资料-多糖含量测定的各种方法优缺点

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多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述多糖是一类具有多种生物活性的化合物,广泛存在于植物、真菌和藻类等生物体中。

由于其具有抗氧化、抗炎、调节免疫功能等多种生物活性,因此对多糖含量的测定具有重要意义。

目前,常用的多糖含量测定方法主要包括酚-硫酸法、酚酸法、甲醇-硫酸法、糖酶法、紫外-可见分光光度法等。

本文将对这些方法进行综述,以便更好地了解多糖含量的测定方法及其特点。

酚-硫酸法是一种常用的多糖含量测定方法。

该方法利用硫酸在酚的存在下与多糖产生浓度相关的颜色反应,然后通过测定颜色的吸光度来计算多糖的含量。

这种方法简单、快速,并且对一定范围内的多糖都有较好的灵敏度,因此被广泛应用于多糖含量的测定。

与硫酸反应产生的热量大,操作时需要小心操作,同时硫酸具有腐蚀性,易造成伤害。

因此在使用该方法时需要十分小心,并采取相应的安全措施。

甲醇-硫酸法是一种利用甲醇和硫酸处理多糖样品后,测定多糖含量的方法。

该方法可以有效地将多糖降解成单糖,然后通过测定单糖的含量来间接计算多糖的含量。

甲醇-硫酸法对多糖的种类和结构较不敏感,操作简便,因此也被广泛用于多糖含量的测定。

但是在操作中也需要小心处理甲醇和硫酸,以防造成伤害。

紫外-可见分光光度法是一种利用多糖对紫外或可见光的吸收特性进行测定多糖含量的方法。

该方法对多糖的种类和结构具有一定的选择性,可以根据样品的特性选择合适的波长进行测定,因此较为灵活。

该方法的操作简便,且测定结果稳定,因此也被广泛应用于多糖含量的测定。

除了以上介绍的方法外,还有一些其他的多糖含量测定方法,如高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等。

这些方法在特定情况下具有一定的优势,可以更准确地测定多糖的含量。

但是这些方法通常需要较为复杂的仪器设备,且操作难度较大,因此在实际应用中较少使用。

多糖含量的测定方法有多种,各有特点。

在选择方法时,需要根据具体的样品特性、实验条件和仪器设备等方面进行考量,选择合适的方法进行测定。

在进行多糖含量测定时,也需要严格操作,遵守安全规范,以确保实验的顺利进行。

四种糖的测定方法

四种糖的测定方法

4种糖的测定方法总结:1、直接滴定法。

原理为糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。

缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。

2、高锰酸钾滴定法。

所用原理同直接滴定法。

缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响,过程较为复杂,误差大。

3、硫酸苯酚法。

糖在浓硫酸作用下,脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。

苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。

缺点:如果水样呈橙红色(大部分水样为黄色),会对比色法造成较大的干扰。

4、蒽酮法糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的测定。

缺点:,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅。

综合比较;采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。

(一)直接滴定法(本法是国家标准分析方法)中华人民共和国行业标准(果汁-总糖的测定-直接滴定法)SB/T 10203-199 4Ⅰ、原理一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。

在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用标液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀,待二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定终点。

根据样液消耗量可计算出还原糖含量。

样品经除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝做指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。

多糖含量测定的几种不同方法比较

多糖含量测定的几种不同方法比较

多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要:本文综述了多糖含量测定的几种常用方法,主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。

并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。

这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考,并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。

关键词:多糖;含量;测定;方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words:polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides,PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。

