常用细胞培养基配方及缓冲液
ms培养基配方表
ms培养基配方表ms培养基是一种常用的细胞培养基，用于无菌条件下培养哺乳动物细胞，特别是鼠胚胎成纤维细胞（Mouse Embryo Fibroblast,MEF）。
它是由多种有机和无机化合物组成的复杂混合物，可以提供细胞生长所需的必需氨基酸、糖类、维生素和微量元素等营养物质。
同时，它还包含有机缓冲剂和盐类，可以调节培养品的 pH 值和离子浓度，保持培养条件的稳定性。
下面介绍 ms培养基的配方表：MS培养基水相1. 将1L 去离子水（DI水）加入1mol/L NaCl 至5mL2. 加入HEPES缓冲液（1mol/L）27.7g，调节至pH7.2-7.43. 加入葡萄糖25.0g，混合直至葡萄糖完全溶解4. 加入 L-谷氨酸1.42g，细胞培养I 类和 II 类所需濃度5. 加入 L-苏氨酸0.07g，细胞培养所需濃度6. 加入 L-半胱氨酸0.16g7. 加入 L-赖氨酸0.07g8. 加入 L-缬氨酸0.07g9. 加入L-异亮氨酸0.07g10. 加入L-亮氨酸0.14g11. 加入L-丙氨酸0.14g12. 加入L-天冬氨酸0.15g13. 加入L-芸香氨基酸0.42g14. 加入 L-色氨酸0.03g15. 加入 L-酪氨酸0.03g16. 加入 L-精氨酸0.17g17. 加入 L-组氨酸0.03g18. 加入 L-甘氨酸0.10gMS培养基固相1. 加入 NaHCO3（7.5%）4mL，细胞培养所需濃度2. 加入 4-(2-羟乙基)吡啶盐酸盐（HEP）2g，细胞培养所需濃度；过度使用可导致凝块形成3. 加入 MgSO4（7H2O）0.94g，细胞培养所需濃度4. 加入 KH2PO4 0.17g，细胞培养所需濃度5. 加入 NaH2PO4（H2O，2. H2O）0.19g，细胞培养所需濃度6. 加入 Na2HPO4（7H2O）3.05g，细胞培养所需濃度7. 加入次黄嘌呤（NEAA）1mL，必需的非必需氨基酸，促进细胞生长8. 加入乳酸钠2.72g，利用减少氧淤积，促进细胞生长9.加入硫酸铜子（10-5M)）1mL，为MEF的细胞类型提供最佳的增生所需注：以上配方根据MS原始文献略作调整，如果在实验中出现差异，请根据实际情况微调。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。
下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。
一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。
常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。
常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。
以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。
Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。
3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。
以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。
1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。
以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。
2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多，根据实验需求，可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方，以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液（Phosphate buffer）磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中，用于控制溶液的pH值，适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液（Sodium chloride solution）氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一，通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液，常见的配方为0.9%氯化钠溶液（生理盐水）。
3. 碳酸氢盐缓冲液（Bicarbonate buffer）碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中，用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液（Tris buffer）Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液，可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液（pH 7.4），需要用Tris（三氯甲烷磺酸，Tris-HCl）和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液（Phosphate-buffered saline）PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液，具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液（pH7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液（Glycine buffer）甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中，用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液（pH8.3），需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液（Bovine serum albumin solution）BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质，用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
各种培养液的配方
各种培养液的配方不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。
