临床基因扩增检验质量要求
临床基因扩增检验的质量保证
室间质评
参与室间质评活动，提高检验结果的互认性和可 比性。
质控数据管理
建立质控数据管理系统，对质控数据进行收集、 分析、反馈和改进。
04
质量保证的实施策略ຫໍສະໝຸດ 建立质量管理体系制定质量方针和目标
明确质量管理的方向和目标，为检验工作提供指导。
组织架构与职责分工
定期进行内部审核和外部认证
本机构定期进行内部审核，以确保质量管理体系 的有效运行。同时，积极参加外部认证，以获得 国际认可的质量保证体系。
其他机构的质量保证经验分享
强化人员培训和考核
其他机构强调在临床基因扩增检验中，应加强人员培训和考核，提高检验人员的专业水平 和操作技能。
建立多层次的质控体系
为确保检验结果的准确性，一些机构采取多层次的质控体系，包括室内质控和室间质评等 措施。
指导治疗
基因扩增检验的结果有助于医生制定 个性化的治疗方案，提高治疗效果。
质量保证的必要性
确保结果准确性
质量保证措施能够确保基因扩增 检验结果的准确性和可靠性，避
免误诊和漏诊。
提高患者安全
质量保证有助于降低因检验误差导 致的不必要的治疗或误诊的风险， 保障患者安全。
提升医疗机构声誉
实施质量保证措施能够提高医疗机 构在基因扩增检验方面的专业性和 可靠性，提升其声誉和患者信任度。
02
临床基因扩增检验的过程
样本采集与处理
样本采集
采集的样本应具有代表性，能够 真实反映患者情况。
样本处理
采集后的样本应尽快进行处理， 避免污染和降解。
核酸提取与纯化
核酸提取
从样本中提取出核酸是基因扩增检验 的前提。
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则一、实验室安全1.实验室必须符合相关的安全规范和操作规程，例如防火、防爆、防尘和环境污染控制。
2.所有实验室人员必须进行安全培训，并熟悉实验室的安全操作规程。
3.实验室设备和试剂必须定期检查和维护，确保其正常运行且不存在安全隐患。
二、样本接收与标本处理1.所有样本必须按照相关规定的方法和时间接收，并尽快进行处理。
2.接收样本时必须进行必要的标识和记录，并确保样本的完整性和唯一性。
3.样本处理必须按照相关的规范进行，包括离心、分装、保存和运输。
三、实验室质量控制1.实验室必须建立质量控制体系，确保实验的准确性和可靠性。
2.每次实验必须进行内部质控和外部质控样品的检测，并记录结果。
3.实验室必须参加相关质控活动，比如参加外部质量评估和互认活动。
4.实验室必须建立相关的质控指标和标准，确保实验的准确性和可靠性。
5.实验室必须建立完整的质量文件和记录，方便质量评审和内外审计。
四、实验操作规范1.实验室必须建立标准的实验操作规范，确保实验的准确性和可重复性。
2.每个实验人员必须按照规定的实验操作流程进行实验，并记录实验结果。
3.实验室必须建立实验数据的记录和存档机制，确保数据的完整性和可追溯性。
4.实验室必须定期对实验操作进行评估和培训，提高实验人员的技术水平和操作规程的遵守性。
五、实验室设备和试剂管理1.实验室设备必须定期检查和维护，确保其正常运行且符合质量要求。
2.实验室试剂必须按照相关规范和标准进行采购和存储。
3.实验室必须定期对试剂进行检查和过期处理，确保试剂的有效性和安全性。
4.实验室必须定期对试剂进行库存管理，确保试剂的供应和使用的连续性。
六、实验室环境和废物处理1.实验室必须保持干净、整洁和无杂乱物品的工作环境。
2.实验室必须建立废物处理制度，确保废物的分类、储存和处理符合相关规范和要求。
3.实验室必须建立应急预案，以应对可能发生的突发事件和意外事故。
七、数据管理和隐私保护1.实验室必须建立完善的数据管理系统，确保实验数据的安全和可靠性。
3医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法及医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则-精选.pdf
医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法发布部门: 卫生部发布文号: 卫办医政发[2010]194号第一章总则第一条为规范医疗机构临床基因扩增检验实验室管理，保障临床基因扩增检验质量和实验室生物安全，保证临床诊断和治疗科学性、合理性，根据《医疗机构管理条例》、《医疗机构临床实验室管理办法》和《医疗技术临床应用管理办法》，制定本办法。
第二条临床基因扩增检验实验室是指通过扩增检测特定的dna或rna，进行疾病诊断、治疗监测和预后判定等的实验室，医疗机构应当集中设置，统一管理。
第三条本办法适用于开展临床基因扩增检验技术的医疗机构。
第四条卫生部负责全国医疗机构临床基因扩增检验实验室的监督管理工作。
各省级卫生行政部门负责所辖行政区域内医疗机构临床基因扩增检验实验室的监督管理工作。
第五条以科研为目的的基因扩增检验项目不得向临床出具检验报告，不得向患者收取任何费用。
