进行检测,具有高灵敏度和特异性。
其次,针对不同的呼吸道病毒,还可以采用特异性的检测方法。
例如,对于流感病毒,可以利用快速抗原检测、实时荧光定量PCR等方法进行检测。
快速抗原检测是一种简便快速的检测方法,通过检测病毒抗原与特定抗体结合产生的颜色变化来判断病毒是否存在。
实时荧光定量PCR则是一种高度敏感的检测方法,可以对病毒进行定量检测,有助于了解病毒载量和感染程度。
此外,近年来还出现了一些新的呼吸道病毒检测技术,如纳米孔测序技术、质谱技术等。
纳米孔测序技术是一种高通量测序技术,可以对病毒核酸进行快速测序,有助于了解病毒的基因组结构和变异情况。
质谱技术则是通过检测病毒蛋白质的质谱图谱来进行检测,具有高度特异性和灵敏度。
综上所述,针对呼吸道病毒的检测方法有多种选择,每种方法都有其特点和适用范围。
在临床实践中,应根据具体情况选择合适的检测方法,并结合临床症状和流行病学调查进行综合分析,以提高呼吸道病毒感染的诊断准确性和治疗效果。
希望本文所介绍的内容能够对相关医护人员和科研人员有所帮助,促进呼吸道病毒检测技术的进步和临床应用。
呼吸道六项圣湘原理

呼吸道六项圣湘原理
呼吸道六项检测试剂盒是采用免疫荧光技术、化学发光技术、干化学技术和酶联免疫技术等多种检测方法,通过对患者痰液、血液、胸水、肺泡灌洗液等标本中的呼吸道病原体抗原或抗体进行检测,以确定患者感染的病原体类型,为临床提供准确的诊断依据。
其中免疫荧光技术是利用荧光物质标记的抗体或抗原与相应的抗原或抗体结合后,在荧光显微镜下呈现特异性的荧光反应,从而对病原体进行定性或定量检测。
化学发光技术是利用化学反应产生的光子进行检测的技术,具有高灵敏度、高特异性和可定量等优点。
干化学技术是利用干式化学分析技术对病原体抗原或抗体进行检测,具有简便、快速、无需特殊仪器等优点。
酶联免疫技术是利用酶标记的抗体或抗原与相应的抗原或抗体结合后,通过酶催化底物反应产生颜色变化,从而对病原体进行定性或定量检测。
呼吸道六项检测试剂盒包括嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、呼吸道合胞病毒、腺病毒和流感病毒六种病原体。
通过对这些病原体的检测,可以快速准确地诊断呼吸道疾病,为临床提供科学依据。
呼吸道九联检(简单)

检测流程
01
02
03
04
采集样本
医生或护士使用无菌鼻咽拭子 或痰液采集器采集患者呼吸道
样本。
样本送检
将采集的样本送至实验室进行 检测。
实验室检测
实验室工作人员进行免疫荧光 技术或分子生物学检测,对九
种病原体进行检测。
结果报告
根据检测结果,出具相应的报 告,供医生参考。
02 呼吸道九联检的临床应用
在临床诊断中的推广应用
早期诊断
呼吸道九联检能够快速、准确地检测出多种 呼吸道病原体,有助于早期诊断和治疗,减 少并发症的发生。
鉴别诊断
呼吸道九联检能够鉴别出不同病原体感染,有助于 医生制定更加精准的治疗方案,提高治疗效果。
监测病情
呼吸道九联检能够监测病情变化和治疗效果 ,有助于及时调整治疗方案,减少不必要的 抗生素使用。
检测后的注意事项
遵循医生建议
在检测后应遵循医生的建 议,如是否需要进一步检 查、治疗等。
注意身体反应
在检测后应注意身体反应, 如出现异常症状应及时就 医。
保持健康生活方式
在检测后应保持健康的生 活方式,如合理饮食、适 量运动等,以促进身体健 康。
05 呼吸道九联检的发展前景
技术进步与新方法
基因测序技术
呼吸道九联检的仪器和试剂成本较高,增 加了医疗费用,不利于在基层医疗机构推 广。
呼吸道九联检的操作较为复杂,需要专业 的技术人员进行操作和维护,限制了其在 基层医疗机构的应用。
假阳性与假阴性
对新技术接受度不一
呼吸道九联检可能出现假阳性或假阴性的 情况,影响诊断的准确性,需要结合临床 症状和其他检查结果进行综合判断。
目的
呼吸道九联检旨在提高呼吸道疾病的 诊断准确率,缩短确诊时间,为患者 提供及时有效的治疗。
上呼吸道感染的病检测方法

上呼吸道感染的病检测方法上呼吸道感染是指病原体感染人体呼吸系统的疾病,包括感冒、流感、喉咙炎等常见疾病。
及时准确地检测上呼吸道感染是对疾病的早期预警,有助于及时采取相应的治疗措施。
本文将介绍几种常用的上呼吸道感染病检测方法。
一、病原体标本采集病原体标本采集是上呼吸道感染病检测的关键步骤之一。
常见的病原体标本包括鼻咽部拭子、咽拭子、喉咙拭子等。
采集标本的方法通常包括用棉签或拭子轻柔地拭取患者的鼻咽部或咽喉部分泌物,并将标本置入采样管中。
标本采集需要操作人员具备一定的专业知识和技能,以确保采集过程的无菌和标本的完整性。
