第六章种子检验原理和技术说课讲解
种子学第六章 种子检验原理和技术
3) 扦样员经过专门训练
4) 种子批便于扦样 5)均匀一致 6)扦样点均匀地分布 7)各点数量一致
农作物种子批的最大重量和样品最小重量
种子批的最 种(变种)名 大重量(kg)
1.洋葱 2.韭菜 3.西瓜 4.黄瓜 5. 大豆 6. 棉花 7. 番茄 8. 稻 9. 豌豆 10.茄子 11.高粱 12.小麦
ISTA是唯一一个专业从事种子检测的国际组织,
现在已在世界上70多个国家拥有会员。 成立 ISTA的主要目的是制定、修订、出版和推行种子 扦样和检测标准程序,并促进在国际种子贸易中统 一使用这些程序。
1931年制定了第一个国际种子检验规程
我国的种子检验工作开始较晚。新中国成立之初没有 专门的种子检验机构,检验工作由粮食部门或商检部门代 行。
死种子%
纯度
水分
发芽床——;温度——;试验持续时间——;发芽前处理和方法—— 实验室方法——,品种纯度(%)—— 田间小区鉴定:品种纯度%——异品种 %异作物%——杂草%——
水分——%
其它测定 生活力——%;重量(千粒)——g;健康状况: 项目
检验员:
复核:
技术负责人:
填表日期:
第二节 扦样
种子检验的第一步,也是至关重要的一步 扦样(Sampling) ⑴ 种子批(seed Lot) ⑵ 初次样品(primary sample) ⑶ 混合样品(composite sample) ⑷ 送验样品(submitted sample) ⑸ 试验样品(working sample) ⑹ 半试样(half sample) ⑺ 封缄(sealed)
(GB4404.1-4404.2-2019 GB4407.14404.2-2019、 GB16715.1-2019) 绿肥种子分级标准
种子学chapter6.1-2 种子检验原理和技术[精]
(2)双管扦样器 (手杖式扦样器stick trier)
构造:
一个空心的铜管紧密套合在一 个具有实心尖头的外管之中。内 外套管的管壁均开有狭长小孔。
用于三叶草和其他小粒自由流动 种子的扦样器,长度为762 mm, 外径为12.7 mm,开有9个小孔;
用于禾谷类种子的扦样器,长度 为762 mm,外径为25.4 mm,开
使用:将分样器刷净,活 门关好,样品放人漏斗铺 平,出口处对准盛接器, 用手很快拨开漏斗下面的 活门,种子由于重力迅速 下落,经圆锥体均匀分散 落入各格内,最后落入盛 样器内,这样将种子分成 2份
种子学chapter612种子检验原理和技术精
第六章 种子检验原理和技术
第一节 种子检验发展史
一、种子检验(seed testing)的概念
指应用科学、先进和标准的方法对种子样品的 质量进行正确的分析测定,判断其质量的优劣, 评定其种用价值的一门科学技术。
二、种子质量的概念
由种子不同特性综合而成的一种概念。通常包 括品种质量(genetic quality)和播种质量(sowing quality)两个方面的内容。
由下列7个标准构成: GB/T 3543·1-1995 总则 GB/T 3543·2-1995 扦样 GB/T 3543·3-1995 净度分析 GB/T 3543·4-1995 发芽试验 GB/T 3543·5-1995 真实性和品种纯度鉴定 GB/T 3543·6-1995 水分测定 GB/T 3543·7-1995 其他项目检验
优点是每次扦样种子数量比较多。
(4)气吸式扦样机 由扦样管、真空泵和连接蛇管
等部分组成
1.扦样管 2.皮管 3.支持杆 4.排气管 5.排气管 6.曲管7.减压室 8.样品收集室 9.玻质观察管
第六章种子检验原理和技术说课讲解
(3)我国农作物种子检验规程所列入的品种鉴定方 法和国内常用电泳方法:
我国GB/T3543·l-7-1995农作物种子检验规程已 将ISTA规程的鉴定小麦和大麦品种的PAGE标准参照 方法、GB/T2930·l-11-2001牧草种子检验规程已将 ISTA规程的鉴定豌豆和黑麦草品种的PAGE标准参照 方法列入应用。
目前我国各地常用和研究较为有效的品种鉴定的电 泳方法有:玉米种子盐溶蛋白PAGE (NY/T 449— 2001),棉花种子的水溶性蛋白质AUS-PAGE,西瓜种 子的SDS-PAGE,水稻和蔬菜幼苗的等电聚焦电泳, 水稻的同工酶电泳鉴定等方法。
(三)电泳图谱的分类和鉴别 1.电泳谱带的分类: (1)根据谱带特征、血缘关系和鉴别方便可将电泳
3.目前鉴定品种的常用电泳方法: (1) 1996国际种子检验规程已将鉴定小麦和大麦品
种醇溶蛋白PAGE标准参照程序,鉴定豌豆属和黑麦 草属的SDS—PAGE标准参照方法、超薄层等电聚焦 电泳测定杂交玉米和种子纯度的标准参照方法列入 规程。
(2)国际植物新品种保护联盟的植物新品种DUS检 测指南所列入的电泳鉴定方法:1994年制订有关分 析小麦高分子量麦谷蛋白的SDS-PAGE方法、分析大 麦醇溶蛋白SDS-PAGE方法、分析大麦B-和C-醇溶蛋 白的A-PAGE方法、分析玉米同工酶的淀粉凝胶电泳 方法。