第二章实验室审核和设置第六条医疗机构向省级卫生行政部门提出临床基因扩增检验实验室设置申请，并提交以下材料：《责验收行政部门执业许可证》（一）《医疗机构执业许可证》复印件；（二）医疗机构基本情况，拟设置的临床基因扩增检验实验室平面图以及拟开展的检验项目、实验设备、设施条件和有关技术人员资料；（三）对临床基因扩增检验的需求以及临床基因扩增检验实验室运行的预测分析。
第七条省级临床检验中心或省级卫生行政部门指定的其他机构（以下简称省级卫生行政部门指定机构）负责组织医疗机构临床基因扩增检验实验室的技术审核工作。
第八条省级临床检验中心或省级卫生行政部门指定机构应当制订医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核办法，组建各相关专业专家库，按照《医疗机构临床基因扩增检验工作导则》对医疗机构进行技术审核。
技术审核办法报请省级卫生行政部门同意后实施。
第九条医疗机构通过省级临床检验中心或省级卫生行政部门指定机构组织的技术审核的，凭技术审核报告至省级卫生行政部门进行相应诊疗科目项下的检验项目登记备案。
临床基因扩增检验实验室验收和复审要求
临床实验室生物安全管理研讨会临床基因扩增检验实验室验收和复审要求师志云赵志军魏军宁夏医科大学附属医院医学实验中心750004宁夏医科大学附属医院医学实验中心PCR检测室于2006年7月16日通过卫生部临床检验中心临床摹因扩增检验实验室的技术验收，并获得技术验收合格证书(No．00527)。
目前，本中心PCR检测室搬迁至新的实验室，按照《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》和《临床基因扩增实验室工作规范》文件，需要进行复审验收及换证。
现将临床基因扩增检验实验室技术验收和复审要求做一简单介绍。
1临床PCR技术准入管理背景临床基因扩增检验实验室主要应用PCR(聚合酶链反应)技术于疾病的诊断与治疗监测。
但在上世纪九十年代，我国由于部分医疗机构受利益的驱动，在缺乏技术、设备以及规范化管理的情况下，PCR技术临床应用泛滥，出现大量假阳性和假阴性结果，造成枪验结果和临床意义应用十分混乱，严重扰乱正常医疗秩序。
PCR技术临床应用所出现的一系列问题引起卫生部管理层高度重视，卫生部医政司于1998年F发了卫医发[199819号文件宣布P CR技术暂停应用于临床诊断。
经过近四年反复论证，卫生部2002年1月14日发布“临床基因扩增检验实验室管理暂行办法”(简称暂行办法)，同年2月20日卫生部临床检验中心发布“临床基因扩增实验室工作规范”。
两个文件宣布了PCR技术临床应用解冻，明确规定临床基因扩增检验实验室开展PCR技术必需具备的基本条件：①规范的PCR实验室②编写适合本实验室的质量手册③经PCR专业知识培i)il的技术人员(PCR上岗证)④使用有生产批文的 PCR试剂。
具备条件的二级以上医院可向卫生部或省临床检验中心申请技术验收。
2技术验收要点2．1为什么要进行临床基因扩增检验实验室技术验收? 临床基因扩增实验室采用PCR技术用于临床基因诊断，由于PCR技术对所检测的核酸模板进行大量扩增，容易出现实验室污染导致临床检测标本假阳性结果；另外由于PCR技术要求高、影响因素多(特别是 RNA标本)，实验过程处理不当易导致核酸模板无扩增现象，导致临床标本假阴性结果。
临床基因扩增实验室验收要求和要点
临床基因扩增实验室验收要求和要点1.实验室设施验收要求：-实验室建筑面积符合要求，具备充足的操作空间，可以满足日常实验工作的需要。
-实验室具备独立的进出通道，避免与其他非相关实验室的交叉污染。
-实验室通风系统符合要求，保证室内空气流通。
-实验室具备紫外线杀菌灯和安全柜等必要的安全设备。
-实验室仪器设备正常工作，并且定期维护和校验，保证准确性和可靠性。
-实验室具备足够的电源和冷却设备，确保实验室设备的正常运行。
2.实验室安全管理要求：-实验室应具备安全管理制度和操作规程，明确实验人员的职责和权限。
-实验室应配备足够的紧急救援设备和药品，如急救箱、灭火器等，以应对突发情况。
-实验室应设有紧急暴露处置计划和应急预案，保障实验人员和环境的安全。
-实验室应有充足的安全标识和警示牌，提示实验人员注意安全事项。
-实验人员应定期参加相关安全培训和知识更新，增强安全意识。
3.实验室操作规范要求：-实验室应具备严格的实验操作规程和操作手册，确保每个步骤的准确性和可重复性。
-实验室应定期检查和校准关键仪器，如PCR仪、电泳仪等，确保其准确性和可靠性。
-实验室应妥善保存实验记录和数据，确保实验结果的可追溯性。
-实验室实验人员应定期参加技术培训和质控练习，提高操作技能和实验质量。
-实验室应建立适当的检测和质控体系，包括内部质控和参加外部质控活动，确保实验结果的准确性和可比性。
4.实验室废弃物处理要求：-实验室应具备妥善处理废弃物的设备和操作规程，包括化学品废弃物和生物废弃物等。
-废弃物应分类储存并定期清理，确保实验室环境的整洁和卫生。
-废弃物的处置应符合相关法规和规定，以减少对环境的污染和危害。