多糖的测定

多糖的测定

多糖的测定是一种常见的生物化学实验,旨在确定样品中多糖的含量。

多糖是由许多单糖单元组成的碳水化合物,包括淀粉、糖原、纤维素等。

以下是多糖测定的常见方法和步骤:
1.碘滴定法:这是测定淀粉含量的常用方法。

它利用碘对淀粉蓝色复合物形
成的特征进行测量。

样品首先与碘溶液反应,形成蓝色化合物,然后根据颜
色的深浅来测量淀粉的含量。

2.酚-硫酸法:该方法用于测定糖原的含量。

它涉及将样品与酚和硫酸混合,
形成特定颜色的复合物。

这种复合物的颜色可以通过光度计或比色计来测量,以确定糖原的含量。

3.酚硫酸法:这是一种用于测定纤维素含量的常见方法。

它包括将样品与酚
硫酸混合,生成一种具有特定吸光度的化合物。

吸光度可以用光度计或比色
计测量,从而确定纤维素的含量。

4.酚-硫酸-苯酚法:这是测定葡萄糖聚合物含量的方法。

它涉及将样品与酚、
硫酸和苯酚混合,产生特定颜色的复合物。

这种复合物的颜色可以通过光度
计或比色计来测量,以确定葡萄糖聚合物的含量。

这些方法提供了测定不同类型多糖含量的有效手段,可以通过定量分析来确定样品中多糖的含量。

在实际操作中,严格遵循实验室安全操作规程以及特定的实验步骤非常重要,以确保准确和可重复的测定结果。

多糖含量测定的方法综述5篇

多糖含量测定的方法综述5篇

多糖含量测定的方法综述5篇第1篇示例:多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于自然界中的生物体内,具有重要的生物学功能。

多糖含量的测定是研究多糖在生物体内作用机制的重要手段。

本文将综述多糖含量测定的方法,旨在为研究人员提供参考。

一、概述多糖是由多个单糖单元通过糖苷键连接而成的高分子化合物。

多糖在生物体内参与多种生物学过程,如能量储存、细胞结构、免疫调节等。

测定多糖含量对于研究多糖的生物学功能、生物合成途径具有重要意义。

二、多糖含量测定方法1. 硫酸-蒽醌法硫酸-蒽醌法是一种常用于测定多糖含量的方法。

该方法通过硫酸水解多糖,生成差向性的蒽醌,并用蒽醌的颜色深浅来反映多糖的含量。

该方法简单快捷,适用于多种多糖的含量测定。

3. 酚-硫酸-钼酸法酚-硫酸-钼酸法是一种用于测定多糖含量的方法。

该方法结合了酚-硫酸法和硅钼酸显色反应,能够提高多糖的测定精确度和灵敏度。

该方法简单易行,适用于各种类型的多糖。

4. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种通过多糖在紫外光区域的吸收来测定多糖含量的方法。

该方法适用于对多糖进行定量和定性分析。

通过分析多糖在不同波长下的吸光度,可以得到多糖的含量和结构信息。

5. 碘液滴定法三、结语多糖含量的测定是研究多糖生物学功能的重要手段。

本文综述了常用的多糖含量测定方法,包括硫酸-蒽醌法、酚-硫酸法、酚-硫酸-钼酸法、紫外分光光度法和碘液滴定法。

研究人员可以根据不同类型的多糖选择合适的测定方法,以准确测定多糖含量。

希望本文能够为多糖研究领域提供帮助,促进多糖研究的进展。

第2篇示例:多糖是一类重要的生物大分子,包括淀粉、半纤维素、纤维素、果胶、均聚糖等多种成分。

多糖在食品工业、医药领域、环境保护等领域具有重要的应用价值,因此测定多糖含量的方法也备受关注。

本文将综述几种常用的多糖含量测定方法,包括酚-硫酸法、硫酸-酚法、差减酶法、红外光谱法等,希望能给相关研究者提供参考。

酚-硫酸法是一种经典的多糖含量测定方法。

多糖含量的测定方法

多糖含量的测定方法

多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有很多种,以下是常用的几种方法:
1. 偏光法:利用在特定波长下,糖溶液对光的旋光性质进行测定来确定多糖含量。

