迈瑞BC-6800血细胞分析仪复检规则的建立与评价

迈瑞BC-6800血细胞分析仪复检规则的建立与评价发表时间：2018-05-07T15:13:00.203Z 来源：《医师在线》2018年2月上第3期作者：蒲雯陈卫袁露张栩晟[导读] 在复检规则建立后，应严格执行，并做好相应的记录，以便今后的统计分析以及对复检规则的进一步完善。

成都市第四人民医院检验科，四川成都 610083[摘要] 目的：建立适合本实验BC-6800血细胞分析仪的复检规则并对其进行应用评价，以保证血细胞分析结果的准确性，有利于临床的诊断和治疗。

方法：根据国际血液学委员会（ICSH）专家组推荐的国际41条复检规则和迈瑞BC-6800性能特点，结合本院的具体情况制定出25条复检规则。

通过对1050份标本进行血细胞分析仪检测，同时对违反复检规则的标本进行对应的复检，并对所有标本制作血涂片，由长期从事临检工作的主管检验师进行显微镜镜检。

最后对所有结果数据进行统计分析，对复检规则进行评价及验证。

结果：人工镜检结果与仪器检测数据相比较，复检率为17.62%，真阳性率为11.62%，假阳性率为6.00%，真阴性率为79.24%，假阴性率为3.14%，符合国际血液学复审协作组关于假阴性率小于5%的规定，在随后的验证实验中也得到证实。

结论：建立适合本实验的复检规则至关重要，本室制定的复检规则既保证了检测结果的准确性，又提高了检验人员的工作效率，能更有效地为临床提供可靠的检验报告。

[关键词] 迈瑞BC-6800；复检规则；显微镜检查随着现代检验医学的不断发展，血细胞分析技术日益革新，各类全自动血细胞分析仪已成为一种应用广泛的检测工具，不但提高了工作效率和准确度，同时也为临床提供了更多的分析参数。

仪器分析性能不断提高而检验人员缺乏对其全面的了解、日益增长的标本量、人员的配置相对不足等多方面原因，导致显微镜检查逐渐被忽视。

由于血细胞形态的多样性和复杂性，血细胞分析仪尚不具备识别血细胞形态的能力，因此对可疑标本进行显微镜复检十分重要[1]。

由于实验室人员少、工作量大，每天有数十数百甚至数千份检验报告需要按时发出，要使用规范的镜检及时发出报告难度很大，因此必须寻找一个简单、快捷的方法筛选出可疑样本，而正确的“筛选标准”是有效筛选的前提。

2005年，国际血液学复核协作组发表了“国际血液学复核共识性协作组：自动全血细胞计数和白细胞分类分析后进行复核的建议准则”，简称“血涂片复核41条国际准则”[2]。

由于血液分析仪的型号众多，其对细胞识别的能力均有差异，各个实验室的要求也不尽相同，故复检标准也应不同。

依照国际41条标准及BC-6800的性能特点，并借鉴其他实验室的经验，结合本实验室的具体情况，制定出25条复检规则并进行评估。

1 材料与方法1.1 标本来源：自2017年5月8日起，连续10天的1050份门诊和住院患者静脉血（EDTA-K2抗凝）标本共1050份，其中初检标本838例，复检标本212例。

1.2 仪器与试剂1.2.1 迈瑞BC-6800血细胞分析仪，原装配套试剂、校准品，昆涞公司生产的2个水平血细胞分析非定值质控品进行室内质控。

1.2.2 Olympus CX-31光学显微镜。

1.2.3 瑞氏-吉姆萨染液，由珠海贝索生物技术有限公司生产。

1.3 方法1.3.1 人员配置：仪器操作、涂片镜检均由经验丰富的主管检验师完成。

1.3.2 仪器准备：确保仪器定期完成校准，通过卫生部及四川省的室间质评，并按要求执行日常保养，每日室内质控情况良好，保证仪器良好的检验状态和试剂稳定。

1.3.3 样本检测：每份静脉血标本采用EDTA-K2抗凝的真空采血管采集，并在2小时内应用BC-6800血细胞分析仪通过CDC模式进行检测。

分析数据由BC-6800全自动血细胞分析软件和瑞美检验网络系统处理和保存。

1.3.4 血涂片显微镜镜检：所有样本经仪器检测后立即推片染色，每份标本制备1张血涂片，经瑞氏染色后进行血细胞形态学镜检，参照《全国临床检验操作规程》[3]。

镜检内容包括：（1）白细胞、血小板的数量评估；（2）红细胞、血小板的形态评估；（3）100个白细胞分类计数；（4）其他异常：如血液寄生虫等。

1.3.5 涂片镜检阳性判断标准：依据我国血细胞分析复核协作组关于血涂片阳性的评定标准[4]:（1）红细胞明显大小不等，染色异常红细胞>30%。

（2）巨大血小板>15%。

（3）见到血小板聚集。

（4）存在Dohle小体的细胞>10%。

（5）中毒颗粒中性粒细胞>10%。

（6）空泡变性粒细胞>10%。

（7）原始细胞≥1%。

（8）早幼/中幼粒细胞≥1%。

（9）晚幼粒细胞>2%。

（10）杆状核粒细胞>5%。

（11）异常淋巴细胞>5%。

（12）嗜酸性粒细胞>5%。

（13）嗜碱性粒细胞>1%。

（14）有核红细胞>1%。

（15）浆细胞>1%。

1.3.6 BC-6800复检规则制定:依照国际41条标准及BC-6800的性能特点，并借鉴其他实验室的经验，结合本实验室的具体情况，制定出25条复检规则,见表1。

因我室未开展网织红细胞和有核红细胞检测，故规则中未列出相关内容。

1.3.7 复检规则的评估：对每份标本的仪器检测结果和显微镜镜检结果进行统计分析，判断所制定复检规则的合理性、有效性。

以显微镜镜检结果为金标准，以本实验室25条复检规则和国际41条复检规则分别对标本结果进行判断。

符合复检规则且涂片镜检结果为阳性者为真阳性；不符合复检规则且涂片镜检结果为阴性者为真阴性；符合复检规则，但涂片镜检结果为阴性者为假阳性；不符合复检规则，但涂片镜检结果为阳性者为假阴性。