综上所述，临床基因扩增实验室验收要求和要点主要包括实验室设施验收、实验室安全管理、实验室操作规范和实验室废弃物处理等方面。
通过严格的验收，可以确保实验室的正常运行和实验结果的准确性，保障临床基因扩增实验的可靠性和可行性。
临床基因扩增检验实验室质量管理手册
临床基因扩增检验实验室质量管理手册
简介
本手册旨在规范临床基因扩增检验实验室的质量管理流程，以提高检验质量并确保患者安全。
质量管理流程
1. 检验前准备
- 确认患者信息的准确性和完整性
- 根据检验要求准备样本
- 校正和确认仪器的准确性和稳定性
2. 检验过程控制
- 按照标准操作程序进行检验
- 确认样品正确匹配
- 记录检验数据，并对异常数据进行分析和处理
3. 质量控制
- 确认质控方法的准确性和可行性
- 测试质对质控样本
- 分析质控结果，及时纠正异常结果
4. 检验结果的分析和审核
- 检查正常和特殊值
- 对异常结果进行处理和检讨
- 最终结论的审核和确认
5. 数据保存和传输
- 建立合适的数据保存和传输机制，确保数据的完整性和保密性
- 纳入质量管理体系中，保证数据安全和可及性
6. 质量管理体系监督与评价
- 借鉴ISO9000等标准体系，不断完善和更新质量管理手册
- 定期对质量管理体系进行内部审核和外部评估，及时发现和解决问题。
结束语
以上是临床基因扩增检验实验室的质量管理手册，请按照规范操作流程进行检验，加强质量管理意识，确保每一个检验结果科学可靠、安全可靠、可追溯、可重复，最终造福患者。
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则一、前言随着科技的不断发展，基因扩增检验技术在医学领域的应用越来越广泛。
为了确保基因扩增检验实验室的工作质量和准确性，提高检测结果的可靠性，我们制定了本《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》。
本文将从实验室的基本要求、实验操作流程、质量控制和安全管理等方面进行详细阐述，以期为我国医疗机构临床基因扩增检验实验室的工作提供参考。
二、实验室基本要求1.1 实验室布局实验室应设立专门的实验区域，包括试剂准备区、标本处理区、仪器操作区和废弃物处理区等。
各区域之间应保持一定的距离，以确保实验操作的安全性。
实验室应设置合理的通风设备，确保实验室内空气的流通。
1.2 仪器设备实验室应配备先进的基因扩增检验仪器设备，如PCR仪、实时荧光定量PCR仪等。
仪器设备应定期进行校准和维护，确保其性能稳定可靠。
实验室还应配备相应的试剂和耗材，以满足实验需求。
1.3 人员配备实验室应有专业的技术人员负责实验操作和数据分析工作。
技术人员应具备扎实的专业知识和丰富的实践经验，能够熟练操作各类仪器设备和处理实验数据。
实验室还应设有管理人员，负责实验室的日常管理和质量控制工作。
三、实验操作流程2.1 标本采集与处理患者需按照医生的要求进行标本采集，如血液、唾液、尿液等。
采集后的标本应及时送至实验室进行处理。
标本处理过程中应注意避免污染，确保标本的完整性和准确性。
2.2 试剂准备根据实验需求，选择合适的试剂和耗材进行准备。
试剂准备过程中应严格按照说明书进行操作，确保试剂的质量和纯度。
应对试剂的使用量和保存条件进行记录，以便后续分析。
2.3 实验操作根据实验方案，使用相应的仪器设备进行实验操作。
实验操作过程中应严格遵守操作规程，确保实验的准确性和可靠性。
应对实验数据进行实时监测和记录，以便后续分析。
2.4 结果分析与报告实验完成后，应对实验数据进行分析，得出相应的检测结果。
分析过程中应遵循相关标准和规范，确保结果的准确性。
临床基因扩增检验实验室工作规范
为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，特制定本规范。
临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10 号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》 .为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室.临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备.各区域都必须有明确的标记,以避免设备物品如加样器或者试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。
进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区，避免发生交叉污染。
在不同的工作区域应使用不同颜色或者有明显区别标志的工作服,以便于鉴别。
此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。
清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进行。
