磁珠分选ppt课件
BD磁珠分选
MACS磁珠系统（附BD IMag介绍）一、免疫磁珠法分离细胞原理免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。
二、免疫磁珠法分为阳性分离法和阴性分离法1、阳性分离法磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞2、阴性分离法磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。
三、磁分离细胞的重要指标纯度和得率，这取决于磁珠所连接单抗的特异性和磁珠大小（磁性），然而太大的磁珠会影响细胞活性，也无法直接上流式。
四、目前市场上有2种磁性细胞分离系统1、Small particles (≈50 nm)－ MACS2、Large particles (1200~4500 nm) －others（如Dynal）五、小磁珠1、优点（1）对细胞温和，不影响分离细胞的后续培养。
（2）可直接上流式检测，不影响散射光。
2、缺点（1）需要很强的磁场来分离细胞。
（2）分离速度很慢，得率不高。
（3）一次性的分离柱，不能在普通试管进行。
（4）成本昂贵。
六、大磁珠1、优点（1）技术简单，分离可在试管中完成。
（2）易于增减细胞用量。
（3）速度快，得率高（4）成本低2、缺点（1）对细胞造成机械压力，影响其生物学活性，不利于分离后培养。
（2）纯度低。
（3）容易阻塞FCM的喷嘴。
七、BD™ Imag磁珠1、大小在0.1－0.45mm。
2、包被了BD Pharmingen生产的高质量单抗。
3、磁珠已为白细胞亚群的阳性和阴性分离法所优化。
4、用于BD™ IMagnet direct magnet。
将包被了特异性单抗的BD IMag磁珠加入细胞悬液，磁珠特异性地与有相应抗原的细胞亚群结合，通过BD™ IMagnet direct magnet分离得到的连有BD IMag磁珠的细胞可直接用于功能试验和用流式细胞仪检测。
免疫磁珠技术ppt课件
O 保护性壳可防止磁性内核漏出或被载液腐蚀； O 免疫配基可特异性地结合反应体系中相应的抗原、抗
体、核酸等生物活性物质。
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1.1.2 免疫磁珠的性质
O 由于免疫磁珠的大小和形状具有均一性， 从而可使 靶物质迅速和有效地结合到磁珠上，也可使生成的新 复合物在磁场中具有相同的磁响应性，且行为一致
O 磁珠的球形结构可消除与不规则形状粒子有关的非特 异性结合
工作量大等缺点。
采用免疫磁珠技术，能够快速地从各种食品样 品中分离富集E.coli O157∶H7，满足流行病学 的研究要求和提高控制力度。
现在这种免疫磁珠的方法已经被英国公共健
康服务实验室认定为标准的分离方法，我国也
已将免疫磁珠法对大肠杆菌O157的检测纳入
国家标准 (GB/T 4789.36-2008 ) 和出入境检
验检疫行业标准(SN/T 1059.5-2006)。
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检样
25g(mL)+225mL改良EC肉汤(mEC+n)，均质225mL
↓ 36±1oC
18h~24h
免疫磁珠捕获
1.2 免疫磁珠技术
O 免疫磁珠( immunomagnetic bead, IMB)技术： 是 一种以特异的抗原抗体反应为基础的免疫学检测和分 离技术。它是以抗体包被的磁珠为载体，通过抗体与 反应介质中特异性抗原结合，形成抗原—抗体复合物， 此复合物在外加磁场的作用下发生定向移动，从而达 到分离抗原的目的。
磁珠分选t细胞
磁珠分选t细胞1. 磁珠分选t细胞的原理和方法磁珠分选是一种常见的细胞分选技术，通过利用磁性的珠子特异性地结合到特定的细胞表面标记物上，然后通过磁力的作用将目标细胞分离出来。
在T细胞分选中，可以利用特殊的抗体来标记T细胞表面上的CD3、CD4、CD8等抗原，然后再使用特定的磁珠将标记物和目标细胞结合。
最后，利用磁力分离，就可以获得高纯度的T细胞。
2. T细胞分选的研究进展随着近年来免疫治疗和细胞治疗的兴起，T细胞分选技术也得到了广泛应用。