另外，符合计数类的复检规则，依据《全国临床检验操作规程》推荐的方法进行手工复查，偏差在允许范围内为阳性，超出允许范围为阴性。

评估结果以复检率、真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率来表示。

所有数据用Microsoft Excel 2007进行统计分析。

1.3.8 复检规则建立后，用200份新标本对复检规则进行验证，计算真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率。

表1 我院迈瑞BC-6800血细胞分析仪25条复检规则2结果2.1 统计1050份标本的仪器检测结果及血涂片镜检结果。

仪器检测结果符合复检规则有185例，不符合者有865例；涂片镜检阳性结果为155例，阴性结果为895例，见表2。

表2 1050份标本25条复检规则与镜检结果比较表4 25条复检规则逐条评估结果从上表可看出，25条复检规则判断出的185例阳性需复检样本中，复检率较高的分别是：第6条-MCV结果<75或>105fl （3.98%），第17条-WBC报警信息未成熟粒细胞（3.05%），第19条-WBC报警信息异型淋巴细胞（1.66%）；假阳性率最高的是：第17条-WBC报警信息未成熟粒细胞（1.14%）；假阴性率最高是：第19条-WBC报警信息异型淋巴细胞（0.95%）。

2.4 验证试验结果：对200份新标本应用BC-6800检测和涂片镜检分析，验证本实验室25条复检规则，复检率为19.00%，真阳性率为11.87%，假阳性率为7.13%，真阴性率为78.32%，假阴性率为2.68%。

其中1例急性白血病没有漏检。

对本实验室2017年6月至2017年12月的复检率进行统计，分别为19.04%、17.52%、18.16%、16.73%、16.52%、17.30%、18.72%，平均为17.71%，与验证结果相符。

3 讨论由于临床实验室所采购的血细胞分析仪多种多样，仪器的检测原理及报警信息也不尽相同，从而导致了其细胞识别的能力也存在差异。

因此，在建立实验室复检规则时，不能照搬“国际41条”或其他实验室的复检规则，而应根据仪器性能特点，以及所在实验室接收的样本特点，建立相应的复检规则。

我室建立的BC-6800复检规则（25条）的假阴性率为3.14%，符合国际血液学复审协作组关于假阴性率小于5%的规定，并在临床可接受范围，同时保证了无血液病漏检。

总体复检率为17.71%，在提高检验质量的同时，又不影响工作效率。

复检率略低于一般文献报道[6],分析原因为我院为精神专科医院，收治病人多为精神方面的疾病，故血液系统异常的病例较其他医院略少。

比较“国际41条”和本实验室25条复检规则，复检率分别为22.10%和17.62%，真阳性率分别为15.43%和11.62%，假阴性率分别为2.48%和3.14%，假阳性率分别为6.67%和6.00%，假阴性率和假阳性率均无较大差别，而复检率和真阳性率差别较大，逐个样本分析发现，复检率增加主要为WBC计数方面，“国际41条”复检规则WBC计数的下限为4.0×109/L，而根据近年来文献对WBC参考范围的相关报道[7]，我室规定的WBC计数下限调整为3.0×109/L，通过镜检评估及手工计数，均与仪器计数相符，故真阳性率提高。

通过对25条复检规则的逐条分析得出，复检率较高的是第6条-MCV结果<75或>105fl （3.98%），我院老年病人和酒精性精神病患者比例较大，易出现贫血及红细胞形态异常。

假阳性率最高的是第17条-WBC报警信息未成熟粒细胞（1.14%），根据BC-6800血细胞分析仪WBC检测原理，仪器采用核酸荧光染色和侧向散射光的原理，当外周血WBC发生变异时，其DNA/RNA含量增高，仪器将会出现错误识别；同时，为保证血液病细胞不出现漏检，仪器未成熟粒细胞报警信息的灵敏度设置较高，故复检率及假阳性率都较高，但对工作效率的影响不大，故未做出调整。

假阴性率较高是第19条-WBC报警信息异型淋巴细胞（0.95%）和第23条PLT聚集/PLT直方图异常报警，为了尽可能地避免假阴性对报告质量的影响，一方面需逐步提高仪器性能，另一方面应注重检验人员素质的培养，加强与临床沟通，做好复检工作。

在1050份标本中，通过仪器检测和复检规则的判断，检出2例EDTA依赖的PLT聚集样本，均报警提示为PLT数量减少，未提示PLT聚集或直方图异常，因此工作中应特别注意PLT计数减少及前后差别较大的样本，并在分析出原因后及时与临床沟通，做好样本采集及送检注意事项的沟通；另1例为嗜碱性粒细胞比例增高（8.3%）的样本，涂片镜检提示嗜碱性粒细胞比例正常，而异型淋巴细胞细胞比例为7%，与仪器嗜碱性粒细胞的检测原理局限性有关[8]。

综上所述，复检规则的建立既要保证检验结果的准确性，降低漏检率，确保血液病的检出，同时要保证工作效率，考虑检验人员的工作量。

针对不同的医院、不同的患者类型、不同的仪器型号，对复检规则进行修正，建立起适合自己的复检规则，提高检验报告的准确性。

在复检规则建立后，应严格执行，并做好相应的记录，以便今后的统计分析以及对复检规则的进一步完善。