卵黄抗体的应用

的分布于平皿培养基上。各纸片 中 心 距 离 不 小 于 ２４ 毫 升 ， 纸 片 距 平皿内缘应大于 １５ 毫升。直径 ９０ 毫升的平皿可贴 ７ 张纸片（一般可
将其切面直接均匀涂布于另一块 营养琼脂平板上。稍作干燥后， 贴 上待试的药敏试纸。将以上两块 平 板 置 于 ３７℃培 养 １２￣２４ 小 时 。
３．１ 培养基
４ 小时， 使抗菌药预扩散， 然后再
培 养 基 的 成 分 、含 量 、ＰＨ 值 、 放 ３７℃温箱中培养 ， 可 以 推 迟 细
琼 脂 的 厚 度 、硬 度 和 表 面 湿 度 等 ， 菌的生长而得到较大的抑菌圈。
１／２。然后， 找到第二点划线至平皿 的 １／２， 依 次 划 线 ， 直 至 细 菌 均 匀
略 停 ， 取 药 敏 片 贴 到 平 皿 培 养 基 料 经 常 规 消 毒 药 浸 泡 消 毒 后 ， 无 养皿 ， 倾注培养基 １８￣２０ 毫 升 为 边缘见不到细菌明显生长为限。
表 面 。 为 了 使 药 敏 片 与 培 养 基 紧 菌 操 作 ， 用 接 种 环 取 心 、肝 、脾 、 宜 。 培 养 基 内 应 尽 量 避 免 有 抗 菌
细菌涂布到平皿培养基上。具体 见表 １。多黏菌素抑菌圈， 在 ９ 毫
方 法 ： 用 灭 菌 接 种 环 取 适 量 细 菌 米 以 上 为 高 敏 ， ６￣９ 毫 米 为 低 敏 ，
分别在平皿边缘相对四点涂菌， 无抑菌圈为不敏。
以第一点开始划线涂菌至平皿的
２ 药敏试验的改良方法
培养。每隔 ６ 小时观察 １ 次， １２ ￣
鸡 室转到新建鸡舍室内较 潮， 曾用炉子烤过， 白天
传 又打开窗户在中午通 风， 没过两天出现呼吸
鼻 道现象， 但呼吸不困难， 可 以 听 见 “呲 呲 ” 甩 鼻
的 误 区
声， 并且有三五只鸡发 呆， 扎堆于笼舍一角， 有 流泪和肿脸现象。
２ 视诊 病鸡脸部肿胀， 面 部水肿， 肉髯明显肿胀， 结膜发炎， 一侧肿， 采食
２．１ 方法一
都可影响抑菌团大小， 应根据试
３．５ 抑 菌 圈 测 量 工 具 的 精 度
用玻璃铅笔将营养琼脂平板 验菌的营养需要进行配制。倾注 及测量方法
密布于平皿。
底部划分为六等份． 分别写上心、 平 板 时 ， 厚 度 合 适（约 ５￣６ 毫 米） ，
一般常用精确度为 ０．１０ 毫米
将 镊 子 于 酒 精 灯 火 焰 灭 菌 后 肝、脾 、肾 、肺 、脑 标 记 。 将 送 检 病 不 可 太 薄 ， 一 般 ９０ 毫 米 直 径 的 培 的 游 标 卡 尺 ， 测 量 范 围 以 抑 菌 圈
置 １ 小时后再使用。 １．１．２ 培 养 基 的 准 备 一 般 用
普 通 营 养 琼 脂 ＰＨ７．２￣７．４， 平 板 倾 注使琼脂厚度为 ４ 毫米， 待琼脂
凝固后置 ４℃冰箱保存 １ 周 ， 使 用 前应置 ３５℃温箱 ３０ 分 钟 ， 使 其 表 面干燥。根据细菌的种类不同可 选择不同的培养基， 如做大肠杆
山东农业大学动物科技学院
密 相 贴 ， 可 用 镊 子 轻 按 几 下 药 敏 肾 、肺 、脑 材 料 在 平 板 的 相 应 标 记 药 物 的 拮 抗 物 质 ， 如 钙 、镁 离 子 能