常用的仪器有偏光仪和旋光仪。

2. 毛细管电泳:将糖溶液置于细毛细管中,通过电场作用,使糖分子在毛细管中迁移,并测定迁移速度来确定多糖含量。

3. 酶解法:使用特定的酶对糖进行降解,然后测定产生的小分子糖或产生的酶活力来确定多糖含量。

常用的酶有α-淀粉酶、葡萄糖氧化酶等。

4. 光谱法:利用红外光谱或核磁共振等技术,通过检测糖分子特征吸收峰或共振信号来确定多糖含量。

5. 硫酸-苯酚法:将多糖与硫酸混合,然后加入苯酚,生成可测定的色素化合物,通过比色法测定吸光度来确定多糖含量。

以上方法都是常用的多糖含量测定方法,选择适合的方法需要根据实验目的、样品性质和仪器设备的可用性等因素综合考虑。

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述多糖是指由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的碳水化合物,是生物体中的重要成分之一,在食品工业、医药和生物技术领域具有重要的应用价值。

对多糖含量进行准确的测定是非常重要的。

目前,针对多糖含量测定的方法有很多种,包括光度法、比色法、高效液相色谱法、质谱法等。

本文将对多糖含量测定的方法进行综述,并对各种方法的原理、优缺点以及适用范围进行分析。

一、光度法光度法是一种常用的多糖含量测定方法,其原理是通过测定多糖在特定波长下的吸光度来确定其含量。

常用的方法有邻苯二甲酰氯法、硫酸-安替土林蓝法等。

邻苯二甲酰氯法是一种简便快速的多糖含量测定方法,其原理是多糖与邻苯二甲酰氯在酸性条件下反应生成二糖苷,然后与二甲基氨基苯酚生成有色产物,利用紫外分光光度计在510nm处测定吸光度。

该方法操作简便、灵敏度高,但只适用于测定淀粉样品。

硫酸-安替土林蓝法是一种比色法,通过多糖与硫酸反应产生的酸性羟乙基酚与安替土林蓝在酸性条件下产生有色产物,利用紫外分光光度计在620nm处测定吸光度。

该方法适用于多种多糖的含量测定,但操作相对复杂,且对于含有还原糖的多糖测定结果会存在误差。

二、比色法三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种准确快速的多糖含量测定方法,其原理是通过高压注射将多糖样品进样到色谱柱中,利用高效液相色谱仪分离多糖,并通过紫外检测器在270nm处检测吸光度,从而确定多糖的含量。

该方法准确性高,适用范围广,但需要专用的设备和耗材,成本较高。

四、质谱法根据实际需要和条件,选择合适的多糖含量测定方法非常重要。

对于一般实验室而言,光度法和比色法是常用的方法,操作简便、成本低,适用于大多数多糖的含量测定。

对于要求准确性和高通量的实验室而言,高效液相色谱法和质谱法是更好的选择,能够满足实验需要。

不同的方法可以组合使用,以提高测定准确性和可靠性。

在实际操作中,需要根据样品的性质和含量范围,综合考虑方法的原理、操作难易度和设备条件,选择合适的多糖含量测定方法。

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述作者:何佩娟张宇洁来源:《现代食品·下》2019年第01期摘要:多糖是生命科学中不可缺少的生物大分子,具有复杂、多方面的生物活性和功能,但由于其分子量大、结构复杂,而且缺少易于检测的发光基团,成为困扰人们对多糖进行进一步研究的一个大问题。

现结合近年文献,对多糖的含量测定进行综述。

关键词:多糖;含量测定;综述Abstract:Polysaccharides are indispensable biological macromolecules in life science, which have complex and multifaceted biological activities and functions. It has been a problem with the research of polysaccharides because of its intricate structur. In conjunction with recent literature, a review of polysaccharides has been determined.Key words:Polysaccharides; Content determination; Review中图分类号:Q53多糖(polysacharides,PS)是由糖苷键结合的糖链,至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。

多糖在自然界分布极广,亦很重要:有的是构成动植物细胞壁的组成成分,如肽聚糖和纤维素;有的是作为动植物储藏的养分,如糖原和淀粉;有的具有特殊的生物活性,如人体中的肝素有抗凝血作用,肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。

多糖的结构单位是单糖,多糖相对分子质量从几万到几千万。

多糖在自然界高等植物、藻类、微生物(细菌和真菌)与动物体内均普遍存在。

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述多糖是一类广泛存在于动植物组织、细胞膜和微生物中的生物大分子,包括淀粉、纤维素、壳多糖、低聚糖等。