二、快速诊断试纸快速诊断试纸是一种方便、快速、准确的上呼吸道感染病检测方法。
这种试纸能够迅速检测出病原体感染所产生的特定抗原或抗体。
使用快速诊断试纸进行检测的步骤通常包括将标本滴入试纸的样品孔中,待片刻后观察试纸上是否出现特定的颜色或线条。
不同的颜色或线条的出现代表着不同的检测结果。
快速诊断试纸在临床应用中具有广泛的适用性和可靠性。
三、免疫荧光染色法免疫荧光染色法是一种常用的上呼吸道感染病检测方法。
这种方法利用特定的抗体与病原体的相应抗原反应,并应用荧光素标记使其在显微镜下呈现出荧光。
这种方法的优点是能够直接观察到病原体的荧光染色,结果准确可靠。
免疫荧光染色法适用于一些对病原体种类和数量要求较高的疾病检测,如呼吸道合胞病毒感染等。
四、核酸扩增技术核酸扩增技术是一种敏感性高、特异性强的上呼吸道感染检测方法。
这种方法通过扩增病原体的DNA或RNA,使其达到可以检测的程度。
常见的核酸扩增技术有聚合酶链反应(PCR)、实时荧光定量PCR等。
核酸扩增技术具有极高的敏感性和特异性,可以对各种上呼吸道感染病原体进行检测,并且可以定量检测病原体的数量。
总结:上呼吸道感染的病检测方法多种多样,根据不同的病情和临床需求,可以选用合适的检测方法。
病原体标本采集是病检测的第一步,其后的快速诊断试纸、免疫荧光染色法和核酸扩增技术都是常见的病检测方法。
免疫荧光检测呼吸道病毒

成人呼吸道感染病毒病原学检测摘要: 目的了解哈尔滨医科大学附属第二医院成人呼吸道病毒感染的流行特征。
方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年4月-2008年6月住院的399名16-87岁呼吸道疾病患者痰标本进行七种病毒检测。
结果399例患者中病毒检测阳性者54例,病毒总体阳性率13.53%。
首位病毒为呼吸道合胞病毒29例(7.27%)和流感病毒A型27例(6.77%),其次为副流感病毒3型17例(4.26%)、副流感病毒1型13例(3.26%)、腺病毒5例(1.25%)、流感病毒B型2例(0.50%)和副流感病毒2型2例(0.50%),混合感染22例(5.51%)。
64-87岁年龄组病毒检出率最高(18.12%),32-47岁年龄组病毒检出率最低(6.94%)。
肺炎、支气管炎、支气管扩张、哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)均有病毒检出,其中以COPD检出率最高(16.67%),其次是哮喘(15.38%)。
结论病毒在成人呼吸道感染中占有重要的地位,感染主要集中在48-87岁年龄阶段(15.38%),COPD 和哮喘病毒感染率最高,以呼吸道合胞病毒和流感病毒A型最为常见。
关键词呼吸道病毒感染;成人Abstract: Objective To understand the epidemiologic feature of respiratory tract viral infection in the adults of Harbin Medical University The Second Affiliated Hospital.Methods From April 2007 to June 2008, a total of 399 hospitalized adults were studied.Sputum were screened for virus by direct immunofluorescent (DIF) assay.Results Virus was identified in 54 patients ( 13.53%) .The most prevalent was respiratory syncytial viruses (RSV) (29, 7.27%) , followed by influenza A (27,6.77%) , parainfluenza 3(17,4.26%) , parainfluenza 1(13,3.26%) , adenovirus (5,1.25 %) ,influenza B (2, 0.50 %) , parainfluenza 2 (2, 0.50%) , and mixed viral infection(22, 5.51%).The highest virus detection rate (18.12%) occur in adults between 64 and 87 years, virus detection rate of the