下面列举一些常见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。
以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。
以下是RPMI1640培养液的配方：-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。
以下是MEM培养液的配方：-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×MEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×MEM中，使最终浓度为1%。
-1×非必需氨基酸：将非必需氨基酸（如谷氨酰胺、苏氨酸等）加入1×MEM中。
细胞培养液配方
双抗(0.2ml)
RPMI-1640培养基 (180ml)
胎牛血清 (20ml)
双抗 （2ml）
溶液各组分终浓度为90%RPMI-1640培养基 +10%胎牛血清+1%双抗（200mM L-谷氨酰胺、10mg/ml链霉素和10000U青霉素）
三 细胞冻存液配方：(20ml)
RPMI-1640培养基 (14ml)
胎牛血清 (4ml)
细胞培养常用溶液配方
一PBS配方：
方法一 1×PBS(Phosphate-Buffered Sallines)
Na2HPO4、Na2HPO4•7H2O、Na2HPO4•12H2O中任选其一。
方法二 母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水
0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
0.02MPBS（PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100ml）即可。
细胞培养常用溶液配方
二 细胞培养液配方：（200ml）
各种浓度PBS(pH=7.4)的配制：
先配0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：
0.1MPBS（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。
同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是一种含有适当营养物质和生长因子的液体或凝胶，用于维持细胞的生长与繁殖。
常用的细胞培养基配方和缓冲液如下：一、常用的细胞培养基配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）-DMEM是最常用的细胞培养基之一，适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：-高糖DMEM：添加25mM葡萄糖-低糖DMEM：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸DMEM：添加高浓度的氨基酸，以促进细胞生长和蛋白质合成。
2.RPMI1640-适用于淋巴细胞和一些肿瘤细胞的培养。
-基本配方：-高糖RPMI1640：添加25mM葡萄糖-低糖RPMI1640：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸RPMI1640：添加高浓度的氨基酸。
3. MEM（Minimum Essential Medium）-MEM是最早用于细胞培养的培养基。
-基本配方：-高糖MEM：添加25mM葡萄糖-低糖MEM：添加5.5mM葡萄糖4. Ham's F-10-适用于肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。
-基本配方：- 高糖Ham's F-10：添加25mM葡萄糖- 低糖Ham's F-10：添加5.5mM葡萄糖5.L-15-适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：- L-15培养基：必须在CO2-free环境下使用。
二、常用的缓冲液：1. 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）-0.1MPBS的配方：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-1L去离子水-调pH至7.42.HEPES缓冲液-基本配方：-119mMNaCl-5mMKCl-0.8mMMgSO4-0.4mMKH2PO4-2.4mMNaHCO3-20mMHEPES（pH7.4）-0.6mMCaCl23. Tris缓冲液-基本配方：- 25mM Tris- 192mM glycine-10%甘油-0.1%SDS-pH8.34. Hanks平衡盐液 (HBSS)-基本配方：-8gNaCl-0.4gKCl-0.146gKH2PO4-0.2gMgSO4-0.06gMgCl2-0.35gNaHCO3-0.06gNa2HPO4-pH7.45. Tris-EDTA-基本配方：- 1M Tris-HCl，pH 8.0-0.5MEDTA，pH8.0以上是常用的细胞培养基配方和缓冲液的一些例子，不同细胞类型和实验要求可能需要不同的培养基和缓冲液。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液成分（mg/L）MD800 MD801 MD802 MD803 四水硝酸钙100 100 100 100 氯化钾400 400 400 400 无水硫酸镁48.84 48.84 48.84 48.84 氯化钠6000 6000 6000 5850 磷酸氢二钠800 800 —800 L-精氨酸200 200 200 200 L-天门冬酰胺50 50 50 50 L-天门冬氨酸20 20 20 20 L-胱氨酸盐酸盐65.15 65.15 65.15 65.15 L-谷氨酸20 20 20 20 L-谷氨酰胺300 300 300 300甘氨酸10 10 10 10L-组氨酸15 15 15 15 L-羟脯氨酸20 20 20 20 L-异亮氨酸50 50 50 50L-亮氨酸50 50 50 50 L-赖氨酸盐酸盐40 40 40 40 L-蛋氨酸15 15 15 15 L-苯丙氨酸15 15 15 15L-脯氨酸20 20 20 20L-丝氨酸30 30 30 30L-苏氨酸20 20 20 20L-色氨酸 5 5 5 5L-酪氨酸20 20 20 20L-缬氨酸20 20 20 20D-葡萄糖2000 2000 2000 2000 谷胱甘肽（还原型）1 1 1 1 HEPES ———5957.5酚红 5 —— 5维生素H 0.2 0.2 0.2 0.2 D-泛酸钙0.25 0.25 0.25 0.25 氯化胆碱3 3 3 3 叶酸 1 1 1 1i-肌醇35 35 35 35烟酰胺 1 1 1 1 对氨基苯甲酸 1 1 1 1 盐酸吡哆醇 1 1 1 1 核黄素0.2 0.2 0.2 0.2 盐酸硫胺 1 1 1 1 维生素B120.005 0.005 0.005 0.005pH（无碳酸氢钠）7.5±0.3 7.5±0.3 8.0±0.3 6.7±0.3 pH（加碳酸氢钠）7.8±0.3 7.8±0.3 8.2±0.3 7.0±0.3 渗透压（无碳酸氢钠）237±5% 235±5% 235±5% 260±5% 渗透压（加碳酸氢钠）279±5%280±5% 280±5% 292±5%成分（mg/L）MD600 MD601 MD602 MD603 MD604 MD605 MD606 MD607 MD608 氯化钙200 140 —200 140 200 —200 200 氯化钾400 400 400 400 400 400 400 400 400 无水硫酸镁97.67 97.67 97.67 97.67 97.67 97.67 97.67 97.67 97.67 磷酸二氢钾—60 ——60 ————氯化钠6800 8000 6800 6800 8000 6800 6800 6800 6800 无水磷酸二氢钠121.74 —121.74 121.74 —121.74 121.74 121.74 —磷酸氢二钠—47.88 ——47.88 ————L-丙氨酸———8.9 8.9 ————L-精氨酸盐酸盐126 126 126 126 126 126 126 126 126 L-天门冬酰胺———13.2 13.2 ————L-天门冬氨酸———13.2 13.2 ————L-胱氨酸盐酸盐31.29 31.29 31.29 31.29 31.29 31 31 31.29 31.29 L-谷氨酸———14.7 14.7 ————L-谷氨酰胺292 292 292 292 292 ——292 292 甘氨酸———7.5 7.5 ————L-组氨酸盐酸盐42 42 42 42 42 42 42 42 42L-异亮氨酸52 52 52 52 52 52 52 52 52L-亮氨酸52 52 52 52 52 52 52 —52L-赖氨酸盐酸盐72.5 72.5 72.5 72.5 72.5 72.5 72.5 —72.5 L-蛋氨酸15 15 15 15 15 15 15 —15L-苯丙氨酸32 32 32 32 32 32 32 32 32L-脯氨酸———11.5 11.5 ————L-丝氨酸———10.5 10.5 ————L-苏氨酸48 48 48 48 48 48 48 48 48L-色氨酸10 10 10 10 10 10 10 10 10L-酪氨酸36 36 36 36 36 36 36 36 36L-缬氨酸46 46 46 46 46 46 46 46 46D-葡萄糖1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000酚红10 10 10 10 10 6 6 10 10 丁二酸钠—————100 100 ——丁二酸—————75 75 ——D-泛酸钙 1 1 1 1 1 1 1 1 1重酒石酸胆碱————— 1.8 1.8 ——氯化胆碱 1 1 1 1 1 —— 1 1叶酸 1 1 1 1 1 1 1 1 1i-肌醇 2 2 2 2 2 2 2 2 2烟酰胺 1 1 1 1 1 1 1 1 1盐酸吡哆醛 1 1 1 1 1 1 1 1 1核黄素0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 盐酸硫胺 1 1 1 1 1 1 1 1 1pH（无碳酸氢钠）5.9±0.3 6.2±0.3 5.1±0.3 5.1±0.3 6.3±0.3 4.2±0.3 4.3±0.3 5.9±0.3 6.6±0.3 pH（加碳酸氢钠）7.6±0.3 7.1±0.3 6.8±0.3 7.5±0.3 7.2±0.3 7.3±0.3 6.7±0.3 7.5±0.3 7.8±0.3 渗透压（无碳酸氢钠）250±5％282±5％265±5％250±5％287±5％251±5％267±5％250±5％240±5％渗透压（加碳酸氢钠）295±5％285±5％300±5％294±5％300±5％289±5％299±5％290±5％281±5％DMEM/F12细胞培养基成分（mg/L）MD206 MD207 成分（mg/L）MD206 MD207 无水氯化钙116.6 116.6 L-色氨酸9.02 9.02 五水硫酸铜0.0013 0.0013 L-酪氨酸38.4 38.4 九水硝酸铁0.05 0.05 L-缬氨酸52.85 52.85 七水硫酸亚铁0.417 0.417 D-葡萄糖3151 3151 氯化钾311.8 311.8 HEPES 3574.5 —氯化镁28.64 28.64 次黄嘌呤 2 2 无水硫酸镁48.84 48.84 亚油酸0.042 0.042 氯化钠6999.5 6999.5 硫辛酸0.105 0.105 无水磷酸二氢钠54.35 54.35 酚红8.1 8.1 磷酸氢二钠71.02 71.02 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081 0.081 七水硫酸锌0.432 0.432 丙酮酸钠55 55 L-精氨酸盐酸盐147.5 147.5 维生素H 0.0035 0.0035 L-胱氨酸盐酸盐31.29 31.29 D-泛酸钙 2.24 2.24 L-谷氨酰胺365 365 氯化胆碱8.988.98甘氨酸18.75 18.75 叶酸 2.65 2.65 L-组氨酸盐酸盐31.48 31.48 i-肌醇12.6 12.6 L-异亮氨酸54.47 54.47 烟酰胺 2.02 2.02 L-亮氨酸59.05 59.05 盐酸吡哆醛2 2 L-赖氨酸盐酸盐91.25 91.25 盐酸吡哆醇0.031 0.031 L-蛋氨酸17.24 17.24 核黄素0.219 0.219 L-苯丙氨酸35.48 35.48 盐酸硫胺 2.17 2.17L-丝氨酸26.25 26.25 胸苷0.365 0.365L-苏氨酸53.45 53.45 维生素B120.68 0.68L-丙氨酸 4.45 4.45L-天门冬酰胺7.5 7.5 pH（无碳酸氢钠）5.8±0.3 5.8±0.3 L-天门冬氨酸 6.65 6.65 pH（加碳酸氢钠）6.8±0.3 6.9±0.3 L-半胱氨酸盐酸盐17.56 17.56 渗透压（无碳酸氢钠）279±5% 277±5% L-谷氨酸7.35 7.35 渗透压（加碳酸氢钠）299±5% 300±5% L-脯氨酸17.25 17.25以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