特别是在肿瘤免疫治疗中，利用CAR-T细胞和TCR-T细胞等细胞治疗手段，可以得到很好的临床疗效。
因此，T细胞分选技术的研究也变得越来越重要。
目前，针对T细胞的分选技术已经有了很多进展，如流式细胞仪、磁珠分选、微流控芯片、光学分选等。
其中，磁珠分选技术在T细胞体外扩增和临床治疗等领域得到了广泛应用。
3. 磁珠分选在T细胞治疗中的应用磁珠分选技术在T细胞治疗中的应用主要包括两个方面：一是体外扩增中的分选，二是治疗细胞产品的分选。
体外扩增中的分选：在体外扩增T细胞时，需要从淋巴细胞中选择和分离出T细胞，同时排除其他免疫细胞。
磁珠分选技术可以帮助实现高效分选，并获得高纯度的T细胞，从而提高体外扩增的效率和规模。
治疗细胞产品的分选：在CAR-T细胞和TCR-T细胞等治疗细胞产品中，需要分离出目标T细胞并通过磁珠分选获得高纯度的治疗细胞。
此外，治疗细胞产品的分选也可以用于排除其他污染物，如病毒、细菌等。
4. 磁珠分选T细胞的优缺点优点：1.高效、快速：磁珠分选技术可以非常迅速地获得纯度较高的目标细胞，从而节省时间和成本。
2.高纯度：使用磁珠分选技术可以获得高度纯化的细胞，从而提高了治疗效果和安全性。
3.对细胞活性无影响：分选过程中不需要进行细胞培养等处理，从而保证了目标细胞的活性和功能。
缺点：1.标记物有限：目前可以使用的标记物数量有限，不能针对所有细胞进行磁珠分选。
2.影响细胞表面：磁珠分选的过程可能会对细胞表面结构产生不良影响，从而影响细胞的功能。
细胞 磁珠分选
细胞磁珠分选细胞磁珠分选细胞磁珠分选是一种基于细胞表面标记物的分选技术，利用磁珠的特殊性质实现对目标细胞的精确分离和富集。
该技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。
一、细胞磁珠分选的原理细胞磁珠分选技术的核心是利用磁珠与目标细胞表面特异性标记物的结合，通过磁力的作用将目标细胞与其他非目标细胞分离。
通常，磁珠表面会修饰有与目标细胞表面标记物相互作用的抗体、配体或其他亲和分子。
当这些磁珠与细胞悬液混合时，目标细胞会与磁珠发生特异性结合，形成复合物。
通过外加磁场，可以将带有目标细胞的磁珠复合物分离出来，从而实现对目标细胞的富集和分离。
二、细胞磁珠分选的优势相比传统的细胞分选方法，细胞磁珠分选具有以下几个显著优势：1. 高纯度：由于细胞磁珠分选是基于目标细胞表面标记物的特异性结合，可以实现对目标细胞的高度纯化。
与传统方法相比，磁珠分选可以有效地去除非目标细胞，提高纯度。
2. 高通量：细胞磁珠分选技术可以实现对大量样本的快速处理。
通过自动化设备的使用，可以同时处理多个样本，提高实验效率。
3. 无损伤：细胞磁珠分选技术基于细胞表面标记物的识别，不需要对细胞进行染色或荧光标记，避免了对细胞的损伤。
4. 多样性：细胞磁珠分选技术可以根据不同的研究目的选择不同的磁珠，并与其他技术相结合，实现对不同类型细胞的分选。
三、细胞磁珠分选的应用领域细胞磁珠分选技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。
以下是该技术在不同领域的应用示例：1. 癌症研究：细胞磁珠分选可以用于从癌症组织中富集和分离肿瘤细胞，进一步研究其生物学特性和致病机制，为癌症的诊断和治疗提供依据。
2. 免疫学研究：细胞磁珠分选可用于分离和纯化免疫细胞亚群，如淋巴细胞、单核细胞等，进一步研究其功能和相互作用机制。
3. 干细胞研究：细胞磁珠分选可以用于从组织中富集和分离干细胞，进一步研究其分化潜能和应用前景。
4. 微生物学研究：细胞磁珠分选可用于富集和分离微生物，如细菌、病毒等，研究其生物学特性和致病机制。
磁珠法核酸提取新篇章PPT课件
优点
1. 生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应，可高效核酸提取，满足微量生物样 本核酸提取的要求。
2.不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂，安全无毒，绿色环保。 3.生物磁珠能够通过仪器进行自动化操作，满足数据库建设对大批量样本提
取的需要，减少人为因素 4.用时少，操作简单，适用于大多数生物检材。 5.全自动核酸提取最大限度地减少了操作人员与检测的接触，可有效保护实