lowest (6.94%) exist in37-47-year-old.Pneumonia, bronchitis, bronchiectasis, asthma, chronic obstructive pulmonary disease (COPD) have detected the virus, with the highest detection rate of COPD (16.67%), followed by asthma (15.38%).Conclusions Viruses still play an important role in respiratory tract infections in adults and was concentrated in the48-87 age group(15.38%), the infection rate of COPD and asthma was the highest. Respiratory syncytial virus and influenza A virus was the most common types.Key words Respiratory tract viral infection;Adults材料和方法1.研究对象2007年4月-2008年6月随机选择哈尔滨医科大学附属二院呼吸科住院病人399例。
直接免疫荧光法对多种呼吸道病毒检测的临床意义

检验医学与临床 2 0 年 2 08 月第 5 卷第 3期
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直 接 免 疫 荧 光 法对 多种 呼 吸道 病 毒 检 测 的 临 床 意 义
黄秋 琳 , 许 翔 , 淑 芳( 京八 一 医院检 验科 江 南 2 00 ) 1 0 2
Die ti m u fu e c n e a s sap i d t e e tn e p r t r y y ilvr s ( r c m no l or s e c s ay wa ple O d t c i g r s ia o y s nc ta iu RSV ),ad no r ( e vius AD V ),i n— fue z v r ( l n a A ius RSV ), i l n a viu (Fl B),pa a n l nz r s PI (1, 2, 3) i e pia o y s c e ins nfue z r s B u r i fue a viu V n r s r t r e r to .Re ・ s is T h s u t e na oph r nge pe i e ole e r ay a1s c m ns c lctd fom 1 5 pa int ih e p r t y tac nf c in s de e t d wih 9 te s w t r s ia or r ti e to wa t c e t die tfuo e c nc m m u a s y f r v r e . T her s lss w e ha ia n e ton r t n t e i a 9 . r c l r s e e i no s a o ius s e u t ho d t tv r 1if c i a e i her gon w s 5 7. 4 T he dee t d viu y si o de e eRSV ,pa anfu nz ius 1a W i t rW S hef v ies a o orvr li t c e r s t pe n r rw r r i l e a v r nd 3. n e St a ort e s n f ia n— f c in. n l so Die ti m u fu e c nc s y i a a t rs i o a diy,c nve e e a i s cfc t . e to Co c u i n r c m no lor s e e as a sch r c e itc f r pi t o ninc nd h gh pe iiiy A sa l ow- os e ho o a osn ia n e in,die ti c tm t d f rdign ig v r lif cto r c mm u fu e c n e a s y i p op it orprm a y ho no l or s e c s a s a pr ra e f i r s pia s t l.