一般地,氨基酸在酸性溶液中带正电荷,在碱性 深液中带负电荷。在某一pH时蛋白质所带的正负电 荷相等,在电场中既不向正极移动,也不向负极移动, 这时溶液的pH值即为该蛋白质的等电点。当溶液的 pH值小于pI时,蛋白质带正电荷,反之带负电荷。 由于蛋白质带有电荷,因此在电场中能泳动,泳动速 度主要取决于所带电荷的数量、分子的大小及形状和 电场特征。
项目六:种子检验
项目六:种子检验一、名词解释:1、种子检验2、扦样3、初次样品4、混合样品5、次级样品6、送验样品7、种子批8、种子净度9、其他植物种子10、杂质 11、净种子12、品种真实性 13、品种纯度14、种子水分15、种子千粒重16、发芽17、发芽率18、正常幼苗19、不正常幼苗 20、复胚种子单位 21、未发芽的种子22、硬实 23、新鲜不发芽种子24、田间试验二、简答题、分析与计算1、扦样的目的是什么?2、如何从口袋种子中扦样一个供净度分析用的小麦种子送验样品?3、小麦、大豆、水稻净种子定义是什么?4、如何从1000g小麦种子送验样品中分取净度分析的两个半试样?5、现有一种子水分测定的送验样品,第一份试样烘前重量为4.705g,烘后重量为4.216g; 第二份试样烘前重量为4.602g,烘后重量为4.118g,计算该种子批的含水量。
6、什么是发芽、发芽率、正常幼苗、不正常幼苗?7、试述小麦和玉米发芽试验测定程序?8、试述田间检验程序?9、小麦种子生活力的四氮唑测定程序?10、简述烘箱标准法测定种子含水量的程序?11、简述种子净度分析的程序?12、简述种子扦样的程序?三、选择题:1、______是种子检验的第一步。
A 扦样B 检测C 结果报告D田间检验2、种子检验的的内容包括扦样、检测和_________.A样品管理 B 误差处理C后处理D结果报告3、_______是种子检验的重要环节.A 扦样B 检测C 结果报告D田间检验4、扦样的目的是要保证样品的_________。
A 包装完好B 对种子批的代表性C 数量充足D干净清洁5、对种子批的一次扦取操作时所获取的样品为________。
A 初次样品B 混合样品C 次级样品D送验样品6、不低于检验规定中所规定的重量的,供某一检验项目之用的样品_____。
A 初次样品B 混合样品C 次级样品D试验样品7、下列对种子批的概念描述正确的是_______。
A 同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、规定数量之内的种子B 不同来源、同一品种、同一年度、不同时期收获和质量基本一致、规定数C 同一来源、不同品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、规定数D同一来源、同一品种、不同年度、不同时期收获和质量基本一致、规定数8、袋装种子,其重量的量值范围规定在________Kg之间。
种子检验技术介绍
黑麦属(Secale)、小麦属(Triticum)、小黑麦属 (Triticosecale)、玉米属(Zea mays):
颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。
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棉属(Gossypium):
有或无种皮,有或无绒毛的种子。 超过原来大小一半,有或无种皮的破种子。
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花生属(Arachis)、芸薹属 (Brassica)、大豆属(Glycine)、苜 蓿属(Medicago)、烟草属 (Nicotiana)、番茄属(Lycopersicon)
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净种子定义细则
稻属(Oryza)
由颖片、内外稃包着颖果的小穗,当芒长超过小花 长度时,将芒除去。 有或无不孕外稃、有内外稃包着颖果的小花,当芒 长超过小花长度时,将芒除去。 有内外稃包着颖果的小花,当芒长超过小花长度时, 将芒除去。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。
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植物学名
用拉丁文表示,采用国际命名法。
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净度分析程序
(接受送验样品后,对送验样品称重) 1、重型混杂物的检查 2、分取试验样品(有精确要求) 至少2500个种子单位,但远少于送验样品 的重量,一般是10倍左右。(?)