全血试剂盒
临床疾病诊断：人类的很多疾病和基因密切相关，白血病、地中海贫血、 肾衰竭等都能用基因技术进行分型检测，再寻找合适的供体进行移植 治疗；叶酸代谢能力基因检测；DNA亲子鉴定；胎儿性别检测
动物疾病检测：布鲁菌病（brucellosis，布病），也称波状热，是布鲁 菌引起的急性或慢性传染病，人畜共患病。
验操作人员。
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感谢您的观看！
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离心柱法提取DNA
集液管 纯化柱
硅胶滤膜
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磁珠法提取DNA
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裂解
使核酸 游离出 来
结合
加入磁珠， 使核酸与 其结合
洗涤
洗去残 留杂质
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洗脱
将核酸从 磁珠中分 离出到溶 液
纯化
分离磁 珠，得 到高纯 度核酸 溶液
比较（以全血为例）
2
氨基磁珠 经活化以后，可以偶 联上抗体，作为免疫 磁珠使用。
此产品主要应用于核 酸提取
免疫检测、免疫诊断
3
羧基磁珠 经活化后，可以偶联 上抗体，作为免疫磁 珠使用。
免疫检测、免疫诊断
《抗干扰磁珠的选择》课件
详细描述
由于抗干扰磁珠具有优异的电磁屏蔽性能，可 以在一定程度上降低线缆的制造成本，同时减 少后期维护和更换的频率。
抗干扰磁珠在无线通信系统中的应用
总结词
提高通信质量和稳定性
详细描述
在无线通信系统中，抗干扰 磁珠可以有效地吸收和反射 电磁波，降低电磁干扰对通
信质量和稳定性的影响。
总结词
增强信号覆盖范围
抗干扰磁珠的应用领域
通信领域
用于通信设备的信号传 输线路中，抑制外部电 磁干扰，提高信号传输
质量。
电力电子
应用于各种电源电路中 ，防止电磁噪声对电子
设备的干扰。
汽车电子
用于汽车电子控制系统 中，提高电子元件的抗
干扰能力。
军事领域
用于军事设备的电磁屏 蔽和干扰抑制，提高设 备的可靠性和安全性。
抗干扰磁珠的重要性
拓展应用领域和市场
探讨了抗干扰磁珠在更多领域的应用可能性，如新能源汽 车、物联网、智能家居等新兴领域，以及如何拓展国际市 场和提高国际竞争力。
THANKS.
抗干扰磁珠的评估标准
磁场强度
根据应用需求选择合适的磁场强 度，以满足系统要求。
电磁屏蔽性能
根据电磁干扰的频率和强度，选 择具有足够屏蔽效果的抗干扰磁
珠。
温度稳定性
根据工作环境的温度变化范围， 选择具有良好温度稳定性的抗干
扰磁珠。
抗干扰磁珠的实际
05
应用案例
抗干扰磁珠在电源电路中的应用
总结词
有效降低电磁干扰
详细描述
抗干扰磁珠可以增强无线信号的覆盖范围 ，特别是在复杂环境和建筑物内部，能够 提高无线通信的可靠性和稳定性。
总结词
降低能耗和延长电池寿命
磁珠分选柱式
磁珠分选柱式
磁珠分选柱式是一种常用的实验仪器，它在生物医学领域中扮演着重要的角色。
该装置通过利用磁珠的磁性特性，将样品中的目标物分离出来，实现对样品的快速分选。
磁珠分选柱式由磁珠分选柱和磁性材料组成。
磁珠分选柱内部填充有磁性材料，通常是强磁性材料。
当样品通过磁珠分选柱时，目标物会与磁珠结合，而非目标物则会被排除。
通过控制磁珠分选柱的磁性，可以实现对不同目标物的分离。
磁珠分选柱式的使用非常简便。
首先，将待分选的样品加入到磁珠分选柱中，然后利用外部磁场的作用，使磁珠与目标物结合。
接下来，将磁珠分选柱放置在磁性材料上，通过磁性材料的吸引力，将磁珠与目标物一起分离出来。
最后，将磁珠从磁珠分选柱上取下，即可得到纯净的目标物。
磁珠分选柱式在生物医学研究中具有广泛的应用。
例如，在肿瘤检测中，磁珠分选柱可以用于分离和富集肿瘤细胞，从而实现早期诊断和治疗。
此外，在基因测序中，磁珠分选柱可以用于从样品中分离和富集目标DNA，以便进一步分析。
磁珠分选柱式还可以应用于蛋白质纯化、细胞分离等领域。