多糖在食品工业、医药工业、生物学研究等领域中有着广泛的应用。

因此,准确测定多糖含量是非常重要的。

目前,多糖含量测定的方法较多,本文将就其中常用的几种方法进行综述。

一、显色法显色法是测定多糖含量的一种简单、快速、经济的方法,可用于多种类型的多糖测定,包括淀粉、纤维素和壳多糖。

目前较为常用的显色法有三种:碘溶液显色法、酚硫酸显色法和亚硫酸还原显色法。

1.碘溶液显色法碘溶液显色法是测定淀粉和其他含碘能力的多糖的一种显色方法。

将待测物溶解于适当的溶液后加入碘溶液,多糖与碘发生空间结合,形成蓝黑色的复合物,比较准确地测定多糖含量。

测定过程:将待测样品溶解于适量的溶液中,加入适量的碘液,快速均匀搅拌,停留一段时间后读取吸光度。

测定时要注意,碘液应无色,且溶液的pH应在中性范围内,若PH超过范围会影响显色结果。

2.酚硫酸显色法酚硫酸显色法是测定纤维素含量的一种经典方法。

此法中,棕红色的多糖酚硫酸复合物会与多糖发生结合,从而产生蓝色的复合物。

本方法操作简单,准确性高,但对硫酸和酚的用量要求较高。

测定过程:取一定量的待测样品加入酚硫酸溶液,并适当加热。

混合搅拌直至均匀,并冷却。

最后度光密度,多糖含量与光密度成正比。

亚硫酸还原显色法在测定多糖含量时具有灵敏度和准确性。

此法中,亚硫酸会还原多糖羟基上的羟基,从而产生醛基,醛基与邻近的氨基酸或蛋白质结合,形成紫色复合物。

测定过程:将待测样品适当溶于适量的溶液中,加入亚硫酸溶液,并充分混合,之后再加入苯胺溶液混合反应,最后测定吸光度,获得样品中多糖的含量。

二、光化学检测法光化学检测法是一种新的多糖含量测定方法,在光学和化学技术的基础上,通过样品与化学反应后的荧光强度进行多糖含量测定。

光化学检测法可用于测定淀粉、葡聚糖、甘露聚糖等糖类物质的含量。

测定过程:将待测样品加入适当的试剂中进行混合均匀,之后将其迅速放入反应器中,启动荧光检测仪测定荧光强度。

多糖检测方法

多糖检测方法

多糖的检测方法关于多糖含量测定,业内有两种评价方法。

一种是狭义上严格的多糖测定,即水提取多糖后,以凝胶色谱柱分离、洗脱提纯粗多糖得到较单一分子量的多糖,再水解成各种单糖,以HPLC法分离测定各单糖,即可得到比较严格意义上的多糖含量及其组成。

这种方法是科研级的多糖测定。

另一种评价方法一般是生产企业用于质控的多糖测定:一般过程是水提醇沉粗多糖后,以葡萄糖作为相比较的物质,加入特定显色剂后比色测定粗多糖的含量。

注意,这种方法测得的是以葡萄糖作为折算的多糖含量。

但这种评价方法简单实用,能反映一定的质量指标,作为质控之用可以的了。

包括中国药典和一些国标、行标都采用此方法评价多糖含量,方法大同小异,如硫酸-苯酚法,硫酸-蒽酮法。

但根据不少实际检验人的反映,要想检测结果有很好的重现性,还是有很多细节问题要注意的。

粗多糖测定多糖的测定方法,目前有碱性酒石酸铜滴定法、比色法(蒽酮比色法、硫酸-苯酚法)。

一般说来,比色法的优点是灵敏度高,样品用量少;但缺点是一般做常规检测时使用葡萄糖作标准品,误差较大,应以被测物的纯品作对照品,以求出换算因子,但要制备被测物的纯品并非每个实验室所能做到的,而且保健食品中往往是多种中草药的提取物作为原料而制成,所含多糖是不同相对分子量多糖的混合体,这就给提取纯品增加了难度。