通用细胞培养基配方及其缓冲液
36
36
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L-缬氨酸
46
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D-葡萄糖
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重酒石酸胆碱
—
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L-蛋氨酸
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L-丝氨酸
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10.5
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L-苏氨酸
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L-色氨酸
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细胞培养基常用的添加成份及使用注意事项
细胞培养基常用的添加成份及使用注意事项
酚红在细胞培养基中用作pH值的指示剂。
一般情况下，可以通过酚红的指示作用判断培养基的pH值，但低血清或是无血清细胞培养基中酚红的含量与普通细胞培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。
酚红通常对含血清的细胞培养基生产的生物制品质量并不会产生明显影响，也可通过纯化技术去除，但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长。
碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统，此外还具有调节渗透压的作用。
通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量，是在科学的基础上根据实践经验所得。
但是由于不同的细胞系（株）不同，同一株细胞适应环境也可能不同（细胞耐受性不同等），且存在的地域性水质差异等，在实际生产过程中也可稍作改动，但使用者需做相应的检测（理化及细胞生产试验等）。
HEPES是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 ～7.4范围内具有较好的缓冲能力，在高浓度时对一些细胞可能有毒。
HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34g /L）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。
其安全浓度范围是10～25mmol/L。
丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是在没有葡萄糖的条件下，细胞也可以代谢丙酮酸钠。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定，4 ℃下放置1周可分解50 %，使用中最好单独配制，置-20 ℃冰箱中保存，使用前加入细胞培养液中。
生命科学细胞培养缓冲液配制
生命科学细胞培养缓冲液配制北京华越洋生物磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,含钙镁) 1L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco's磷酸缓冲盐溶液、D-PBSB、D-PBS溶液,含钙镁,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
"主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4, 1.47mM KH2PO4,1.8mMCaCl2,3.98mM镁离子组成,该粉剂溶于水后pH值为7.2～7.4。
使用时，取粉末充分溶解于水即可使用，如要求无菌，应高压灭菌或过滤除菌。
磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,含钙镁) 10×1L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco's磷酸缓冲盐溶液、D-PBSB、D-PBS溶液,含钙镁,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
"主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4, 1.47mM KH2PO4,1.8mMCaCl2,3.98mM镁离子组成,该粉剂溶于水后pH值为7.2～7.4。
使用时，取粉末充分溶解于水即可使用，如要求无菌，应高压灭菌或过滤除菌。
磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,无钙镁) 1L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco磷酸缓冲盐溶液、D-PBSA、CMF-DPBS溶液或DPBS溶液,不含钙离子和镁离子,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4,1.47mM KH2PO4组成,该粉剂溶于水后pH值为7.4。
现货磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,无钙镁) 2L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco磷酸缓冲盐溶液、D-PBSA、CMF-DPBS溶液或DPBS溶液,不含钙离子和镁离子,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4,1.47mM KH2PO4组成,该粉剂溶于水后pH值为7.4。
细胞培养常用缓冲配制及保存
细胞培养常用缓冲配制及保存（所需水全用合格的去离子水）１）Hank's液用途：用于保存标本产品编号：HA2004Y 产品规格：500ml 价格：120.00 配制：500ml (ddH2O)称量：NaCl……………………………….. 4g KCl………………………………………… 0.2gMgSO4.7H2O ……….……….0.1g Na 2HPO4.12H2O.............. 0.067 gKH2PO4 ....................0.03 g CaCL................................0.07 g葡萄糖 .......................0.5 g注意：A：在300-400ml水中依次溶解NaCl、KCl、MgSO4.7H2O、Na2HPO4.12H2O、KH2PO4、葡萄糖为A液。