等 : 有或无种皮的种子。
超过原来大小一半,有或无种皮的种子。 豆科、十字花科种皮完全脱落的种子单位列为 杂质。 即使有胚中轴,并超过原来大小一半的附属种 皮,豆科种子单位的分离子叶也列为杂质。
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甜菜属(Beta):
复胚种子:用筛孔为1.5mm*20mm的 200mm*300mm的筛子筛理1min后,留在筛上的种球 或破损种球(包括从种球突出程度不超过种球宽度的附 着断柄),不管其中有无种子。 遗传单胚:种球或破损种球(包括从种球突出程度不超 过种球宽度的附着断柄),但明显无种子的除外。 果皮/种皮部分或完全脱落的种子。 超过原来大小一半,果皮/种皮部分或完全脱落的种子。 (突出程度超过种球宽度的附着断柄,除去整个断柄)
种子质量检验标准与技术课件
散装扦样点数(最低要求) 种子质量检验标准与技术课件
㈣、配制混合样品
由种子批内扦取的全部初次样品合而成。
前提:初次样品无明显差异
种子质量检验标准与技术课件
㈤、送验样品的取得
1、送验样品的重量
a. 水分测定: 需磨碎的种类为100g,不需磨碎种类为50g。 b.品种纯度鉴定 按GB/T 3543.5的规定。 c. 其他项目测定参考该作物送验样品规定的最小重量
种子质量检验标准与技术课件
三、种子水分的类别
自由水(游离水) 束缚水(结合水) 化合水(结构水)
种子质量检验标准与技术课件
四、种子水分测定的时机
1、收购入库。 2、贮藏期间。 3、熏蒸前后。 4、确定堆垛方式。 5、当霪雨连绵后天气放晴时。
6、种子出仓前。
种子质量检验标准与技术课件
五、水分测定的方法
种子质量检验标准与技术课件
5.防止病虫和有毒杂草的传播蔓延,保护生产 和人畜安全
6.避免伪劣种子播种,节约种子和费用
7.推行种子标准化和实施种子法的保证
8.确保种子质量,维护国家声誉
种子质量检验标准与技术课件
二、种子检验规程
《种子法 》
第四十六条 禁止生产、经营假、劣种子。
种子质量检验标准与技术课件
烘干样品盒 样品制备 试样称重
结果计算
水分铝盒 种子质量检验标准与技术课件
2、快速测定法----电子仪器法
红外线快速水分测定仪
稻、麦水分测定计
种子质量检验标准与技术课件 快速电脑水分测定仪
第五节 种子的发芽率
一、发芽率检测的术语
发芽率 Percentage germination
在规定的条件和时间内长成的正常幼苗数占供检种 子数的百分率( GB/T 3534.3—1995 )。
种子质量检验原理和技术
1.4 混合样品(composite sample):由种子批 内扦取的全部初次样品混合而成的样品。
1.5 次级样品(sub-sample):指通过分样所获 得的部分样品。是一个“小样品对大样品”的相 对概念,
1.6 送验样品(submitted sample):是指送达 检验室的样品,该样品可以是整个混合样品或是 从其中分取的一个次级样品(规定最低数量)。
样品的质量进行正确的分
析测
定,判断其质量的
优劣,评定
其种用价值
的一门
科学技术。
•二、种子质量的概念
•种子质
量 •品种质
•播种质
量
量
•真 •纯
•净 •壮 •饱 •健 •干 •强
•活力 •含水率(量) •病虫感染率 •千粒重或容重 •发芽力、生活力 •净度
•纯度 •真实性
•三、种子检验的意义
•1.保证种子质量,提高产品产量和质量; •优良品种+优质种子+科学栽培---优质高产 •2.贯彻优质优价政策,促进种子质量的提高; •3.监测种子质量,保证种子贮藏运输的安全; •4.防止伪劣种子流通,保护国家和农户的利益。
•2.2 扦样的原则
•若不一致,拒绝 扦样
•2.2.1 种子批质量要均 匀
•2.2.2 扦样点要均匀分布
•加工整理达到要 求后可扦样
•有怀疑进行异质 性测定
•2.2.3 各个扦样点扦出种子数量应基本相等
•2.2.4 保证样品的可溯性和原始性
•2.2.5 合格扦样员扦样
•二、仪器设备
•1 扦样器
•1.1 袋装种子扦样器( •s1a.m1p.lቤተ መጻሕፍቲ ባይዱer单)管扦样器(诺培扦样器 )• 有不同的规格,一
种子检验技术教案
