春砂仁多糖的提取及组分分析

1. 00 0. 68 0. 97
半乳糖
24. 35
0. 86
( GC 法测单糖含量, 相对含量用面积归一化法 )
2. 2 讨 论 2. 2. 1 春砂仁多糖的种类
由表 1可见: 春砂仁多糖的种类数为 2, 较高 分子量的多糖的含 量较大, 而较低分子量的多 糖 的含量较小. 2. 2. 2 春砂仁多糖中单糖组分的分析
( 2) 砂仁多糖的水解 取以上样品 0. 5 g, 加 75% 硫酸 ( 冷 ) 3. 0 mL, 浸泡 2 h, 加入 35 mL 水稀释, 加热回流 6 h, 冷却, 用饱和 B a( OH ) 2中和, 离心或过滤除去 BaSO4, 上清液水浴浓缩, 定容至 5 mL. ( 3) 单糖衍生物的制备 取上述水解液 2 mL 彻底蒸干水分, 称重; 另 分别取半乳糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖及 核糖, 称样各 5 m g. 上述各样及标样中加入 42 mg盐酸羟胺, 4 mL吡 啶, 90 以 上 水 浴 1 h, 取 出 稍 冷, 加 4 mL醋酸酐, 90 以 上水 浴 1 h, 冷却. 加 10 mL 水水解过量的醋酐, 氯仿提取乙酰化产物 3 次 ( 5 5 3 mL), 合并提取液, 再用水洗氯仿提 取液 2次 ( 5 5 mL ) , 用无水 N a2 SO 4 干燥, 定容 至 5 m L. 该步样品用于 测定春砂 仁多糖中 的单 糖组分. 1. 2. 3 分析条件 ( 1) 凝胶过滤色谱测多糖分子量 凝胶色谱柱: TSK GEL G3000SWXL, 7. 8 mm ( 内 径 ) 300 mm ( 柱 长 ); 色 谱 条 件: 流 动 相: 0. 05 m o l L- 1 N aH2 PO4 N a2H PO4 缓 冲 体 系; ( pH = 6 7, 加 0. 05% N aN3 ) ; 流 速: 0. 5 mL m in- 1; 检测器: 示差折光检测 ( R ID ) . ( 2) 气相色谱测单糖组分 GC操 作 条 件: column: SE 30 [ 15 m ( 长 ) 0 2 mm (内径 ) 0. 33 m ( 膜厚 ) ]; 柱温: 起始 120 , 以 8 m in- 1升至 240 .
表 2 春砂仁多糖中的单糖组分
T ab le 2 T he m ono saccharide com ponents in the Am omum vil
Baidu Nhomakorabea
losum L our. po lysacchar ides
组分名称
相 对含量 /%
单糖相对比例
阿拉伯糖 甘露糖 葡萄糖
28. 25 19. 25 27. 45
功能. 从历 史记载看, 砂仁以广东阳 春市产者为 佳, 故得名春砂仁.
阳春砂仁由于质量佳, 产量较大, 是砂仁中的 主流品种 [ 1] , 在云南、广西、福建、四川等地也有引 种. 由于该物种特殊的地域性, 国外少有关于春砂 仁的研究与报道; 对 春砂仁中所含挥发性主要有 效成份的生物活性在国内外则多有报道 [ 2, 3] ; 而对 春砂仁中多糖的研究尚未见报道.
在以往的报道中, 对春砂仁 的药理性质与其 中芳香成分的对应关系有较多的研 究 [ 4] ; 而药理 性质是否与多糖有关, 尚不知晓. 许多资料 [ 5, 6] 报 道: 中草药的药理性 质往往与其中的多糖及其结 构有关. 本研究的目的就是在中草药多糖提取研
究 [ 7, 8] 的基础上, 采用超声波法提取分离春砂仁多 糖, 并对其结构进行分析测定, 为进一步研究春砂 仁多糖的药理性质奠定基础.
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2 结果和讨论
2. 1 实验结果 2. 1. 1 凝胶过滤色谱测定春砂仁多糖的分子量
测定结果见表 1.
表 1 春砂仁中多糖含量
T ab le 1 The content o f the Amomum villosum Lour. po lysac
char ides
峰保留时间 /m in 相 对含量 /% 数均分子量 /M n
1 实验部分
1. 1 主要仪器、材料和试剂 Ag ilent 1100 Series凝胶过滤色谱仪测定多糖
分子 量, Ag ilent 6890 GC 气相 色 谱 仪测 定 单 糖 组分.