呼吸道感染病原体检测技术

感染新冠病毒后,病毒载量在症状出现前约 2 天升 至最高水平,并在 5 天内保持较高水平,然后在 7 ~ 8 天后下降,但除免疫功能低下的患者外,多数 患者的活病毒可在 7 ~ 10 天内降为零。
血液中最早出现的抗体是 SARS-CoV-2 IgM,通常 在症状出现后 5 ~ 7 天出现。并不是所有的患者都 会产生 IgM,IgM 在血液中的含量比 IgG 上升得快, 下降得早,IgM 抗体是感染大多数病原体的标志物。
标本采集
涂片染色镜检
阳性检出率
约10%
分离培养(平板
微生物鉴定(生
培养或血培养)
化鉴定)
药敏试验
先进行痰液标本质量判定, 扁平鳞状上皮细胞≥10个 而白细胞<25/低倍镜视野 建议标本重采,用革兰染 液对痰液或支气管肺泡灌 洗液的涂片样本进行染色 后镜检,根据涂片染色结 果粗略判断革兰氏阴阳性 球杆菌?疑似哪种病菌/真 菌(念珠菌),提供临床 经验性用药和选择合适培 养基分离培养。
真菌(GM试验)
抗原检测法 血清、BALF
因素第5位
呼吸道感染居全球疾病负担前列
• 据世界卫生组织估计,2016 年ARI 已导致全球近3 0 0 万人死亡。2 0 2 1 年全球疾病负担研究 结果显
• 示,2019 年下呼吸道感染位居全球主要死亡原因的第四位,2021 年新型冠状病毒(severe acuterespiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染位居第二位,导致2019 年至2021 年间全球预期寿命下降了1.6 岁。
LI Z J, ZHANG H Y, REN L L, et al. Etiological and epidemiological features of acute respiratory infections in China[J]. Nat Commun, 2021, 12(1): 5026.[1] GBD Demographics Collaborators. Global age-sexspecific mortality, life expectancy, and population estimates in 204 countries and territories and 811 subnational locations, 1950-2021, and the impact of the COVID-19 pandemic: a comprehensive demographic analysis for the Global Burden of Disease Study 2021[J]. Lancet, 2024, 403(10440):
肺炎支原体感染的病毒血清学与免疫学检测

肺炎支原体感染的病毒血清学与免疫学检测肺炎支原体是一种常见的细菌性感染病原体,可引起呼吸道疾病,包括肺炎、支气管炎和喉炎等疾病。
针对肺炎支原体感染的确诊与治疗,病毒血清学与免疫学检测成为了非常重要的手段。
本文将介绍肺炎支原体感染的病毒血清学与免疫学检测的原理和方法,并探讨其在临床应用中的价值。
一、病毒血清学检测方法病毒血清学检测主要通过检测人体血液中的抗体来判断肺炎支原体的感染情况。
常用的病毒血清学检测方法包括:1. 血清中特异性抗体的检测:通过检测患者血液中肺炎支原体特异性IgM和IgG抗体的水平变化来确定感染的阶段和病情。
IgM抗体是早期感染的标志,而IgG抗体则是感染后体内产生的免疫应答。
针对这些抗体的检测可采用酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法。
2. 补体结合试验:通过检测患者血清中的补体结合反应来判断是否感染了肺炎支原体。
该方法较为传统,操作相对繁琐,但作为一种辅助诊断手段仍然具有一定的参考价值。
二、免疫学检测方法免疫学检测方法是指以人体免疫系统的反应来检测肺炎支原体的感染情况,常用的免疫学检测方法包括:1. 免疫荧光检测法:该方法通过标记抗肺炎支原体抗体的荧光物质,并与患者标本中的肺炎支原体结合,最后观察荧光情况来判断是否感染。
该方法具有灵敏度高、特异性好的特点,且操作简便,常用于快速检测和筛查。
2. 免疫层析检测法:该方法通过将肺炎支原体特异蛋白质与检测纸条上的抗体相结合,形成蛋白质-抗体复合物,从而显示出特异反应的颜色带。
该方法具有快速、便携、易于操作的特点,常用于临床现场的快速诊断。
三、病毒血清学与免疫学检测在临床应用中的意义病毒血清学与免疫学检测方法在肺炎支原体感染的临床应用中发挥着重要作用。
