分光光度计的使用方法

分光光度计的使用方法

一、实验原理

吸光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法。其理论基础是光的吸收定律——朗伯-比尔定律：

A=Kdc

当液层厚度d以cm，吸光物质浓度c以mol?L－1为单位时，系数K就以ε表示，称为摩尔吸光系数。朗伯-比尔定律表示为：

A=εdc

二、仪器介绍

吸光光度法具有较高的灵敏度和一定的准确度，特别适合于微量组分的测量。吸光光度法操作简便、快速、适用范围广，在分析化学中占有重要的地位。

吸光光度法的主要仪器是分光光度计，其主要结构如下：

光源单色器比色皿光电元件输出装置

7220型分光光度计是较为常用的一种数字显示分光光度计。它以碘钨灯为光源，光栅为色散元件。可用波长范围是330~800nm，波长精度2nm，波长重现性为0.5nm，单色光带宽6nm，吸光度显示范围为0~1.999，吸光度的精度为0.004(A=0.5)，试样架可置四个吸收池。

1、样品室门

2、显示窗

3、波长显示窗

4、波长调节旋钮

5、电源开关

6、操作键区

7、样品池拉手

操作键区面板从左至右：

1、方式选择

2 、100%T、ABS 0

3、 0%T

4、选标样点

5、置数加

6、置数减

7、确认

8、打印

三、仪器使用方法

1、开机

安装好仪器后，检查样池位置，使其处在光路中（拉动拉手应感应到每档的定位），关好样品室门，打开仪器电源开关，预热10分钟，即可进行测量。

2、打开样品室门，将方式定于透过率档，按0%T进行机械调零。

3、从蒸馏水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。向比色皿内注入少量试液，润洗三次，然后注入3/4至4/5的试液，用滤纸片擦干外壁所挂水珠。将比色皿按顺序放入样品池。注

意光面对光源。

4、在样品池中放置空白液与样品

5、按需要调节波长旋钮，使显示窗显示所需波长。

6、使空白溶液位于光路中，按方式选择键使吸光度指示灯亮，按100%T键调100%，至窗口显示100%。

7、打开样品室门，将功能调于透射比档，观察显示是否为0.0，若否则按0%T键调零。调零后再放回吸光度档。

8、重复上两步，直至仪器稳定。

9、将样品置入光路，从显示屏上读取吸光度。

用7220型分光光度计可以直接测出样品浓度。测定采用工作曲线法，曲线由仪器自动生成，并自动给出样品浓度。