不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备. 贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。
在打开含有反应混合液的离心管或者试管前,应将其快速离心数秒。
试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。
当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，避免由于时常打开反应管吸液而造成污染。
含反应混合液的离心管或者试管在冰冻前都应快速离心数秒。
大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。
为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。
贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。
主反应混合液的组成成份特别是聚合酶的合用性和稳定性通过预试验来检查,评价结果必须有书面报告。
医疗机构临床基因扩增管理办法卫生部
医疗机构临床基因扩增管理办法卫生部一、引言医疗行业发展迅速，临床基因扩增技术作为一种重要的诊断和治疗手段，在疾病防控、个体化医疗等方面发挥着重要的作用。
为了确保临床基因扩增技术的准确性、安全性和可靠性，卫生部制定了《医疗机构临床基因扩增管理办法》。
二、背景临床基因扩增技术是指通过特定引物放大特定DNA片段的技术，可用于基因检测、遗传病诊断、肿瘤分型等。
随着技术的进步和应用的推广，临床基因扩增技术在临床实践中的重要性逐渐凸显。
三、管理要求1.设施与设备医疗机构应具备适合进行临床基因扩增的实验室条件，包括洁净、无尘、无菌。
实验室内应配备必要的基因扩增仪器和设备，并定期进行检查和维护。
2.人员资质和培训医疗机构应配备符合要求的专业技术人员，熟悉临床基因扩增技术的操作流程和操作规范。
相关人员应定期进行培训，掌握最新的技术和管理要求。
3.质量控制医疗机构应建立严格的质量控制体系，确保临床基因扩增技术的准确性和可靠性。
包括但不限于对试剂的选择和采购、实验操作的标准化、结果分析和解读的质量控制等。
4.数据管理医疗机构应建立健全的数据管理系统，确保临床基因扩增的结果准确、可追溯。
数据存储应符合法律法规的要求，且能够保护患者的隐私和个人信息安全。
5.质量评估医疗机构应接受监管部门的质量评估和中心质量控制的监督。
同时，医疗机构应及时反馈和改正存在的质量问题，确保临床基因扩增技术的质量和安全。
四、监督与执法1.监督部门卫生部及其派出的相关机构将对医疗机构的临床基因扩增技术实施监督，并根据需要进行抽查和评估。
2.违规处理对于不符合管理要求、操作不规范或存在严重质量问题的医疗机构，将依据相关法律法规进行处理，包括但不限于责令整改、暂停临床基因扩增技术的使用、吊销医疗机构执照等。
五、总结《医疗机构临床基因扩增管理办法》的制定和实施旨在加强对临床基因扩增技术的管理和监督，确保技术在临床实践中的准确性、安全性和可靠性。
通过规范临床基因扩增技术的应用，可以更好地服务于患者，推动医疗技术的进步和创新。
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则要了解《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》的要求，我们得从基础说起，聊聊什么是基因扩增检验，什么是实验室工作导则。
这是一项涉及人类基因的“黑科技”，听起来挺神秘的，但其实没那么复杂。
简单来说，基因扩增就是把少量的基因样本“放大”，以便于我们能看得更清楚。
想象一下，你用放大镜看蚂蚁，能看到它的每一根腿、每一根触角，这就是基因扩增在做的事。
首先，我们来谈谈这个“工作导则”究竟是什么。
它就像是一本实验室的操作手册，告诉我们怎么做实验、怎么保证结果的准确性、怎么保证实验室的安全。
就像你去餐馆吃饭，菜单上会告诉你每道菜怎么做，厨房里的厨师们也有他们的规矩，以确保菜品美味又安全。
实验室也是一样，操作规程、质量控制、设备维护等等，都是要按部就班的。
1. 实验室环境1.1 实验室的清洁实验室的环境就像我们的厨房，必须干净整洁。
搞得一团糟不仅会影响实验结果，还可能引发安全问题。
你要保证实验台面没有灰尘，没有不小心掉落的实验器具，甚至连空气都是清新的。
这就像每天回家前，妈妈总会嘱咐我们“把房间整理好，不然她不让你出门”，对吧？实验室也是如此，干净整洁是基础。
1.2 安全措施安全是重中之重。
如果你在实验室里玩忽职守，那就像在家里做饭时把火开得太大一样，危险系数直线飙升。
要穿上专用的实验服，戴上手套、眼镜等保护装备，别让自己成了实验中的意外品。
实验室里还有各种化学品和仪器，一不小心就会出大问题，所以一定要小心谨慎。
2. 实验操作2.1 样本处理样本处理就像是我们在做烘焙前准备原料。