片。为了能准确的观察结果， 纸片 部位划线接种。
减低氨基糖苷类的抗菌活性， 胸
位置要适当， 要求药敏片有规律
表 １ 药物敏感实验判定标准
抑菌圈直径（毫米） 敏感度
２０ 以上
极敏
菌的药敏试验， 可选择普通营养 在平皿中央贴 １ 片， 外周可等距 每隔 ６ 小时观察一次。
１５－ ２０
高敏
琼 脂 或 麦 糠 凯 培 养 基 ， 做 沙 门 氏 离贴 ６ 片）， 贴后要尽量避免移动，
出 现 抑 菌 圈 后 ， 筛 选 出 高 敏 １０－ １４
自己耳部， 倾听病鸡呼吸强度。 ４ 剖诊 病鸡解剖可见鼻腔渗出物多，
内 充 满 半 透 明 渗 出 物 。用 解 剖 剪 划 开面部和肉髯可见炎性分泌物填
塞。从鼻孔流出清亮液体， 鼻窦明 显发炎， 被白色物填充。
５ 诊断 据流行特点 （ 本病多发生于 ２ 月龄至 ３ 月龄青年鸡） 、临床症状 （ 流泪， 一侧或双侧肿脸） 和剖检 （ 鼻内渗出物居多） ， 可初步诊断为 鸡传染性鼻炎。 ６ 预防 ６．１ 用 传 鼻 疫 苗 在 ５５ 天 预 防 ， 一次滴鼻。按每只鸡 １．５ 羽， 起到预 防作用。 ６．２ 平 日 用 抗 生 素 消
用 效， 第一次按大肠杆菌 病和支原体病治疗， 用
磺 丁胺卡那和泰乐菌素 等， 第二次又按传染性
胺 鼻炎治疗， 用磺胺喹恶 啉和肾肿解毒药 （ 乌洛
药 治 疗
托品） 和电解同用， 起初 一两天减轻， 之后又再 次发生， 且一发不可收 拾， 现在每天死亡两只， 呼吸且肿脸蔓延。
１ 问诊 ６５ 天 时 由 原 来 育 雏
２．２ 方法二
抑菌圈变小， 能产酶的菌株更可
心 脏 和 脾 等 内 脏 器 官 放 入 平 皿 中 制。过夜培养后形成一个抑菌圈，
取病死畜禽部分肝、脾等组 破坏药物的抗菌活性。
备 用 。 采 集 的 病 料 最 好 是 典 型 的 抑 菌 圈 越 大 ， 说 明 该 菌 对 此 药 敏 织， 按 １： ５ 加 生 理 盐 水 研 磨 制 成 急性病料， 原则上采集时间越早 感性越大， 反之越小； 若无抑菌 悬液， 静置 ５ 分钟后， 用无菌吸管
在涂有细菌的琼脂平板上， 抗 筛选出的高敏药物对分离的致病 性。
１．２ 试验过程
菌药物在琼脂内向四周扩散， 其 菌有高效， 即可选择其中一种投
３．２ 细菌接种量
１．２．１ 采 集 病 料 以 无 菌 操 作 浓 度 呈 梯 度 递 减 ， 因 此 在 纸 片 周 药。
细菌接种量应恒定， 如太多，
方法用剪刀剪取病畜禽的肝脏、 围一定距离内的细菌生长受到抑
用卵黄免疫球蛋白防治
肠杆菌所导致的腹泻（ 白痢） 。 仔猪腹泻， 在疾病发生的早期
同样给新生仔猪口服大肠杆 使用效果最好， 用于卵黄抗体
菌高免卵黄液， 可明显降低仔 预防和治疗时， 都不能与疫苗
猪黄痢的发生率。再如把卵黄 同 期 接 种 ， 需 要 使 用 疫 苗 时 ，
抗体加进添加 剂 中 喂 仔 猪 ， 可 应间隔一定时间再进行。使用
常采集 ５ 份以上， 使其具有代表 细菌浓度有直接关系。
贴于标记好的琼脂 板 上 ， 置 ３７℃ 制。
性。
１．４ 判定标准