其意义主要包括:1. 确定感染与排除感染:通过病毒血清学与免疫学检测,可以明确患者是否感染了肺炎支原体,排除其他病原体引起的类似症状,有助于判断病情和制定治疗方案。
2. 指导治疗:不同阶段的肺炎支原体感染需要采取不同的治疗策略,如抗生素和抗病毒药物的选择等。
直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测分析
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直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测分析作者:李剑鸿来源:《中外医疗》2013年第22期[摘要] 目的研究分析直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测。
方法该院接诊呼吸道感染患者230例,将其分为成人组(105例)和儿童组(125例),均通过直接免疫荧光法对7种病毒抗原进行检测,其中包括流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、呼吸道合胞病毒、腺病毒。
结果 230例呼吸道感染的病毒检出呈阳性85例,检出率为37.0%,其中最高为呼吸道合胞病毒50例(21.7%),其次为流感病毒A(16例,6.9%)、流感病毒B(14例、6.0%)。
呼吸道病毒的阳性检出率随着年龄增长而下降,其中儿童组检出阳性55例,阳性率为44.0%,明显高于成人组(30例,28.6%),差异有统计学意义(P[关键词] 直接免疫荧光法;呼吸道病毒;快速检测[中图分类号] R446 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2013)08(a)-0015-02呼吸道感染为常见疾病,主要病原体为病毒。
呼吸道病毒可以侵犯呼吸道导致呼吸道局部发生病变或者通过呼吸道入侵导致呼吸道的组织器官发生病变[1]。
目前呼吸道病毒感染不断上升,而传统病毒分离及鉴定的操作比较复杂,无法满足临床对其进行快速检测的需要。
而直接免疫荧光法可为诊断和治疗提供及时的临床依据,逐渐应用到临床中[2]。
为研究分析直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测,该研究对该院2013年1—5月间共接诊呼吸道感染患者230例的多种呼吸道病毒采取直接免疫荧光法进行快速检测,报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取该院共接诊呼吸道感染230例患者,由患者的病史、X线以及辅助检查等结果以及《中华人民共和国传染病防治法》中规定的呼吸道感染诊断标准得到确诊。
年龄0~55岁,平均(31±2.8)岁。
将其按照年龄分为成人组和儿童组,成人组105例,男67例、女38例,年龄23~55岁,平均(41±2.8)岁;儿童组125例,男80例、女45例,年龄0~12岁,平均(4.2±0.8)岁。
呼吸道病原体抗体11项联合检测结果分析

呼吸道病原体抗体11项联合检测结果分析DOI:10.16659/ki.1672-5654.2016.19.113目的了解大理地区呼吸道感染疾病的病原体分布情况以及病原体感染与季节、年龄的相关性,为临床呼吸道感染疾病诊治提供参考。
方法采用间接免疫荧光法对4005例呼吸道感染患者血清中的流感病毒A型、流感病毒B型、呼吸道合包病毒、腺病毒、副流感病毒、柯萨奇病毒A型、柯萨奇病毒B型、埃可病毒、肺炎衣原体、肺炎支原体、嗜肺军团菌1型等11种病原体IgM抗体进行联合检测和分组统计分析。
结果11种病原体总阳性率为12.91%,流感病毒B型8.61%、肺炎支原体1.57%、流感病毒A 型1.20%、肺炎衣原体0.72%、嗜肺军团菌1型0.45%、副流感病毒0.22%、呼吸道合胞病毒0.1%、腺病毒0.02%,柯萨奇病毒和埃可病毒未检出;按照季节统计,呼吸道病原体阳性率第一季度9.69%、第二季度10.20%、第三季度13.41%、第四季度18.26%;按照年龄分组统计,病原体阳性率婴幼儿组(0-10岁)12.23%,青少年组(11~20岁)24.00%,壮年组(21~60岁)10.56% 老年组(>60岁)7.69%。
结论大理地区呼吸道病原体谱IgM总阳性率为12.91%,以流感病毒B型为主,其次为肺炎支原体;阳性率与季节有相关性,第四季度最高;阳性率与年龄有相关性,以青少年组最高。