所以当成品中多糖含量大于1%(质量浓度)时,最好选用碱性酒石酸铜滴定。

滴定法1.样品预处理取本品适量,精密称定,置于250ml磨口烧瓶中,精密加水50ml,称定重量,置沸水浴回流2小时,放置至室温,用水补足减失重量,混匀,滤过,精密吸取续滤液15ml于100ml 离心管中,加无水乙醇75ml,混匀,以4000r/min离心10min,并小心弃去上清液,再加15ml 热水(温度>90℃)冲洗离心管中沉淀物,重复一次后再以4000r/min离心30min,弃去上清液,沉淀用乙醇液(水:乙醇=15:75)洗涤两次,离心,弃去洗涤液。

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述多糖含量测定是在食品、医药、化工等领域中十分重要的一个分析检测方法。

多糖是指由多种单糖分子通过糖苷键连接而成的碳水化合物,是生物体内的重要成分之一。

多糖的含量测定对于食品行业来说,可以评价产品的质量和营养价值;在医药行业,可以评估药物的活性成分含量;在化工领域,可以评估多糖材料的性能。

多糖含量测定方法的准确性和可靠性对于各个领域都具有重要意义。

目前,多糖含量的测定主要包括光度法、色谱法、质谱法和核磁共振法等多种方法。

下面将对这些方法进行综述,以便更好地了解多糖含量测定的原理和应用。

光度法是一种常用的多糖含量测定方法,它利用多糖与酚类试剂反应后产生的颜色变化来测定多糖的含量。

最常用的酚类试剂是菲林试剂和安格酚试剂。

菲林试剂反应的产物可生成可见光吸收峰,因此可用于光度法测定多糖含量。

而安格酚试剂则可与多糖发生缩合反应生成有色产物,也可以用于多糖的定量分析。

色谱法是利用色谱仪对多糖进行分离和检测的一种方法。

常见的色谱方法包括高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)。

HPLC是一种高效、精密的分析方法,可以对多种多糖进行快速准确的分离和定量测定。

而GC则适用于脱硫葡聚糖、脱乙酰葡聚糖等多糖的分析,其分离效果和灵敏度都较高。

质谱法是通过对多糖分子进行质谱分析来测定其含量的一种方法。

在质谱法中,多糖分子首先通过质谱仪进行离子化,然后通过质谱仪对其进行检测和定量分析。

质谱法具有灵敏度高、选择性好等优点,适用于对多糖含量进行快速、准确的测定。

核磁共振法是一种利用核磁共振技术对多糖进行定量分析的方法。

在核磁共振法中,多糖分子中的核能级差会产生共振信号,在外加磁场的作用下,会产生特定的谱峰。

通过对这些谱峰的分析,可以准确地测定多糖的含量。

除了上述方法外,还有一些其他的多糖含量测定方法,例如比色法、滴定法、电泳法等。

每种方法都有其适用的范围和优缺点,因此在选择多糖含量测定方法时,需要根据具体的实际情况进行选择。

苯酚硫酸法与蒽酮硫酸法测定香菇多糖含量比较

苯酚硫酸法与蒽酮硫酸法测定香菇多糖含量比较

苯酚硫酸法与蒽酮硫酸法测定香菇多糖含量比较一、本文概述香菇多糖作为一种重要的生物活性物质,近年来在食品、医药等领域的应用日益广泛。

准确测定香菇多糖的含量对于其质量控制和应用研究具有重要意义。

目前,苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法是常用的两种测定香菇多糖含量的方法。

本文旨在对这两种方法进行比较研究,探讨它们的优缺点和适用范围,为香菇多糖的测定提供更为准确、可靠的方法依据。

本文将简要介绍苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法的基本原理和操作步骤。

随后,通过实验对比两种方法在测定香菇多糖含量时的准确性、稳定性和重复性,评估它们的优劣。

还将探讨影响两种方法测定结果的因素,如样品处理、反应条件等,并提出相应的改进措施。

本文的研究结果将为香菇多糖的含量测定提供更为全面、深入的理论依据,有助于推动香菇多糖在食品、医药等领域的应用发展。

也为其他多糖类物质的含量测定提供参考和借鉴。

二、苯酚硫酸法测定香菇多糖含量苯酚硫酸法是一种常用的测定多糖含量的方法,因其操作简便、灵敏度高而广泛应用于食品、医药等领域。

该方法基于多糖在浓硫酸的作用下,能脱水生成糠醛或其衍生物,这些衍生物与苯酚能发生显色反应,生成的有色化合物在特定波长下具有最大吸收,从而可通过比色法测定多糖的含量。