种子检验技术教案下载-样章.doc1种子检验程序Z-1种子检验内容和程序一、种子检验的内容种子检验是指采用科学的技术和方法,按照一定的标准,运用一定的仪器设备,对种子质量进行分析测定,判断其优劣,评定其种用价值的一门应用科学。
(一) 种子检验的内容种品种品质:是指与遗传特性有关的品质,包括品种的真实性和子品种纯度。
可用真、纯两个字概括。
品质播种品质:是指种子播种后与田间出苗有关的品质,可用净、壮、饱、健、干五个字概括⒈真是指种子真实可靠的程度,可用真实性表示。
如果种子失去真实性,不是标识所指代的优良品种,其为害小则不能获得丰收,为害大则会造成歉收甚至无收。
⒉纯是指品种典型一致的程度,可用品种纯度表示。
品种纯度高的种子因具有该品种的优良特性而可获得丰收。
相反,品种纯度低的种子由于其混杂退化而明显减产。
⒊净是指种子清洁干净的程度,用净度表示。
种子净度高表明种子中其他植物种子和杂质的总含量少,可利用的净种子数量多。
净度是计算种子用价的指标之一。
⒋壮是指种子发芽出苗齐、壮的程度,可用发芽力、生活力、活力表示。
发芽力、生活力高的种子,发芽出苗整齐,活力高的种子出苗率高,幼苗健壮,同时可以适当减少单位面积的播种量。
⒌饱是指种子充实饱满的程度,可用千粒重、容重表示。
种子充实饱满表明种子中贮藏物质丰富,有利于种子发芽和幼苗生长。
⒍健是指种子健全完善的程度,通常用病虫感染率表示。
⒎干是指种子干燥、耐藏程度。
可用种子水分百分率表示。
综上所述,种子检验的内容包括种子真实性、品种纯度、净度、发芽力、活力、千粒重、容重、种子水分和健康状况等。
在种子质量标准中常以纯度、净度、发芽率和水分四项指标为依据,因而我国种子检验是以净度分析、发芽试验、真实性和品种纯度鉴定、水分测定为必检项目,生活力等其他项目属非必检项目。
二、种子检验程序混合样品送验样品送验样品送验样品试验样品试验样品重型混杂物测定保留样品试验样品净度分析送验验样送验验样结果报告初次样品种子批Z-2 与种子检验有关的国际组织和国际标准一、国际种子检验协会及其国际标准国际种子检验协会(简称ISTA)成立于1924年。
《室内种子检验》PPT课件上课讲义
《室内种子检验》PPT课 件
1、种子检验—— 是指按照规定的种子检验程序,确定给定农作
44、试样样品须称重,以克表示,精确至规定的0——四位 小数,以满足计算各种组分百分率达到一位小数的要求。
45、试样分离、鉴定、称重——
1】试验样品须称重,
2】通常采用人工分析进行分离和鉴定。可以 借助放大镜等仪器将样品分为净种子、其它植物 种子和杂质。
3】然后分别放入相应的容器。
4】对于损伤的种子均作为净种子或其它植物 种子;留下来超过原来大小一半,如不能迅速作 出决定,则列为净种子或其它植物种子。
字位数与原数字相同。 3》某些常数、倍数或分数的有效数字是无限的
,根据需要取其有效数字的位数。
33、种子净度—— 即种子清洁干净的程度,是指种子批或样品
中的净种子、杂质和其它植物种子组分的比例及 特性。
34、种子净度分析的目的—— 通过对种子样品中净种子、其它植物种子和
杂质三种成分的分析,了解种子批可利用种子的 真实重量,以及其它植物种子、杂质的种类和含 量,为评价种子质量提供依据。
品数等信息。
31、包衣种子填报—— 需要在种名后注明哪一种类的包衣种子,如“玉米,包
膜种子”。净包衣种子、杂质、未包衣种子的百分率分别 在“净种子”、“杂质”、和“其他植物种子”栏中填报。
32、有关检测数据的数字修约—— 种子检验规程规定: 1】称重方面——所有样品称重时(包括净度分析、
水分测定、重量测定等),应符合要求,即1g以下保留四 位小数,1-10g保留三位小数,10-100g保留两位小数, 100-1000g保留一位小数。
种子检验技术教学大纲
《种子检验原理和技术》课程教学大纲(种子生产与经营专业)课程编号课程名称:种子学学时:28 实验学时:10 学分:2一、课程的性质、目的和任务种子检验原理和技术是研究作物种子的特征特性、生理功能和生命活动规律,为农业生产服务的一门应用学科,是农学、农师专业的主要专业课程之一。
本课程的教学,旨在使学生运用种子学的理论来阐明种子质量检验的技术原理,熟练掌握种子质量检验的操作技术,能在生产实践中灵活运用所学知识解决具体问题。