B：在约50ml水中溶解CaCL2为B液。
C：将B液缓缓倒入A液中，同时搅拌，为C液。
D：在C液中加入1%酚红1ml，混均，加水至500ml，该液即为Hank's液，此液偏酸。
消毒：10磅10分种高压消毒（消毒时压力波动不能大，否则葡萄糖会沉淀出来，消毒完毕,须等冷却方打开高压锅，以免液体冲出。
）保存：4度。
使用：在使用时加入5.6% NaHCO3调PH至7.2左右，然后加入10%（体积/体积）青链霉素液。
2）5.6%NaHCO3液；用途：调节溶液的PH值。
配制：50ml称量：NaHCO3…………………2.8g注意：在约40ml水中溶解NaHCO3，再加水至50ml即可，NaHCO3溶解缓慢，故可适当加热。
消毒：10磅10分钟高压消毒。
保存：4度。
3）1%酚红液；用途：作溶液的指示剂。
配制：100ml称量：酚红………………………….1g注意：A）在于1N NaOH 2ml溶液中溶解酚红；酚红较为困难，所以在研钵中进行，不断研磨至溶。
常用细胞培养基配方及缓冲液
1640细胞培养基以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
MEM细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
DMEM/F12细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
IMDM细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
BME 细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
199 细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
Hanks'平衡盐
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
Earle's平衡盐
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
Dulbecco's磷酸盐缓冲盐
以上数据仅为参考，以产品说明书为准
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丁二酸钠
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丁二酸
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维生素H
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D-泛酸钙
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重酒石酸胆碱
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氯化胆碱
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叶酸
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i-肌醇
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烟酰胺
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盐酸吡哆醛
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盐酸硫胺
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pH（无碳酸氢钠）
5.9±0.3
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97.67
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磷酸二氢钾
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氯化钠
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无水磷酸二氢钠
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磷酸氢二钠
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L-丙氨酸
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1640细胞培养基
成分（mg/L）
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MD801
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四水硝酸钙
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氯化钾
400
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无水硫酸镁
48.84
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48.84
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氯化钠
6000
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磷酸氢二钠
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L-精氨酸
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L-天门冬酰胺
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L-精氨酸盐酸盐
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L-天门冬酰胺