标签:呼吸道感染;病原体;间接免疫荧光法呼吸道感染是最常见的感染性疾病,分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,目前已知的常见呼吸道感染病原体为嗜肺军团菌、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、流感病毒A、流感病毒B、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、柯萨奇病毒、埃可病毒等[1-2]。
近年来随着科学技术的进步,采用间接免疫荧光检测法联合检测呼吸道病原体抗体谱已在全国范围内广泛应用,不同地区对呼吸道病原体抗体谱检测结果报道不一致[3-5],为了解大理地区呼吸道感染疾病病原体在人群中的感染分布情况以及病原体感染与季节、年龄的相关性,为临床呼吸道感染疾病诊断治疗提供参考,该研究对2015年度大理地区的4 005例呼吸道感染疾病血清中病原体IgM检测结果进行统计分析,现报道如下。
直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测分析
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【 关键词】 直接免疫 荧光 法; 呼吸道病毒 ; 快速检 测 【 中图分类 号】R 4 4 6 【 文献标识码】A 【 文章编号】1 6 7 4 — 0 7 4 2 ( 2 0 1 3 ) 0 8 ( a ) 一 0 0 1 5 — 0 2
Ra p i d De t e c t i o n An a l y s i s o f Mu l t i p l e Re s p i r a t o r y Vi r u s An t i g e n s wi t h Di r e c t I mm u n o l f u o r e s c e n c e
L IJ i a n h o n g
T h e F i r s t Pe o p l e S Ho s p i t a l o f Xi a n g t a n C i t y , Xi a n g t a n, Hu n a n P r o v i n c e ,4 1 1 1 0 1 , C h i n a
o d s 2 3 0 c a s e s o f p a t i e n t s w i t h r e s p i r a t o y r t r a c t i n f e c t i o n a d mi t t e d i n o u r h o s p i t l a f r o m J a n u a r y , 2 0 1 3 t o Ma y , 2 0 1 3 w e r e d i v i d e d
i n t o a d u l t s g r o u p ( 1 0 5 c a s e s ) a n d c h i l d r e n g r o u p( 1 2 5 c a s e s ) . k i n d s o f v i us r a n t i g e n s , i n c l u d i n g F l u A ,
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成人呼吸道感染病毒病原学检测摘要: 目的了解哈尔滨医科大学附属第二医院成人呼吸道病毒感染的流行特征。
方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年4月-2008年6月住院的399名16-87岁呼吸道疾病患者痰标本进行七种病毒检测。
结果399例患者中病毒检测阳性者54例,病毒总体阳性率13.53%。
首位病毒为呼吸道合胞病毒29例(7.27%)和流感病毒A型27例(6.77%),其次为副流感病毒3型17例(4.26%)、副流感病毒1型13例(3.26%)、腺病毒5例(1.25%)、流感病毒B型2例(0.50%)和副流感病毒2型2例(0.50%),混合感染22例(5.51%)。
64-87岁年龄组病毒检出率最高(18.12%),32-47岁年龄组病毒检出率最低(6.94%)。
肺炎、支气管炎、支气管扩张、哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)均有病毒检出,其中以COPD检出率最高(16.67%),其次是哮喘(15.38%)。
结论病毒在成人呼吸道感染中占有重要的地位,感染主要集中在48-87岁年龄阶段(15.38%),COPD 和哮喘病毒感染率最高,以呼吸道合胞病毒和流感病毒A型最为常见。