你得确保样本的来源、存储、处理都准确无误。
每个小细节都不能马虎，比如在拌面粉之前，得先过筛、混合，不然面糊可能会结块。
处理样本也是如此，精确和细致是关键。
2.2 设备使用实验室的设备就像是我们的厨房电器，都是得心应手的好帮手。
使用这些设备时，你得按照说明书来，别搞得一头雾水。
比如PCR仪，像是一台超级高效的放大机，你得设定好参数，确保它正常工作。
医疗机构临床基因扩增检验工作导则
医疗机构临床基因扩增检验工作导则一、概述临床基因扩增检验是一种常见的分子生物学技术，用于检测个体的基因型和基因表达水平，为临床诊断和治疗提供重要依据。
医疗机构开展临床基因扩增检验工作，需要建立科学规范的操作流程和质量控制体系，以确保结果的准确性和可靠性。
二、工作流程1.采样：根据具体疾病特点和检测要求，选择合适的采样方法和标本类型，并确保采样过程符合标准操作规程，避免污染和损伤。
2.样本处理：对于血液等液体样本，需进行细胞分离、DNA提取等步骤。
对于组织、细胞等固体样本，需进行组织切片、DNA提取等步骤。
在样本处理过程中，严格控制污染风险，避免外源性DNA污染。
3.扩增反应：根据实验要求和检测目的，选择合适的扩增方法：PCR、RT-PCR等。
在反应体系中加入模板DNA、引物、酶和缓冲液等物质，进行适当的温度循环，使目标序列得到扩增。
4.产品检测：对扩增产物进行凝胶电泳、定量PCR、测序等技术，判断扩增反应的成功与否，避免假阳性和假阴性结果的发生。
5.结果分析：依据扩增产物的检测结果，结合病例信息和数据库查询，进行基因型分析、突变检测、表达水平分析等，提供临床诊断和治疗建议。
三、质量控制1.标本质量控制：确保采样过程中样本的完整性和稳定性，避免血液凝块、组织坏死等问题。
采用标准操作规程进行样本处理，保证样本的一致性和可靠性。
2.试剂质量控制：使用符合质量要求的试剂，检验其有效期和保存条件，并建立试剂库存管理制度，确保试剂的稳定性和可靠性。
3.实验操作质量控制：建立标准操作规程，对实验人员进行培训，确保操作的规范性和一致性。
进行实验过程中的质量控制，包括负对照的引物、样本的扩增效果等。
4.质量评估体系：建立质量控制指标，对样本质量、试剂质量、实验操作等进行定期评估，及时发现和解决问题，确保检测结果的可靠性。
四、质量保证1.设备维护：定期对实验设备进行维护和检查，保证设备的正常运行和准确性，及时更换损坏的设备和附件。
临床基因扩增检验操作规范
通过学术会议、科普宣传等方式，向社会公众宣传基因扩增检验的重要性和应用价值，提 高公众对基因扩增检验的认知度和接受度。
政策支持与资金投入
政府和相关部门应加大对基因扩增检验领域的政策支持和资金投入，鼓励科研机构和企业 开展相关研究和产品开发，推动基因扩增检验的普及和应用。
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标准化操作流程
制定标准化的操作流程，确保不同实验室之间的检测结果具有可比性和
可重复性，提高检测结果的准确性和可靠性。
03
验证与比对实验
定期进行验证与比对实验，确保实验室内部的检测结果准确可靠，同时
与其他实验室进行比对，提高实验室之间的协作和交流。
加强基因扩增检验的普及与推广
培训和教育
加强临床医生和实验室技术人员对基因扩增检验的培训和教育，提高他们对基因扩增检验 的认识和应用能力。
人工智能应用
人工智能技术在临床基因扩增检验中具有广阔的应用前景， 能够提高检测的自动化和智能化水平，减少人为误差和操 作繁琐性。
提高基因扩增检验的准确性与可靠性
01
严格质量控制
建立完善的质量控制体系，确保从样本采集、处理、扩增到检测的各个
环节都符合规范要求，减少误差和假阳性、假阴性结果的出现。
02
高特异性和操作简便等优点。
RT-PCR技术
反转录聚合酶链式反应 （Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction） 是将RNA逆转录为cDNA再进行 PCR扩增的技术，用于检测病毒
RNA。
qPCR技术
实时荧光定量聚合酶链式反应 （Quantitative Polymerase Chain Reaction）通过荧光染料 或探针标记，实时监测PCR产物 量，用于定量分析基因表达水平。
临床基因扩增检验实验室管理暂行办法
临床基因扩增检验实验室管理暂行办法第一章总则第一条为规范临床基因扩增检验实验室管理，保证临床基因扩增检验质量，使临床诊断和治疗更为科学、合理，特制定本办法。
第二条临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的，以扩增检测DNA或RNA为方法的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的放大系统（TAS）自主序列复制系统（3SR）和链替代扩增（SDA）等。
第三条本办法适用于开展临床基因扩增检验的实验室。
临床基因扩增检验实验室设立在二级以上医院。