磁珠分选柱式是一种重要的生物医学实验仪器，它通过利用磁性特性，实现对样品中目标物的快速分选。
该装置简便易用，广泛应用
于肿瘤检测、基因测序、蛋白质纯化等领域。
磁珠分选柱式的使用为科研人员提供了方便快捷的实验手段，对于推动生物医学研究具有重要的意义。
高频磁珠(共7张PPT)
磁珠有很高的电阻率和磁导率，他等效于电阻和电感串联，但电阻值和电感值都随频率变化。
• 磁珠由氧磁体组成，电感由磁心和线圈组成，磁珠 高频磁珠粉料目前主要有两种生产工艺：一种是传统的机械造粒工艺；
高频磁珠
科翔磁环 整理
高频磁珠应用
• 磁珠有很高的电阻率和磁导率，他等效于电阻和电 感串联，但电阻值和电感值都随频率变化。 他比普
通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻 他比普通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗，从而提高调频滤波效果。 性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗 磁珠由氧磁体组成，电感由磁心和线圈组成，磁珠把交流信号转化为热能，电感把交流存储起来，缓慢的释放出去。
磁珠由氧磁体组成，电感由磁心和线圈组成，磁珠把交流信号转化为热能，电感把交流存储起来，缓慢的释放出去。
，从而提高调频滤波效果。 磁珠有很高的电阻率和磁导率，他等效于电阻和电感串联，但电阻值和电感值都随频率变化。
磁珠有很高的电阻率和磁导率，他等效于电阻和电感串联，但电阻值和电感值都随频率变化。
• 作为电源滤波，可以使用电感。磁珠的电路符号就是电 他比普通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗，从而提高调频滤波效果。
高频磁珠生产
• 高频磁珠粉料目前主要有两种生产工艺：一种是传 统的机械造粒工艺；一种是后来发展的喷雾造粒工 艺。
高频磁珠安装
磁珠有很高的电阻率和磁导率，他等效于电阻和电感串联，但电阻值和电感值都随频率变化。 他比普通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗，从而提高调频滤波效果。 他比普通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗，从而提高调频滤波效果。 磁珠由氧磁体组成，电感由磁心和线圈组成，磁珠把交流信号转化为热能，电感把交流存储起来，缓慢的释放出去。 高频磁珠粉料目前主要有两种生产工艺：一种是传统的机械造粒工艺； 他比普通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗，从而提高调频滤波效果。 他比普通的电感有更好的高频滤波特性，在高频时呈现阻性，所以能在相当宽的频率范围内保持较高的阻抗，从而提高调频滤波效果。
磁珠分选原理及应用
磁珠分选原理及应用磁珠分选是一种利用磁性微珠与目标分子的相互作用来实现分离和富集的方法。
磁珠是一种具有高度磁响应性的微珠，通常由磁性材料（如硅酸铁）和聚合物（如聚丙烯酸）复合而成。
通过磁性微珠与目标分子之间的特异性结合，可以实现目标分子的高效分离和富集。
磁珠分选的原理基于磁性微珠的特异性结合。
磁性微珠可以通过特异性抗体、寡核苷酸、亲和配体等多种方式与目标分子结合。
当磁性微珠与目标分子结合后，可以通过外加磁场将磁性微珠与非结合物质分离开来。
通过控制磁场的力度和方向，可以调控磁性微珠与目标分子的相互作用，实现目标分子的分离和富集。
磁珠分选的应用领域非常广泛。
其中，生物医学领域是磁珠分选的主要应用之一、通过将磁性微珠与特异性抗体结合，可以实现对生物样品中特定目标分子的高效分离和富集。
例如，在肿瘤标志物的检测中，可以通过磁珠分选技术快速富集肿瘤标志物，提高检测敏感性。
此外，磁珠分选还可以应用于基因诊断、药物筛选、蛋白质纯化等领域。
另外，环境监测和食品安全领域也是磁珠分选的重要应用领域。
通过将磁性微珠与污染物或有害物质的特异性结合，可以实现对环境水样、土壤样品以及食品样品中有害物质的高效分离和富集。
例如，通过将磁性微珠与重金属离子结合，可以实现对水样中重金属的高效富集和分离。
此外，磁珠分选还可以应用于工业领域。
