灭活、减毒疫苗工艺流程

病毒性疫苗

（一）疫苗原液生产区：

1、细胞操作间（C级洁净度，无毒区）。进行细胞复苏，细胞CO2培养箱培养，为细胞大量培养做准备；检测细胞恒温室、发酵罐中细胞生长状态。

2、细胞培养恒温室（C级洁净度，无毒区）。使用转瓶机进行细胞培养，为病毒接种准备细胞。

3、细胞罐培养间（C级洁净度，无毒区）。利用20L发酵罐进行细胞大量培养，为病毒接种准备细胞。

4、毒种操作间（C级洁净度，有毒区）。复苏含有毒种的细胞，为毒种的扩增做准备；检测病毒感染后细胞的生长状态。

5、种毒间（C级洁净度，有毒区）。将病毒按照适宜比例接种于细胞恒温室、细胞发酵罐培养得到的细胞中。

6、病毒培养恒温室（C级洁净度，有毒区）。将种毒后的细胞置于温室中转瓶培养。

7、病毒罐培养室（C级洁净度，有毒区）。种毒后的细胞在50L发酵罐中大量培养，培养至适宜程度，将发酵物泵入离心间。

8、离心间（C级洁净度，有毒区）。使用大容量冷冻离心机，将病毒发酵罐内发酵物进行离心，分离上清液与细胞沉淀。

9、病毒粗纯间（C级洁净度，有毒区）。对于分泌于细胞培养液中的病毒，使用超滤膜包过滤澄清细胞上清液，得到粗纯后的病毒液；对于胞内病毒，利用细胞冻融、超声破碎技术破碎细胞，释放病毒，并使用有机溶剂抽提法抽提得到病毒。

10、病毒精纯间（B级洁净度，有毒区）。对粗纯后的病毒液进行超滤浓缩等操作，得到减毒活疫苗原液。

9、灭活前纯化间（C级洁净度，有毒区）。对灭活疫苗进行纯化（粗纯、精纯）

10、灭活间（C级洁净度，有毒区）。灭活病毒

11、灭活后纯化间（B级洁净度，无毒区）。灭活后疫苗纯化间。

（二）减毒疫苗西林瓶分装单元

1、西林瓶灌装间

（三）减毒活疫苗中试生产辅助区

1、称量间（C级洁净度，无毒区）。存放减毒活疫苗原液中试生产所需的试剂；利用不同精度的电子天平称量所需的试剂，用于后续生产或溶液配制。

2、配液间（C级洁净度，无毒区）。将称量的试剂配制成溶液，或对原液进行稀释等，用于后续减毒活疫苗的中试生产。

3、清洗间（D级洁净度，无毒区）。使用洗瓶机清洗器皿等，将清洗后的器皿置于烘箱内烘干。

4、洗衣间（D级洁净度，无毒区）。使用不同的洗衣机分别洗涤有毒区内衣物、无毒区内衣物，并在百级层流罩内进行洗涤后衣物的包装。

4、灭菌间（D级洁净度，无毒区）。利用干热或者湿热灭菌法对清洗后包装的器皿、衣物等进行灭菌。

5、灭后间（C级洁净度，无毒区）。存放灭菌后的器皿、衣物等。