第四条临床基因扩增检验实验室必须使用经国家药品监督管理局批准的临床检验试剂开展临床基因扩增检验项目。
第五条卫生部临床检验中心（以下简称卫生部临检中心）和省、自治区、直辖市临床检验中心（以下简称省临检中心）负责对所辖行政区域内临床基因扩增检验实验室的质量监督管理工作。
第二章实验室设置和验收第六条拟设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》（见附件）筹建实验室；筹建完成后，由法定代表人向卫生部临检中心提出技术验收申请。
申请时需提交以下材料：（一）《医疗机构执业许可证》复印件；（二）可行性研究报告；1、拟设临床基因扩增检验实验室机构的所在地医疗卫生资源状况、本机构的基本情况、对临床基因扩增检验的需求以及临床基因扩增实验室运行的预测分析；2、拟设临床基因扩增检验实验室的设置平面图；3、拟设临床基因扩增检验实验室将开展的检验项目、实验设备条件和有关技术人员资料第七条卫生部临检中心和省临检中心共同组织相关专业的专家组（以下简称专家组），按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》对提出申请的临床基因扩增检验实验室进行技术验收。
验收完成后，在20日内将验收报告寄送至申请机构。
第八条经专家组技术验收合格的医疗机构将本办法第六条规定的材料及专家组验收报告送至省级行政部备案。
在将符合规定的全部材料送达省级卫生行政部门后15日内未收到省级卫生行政部门不同意的意见，方可开展专家组技术验收合格的临床基因扩增检验项目。
临床基因扩增实验室验收要求和要点
2.5 实验室应有关化学试剂管理、废 弃血清处理、生物防护等的措施
通风问题较多：排 风压力设置不合理 表面上做到物理隔 离，实际暗藏缝隙
湿度容易忽略
实验室清洁SOP要点
目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备在使用后，处于洁净和无感染性 状态，以防止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用寿命；防止因实验 室台面、地面和仪器设备的生物传染危险性造成实验室人员感染，以及防 止实验室交叉污染而出现假阳性结果等。
性能验证：按检测系统
（包括试剂）说明书进
行各指标的复现 38
5
检测方法
5.1
实验室应制定以下标准操作程
序:
有关仪器设备操作、维护和
校准程序；
有关扩增检测的工作程序。
所有上述标准操作程序都应现 行有效并便于工作人员使用。
5.2
实验室应有仪器、试剂、消耗
品的选购、验收、贮存和质检
程序;
*5.3 对计算和数据换算应进行适当 的校核。
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
16
本图来自李金明教授
标本制备区
空气流向 +
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产物
分析区
空气流向++
门
门
17
本图来自李金明教授
扩增和产 物分析区
空气流向
其他实验室
试剂准备区
空气流向
其他实验室
其他实验室
走廊
走廊
其他实验室
空气流向
标本制备区
其他实验室
其他实验室
10
PCR质量控制2012.3
耗材、试剂
耗材 带滤芯吸头、离心管爆管和抑制物质检 试剂盒的质检 包括外观质检和性能质检 选择或更换试剂品牌：试剂性能评估 更换试剂批号：评价核酸提取效率和扩增效率
更换试剂批号质检
设置空白对照、阴性对照、低值阳性对照 试剂不合格 1)低值阳性对照和标准品均未检出，或低值阳性对照未检出而标 准品检出率大幅下降，表示试剂失效或检测灵敏度大幅下降。 2)低值阳性对照未检出，标准品检测正常，提示样品提取液存在 问题。重复新旧提取液阳性对照实验，确定提取液失效问题。 3) 阴性对照有扩增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可 能。 4)低值阳性对照检出，标准品未检出或扩增曲线明显系统性CT值 偏大5个循环以上，提示阳性标准品存在问题。
使用玻璃器皿，必须为密闭的、必须经高压灭菌， 以使可能存在的RNase永久性失活。
标本验收、拒收
血液标本：溶血、严重脂血等应拒收 泌尿生殖道分泌物：镜下观察到上皮细胞存在。 痰液：镜下观察上皮细胞很少，一般<10个，白细胞 一般>25个。
标本运送
实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床标本的运送条件 （温度、时间）作出相应规定。 靶核酸为DNA的标本，如在无菌条件下，则可以在室温下运送， 建议采集后8h之内送至实验室； 靶核酸为RNA的标本，如在无菌条件下，可在室温下运送，如为 较长时间，则应在加冰条件下运送，建议采集后4h之内送至实验 室； 所有标本采集后送至实验室之前，所有临床标本在采集后送至 实验室前，均应放2－8℃临时保存。 淋病奈瑟菌有自溶的特性，标本采集后应立即送检。
-2S
-3S