二、课程教学的基本要求课程教学应力求使学生弄清基本原理,掌握基本内容,熟悉操作规程,能独立解决种子工作中的实际问题。
三、教学内容,重点和难点第一章种子检验与种子标准化1、教学内容种子检验的内容和意义;种子标准化的内容和意义;种子检验的方法步骤和程序。
2、教学基本要求掌握种子检验的方法步骤和程序,了解种子检验学科的历史与发展,种子检验与种子标准化内容与意义。
3、重点和难点:重点:种子检验的方法步骤和程序难点:种子检验的方法步骤和程序第二章扦样1、教学内容扦样的目的意义,扦样的方法,混合样品和送检样品的配制。
2、教学基本要求掌握扦样原则和方法步骤,混合样品和送检样品的配制,了解扦样的目的意义。
3、重点和难点:重点:扦样的方法,混合样品和送检样品的配制难点:扦样原则和方法步骤第三章种子净度分析1、教学内容种子净度分析的目的与意义,净度分析的标准,净度分析的方法,其他植物种子数的测定。
2、教学基本要求掌握种子净度分析的概念及方法步骤,了解种子净度分析在实践中得意义及其他植物种子数的测定。
3、重点和难点:重点:种子净度分析的概念及方法步骤难点:种子净度分析的概念及方法步骤第四章种子发芽试验1、教学内容发芽试验的重要意义,种子发芽试验的设备,标准发芽试验的方法,其他发芽方法,快速发芽试验方法及幼苗鉴定。
2、教学基本要求掌握种子发芽试验的方法步骤及幼苗鉴定,了解其他发芽方法和快速发芽试验方法。
3、重点和难点:重点:种子发芽试验的方法步骤及幼苗鉴定难点:正常幼苗和非正常幼苗的标准第四章种子真实性和品种纯度鉴定1、教学内容品种纯度检验在农业生产上的意义,鉴定品种的性状,田间检验,室内检验,田间小区鉴定。
子质量检验原理和技术
401 或以上
每袋至少扦取 1 袋, 不少于 80 袋
第三十九页,共62页。
3.1.1 设置 (在sh收è购zh、ì调)扦运、样加点工、装卸(zhuāngxiè)扦样时可每隔
一定袋数设置扦样点。在种子仓储、堆垛的情况下, 扦样点应均匀分布于堆垛的上、中、下各个部分。
X
x
x
Xx x x
x
取的全部(quánbù)初次样品混合而成的样品。 1.5 次级样品(sub-sample):指通过分样所获得的
部分样品。是一个“小样品对大样品”的相对概念, 1.6 送验样品(submitted sample):是指送达检验
室的样品,该样品可以是整个混合样品或是从其中分 取的一个次级样品(规定最低数量)。
活力
含水率(量) 病虫感染率
千粒重或容重
发芽(fā yá)力、生活力 净度
纯度(chúndù) 真实性
第四页,共62页。
三、种子检验的意义 1.保证种子质量,提高产品产量和质量; 优良品种+优质种子+科学栽培---优质高产 2.贯彻优质优价政策,促进种子质量的提高; 3.监测种子质量,保证种子贮藏运输的安全; 4.防止(fángzhǐ)伪劣种子流通,保护国家 和农户的利益。
蓝色证书——扦样不是在授权的成员站监督 下进行,授权的成员站只负责对送验样品的检 验。
第十页,共62页。
第二节 扦 样
一、扦样的概念(gàiniàn)和原 则
1 扦样(sampling)的概念 (gàiniàn) 1.1 扦样:通常是利用一种专用的扦样器具,从大量的 种子(zhǒng zi)中,随机取得一个重量适当,有代表 性的供检样品。
使用:
慢慢插入袋内,尖端朝上,与水平约成30°, 洞孔向下,直达袋的第十中九页,共心62页。 。然后将扦样器旋
室内种子检验员专业知识讲座第六讲
报“四唑测定有生活力的种子_%”。
❖ 对豆类、棉籽和蕹菜等需增添“试验中发 现的硬实百分率”,硬实百分率应包括在 所填报有生活力种子的百分率中。
28
谢谢
35
5
❖ 四、四唑测 ➢ 发芽缓慢的种子; ➢ 要求估测发芽潜力的种子。
7
➢ 另外,也适用于测定发芽末期个别种子的 生活力,特别是怀疑有休眠时;测定已萌 发种子,或收获期间存在的不同类型和/或 加工的损伤(热害、机械损伤或虫蛀等) 种子;解决发芽试验中存在的问题,如不 清楚不正常幼苗产生的原因或怀疑杀菌剂 的处理效果等。
发芽试验来测定发芽力,这是因为发芽试验所需 的时间更长。
4
❖ 三、四唑染色测定的原理 ➢ 在种子组织活细胞内脱氢酶的作用下,无