广东省阳春市春湾产春砂仁. 所用化学试剂 均为化学纯, 未进一步纯化. 1. 2 实验方法 1. 2. 1 春砂仁多糖及单糖组分分离及分析步骤
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以 6个单糖标样作为对 照: 半乳糖、木糖、甘 露糖、阿拉伯糖、葡萄糖 及核糖, 结果表明春砂 仁 多糖中单糖组分有 4个, 其中阿拉伯糖含量最高, 以此为基准, 算出 4种单糖的比例 ( 阿拉伯糖 甘 露糖 葡萄糖 半乳糖 = 1. 00 0. 68 0. 97 0 86).
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广州大学学报 ( 自然科学版 )
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春砂 仁 多 糖 及 单 糖 组 分 分 离 及 分 析 步 骤 如下:
收稿日期: 2006- 03 - 21; 修回日期: 2006- 06- 03 基金项目: 国家星火计划项目 ( 2005EA 780029) 作者简介: 樊亚鸣 ( 1957 - ) , 女, 副教授, 主要从事天然有机产物化学研究.
第 5卷
3结 论
在所选择的标样范围内, 春 砂仁所含多糖主
要为两个; 在春砂仁的多糖分子中, 戊醛糖阿拉伯 糖的含量最高, 这是春砂仁多糖区别于其它多 糖 的一个特点.
参考文献:
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樊亚鸣1 , 黄晓兰2 , 陈永亨1 , 廖子英1 , 林海清 1
( 1. 广州大学 化学与化 工学院, 广东 广州 510006; 2. 中国广州分析测试中心, 广东 广州 510070)
摘 要: 报道春砂仁多糖的分离纯化及结构分析的研究. 以凝胶过滤色谱法测定春砂仁多糖的数量及分子 量,
结果显示: 春砂仁主要含两种多糖, 其数均分子量分别为 56 421及 1 743; 多糖经酸解成为单糖并衍生为乙酰化
的糖肟, 对照标样采用气 相色谱法测定其单 糖组分为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半 乳糖, 4种单糖 含量的相对
比例: 1. 00 0. 68 0. 97 0. 86.
关键词: 春砂仁多糖; 多糖分子量 ; 多糖数量; 单糖组分
中图分类号: R 281. 5
文献标识码: A
春砂仁 ( Am om um villosum L our. ) 是姜科豆蔻 属的果实, 作为著名的 四大南药 之一, 在中国传 统医学中具有行气、止痛、健脾、消胀、安胎止呕的
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12. 21
13. 979 6
56 421
21. 38
9. 313 5
1 743
( GFC法测分 子量, 相对含量用面积归一化法 )
2. 1. 2 气相色谱法测定春砂仁多糖中的单糖组分 经水解的春砂仁单糖与标准单糖分别与盐酸
羟胺及吡啶作用, 单糖的醛羰基首先生成糖肟; 糖 羟基再与醋酸酐作 用生成乙酰化产物, 再用氯 仿 提取出来, 经干燥形成较易挥发的单糖衍生物, 以 便在气相色谱中测定. 经与标准单糖比较, 得出以 下单糖组分 (见表 2).
第 4期
樊亚鸣等: 春砂仁多糖的提取及组分分析
31
1. 2. 2 分离纯化及预处理 ( 1) 春砂仁多糖的分离提纯 砂仁 样 品 粉 碎, 取 10. 0 g, 加 50 mL 水,
45 浸 泡 2 h, 超 声 波 振 荡 1 h, 残 渣 用 2 10 m L水超声 30 m in, 合 并 3 次水 提液, 定容 至
第 5卷 第 4期 2006年 8月
广州大学学报 (自然科学版 )
Journa l of G uang zhou U n ive rsity( N atura l Sc ience Edition)
文章编号: 1671 4229( 2006) 04 0030 03
春砂仁多糖的提取及组分分析
V o.l 5 N o. 4 Aug. 2006
50 m L. 沉淀多糖, 加 200 mL 无水乙醇 沉淀多糖, 取
沉淀, 沉淀用 80% 乙醇沉淀 2次. 沉淀于 70 烘 干. 于干燥器中保存. 将粗多糖复溶于适量的蒸 馏水中, 采用 Sevag 法除 蛋白 ( 重 复 3 次 ), 加入 95% 乙醇使 其终浓度为 80% , 静置 过夜, 收集沉 淀, 无水乙醇洗涤、干燥. 该步样品用于测定春砂 仁多糖.