病理切片的特殊染色方法

1、Van Gieson苦味酸与酸性品红法

【染色方法】

(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片;

(2)组织切片脱蜡至水;

(3)用Van Gieson液染1～5分钟;

(4)倾去染液,直接用95％乙醇分化与脱水;

(5)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

【结果】胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。

2、Masson氏结缔组织三合染色法

【染色方法】

(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;

(2)0、2％冰醋酸水溶液浸泡片刻;

(3)Masson氏染色液中5分钟或更长时间;

(4)0、2％冰醋酸水溶液浸泡片刻;

(5)5％磷钨酸水溶液2～3分钟,再入0、2％冰醋酸水溶液浸洗

(6)投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间;

(7)再入0、2％冰醋酸水溶液浸洗片刻;

(8)脱水、透明与封固。

【结果】胞浆与神经胶质纤维染红色,胶原纤维染绿色。

【染色方法】

(1)石蜡切片、脱蜡至水;

(2)0、25％高锰酸钾液3分钟;

(3)蒸馏水洗2次;

(4)1％草酸漂白即可;

(5)蒸馏水洗2次;

(6)2、5％铁明矾水溶液媒染5～10分钟,蒸馏水洗多次;

(7)二氨氢氧化银浸染1分钟,蒸馏水洗3次;

(8)10％甲醛液还原2分钟,蒸馏水洗3次;

(9)0、2％氯化金液调色1～2分钟,蒸馏水洗3次;

(10)5％硫代硫酸钠固定5分钟;

(11)蒸馏水洗,需要时复染;

(12)水洗、脱水、透明与封固。

【结果】网状维呈黑色,其她组织呈复染得颜色。

显示弹性、胶原纤维得双重组合染色法

【染色方法】

(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;

(2)切片入70％乙醇中洗2分钟;

(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0、5～2小时;

(4)直接入95％乙醇中分色数秒钟;

(5)浸入蒸馏水洗2分钟;

(6)用丽春红S液滴染切片5分钟;

(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次;

(8)将切片在空气中或冷风干燥;

(9)二甲苯透明,中性树胶封固。

【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。

【染色方法】

(1)冰冻切片厚度8～15μm;

(2)Harris苏木素,染约1分钟;

(3)自来水洗后,用0、5％盐酸乙醇分化,再水洗直至胞核返蓝为止;

(4)蒸馏水洗后移入70％乙醇内浸洗一下;

(5)浸入苏丹III染液中约30分钟或更长时间(如果置于56℃温箱中可适当缩短时间);

(6)在70％乙醇分化数秒钟;

(7)待切片在空气中稍凉干或用冷风机吹干;

(8)及时用明胶甘油封片。

【结果】脂肪呈橘红色,脂肪酸不着色,胞核淡蓝色。

高碘酸－Schiff(Periodic acid Schiff,PAS)染色法

【染色方法】

(1)切片脱蜡至蒸馏水;

(2)浸入高碘酸氧化液中10～20分钟;

(3)蒸馏水洗2次;

(4)Schiff液染色10～30分钟;

(5)流水冲洗5分钟;

(6)用苏木素染细胞核3～5分钟;

(7)在盐酸酒精中分化,自来水洗至细胞核变蓝为止;

(8)脱水、透明与封固。

【结果】糖原与粘蛋白呈紫红色,细胞核染蓝色,霉菌也呈紫红色等。

【染色方法】

(1)切片入二甲苯,后递次向下直到入水;

(2)3％冰醋酸溶液3分钟;

(3)在奥辛兰溶液中染5分钟;

(4)入3％冰醋酸3分钟,蒸馏水洗(3次);

(5)用1％过碘酸处理10分钟,蒸馏水洗;

(6)入Schiff液10～30分钟;

(7)流动自来水洗10分钟;

(8)逐级酒精脱水,二甲苯透明;

(9)中性树胶封固。

【结果】酸性粘多糖染兰色;中性粘蛋白染品红色;中性与酸性粘蛋白混合物染紫色。

Mallory磷钨酸－苏木素染色法PTAH

【染色方法】

(1)切片脱蜡至水;

(2)在酸性高锰酸钾液中氧化5～10分钟;

(3)自来水充分洗,蒸馏水洗2次;

(4)用1％草酸液漂白2分钟;

(5)自来水洗,蒸馏水洗2次;

(6)浸入MalloryPTAH液中12～48小时;

(7)直接用95％乙醇分化;

(8)无水乙醇急速脱水,二甲苯透明与树胶封固。

【结果】胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维素、横纹肌等均呈蓝色;胶质纤维、网状纤维、软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色;粗弹力纤维有时被染成微紫色;有缺血缺氧早期病变得心肌呈紫蓝色或棕黄色。

【染色方法】

(1)石蜡切片,脱蜡至水;

(2)在1％刚果红水溶液中1小时或更长时间;

(3)投入饱与碳酸锂水溶液中15秒钟;

(4)用80％酒精分化,直至无多余燃料溜下为止;

(5)水洗后用苏木素进行核染色;

(6)等干后进行二甲苯透明与树胶封固。

【结果】淀粉样物质呈红色,细胞核呈兰色。

【染色方法】

(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;

(2)0、2mol／L醋酸缓冲液洗2次;

(3)将切片置入1％硝酸银液内1小时左右(温箱56℃);

(4)直接把切片取出,立即浸入显影液内2～3分钟;

(5)将切片浸入56℃蒸馏水中洗1～2分钟;

(6)蒸馏水洗1次;

(7)无水乙醇脱水,二甲苯透明与中性树胶封固。

【结果】胃幽门弯曲菌呈棕黑色或黑色,背景呈淡黄色。

【染色方法】

(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;

(2)用1％甲苯胺蓝水溶液置于50～60℃温箱内浸染20～40分钟;

(3)蒸馏水稍洗;

(4)95％乙醇迅速分化;

(5)无水乙醇脱水,二甲笨透明,中性树胶封固。

【结果】尼氏小体紫蓝色,胞核棕红色。

【染色方法】

(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;

(2)投入新鲜配置得20％盐酸与10％亚铁氰化钾等量混合液(用前过滤)中30分钟,必要时可延长时间;

(3)蒸馏水洗;

(4)在0、5％得碱性品红(溶剂为50％酒精)进行1分钟对比染色;

(5)在95％酒精中分化后晾干,透明,封固。

【结果】含铁血黄素呈蓝色,血棕色素呈红色。

【染色方法】

(1)石蜡切片,脱蜡至水;

(2)投入硝酸银染色液中,并置于暗处12～18小时;

(3)蒸馏水洗2分钟;

(4)以0、2％氯化金水溶液增色5－10分钟;

(5)蒸馏水洗;

(6)投入5％硫代硫酸钠水溶液2分钟;

(7)自来水洗;

(8)如需复染,可用苏木素－伊红染色法;

(9)酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。

【结果】黑色素呈黑色。