色的氯化三苯基四氮唑,接收活种子代谢 过程中呼吸链上的氢,在活细胞里变成还 原态的红色、稳定、不扩散的三苯基甲月 替(Triphenyl Formazam)。可根据四唑染成 的颜色和部位,区分种子红色的有生活力 部分和无色的死亡部分。
❖ 凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色 和光泽,并且活营养组织不染色部分已超过二分 之一,或超过容许范围,以及组织软化的,完全 不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色,且组织 已软化腐烂或异常、虫蛀、损伤的均为无生活力 种子。
27
七、结果表示与报告
❖ 计算各个重复中有生活力的种子数,重复 间最大容许差距不得超过规定,平均百分 率计算到最近似的整数。
8
第二节 试剂的配制和仪器设备
10
二、仪器和设备(*)
❖ 四唑测定的主要仪器设备与发芽试验设备相同, 可采用其设备:如电热恒温箱或发芽箱、冰箱。
❖ 四唑测定需配备的小器具有:种子切割工具如解 剖刀或刀片、小针、切割垫板等;种子预湿需要 纸、毛巾、烧杯等器具;染色时,要准备有盖的 不同规格的染色盘、棕色加液器、镊子、吸管等; 观察器具如体视显微镜或放大镜;以及保护器具 如手套、眼睛保护镜、废液处理容器等。
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第五节 真实性和品种纯度鉴定
一、有关定义和目的意义
(一)有关定义 1.种子真实性:种子真实性(cultivar genuineness
或trueness)是指一批种子所属品种、种或属与文件 (品种证书、标签等)是否相同,是否名符其实。这 是鉴定种子样品的真假问题。
2.品种纯度:品种纯度(varietal purity)是品种在 特征、特性方面典型一致的程度,用本品种的种 子数占供检样品种子数的百分率表示。这是鉴定 品种一致性程度高低的问题。
苯酚染色法
A
B
Fig. Phenol test: Uniform ivory color reaction in a genetically pure wheat variety (A), and a mixture of color reaction in a sample containing more than one variety (B).
大豆幼苗颜色可在10~14天进行,分4种,绿色, 赤褐色(下胚轴下部有),淡紫色(下胚轴紫色,上胚 轴绿色)和深紫色(上、下胚轴均为紫色)。播后21天(3 片小叶完全展开)进行茸毛颜色和上面一片小叶背面 茸毛着生角度(直立、平贴,中间)及小叶形状(卵 形(长宽比小于1.6),披针形(长宽比大于2.0)) 鉴定。
1.种植方法 所有样品均应播种在惰性砂床中,加 水湿润到适宜湿度后播种。
2.浇水方法 出苗前,全部种植盘或盆在出苗前应 加水一致,以满足出苗所需水分。出苗后,为鉴定色 素而种植的大豆、莴苣幼苗,应用Hoagland No.l营 养液浇水,每4天一次;当鉴定芽鞘和茎上色素而种 植的小麦、燕麦幼苗,应用缺磷的Hoagland No.1营 养液,每4天浇1次。其余几天可以用水浇。
pH< pI 正电荷
pH= pI
pH> pI 负电荷
(1)电泳基本设备 温控设备(冰箱、保温箱)和电泳设备(电泳仪和电
泳槽)。
(2)电泳缓冲系统
指由处理或溶解样品、配制或浸泡支持物及电泳 时电极槽所用缓冲液构成的缓冲体系。缓冲系统在 电泳过程中有两个主要作用:一是缓冲电泳过程中 支持物上和电泳槽内pH的改变。电泳过程中阳极 一端形成酸性离子,阴性一端形成碱性离子,溶液 pH的改变程度与电泳持续时间、所用的电压和产 生的电流呈正相关。二是缓冲液形成正负极与支持 介质之间的离子通道,起传导电流的作用。
1)缓冲系统的类型 ①解离缓冲系统 ②非解离缓冲系统 2)缓冲液的离子强度 3)缓冲液的PH 3)支持介质的选择 4)电场特征
2. 应用电泳鉴定品种的理论基础
在品种鉴定中,个体或群体间蛋白质成分的差异, 反映基因表达的根本差异。由于基因是与遗传特征相 联系的,所以蛋白质标志能用以标记这些特征。这种 特征体系是一套基因,或是部分染色体,或是整条染 色体,或是完整的基因组。通过分析足够多的蛋白质 标志,可以涉及大量的基因组。由于作物品种是由各 种不同遗传表现的种质集合体所组成,所以对这些集 合体中的特种蛋白质或酶的成分进行比较就能用来表 示或描述这些材料的特征。电泳方法提供了一种进行 这种比较的绝好方法。这种有效的方法是基于各品种 蛋白质的多态性,即以多种不同的分子形式存在。