在化学合成中，可以利用磁珠分选技术对产物进行分离和富集，提高产物纯度和产率。
在纳米材料合成中，可以通过磁珠分选技术实现纳米颗粒的分离和富集，提高纳米材料的制备效率和品质。
总之，磁珠分选是一种利用磁性微珠与目标分子的特异性结合来实现分离和富集的方法。
它具有高效、快速、灵活等特点，广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。
随着技术的不断发展和完善，磁珠分选在各个领域的应用前景将会更加广阔。
固体废弃物磁力分选ppt课件
磁流体动力分选(MHDs)
原理：在均匀或非均匀磁场与电场的联合作用下， 以强电解质溶液为分选介质，按固体废物中各组 分间密度、比磁化率和电导率的差异使不同组分 分离。 研究历史较长，技术也较成熟，
磁流体动力分选(MHDs)
优点：是分选介质为导电的电解质溶液，来源广、价格便 宜、粘度较低．分选设备简单，处理能力较大，处理粒度 0.5~6mm的固体废物时，可达50t／h，最大可达 100~600t／h。 缺点：分选介质的视在密度较小，分离精度较低。
磁流体静力分选(MHSS)
原理：在非均匀磁场中，以顺磁性液体和铁磁性胶体悬浮液 为分选介质，按固体废物中各组分间密度和比磁化率的差异 进行分离。 特点：由于不加电场，不存在电场和磁场联合作用产生的特 性涡流，故称为静力分选。
磁流体静力分选(MHSS)
优点：视在密度高，如磁铁矿微粒制成的铁磁性胶体悬浮液 视在密度高达19000kg／m3，介质粘度较小，分离精度高。 缺点：分选设备较复杂，介质价格较贵，回收困难，处理能 力较小。
选择： 要求分离精度高时．采用静力分选； 固体废物中各组分间电导率差异大时，采用动力分选。
分选介质
理想的分选介质应具有特性条件： • 磁化率高 • 密度大 • 粘度低 • 稳定性好 • 无毒、无刺微味、无色透明 • 价廉易得
资金是运动的价值，资金的价值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
• 特点：
(三)磁流体分选设备及应用
• 磁系属于永磁
• 分离密度较高的物料时，磁系用钐—钴合金磁铁
• 分离密度较低的物料时，磁系用锶铁铁氧体磁体
• 这种分选槽使用的分选介质是油基或水基磁流体。
免疫磁珠分选步骤
免疫磁珠分选步骤
准备工作
1：用pH=7.2的P-8读BS配置0.5%的BSA和2mMEDTA,用以稀释分选缓冲液（1:20）
2：准备碎冰，让所有操作均在4-8℃完成
样本制备
1：制备单细胞悬液（用30um的尼龙网过滤，避免堵塞柱子）（过滤前先用缓冲液湿化过滤器）
2：加入缓冲液清洗细胞，并离心(300g,10min)( 4-8℃)
3:加入缓冲液重选细胞单细胞悬液，
4：再次用30um的尼龙网过滤，避免堵塞柱子）（过滤前先用缓冲液湿化过滤器）
5：细胞计数
6：离心(300g,10min)( 4-8℃)后去掉上清
9：加入80ul/107个细胞的缓冲液
10：加入20ul/107个细胞的CD117
11：4-8℃混匀放置15分钟
12：加入1ml/107个细胞的缓冲液清洗细胞并离心(300g,10min，4-8℃)
13：重选细胞加入500ul/108个细胞的缓冲液
14：准备好分离柱，并用缓冲液清洗MS用500ul.
15:把细胞悬液倒入柱子中
16：用500ul的缓冲液冲洗柱子，（每次液体无残留时再加入新的液体）共三次
17：将柱子移开磁场到一合适的容器中，用1mL缓冲液稍用力冲洗，。
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素微珠、抗荧光素微珠 • 多选微珠:专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。 这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联， 在第一次阳性分选完成后， 与细胞结合的多选微珠 可以被解离试剂剪切下来， 阳性分选的细胞可以进行 再次阳性分选或者去除分选。
.
MACS分选策略
• 阳性分选 • 去除分选 • 复合分选
。
.
• 阳性分选中，目的细胞被磁性标记后，作 为阳性标记组分直接分选出来。阳性分选 策略优点：纯度高，回收率高，操作迅速、 简便
.