关键词呼吸道病毒感染;成人Abstract: Objective To understand the epidemiologic feature of respiratory tract viral infection in the adults of Harbin Medical University The Second Affiliated Hospital.Methods From April 2007 to June 2008, a total of 399 hospitalized adults were studied.Sputum were screened for virus by direct immunofluorescent (DIF) assay.Results Virus was identified in 54 patients ( 13.53%) .The most prevalent was respiratory syncytial viruses (RSV) (29, 7.27%) , followed by influenza A (27,6.77%) , parainfluenza 3(17,4.26%) , parainfluenza 1(13,3.26%) , adenovirus (5,1.25 %) ,influenza B (2, 0.50 %) , parainfluenza 2 (2, 0.50%) , and mixed viral infection(22, 5.51%).The highest virus detection rate (18.12%) occur in adults between 64 and 87 years, virus detection rate of the lowest (6.94%) exist in37-47-year-old.Pneumonia, bronchitis, bronchiectasis, asthma, chronic obstructive pulmonary disease (COPD) have detected the virus, with the highest detection rate of COPD (16.67%), followed by asthma (15.38%).Conclusions Viruses still play an important role in respiratory tract infections in adults and was concentrated in the48-87 age group(15.38%), the infection rate of COPD and asthma was the highest. Respiratory syncytial virus and influenza A virus was the most common types.Key words Respiratory tract viral infection;Adults材料和方法1.研究对象2007年4月-2008年6月随机选择哈尔滨医科大学附属二院呼吸科住院病人399例。
其中年龄16岁-87岁,男性214例,女性185例。
2.设备及试剂荧光显微镜(TS100),离心机(TGL20LM),漩涡混合器(XH-B),37℃培养箱(SKP-02.500),直接免疫荧光试剂盒(3137,chemicon)。
3.病毒抗原检测标本收集和处理由专职护士将塑料导管经鼻腔插入7-8cm达到咽部以下诱导吸取1-2ml分泌物于10ml无菌离心管中[1],-40℃冻存。
实验时取出标本,向离心管中加入4-8ml冷PBS,4℃放置3-4个小时,用漩涡混合器震荡3-5分钟后,标本液转移入1.5mlEP管中,1000-6000r/min离心5-10分钟,弃去上清液,如果有粘液也一并弃去。
沉淀物再加入1ml冷PBS震荡3-5分钟,1000-6000r/min离心5-10分钟,再次弃去上清液。
沉淀物中加入适量PBS,调节细胞浓度到含纤毛柱状上皮细胞1.0×106/ml。
细胞片制备微量加样器吸取上述纤毛柱状上皮细胞悬液20ul,点于预先用4℃丙酮浸泡过的载玻片上。
室温下空气干燥后4℃丙酮浸泡固定10分钟。
3.3 免疫荧光染色用Chemicon直接免疫荧光试剂盒对所有标本进行直接免疫荧光检测。
筛查试剂中含有7种混合单克隆抗体,即腺病毒(ADV)、流感病毒A(IFVA)、B型(IFVB)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)及呼吸道合胞病毒(RSV)单克隆抗体。
当筛查试验为阳性时,再用单一特异性单克隆抗体对标本进行鉴定检测。
按试剂盒说明一滴混合单克隆抗体或单一单克隆抗体置于标本上,37 ℃孵育,筛查为15分钟,鉴定为30分钟后,用PBS 洗片3次,每次3-5分钟,风干后封片。