１．２．２ 实 验 方 法 在 “超 净 台 ”
药敏试验的结果， 应按抑菌
中， 用经火焰（酒 精 灯）灭 菌 的 接 种 圈 直 径 大 小 作 为 判 定 敏 感 度 高 低
环插入病料数次， 以划线方式将 的标准。药物敏感试验判定标准
３．４ 培养时间
２４ 小时判定。抑菌圈大的即为该
一般培养温度和时间为 ３７℃，
病 原 菌 对 这 种 药 物 的 敏 感 性 强 ， １２￣２４ 小时， 有些抗菌药扩散慢，
对病畜禽即选用这种药物治疗。 如多黏菌素， 可将已放好抗菌药
３ 影响药敏结果的因素
的 平 板 培 养 基 先 置 ４℃冰 箱 内 ２￣
叉感染已成为全球性的突出问
题。如何指导科学合理地抗菌治 疗及耐药监测已成为兽医工作者
的重要任务之一。而药敏试验作 为抗菌药物实验室检测的主要手
段， 在畜禽疾病的防治中显得尤 为重要。
１ 药敏试验的一般方法 １．１ 药敏试验的准备 １．１．１ 药 敏 纸 片 的 制 作 根 据 美 国 食 品 、药 品 管 理 局（ＦＤＡ）的 建 议 ， 药 敏 纸 片 为 ＰＨ 值 中 性 ， 直 径 ６．３５ 毫 米 ， 纸 重 量 与 吸 水 量 之 比 为 １∶２．５￣３．０。 用 电 子 天 平 称 取 一 定量的抗菌药原粉， 以适当溶剂 或溶媒溶解， 配成一定浓度的溶 液， 然后作倍比稀释， 制成所需的 不同浓度的稀释液， 然后， 把滤纸 片放入稀释液中， 几分钟后取出 晾干。制备后冷冻干燥密封， 置于 ２０℃保 存 备 用 。 每 次 药 敏 试 验 未 用完的纸片应放 ４℃冷藏。β－ 内酰 胺 类 抗 生 素 在 ４℃冰 箱 保 存 应 不 超过 １ 周， 否则效价下降。盛纸片 的小瓶自低温处取出应在室温放
选 择 具 有 典 型 病 变 的 病 料 ， 腺 嘧 啶 核 苷 和 对 氨 苯 甲 酸 （ＰＡ－
王立芹 徐振华 ２７１０００ （ ０７Ｂ２２３０）
２００７ 年 １ 月 １５ 日 ，
在北京市怀柔区一户饲
走 养 了 ５００ 只 ８５ 天 海 兰 褐鸡的畜主邀我去他家
出 给鸡看病。原来他已找 当地兽医治两次均不见
清华东路 ２ 号金码大厦 Ａ 座 ８ 层 （ 中国农大东校区）
李广顺 １０００８３ （ ０４Ｂ９８０）
１ 卵黄抗体的使用方法 制品， 已有商品卵黄抗体面
预防仔猪大肠杆菌腹泻， 世， 使用时详见说明。
可用免疫获得的抗产肠毒素
２ 使用卵黄抗体的注意事
大肠杆菌的抗体卵黄免疫蛋 项
白， 来喂新生仔猪， 可防止大
不敏
高 压 蒸 气 火 菌 器 、接 种 环 、剪 刀 、 １２￣２４ 小时后观察效果。
片， 革兰氏染色及镜检， 如检出的
镊子、酒 精 灯 、营 养 琼 脂 、平 皿 、三 角 瓶 、电 炉 等 。
１．３ 结果观察
两 种 菌 形 态 、 大 小 完 全 一 致 说 明 ＢＡ） 能 拮 抗 磺 胺 药 和 ＴＭＰ 的 活
提 高 仔 猪 的 平 均 日 增 重 、饲 料 卵 黄 抗 体 的 同 时 ， 也 不 能 与 抗
采食量和饲料报酬， 能明显减 生素类药品搭配使用， 以免降
少仔猪的下痢。使用方法， 一 低或失去卵黄抗体的防制效