种子的形态特征,必要时可借助放大镜等进行逐粒
观察,区分出本品种和异品种种子,计数,并按下
列公式计算品种纯度百分率。
查对容许差距
良种品种纯度是否达到国家标准种子质量标准、
合同和标签的要求,可利用表7.2进行判别。
(二)幼苗形态鉴定 通过两个途经:一种途径是在温室或培养箱中,
提供给植株以加速发育的条件(类似于田间小区鉴定, 只是所需时间较短),当幼苗达到适宜评价的发育阶 段时,对全部或部分幼苗进行鉴定;另一种途径是让 植株生长在特殊的逆境条件下,测定不同品种对逆境 的不同反应来鉴别不同品种,如培养在不同营养成分, 不同光周期,不同有毒成分等环境。
五、种子纯度的快速鉴定
(一)化学鉴定
主要根据不同品种皮壳成分和化学物质的差异, 而对不同化学试剂反应显色的差异来鉴定品种。
1.苯酚染色法 又名石炭酸,其染色的原理是单酚、双酚、多酚 在酚酶的作用下氧化成为黑色素(C77H98O55N14S), 由于每个品种皮壳内酚酶活性不同,将苯酚氧化呈 现深浅不同的褐色。该法主要适用于小麦、水稻和 燕麦、大麦、黑麦草、早熟禾等牧草种子。
3.光温控制 通常利用高强度的光照如白冷光荧光 灯和白炽灯光源,光照强度33000Lux(勒克司); 一般采用24h连续光照,但除草剂敏感性测定和光周 期反应测定例外。温度一般控制在25℃条件下,但 也有例外。
4. 小麦幼苗的芽鞘和茎色鉴定,可在播后大约7天进 行,颜色从绿到紫。可用1%NaCl或HCL溶液湿润滤 纸或用紫外光照射幼苗1~2h 高梁和玉米幼苗芽鞘和顶端颜色鉴定可在出苗后14 天进行。芽鞘颜色分紫红色和绿色,顶端颜色可能有 4种类型,深紫色(在茎和叶近轴和远轴表面全深紫 色);中等紫色(紫色茎,近轴叶表面几乎深紫色,远 轴叶表面黄棕色);浅紫色(幼苗在茎和叶边缘有局部 紫色,主要为绿色)和绿色(幼苗含绿色) 燕麦幼苗可在播后10~14天进行鉴定,芽鞘和叶鞘颜 色分绿色和紫红色,叶鞘茸毛有无(光滑、茸毛、混 合型)等。
(3)我国农作物种子检验规程所列入的品种鉴定方 法和国内常用电泳方法:
我国GB/T3543·l-7-1995农作物种子检验规程已 将ISTA规程的鉴定小麦和大麦品种的PAGE标准参照 方法、GB/T2930·l-11-2001牧草种子检验规程已将 ISTA规程的鉴定豌豆和黑麦草品种的PAGE标准参照 方法列入应用。
3.变异株: 变异株(off-type)是一个或多个性状与 原品种育成者所描述性状明显不同的植株。
(二)目的意义 (1)保证种子质量,充分发挥品种的增产作用。 (2)促进优质优价政策的贯彻,提高效益。
二、真实性和品种纯度鉴定原理
品种具备新颖性、特异性、一致性及稳定性。 品种区分的外在表现就是品种的特征特性,其内在基础是 遗传信息DNA的差异。DNA可转录形成RNA序列,再翻译 形成氨基酸系列进而形成多肽·蛋白质。蛋白质是构成植物 细胞的基本成分之一,也可作为酶成分。酶能催化各级代谢 反应,初级、次级反应,进而形成各种有机化合物,如碳水 化合物、有机酸、脂肪等物质,这些化学成分在植物能量贮 存和细胞结构方面有巨大作用,并反映在其解剖结构和形态 特征方面。 因此,我们可以借助各种有效手段,对遗传信息本身及其 调节产物与表现在不同层次水平上进行区分鉴定,找出品种 之间所具有的形态学、细胞遗传学、解剖学、物理学、生理 学、化学和生物化学等方面的差异,才能鉴定成功。
目前我国各地常用和研究较为有效的品种鉴定的电 泳方法有:玉米种子盐溶蛋白PAGE (NY/T 449— 2001),棉花种子的水溶性蛋白质AUS-PAGE,西瓜种 子的SDS-PAGE,水稻和蔬菜幼苗的等电聚焦电泳, 水稻的同工酶电泳鉴定等方法。
(三)电泳图谱的分类和鉴别 1.电泳谱带的分类: (1)根据谱带特征、血缘关系和鉴别方便可将电泳
小麦种子的氢氧化钠测定法
Fig. Sodium hydroxide (NaOH) test: (left) Red wheat, and (right) white wheat.