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L-天门冬氨酸
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L-胱氨酸盐酸盐
31.29
31.29
31.29
31.29
31.29
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31.29
31.29
L-谷氨酸
—
—
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14.7
14.7
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4.2±0.3
4.3±0.3
5.9±0.3
6.6±0.3
pH（加碳酸氢钠）
7.6±0.3
7.1±0.3
6.8±0.3
7.5±0.3
7.2±0.3
7.3±0.3
6.7±0.3
7.5±0.3
7.8±0.3
渗透压（无碳酸氢钠）
250±5％
282±5％
265±5％
250±5％
287±5％
251±5％
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L-天门冬氨酸
20
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L-胱氨酸盐酸盐
65.15
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65.15
65.15
L-谷氨酸
20
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L-谷氨酰胺
300
300
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甘氨酸
10
10
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10
L-组氨酸
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L-羟脯氨酸
20
20
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L-异亮氨酸
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L-亮氨酸
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L-赖氨酸盐酸盐
—
72.5
L-蛋氨酸
15
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15
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15
L-苯丙氨酸
32
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L-脯氨酸
—
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11.5
11.5
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L-丝氨酸
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10.5
10.5
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—
—
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L-苏氨酸
48
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48
48
48
48
48
48
L-色氨酸
10
10
10
10
10
10
10
10
10
L-酪氨酸
36
36
36
36
42
渗透压（加碳酸氢钠）
276±5％
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
BME细胞培养基
成分（mg/L）
MD100
MD101
MD102
MD103
无水氯化钙
200
140
200
200
氯化钾
400
400
400
400
无水硫酸镁
97.67
97.67
—
97.67
磷酸二氢钾
—
60
—
—
氯化钠
6800
8000
6800
0.01
L-组氨酸盐酸盐
21.88
21.88
氯化胆碱
0.50
0.50
L-羟脯氨酸
10.00
10.00
叶酸
0.01
0.01
L-异亮氨酸
40.00
40.00
i-肌醇
0.05
0.05
L-亮氨酸
60.00
60.00
维生素K3
0.01
0.01
L-赖氨酸盐酸盐
70.00
70.00
烟酸
0.025
0.025
L-蛋氨酸
维生素H
0.0035
0.0035
L-胱氨酸盐酸盐
31.29
31.29
D-泛酸钙
2.24
2.24
L-谷氨酰胺
365
365
氯化胆碱
8.98
8.98
甘氨酸
18.75
18.75
叶酸
2.65
2.65
L-组氨酸盐酸盐
31.48
31.48
i-肌醇
12.6
12.6
L-异亮氨酸
54.47
54.47
烟酰胺
2.02
2.02
48.84
48.84
亚油酸
0.042
0.042
氯化钠
6999.5
6999.5
硫辛酸
0.105
0.105
无水磷酸二氢钠
54.35
54.35
酚红
8.1
8.1
磷酸氢二钠
71.02
71.02
1,4-丁二胺二盐酸盐
0.081
0.081
七水硫酸锌
0.432
0.432
丙酮酸钠
55
55
L-精氨酸盐酸盐
147.5
147.5
6800
无水氯化镁
—
—
93.68
—
磷酸氢二钠
—
47.88
—
—
无水磷酸二氢钠
121.74
—
121.74
121.74
L-精氨酸盐酸盐
21
21
21
21
L-胱氨酸盐酸盐
15.65
15.65
15.65
15.65
L-谷氨酰胺
292
292
292
—
L-组氨酸盐酸盐
15
15
15
15
L-异亮氨酸
26
26
26
26
L-亮氨酸
MEM细胞培养基
成分（mg/L）
MD600
MD601
MD602
MD603
MD604
MD605
MD606
MD607
MD608
氯化钙
200
140
—
200
140
200
—
200
200
氯化钾
400
400
400
400
400
400
400
400
400
无水硫酸镁
97.67
97.67
97.67
97.67
97.67
97.67
1.8
—
—
氯化胆碱
1
1
1
1
1
—
—
1
1
叶酸
1
1
1
1
1
1
1
1
1
i-肌醇
2
2
2
2
2