在测定香菇多糖含量的过程中,我们首先需要制备香菇多糖的提取液。

将香菇干燥、粉碎后,用适宜的溶剂(如热水、稀碱等)进行提取,得到多糖的粗提物。

然后,将粗提物进行纯化,去除其中的杂质,得到较为纯净的多糖。

接下来,按照苯酚硫酸法的操作步骤,将多糖溶液与苯酚-硫酸试剂混合,并在沸水浴中加热一定时间,使多糖完全脱水生成糠醛衍生物。

然后,将反应液冷却至室温,用分光光度计在特定波长下测定其吸光度值。

为了得到准确的测定结果,我们需要绘制标准曲线。

选取一系列不同浓度的标准多糖溶液,按照上述方法进行处理,测定其吸光度值,并绘制出标准曲线。

通过比较样品溶液的吸光度值与标准曲线,即可计算出香菇多糖的含量。

水溶性多糖的提取及结构测定方案

水溶性多糖的提取及结构测定方案

水溶性多糖的提取及结构测定方案提取水溶性多糖方法:1. 蒸馏水提取法将植物材料使用蒸馏水浸泡一定时间后,在常温下加热,使多糖向水中溶解。

然后进行过滤、冷却、离心等操作,分离出水溶性多糖。

优点:简单易行,可获得高纯度多糖。

缺点:需耗费大量水和时间,获得的多糖含量低。

2. 酸碱法提取法将植物材料使用强酸或强碱处理,破坏细胞壁,释放出多糖。

然后中和酸或碱,进行沉淀或过滤,获得多糖。

优点:易操作,可获得高纯度多糖,提取产量高。

缺点:对多糖结构有影响,需要严格控制处理时间、温度等参数。

3. 高压法提取法将植物材料加入高压蒸馏水中,在高温高压下进行提取。

然后通过冷却和离心等步骤,分离出水溶性多糖。

优点:高效、快捷、获得的多糖含量高。

缺点:需要专业设备,投资成本高。

结构测定方案:1. 紫外-可见光谱分析法将多糖样品溶解在水中,使用紫外-可见光谱仪测量其吸收光谱。

通过分析吸收峰位、峰形等特征,推断多糖结构。

优点:简单易用,快速。

缺点:只能得出对多糖主要结构的推测。

2. 红外光谱分析法将多糖样品与 KBr 混合后压成盘,进行红外光谱测量。

通过分析吸收峰位、峰形等特征,确定多糖结构。

优点:稳定可靠,测量精度高。

缺点:需要专业技能和设备。

3. 核磁共振光谱分析法将多糖样品溶解在溶剂中,使用核磁共振仪进行分析。

通常使用的是1H核磁共振技术。

通过分析多糖分子内部原子的化学位移、耦合常数等特征,确定多糖结构。

优点:精确度高,能够解析多糖结构。

缺点:需要专业技能和设备,而且成本较高。

总的来说,不同的提取方法和结构测定方法各有优缺点,需要根据具体的研究目的和条件来选择。

同时,为了保证研究结果的可靠性和精确度,提取和分析过程中需要注意控制实验条件和误差。

资料-多糖含量测定的各种方法优缺点

资料-多糖含量测定的各种方法优缺点

苯酚-硫酸法测多糖含量一、原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物。

再以比色法测定。

二、试剂1、浓硫酸:分析纯,95.5%2、80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。

3、6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。

(每次测定均需现配)4、标准葡聚糖(Dextran,Pharmacia)或分析纯葡萄糖。

5、15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。

6、5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。

7、6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml 水。

8、6mol/L 盐酸三、操作1、制作标准曲线准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。

2、样品含量测定1)取样品1克(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液于10毫升离心管中,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液,重复3次。

