第10章 吸光光度法
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2018/11/12 3
分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
3. 波粒二象性
c E=h = h n
长(频率越低)，光量子的能量越低。
结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 单色光：具有相同能量(相同波长)的光。
混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在
一起。
电磁波谱的波段如何划分?
2005-8-30
第10章
吸光光度法
10.1 吸光光度法概述
一、方法与特点
吸 光 光 度 法 (Absorption Photometry) 是 一 种 基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一种 分析方法。 特点： (一)灵敏度高 测定下限可达10-4%～10-5% (二)准确度较高 相对误差2～5％(1～2％) (三)操作简便，测定速度快 (四)应用广泛
第10章 吸光光度法 第十八章 吸光光度法
第10章 吸光光度法
10.1 吸光光度法概述 10.2 物质对光的选择性吸收
目 录
10.3 10.4 10.5 10.6
2018/11/12
光吸收的基本定律
吸光光度法及其仪器
光度法分析及误差控制
光度法分析的应用
1
分 析 学习 习 分 析化 化学学 指指 导导
/
2018/11/12
16
分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
小结： （1）在T和等条件一定时，ε仅与吸收物质本 身的性质有关，与待测物浓度无关。
质的本性有 关，而与浓
度无关。可
C 作为定性的 参数。
2018/11/12
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
（1）物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最 大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。
（2）同一种物质，浓度不同,吸收曲线形状相似 λmax不变。不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax 则不同。
It
2018/11/12
I0 =Ia + It + Ir
分 析 化 学 学 习 指 导
13
第10章
吸光光度法
1) T－透光率
透光率(透射比) T = 吸光度 A = lg
It I0
I0 It
A = lg (I0/It) = lg(1/T) = -lgT
2）朗伯-比耳定律
A— 吸光度 b— 介质厚度(cm) c— 浓度 K— 吸光系数，与入射光的波 长、物质的性质和溶液的温度 等因素有关。 14
5
分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
光学光谱区 (Spectral region)
远紫外 近紫外 可见
(真空紫外)
近红外 中红外 远红外
10nm~ 200nm
200nm ~400nm
400nm ~ 750nm
750 nm 2.5 m 50 m ~ 2.5 m ~ 50 m ~300 m
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
三、电磁波谱
电磁辐射按波长顺序排列，称~。
γ射线→ X 射线→紫外光→可见光→红外光→微波→无线电波 高能辐射区 γ射线 χ射线 光学光谱区 紫外光 可见光 红外光 波谱区 微波 无线电波
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能量最高，来源于核能级跃迁 来自内层电子能级的跃迁 来自原子和分子外层电子能级的跃迁 来自分子振动和转动能级的跃迁 来自分子转动能级及电子自旋能级跃迁 来自原子核自旋能级的跃迁
A=kbc
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分 析 化 学 学 习 指 导
第A T = 10 = 10
3） 吸光系数，摩尔吸光系数
当c的单位用g· L-1表示时，用a表示， A＝abc a的单位: L· g-1· cm-1 当c的单位用mol· L-1表示时，用表示.
－摩尔吸光系数
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
二、光的基本性质
1.波动性
2.微粒性
c 光的传播速度: V = = n
光量子，具有能量。
h－普朗克(Planck)常数
E h
6.626×10-34J· s
－频率
E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为 物质定性分析的依据之一。 （4）同一种物质，λmax处吸光度随浓度变化改变 最大。此特性可作为物质定量分析的依据。
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
10.3 光吸收的基本定律
一、朗伯-比耳定律
I0 Ir
Ia b
A＝ bc
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的单位: L· mol-1· cm1
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
[例]已知含Fe2+12.5μg/25mL，用邻二氮非显色 后形成Fe(Phen)3 用2cm比色皿在λ508nm测得 A=0.19 ，求ε=？ μg· 10-6 [解 ] ——— -6 12.5· 10 (g) Fe(g/mol) 25 [Fe2+]= cFe=————— ————= ——— 25mL 1000 M —— 1000 = 8.95×10-6mol/L A 0.19 4L· -1· -1 ε= —— = = 1.1 × 10 mol cm bc 2×8.95 ×10-6
第10章
吸光光度法
/nm 400-450 450-480 480-490
颜色 紫 蓝 绿蓝
互补光 黄绿 黄 橙
白光
490-500 500-560 560-580 580-610 610-650 650-760
分 析 化 学 学 习 指 导
蓝绿 绿 黄绿 黄 橙 红
红 红紫 紫 蓝 绿蓝 蓝绿
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中层 电子
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价电 子
价电子
分子 振动
分子 振动
分子 转动
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第10章
吸光光度法
10.2 物质对光的选择性吸收
一、物质对光的选择性吸收
1、单色光与复合光 2、物质的颜色与吸收的关系 3、吸收的本质 4、原子光谱与分子光谱
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
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第10章
吸光光度法
物质的颜色是由于物质对不同波长的光有 选择性吸收而产生的。 二、光吸收曲线 物质对光的吸收情况可用吸收曲线来表征
A~λ曲线
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第10章
吸光光度法
λmax 与物
分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
3. 波粒二象性
c E=h = h n
长(频率越低)，光量子的能量越低。
结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 单色光：具有相同能量(相同波长)的光。
混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在
一起。
电磁波谱的波段如何划分?