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
4） R4S 在同一批中两个控制结果差超出4S范围， 其中有一个超出了+2S限值，另一个超出了2S 限值。或其中一个超出了＋1.5S，另一个超出了 －2.5S限值属随机误差过大，为失控。
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检验试剂及耗材的采购、验收、管理、领用及使用
样品的采集、运送、接收、处理及保存 检验方法的选择、确认或验证
检验项目及仪器设备标准操作程序的建立和管理
检验结果质量保证
检验报告管理的规定：结果的发放方式、报告的格式和 内容、保护患者隐私的规定 记录的管理：记录的修改。保存及期限 对差错事故及不符合工作的纠正及预防措施
程，系统误差应<7.5%）
应保存主要设备的档案，档案内容应包括：设备标识、型 号、序号或其它唯一性识别、到货日期和投入运行日期、 目前放置地点、接收时的状态、仪器使用说明书或其存放 处、证实设备可以使用的设备验证报告、校准和/或检定 报告、维护、损坏、故障或维修的记录
应制定各类仪器维护保养，校准/检定计划，并有执行记 录。
对服务对象投诉处理
人员要求
实验室至少应有2名取得PCR上岗证，并为本单位在职 技术人员 实验室负责人应具有中级或以上专业技术任职资格 开展遗传性疾病基因芯片诊断技术或基于组织等分子 病理检测技术并出具诊断报告的实验室，还应具备至 少2名取得《医师执业证书》、主治医师或以上专业技 术、从事本专业的本单位在职医师
分析中质量控制
对新项目的性能进行方法学验证，并有相应的实验记录。 仪器、试剂、方法更新时应进行方法学验证，并有记录。 定量检测项目方法学验证的内容至少应包括：精密度、 正确度、线性范围（可报告范围）、检出限；
定性检测项目方法学验证的内容至少应包括：检出限、
精密度、符合率。
室内质量控制
目的 监测和控制实验室常规工作的精密度，即实验 室测定的批内和批间重复性 IQC结果决定了实验室即时测定结果的可靠性和有效性
淋病奈瑟菌有自溶的特性，标本采集后应立即送检。
标本保存
靶核酸(尤其是RNA)易受核酸酶的作用而迅速降解，因此酸为DNA的标本2-8℃保存1-3天，靶核酸为RNA的标本应 －20℃下保存 －20℃下保存1个月 －70℃以下可长期保存 如为提取核酸后用于DNA扩增分析的样本，可于10TE缓冲液 {mmol/L Tris,1mmol/L EDTA(pH7.5～8.0)}2-8℃下保存。 用于RNA扩增分析的样本，则应于上述 TE缓冲液中-70℃保存。
使用玻璃器皿，必须为密闭的、必须经高压灭菌，
以使可能存在的RNase永久性失活。
标本验收、拒收
血液标本：溶血、严重脂血等应拒收
泌尿生殖道分泌物：镜下观察到上皮细胞存在。 痰液：镜下观察上皮细胞很少，一般<10个，白细胞一 般>25个。 标本拒收原因分析，采取有效措施予以纠正
标本运送
实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床标本的运送条件 （温度、时间）作出相应规定。
计量性能要求（容量允许误差、测量重复性）
内部校准-参照《定量、可调移液器试行检定规程》 (JJG646-2006)
注意：环境的要求
计量性能要求（标称容量、标定点、容量允许 误差、测量重复性）
校准点涵盖试验过程中所涉及的量程
生物安全柜
清洁: 75%乙醇擦拭,不宜用次氯酸钠溶液清洁 检定：有资质的第三方检测机构 检定参数：高效过滤器完整性、流入气流流速、下降 气流流速、气流模式
标本接收区建议放在四个区域以外的房间
开展基于组织的分子病理项目宜有独立的切片制备和前处理
（脱蜡、水化）区域
设施和环境
进入和使用实验室各区域应有明确的限制和措施，防止患
者和其他非相关人员的随意进出 各工作区域应有明确的标记，应按照单一方向进入各工作
区域，不同区域内的设备、物品不得混用
实验室应规定环境温、湿度的要求，实施监控，并有记录 应有指定的经过培训的内务管理人员（如保洁人员），有 相应清洁用具，有实验室清洁和消毒相关的记录
拒收）、保存和安全处置的具体要求和操作规程 标本应正确采集并符合检测要求
标本运送应符合相关时间、温度和生物安全的要求，
并进行有效监控 标本接收时有接收时间和状态记录
标本拒收原因要明确，并有记录
实验室应对标本拒收原因进行定期分析，有切实可行的整改 措施 用于分子病理检测的石蜡包埋组织标本应按要求及时进行切 片、脱蜡等处理，新鲜组织标本应及时进行取材作冰冻切片 或切开、固定等处理，穿刺细胞应及时进行制备细胞蜡块、 切片等处理。 标本检测全过程包括核酸提取、扩增、产物分析、保存等应 能溯源.分子病理检测项目在检测过程中应以病理号作为原 始标本、取材标本（包埋盒）、蜡块或切片的唯一性标识
标本采集量
标本的类型和采集量应根据所测病原体而定。 一般来说，如果样本的量对病原体培养够用的 话，则其量亦足以用于核酸提取及其后的扩增
检测。
采样容器
采样所用的抗凝剂及相关试剂材料不应对核酸扩增及