• 去除分选是把非目的细胞磁性标记后从细 胞混合物中去除的方法，即未磁性标记的 细胞为目的细胞。
.
去除分选策略适用范围
.
• MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的 塑料容器，铁珠表面有亲水包被
.
• MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。与 分选柱一起组成高强度的梯度磁场。根据 应用范围分为研究用和临床应用的MACS分 选器，根据操作方式分为手动和自动分选 器。
.
MACS技术优点
1、MACS微珠由氧化铁和多聚糖组成，直径 只有50nm，体积大约为真核细胞的百万分 之一。 2、微珠易于降解，对细胞无毒性，分选后 细胞仍旧保持生理功能。 3、与流式细胞仪兼容，分选后细胞可以立 即用于分析和后续实验。 4、高纯度、高回收率、高活性。
.
谢谢
.
•
.
其他磁分选产品
Dynal 大磁珠 后续应用研究，如流式细胞术，则需要将
Dynabeads 与靶细胞分离。 适用于高频细胞
stemcell
.
MACS 与FACS
• MACS相比FACS的优点： 1， 适合大批量的细胞分选，FACS分选速度相对而言要慢很多； 2，稳定性高，重复性强，而FACS由于机器运行时间长会导致参数漂 移故而实际获取得靶细胞阳性率会大大下降； 3，无须大型设备，普遍适合大多数实验室的细胞分选工作； 4，操作简单，无须专门的设备操作人员（FACS操作需要一定的经 验）。 FACS相比MACS的优点： 1，少量细胞分选时比MACS精确得多，速度也快； 2，可以多个marker分选、正选负选同时进行（比如 CD117+/CD90lo/Sca-1+/CD45-），而MACS一般只能进行阳选或阴选， marker往往同时只能做一个（或一类）； 3，抗体可以用荧光直接标的，也可用间标的（最好是厂家标明可以 用于FACS），选择余地大，但是MACS的抗体往往需要和磁珠配套，选 择余地小。
.
MACS微珠
• 与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微 粒
• 直径约有50nm • 无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解 • 不影响细胞的光散射特性 • 磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响
细胞的荧光抗体标记。 • 最大限度地避免细胞活化； • 无需解离磁珠
.
Hale Waihona Puke MACS微珠主要有三种：• 去除不需要的细胞； • 缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤
细胞）； • 不需要抗体和目的细胞结合，即细胞不被
激惹（如T细胞、B细胞、NK细胞功能分 析）； • 复合分选的一部分。
.
联合使用两种以上分选策略，主要用于细胞亚群的分选或者得 到高纯度非常稀有的细胞。
.
适用范围：
（1）非目的细胞也表达用来阳性选择的抗 原 （2）分选非常稀有细胞，先去除非目的细 胞再行阳性分选，可获得高纯度的稀有目 的细胞。
免疫磁珠分选技术
.
技术原理
MACS（磁性细胞分选技术）是一种广泛用 来磁性分选多种细胞或者生物分子的技术。 • 基于抗体对抗原的特异性识别
• 磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上， 从而与细胞相连
• 在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性 分离的目的
.
.
组成成分
• MACS微珠 • MACS分选柱 • MACS分选器
.
步骤
• 查找合适的磁珠：首选直标磁珠，试剂盒 • 仔细阅读说明书，根据分选总细胞数，目
的细胞数选择合适的柱子。合适的柱子对 应合适的分选器 • 按照说明书进行操作
样本制备：制备单细胞悬液 磁珠标记：将磁珠与细胞共孵育 过柱：洗柱---上柱------洗脱
.
关键环节
1.抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合.因而分选前去除死细胞; 2.上分离柱前,充分振荡,混悬细胞,打散细胞团块; 3.用分离柱分选, 减少水中气泡,使分离柱不被气泡阻滞; 分选过程中不能干柱 4.细胞悬液加入分离柱中时,应将滴管伸至底壁后加入,避免将细悬液沿管壁流入,使管壁残流末 分选细胞,以致后继洗柱过程中,因疏忽末被洗下,最后导致纯度不高.洗柱时,应在前次液体充分 流尽后,再加洗液. 5.分选细胞量应根据说明书控制,不超量;细胞计数准确 6.孵育时间和温度应按说明书进行,延长孵育时间、提高温度会增加非特异结合; 7.先用抗体阻断Fc受体,可降低非特异性结合 8.分选温度：低温。预冷分离液