最后一次将残渣一起到入离心管。

注意:总的溶液不要超出10毫升。

(既不要超出离心管的容量)。

2)离心,转速3000转/分钟,共三次。

第一次15分钟,取上清液。

后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。

最后滤液保持18毫升左右。

3)水浴,在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀,在96℃水浴锅中水浴2小时。

4)定容取样。

水浴后,用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。

定容至25毫升的容量瓶中。

(2021年整理)测定多糖的方法

(2021年整理)测定多糖的方法

(完整版)测定多糖的方法编辑整理:尊敬的读者朋友们:这里是精品文档编辑中心,本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的,发布之前我们对文中内容进行仔细校对,但是难免会有疏漏的地方,但是任然希望((完整版)测定多糖的方法)的内容能够给您的工作和学习带来便利。

同时也真诚的希望收到您的建议和反馈,这将是我们进步的源泉,前进的动力。

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在10~100mg范围内其颜色与糖的含量成正比。

在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在波长下测定。

苯酚法可用于甲基化的糖和多糖的测定方法.简单,灵敏度高,实验室基本不受蛋白住存在的干扰.2、实验药品浓硫酸苯酚3苯酚溶液的配制(1)先配制80%苯酚溶液,然后称取80。

0g苯酚加20.0g水,使之溶解,置于冰箱中,避光长期保存。

取80%苯酚37.5mL定容到500Ml。

配制成60%的苯酚溶液,避光保存。

(2)取苯酚100g,加铝片0。

总多糖含量测定方法

总多糖含量测定方法

总多糖含量测定方法一、引言多糖是一类重要的生物大分子,存在于植物、微生物和动物体内,具有重要的生物学功能和医学应用价值。

对多糖含量进行精确测定具有重要的意义。

本文将介绍多种常用的总多糖含量测定方法,希望能对相关研究和应用人员提供参考。

二、酚-硫酸法测定酚-硫酸法是一种常用的总多糖含量测定方法。

其原理是将待测样品与稀硫酸和苯酚在沸水中混合,然后加入磷酸,形成紫色复合物,测定其吸光度以计算多糖含量。

这种方法操作简单,灵敏度高,适用于各种多糖的测定。

三、硫酸铬酸法测定硫酸铬酸法是另一种常用的总多糖含量测定方法。

其原理是将待测样品与硫酸和酚酞在沸水中混合,然后以硫酸钾氧化铬溶液滴定至终点,测定消耗的溶液体积以计算多糖含量。

这种方法具有操作简单、准确度高的特点,适用于各种多糖样品的测定。

四、酚硫酸-亚硫酸盐法测定酚硫酸-亚硫酸盐法是一种用于测定多糖含量的快速测定方法。

其原理是将待测样品与稀硫酸和苯酚在沸水中混合,然后用亚硫酸钠还原,制备成席氏霉素蓝,测定吸光度以计算多糖含量。

这种方法操作简单、快速,适用于多糖含量较高的样品。

五、红外光谱法测定红外光谱法是一种用于测定多糖含量的非破坏性方法。

其原理是通过测定待测样品在红外光谱区的吸收峰强度与标准曲线进行对比,从而计算出多糖含量。

这种方法不需要样品前处理,操作简便,适用于各种多糖样品的测定。

六、离子色谱法测定离子色谱法是一种高效准确的多糖含量测定方法。

其原理是通过色谱柱将待测样品中的多糖分离,然后通过检测器测定多糖的峰面积或峰高度,从而计算多糖含量。

这种方法具有高灵敏度、高分辨率的特点,适用于多糖含量较低的样品。

七、总结与展望总多糖含量的测定方法各有其特点,选择合适的测定方法需要根据实际样品的情况和实验室条件进行综合考虑。