封片剂由试剂盒提供。
在荧光显微镜下观察。
所有标本均涂两张载玻片,一张上面涂一个样点用于筛查,另一张载玻片上面涂七个样点,如筛查为阳性,则用涂有七个样点的载玻片进行鉴定实验。
3.4 阳性结果判定及对照设定荧光显微镜下读片,放大倍数为200倍。
如果样点中含有>=20个细胞,则认为此片是可以评价的。
筛查实验阳性:在荧光显微镜200倍视野下有>=2个柱状纤毛细胞呈明亮黄绿色荧光即为筛查实验阳性,否则为阴性。
鉴定实验阳性:在荧光显微镜下呼吸道合胞病毒及副流感病毒显示细胞浆染色,流感病毒及腺病毒为核染色或细胞浆内染色,否则为阴性。
由试剂盒提供阳性及阴性对照片作对照。
4.数据处理采用SPSS统计软件进行数据处理。
结果1.呼吸道病毒种类分布399例入选病人中病毒检测阳性者54例,男27例,女27例,病毒感染率13.53%。
其中腺病毒感染5例(1.25%),呼吸道合胞病毒感染29例(7.27%),流感病毒A型感染27例(6.77%),流感病毒B型感染2例(0.50%),副流感病毒1型感染13例(3.26%),副流感病毒2型感染2例(0.50%),副流感病毒3型感染17例(4.26%),混合感染22例(5.51%)。
2.病毒检出率与年龄的关系表1 呼吸道病毒检出率与年龄的关系年龄组例数检出数检出率(%) ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3 混合感染16-23 22 3 13.64 1 2 2 0 0 0 0 124-31 19 2 10.53 0 2 1 0 1 0 1 232-39 27 2 7.41 0 2 0 0 1 0 0 140-47 45 3 6.67 0 1 1 0 0 0 2 148-55 52 7 13.46 1 4 5 0 1 0 1 356-63 96 12 12.50 2 5 7 0 3 0 2 464-71 70 16 22.86 1 8 8 0 5 0 7 771-79 48 4 8.33 0 2 0 0 0 1 1 080-87 20 5 25.00 0 3 3 2 2 1 3 33.呼吸道病毒种类的季节分布表2 呼吸道病毒的年份、季节分布季节例数检出数检出率(%) ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3 混合感染07春季 33 2 6.06 0 2 1 0 0 0 0 107夏季 91 20 21.98 0 10 11 0 5 0 2 707秋季 99 11 11.11 2 6 4 0 3 1 3 307冬季 73 8 10.96 1 5 5 0 2 0 4 508春季 93 13 13.98 2 6 6 2 3 1 8 608夏季 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 04.不同疾病的病毒检出情况表3 几种常见疾病的病毒检出情况常见疾病例数检出数检出率(%) ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3 混合上呼吸道感染 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 肺炎 117 12 10.26 1 7 7 1 4 0 5 5 支气管炎 38 5 13.16 0 5 1 0 2 0 1 2 支气管扩张 35 3 8.57 1 1 2 0 0 0 1 1 哮喘 13 2 15.38 1 0 2 0 0 0 1 1 COPD 60 10 16.67 1 4 4 1 0 2 2 2 5.混合感染检出情况表4 七种病毒的混合感染情况例数 ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3单独感染 1 14 9 0 2 1 5混合感染 4 15 18 2 11 1 12总数 5 29 27 2 13 2 17讨论直接免疫荧光技术检测病毒的抗原快速而准确,与间接免疫荧光相比,减少了非特异性反应而提高了特异性。
Chemicon呼吸道病毒的诊断方法经过WHO3个参考中心审评,结果可靠。
本文采用直接免疫荧光法检测痰标本中的病毒抗原,399例病人中,病毒检出率为13.53%,已有报道RSVIgM抗体的测定结果多在8.1%-46.2%,虽然方法不同,但本次结果与该报道接近,且本次研究检测痰标本,易被患者接受。
在所检测的呼吸道病毒中,首位病毒为呼吸道合胞病毒和流感病毒A型,分别占总阳性例数的53.70%和50%,其次为副流感病毒3型、副流感病毒1型、腺病毒、流感病毒B型和副流感病毒2型。