(二)物理鉴定
荧光分析法,其原理是根据不同品种种子和幼苗含 有荧光物质的差异,利用紫外线照射物体后有激发光 的现象,将不可见的短光波转变为可见的长光波。由 于光的持久性不同可分成两种类型:一种叫荧光现象, 紫外光连续照射后物体能发光,当停止照射时,被激 发的光也随之停止。另一种叫磷光现象,当紫外光停 止照射后,激发生成的光在或长或短时期内可继续发 光。这里主要应用荧光法鉴定品种,因为不同品种和 类型的种子,其种皮结构和化学成分不同,在紫外光 照射下发出荧光也不同。鉴定的方法有两种:
2.愈创木酚(C7H802)法 其原理是大豆种皮内具有 过氧化物酶,能使过氧化氢分解而放出氧,使愈创 木酚氧化而产生红棕色的4-邻甲氧基醌,由于不同 品种过氧化物酶的活性不同,使溶液颜色也有深浅 之分。
3.碱液(NaOH或KOH)处理 可用于十字花科种子 真实性鉴定。
4.草木樨硫酸四氨铜鉴定 5.高粱种子氢氧化钾一漂白粉测定法 6.燕麦种子氯化氢测定法 7.小麦种子的氢氧化钠测定法 8.羽扇豆属植物碱测定法
1.种子鉴定法 2.幼苗鉴定法
六、种子纯度的电泳鉴定
(一)应用电泳鉴定品种的理论基础 1. 电泳基础 电泳是指带电颗粒在电场作用下向与其电性相反 方向的电极移动的现象。由于蛋白质是由许多氨基酸 组成,除肽链的两端有自由的氨基和羧基外,在侧链 上还有很多可解离的基团,如氨基、羧基、酚基、巯 基、咪唑基、胍基等,在一定条件下,这些基团都能 解离成为带电基团。在不同的pH条件下,可分别解 离成正负离子,因而带不同的电荷。
2.同工酶的结构的性质: (1)同工酶的结构 酶蛋白是很多氨基酸按一定顺序排列而形成的一 条多肽链。在同一生物有机物体的同一器官,甚至 同一细胞里,某些酶虽然具有相同的催化活性,但 是它们之间分子的氨基酸顺序却有相当大的差异。 因此,在酶学上把这种催化活性相同而分子结构不 同的酶称为同工酶。
(2)同工酶分类 Markert(1978)把同工酶的分为两类。 a.单基因决定同工酶,但其氨基酸序列上存在着 差异。如水稻幼苗芽鞘颜色控制的酯酶同工酶。 b.后成同工酶,这种酶在翻译后再经修饰而产生 同工酶。 Whitt(1967年)也把同工酶按其结构分为两类: a.单体同工酶,这是指一条多肽链组成的酶。 b.多体同工酶,这是指由多条多肽链组成的酶。 在多体同工酶中,按其初级结构的同异,又可分为 同质多体同工酶(同聚体:由相同肽链组成)和异质多 体同工酶(异聚体)。
一般地,氨基酸在酸性溶液中带正电荷,在碱性 深液中带负电荷。在某一pH时蛋白质所带的正负电 荷相等,在电场中既不向正极移动,也不向负极移动, 这时溶液的pH值即为该蛋白质的等电点。当溶液的 pH值小于pI时,蛋白质带正电荷,反之带负电荷。 由于蛋白质带有电荷,因此在电场中能泳动,泳动速 度主要取决于所带电荷的数量、分子的大小及形状和 电场特征。