2005-8-30
第10章
吸光光度法
10.1 吸光光度法概述
一、方法与特点
吸 光 光 度 法 (Absorption Photometry) 是 一 种 基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一种 分析方法。 特点： (一)灵敏度高 测定下限可达10-4%～10-5% (二)准确度较高 相对误差2～5％(1～2％) (三)操作简便，测定速度快 (四)应用广泛
第10章 吸光光度法 第十八章 吸光光度法
第10章 吸光光度法
10.1 吸光光度法概述 10.2 物质对光的选择性吸收
目 录
10.3 10.4 10.5 10.6
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光吸收的基本定律
吸光光度法及其仪器
光度法分析及误差控制
光度法分析的应用
1
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第10章
吸光光度法
小结： （1）在T和等条件一定时，ε仅与吸收物质本 身的性质有关，与待测物浓度无关。
质的本性有 关，而与浓
度无关。可
C 作为定性的 参数。
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第10章
吸光光度法
（1）物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最 大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。
（2）同一种物质，浓度不同,吸收曲线形状相似 λmax不变。不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax 则不同。
It
2018/11/12
I0 =Ia + It + Ir
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13
第10章
吸光光度法
1) T－透光率
透光率(透射比) T = 吸光度 A = lg
It I0
I0 It
A = lg (I0/It) = lg(1/T) = -lgT
2）朗伯-比耳定律
A— 吸光度 b— 介质厚度(cm) c— 浓度 K— 吸光系数，与入射光的波 长、物质的性质和溶液的温度 等因素有关。 14
5
分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
光学光谱区 (Spectral region)
远紫外 近紫外 可见
(真空紫外)
近红外 中红外 远红外
10nm~ 200nm
200nm ~400nm
400nm ~ 750nm
750 nm 2.5 m 50 m ~ 2.5 m ~ 50 m ~300 m
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吸光光度法
三、电磁波谱
电磁辐射按波长顺序排列，称~。
γ射线→ X 射线→紫外光→可见光→红外光→微波→无线电波 高能辐射区 γ射线 χ射线 光学光谱区 紫外光 可见光 红外光 波谱区 微波 无线电波
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能量最高，来源于核能级跃迁 来自内层电子能级的跃迁 来自原子和分子外层电子能级的跃迁 来自分子振动和转动能级的跃迁 来自分子转动能级及电子自旋能级跃迁 来自原子核自旋能级的跃迁
A=kbc
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第A T = 10 = 10
3） 吸光系数，摩尔吸光系数
当c的单位用g· L-1表示时，用a表示， A＝abc a的单位: L· g-1· cm-1 当c的单位用mol· L-1表示时，用表示.
－摩尔吸光系数
2018/11/12 2
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第10章
吸光光度法
二、光的基本性质
1.波动性
2.微粒性
c 光的传播速度: V = = n
光量子，具有能量。
h－普朗克(Planck)常数
E h
6.626×10-34J· s
－频率
E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为 物质定性分析的依据之一。 （4）同一种物质，λmax处吸光度随浓度变化改变 最大。此特性可作为物质定量分析的依据。
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第10章
吸光光度法
10.3 光吸收的基本定律
一、朗伯-比耳定律
I0 Ir
Ia b
A＝ bc
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的单位: L· mol-1· cm1
15
分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
[例]已知含Fe2+12.5μg/25mL，用邻二氮非显色 后形成Fe(Phen)3 用2cm比色皿在λ508nm测得 A=0.19 ，求ε=？ μg· 10-6 [解 ] ——— -6 12.5· 10 (g) Fe(g/mol) 25 [Fe2+]= cFe=————— ————= ——— 25mL 1000 M —— 1000 = 8.95×10-6mol/L A 0.19 4L· -1· -1 ε= —— = = 1.1 × 10 mol cm bc 2×8.95 ×10-6
第10章
吸光光度法
/nm 400-450 450-480 480-490
颜色 紫 蓝 绿蓝
互补光 黄绿 黄 橙
白光
490-500 500-560 560-580 580-610 610-650 650-760
分 析 化 学 学 习 指 导
蓝绿 绿 黄绿 黄 橙 红
红 红紫 紫 蓝 绿蓝 蓝绿
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中层 电子
2018/11/12
价电 子
价电子
分子 振动
分子 振动
分子 转动
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第10章
吸光光度法
10.2 物质对光的选择性吸收
一、物质对光的选择性吸收
1、单色光与复合光 2、物质的颜色与吸收的关系 3、吸收的本质 4、原子光谱与分子光谱
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第10章
吸光光度法
2018/11/12
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
物质的颜色是由于物质对不同波长的光有 选择性吸收而产生的。 二、光吸收曲线 物质对光的吸收情况可用吸收曲线来表征
A~λ曲线
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分 析 化 学 学 习 指 导
第10章
吸光光度法
λmax 与物