检测过程造成干扰。如全血、骨髓和血浆标本，用
EDTA抗凝，不使用肝素，因其是 Taq酶的强抑制剂， 且在核酸提取过程中很难完全去除。
临床基因扩增检验质量要求
上海市临床检验中心
肖艳群
制定依据
《医疗机构临床实验室管理办法》（卫医发[2006]73号）
《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办 医政发[2010]194号）
医学实验室质量和能力认可准则 ISO15189(CNAS-CL02) 医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的 应用说明（CNAS-CL36） 医学实验室质量和能力认可准则在病理学检查领域的应 用说明（CNAS-CL37）
实验室有培训制度、计划，保证其技术人员得到及时 培训，并对培训效果进行评估 实验室应定期评审员工的工作能力，保存评审记录
实验室应分册建立技术人员技术档案，档案至少应包
括以下内容:学历、职称、ＰＣＲ上岗证书复印件；培 训、能力评审等资料，并定期更新
实验室设置
原则上应分为四个区：试剂准备区、标本制备区、扩增区、 产物分析区
产物分析区
扩增区
标本制备区
试剂准备区
缓冲间
基本原则：1、四个区域必须相互独立 2、各区不能直通，应有缓冲间 3、各区有独立通风系统
设备、材料与信息系统
使用的仪器、试剂、耗材、辅助品必须符合国家相关规定。
仪器：必须三证齐全 试剂：必须CFDA批准
相同检验项目在不同仪器或系统上进行检测时，须对检验 结果进行比对( 2次/年，每次至少20份标本，计算回归方
耗材、试剂要求
耗材 带滤芯吸头、离心管爆管和抑制物质检
试剂盒的质检
包括外观质检和性能质检
选择或更换试剂品牌：试剂性能验证 更换试剂批号：试剂批间差，应评价核酸提取效率和 扩增效率（定量项目至少使用高低两个临床样本，结 果在T±0.5范围内可接受）
信息系统
建立信息系统管理制度，制订计算机（办公用除外） 和计算机网络使用权限、登陆密码、维护的规定，有
基本内容
质量管理体系建立
人员
实验室设置、设施和环境 设备、材料与信息系统 分析前 分析中
分析后
质量管理体系建立
质量手册、程序文件、操作规程、记录 现行有效 适合自身实际情况 写你所做的、做你所写的、记你所做的
文件至少应包括
组织和人员管理：各类人员的岗位职责、岗位培训、继续 教育、定期考核、评估等 环境、设施及安全管理文件或程序 仪器、设备采购、验收、管理、领用及使用的文件或程序
• •
如使用全自动扩增分析仪，后两区可合并 如使用核酸提取、扩增和产物分析一体化的全自动分析 系统，后三区可合并
各区有独立的缓冲区
各区都有水池 标本制备区有冲眼器和生物安全柜
各区有独立的通风系统（建议有窗户的房间为PCR实验室），
设施和环境
实验室有足够的空间保证：标本处置符合分析前、后样本分 区放置、仪器放置符合维修和操作要求、打印检验报告时交 叉污染的控制
仪器校准
需校准仪器：温度计、温湿度计、移液器、恒温金属浴、生物安 全柜、高速冷冻离心机、扩增仪、杂交仪、测序仪；开展分子病
理项目需校准切片机（包括冰冻切片机）、捞片水浴槽
校准单位资质 合格的校准/ 检定报告 校准周期：参照国家计量部门或生产厂商的要求进行，厂家没有 规定的则每年至少进行一次
内部校准的辅助设备，实验室应根据国家计量部门或生产厂商的
标本接收
标本接收建议在三个测定区之外
接收的标本应收集在原始容器中，不能接受从其他检
测如生化、免疫检验等分出来的标本，因其有较大的 发生标本间污染的可能性
标本处理
血清（浆）： 应1小时内分离血清，抗凝后4小时内分离血浆，然后转移至1.5ml灭菌离心 管中保存。若血清分离不充分，可1500rpm离心5min 。 如甘油三酯含量超过6mmol/L或肉眼可见血清/血浆呈白色浑浊状的标本， 应4℃13 000rpm离心15min,吸取下层清亮血清或血浆转移至1.5ml灭菌离心 管中保存
标本应按相关规定保存，并进行监控和记录
标本采集时间
1、血清（浆）：无特殊要求 2、如用泌尿生殖道分泌物做CT、NG项目：应在抗生素应用前或停 药两周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用 前采集。 3、如用痰做TB：应在抗结核药物应用前或停药两周后采集标本， 如不能停用抗结核药物，应于下次抗结核药物应用前采集。 因为PCR方法所检测的靶物质为核酸，不受标本生物活性的 限制，对于已经死亡的病原体仍可检测出来，即感染后在药物 治疗有效的情况下，患处仍会有少量已死亡的病原体存在。
靶核酸为DNA的标本，如在无菌条件下，则可以在室温下运送，
建议采集后8h之内送至实验室； 靶核酸为RNA的标本，如在无菌条件下，可在室温下运送，如为
较长时间，则应在加冰条件下运送，建议采集后4h之内送至实验
室； 所有标本采集后送至实验室之前，所有临床标本在采集后送至
实验室前，均应放2－8℃临时保存。
凡出具临床检测报告的项目均应开展室内质控