未来,随着科学技术的不断发展,相信会有更多更准确、更简便的多糖含量测定方法出现,为多糖研究和应用提供更好的支持。

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述
多糖是一类由多个糖分子组成的生物大分子。

它们在生物体内起着重要的作用,如能量储存和结构支持等。

准确地测定多糖的含量对于生物学研究和食品工业等领域具有重要意义。

本文将综述多种多糖含量测定的方法,包括显色法、光学测定法、酶解法和质谱法等。

显色法是最常用的测定多糖含量的方法之一。

这种方法利用染料与多糖反应生成颜色产物,通过测量产物的吸光度来确定多糖的含量。

常用的染料有安替比林蓝、伊红和费林试剂等。

这种方法简便、快速,适用于大量样品的高通量测定,但染料可能对生物活性产生影响,而且对于结构复杂的多糖,测定结果可能存在一定的误差。

质谱法是最具准确性和灵敏度的多糖含量测定方法之一。

这种方法利用质谱仪对多糖分子进行分析,通过测量多糖分子的质量、荷质比和离子碎片等信息来确定多糖的含量。

常用的质谱仪有质子核磁共振谱仪和高性能液相色谱-质谱仪等。

这种方法准确度高,适用于复杂结构多糖的测定,但设备昂贵,操作要求较高。

多糖含量测定的方法有很多种,选择合适的方法要根据具体的实验需求和样品特性来确定。

显色法和光学测定法适用于大量样品测定,酶解法适用于特定种类的多糖测定,而质谱法适用于复杂结构多糖的测定。

研究人员应根据实验要求选择合适的方法进行多糖含量的测定。

资料-多糖含量测定的各种方法优缺点

资料-多糖含量测定的各种方法优缺点

苯酚-硫酸法测多‎糖含量一、原理多糖在硫酸‎的作用下先‎水解成单糖‎,并迅速脱水‎生成糖醛衍‎生物,然后与苯酚‎生成橙黄色‎化合物。

再以比色法‎测定。

二、试剂1、浓硫酸:分析纯,95.5%2、80%苯酚:80克苯酚‎(分析纯重蒸‎馏试剂)加20克水‎使之溶解,可置冰箱中‎避光长期储‎存。

3、6%苯酚:临用前以8‎0%苯酚配制。

(每次测定均‎需现配)4、标准葡聚糖‎(Dextr‎a n,瑞典Pharm‎a cia)或分析纯葡‎萄糖。

5、15%三氯乙酸(15%TCA):15克TC‎A加85克‎水使之溶解‎,可置冰箱中‎长期储存。

6、5%三氯乙酸(5%TCA):25克TC‎A加475‎克水使之溶‎解,可置冰箱中‎长期储存。

7、6mol/L 氢氧化钠:120克分‎析纯氢氧化‎钠溶于50‎0ml水。

8、6mol/L 盐酸三、操作1、制作标准曲‎线准确称取标‎准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于‎500ml‎容量瓶中,加水至刻度‎,分别吸取0‎.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水‎补至2.0ml,然后加入6‎%苯酚1.0ml及浓‎硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置2‎0分钟以后‎于490n‎m测光密度‎,以2.0ml水按‎同样显色操‎作为空白,横坐标为多‎糖微克数,纵坐标为光‎密度值,得标准曲线‎。

2、样品含量测‎定1)取样品1克‎(湿样)加1ml 15%TCA溶液‎研磨,再加少许5‎%TCA溶液‎研磨,倒上清液于‎10毫升离‎心管中,再加少许5‎%TCA溶液‎研磨,倒上清液,重复3次。

最后一次将‎残渣一起到‎入离心管。

注意:总的溶液不‎要超出10‎毫升。

(既不要超出‎离心管的容‎量)。

2)离心,转速300‎0转/分钟,共三次。

第一次15‎分钟,取上清液。

后两次各5‎分钟取上清‎液到25毫‎升锥形比色‎管中。

最后滤液保‎持18毫升‎左右。

3)水浴,在向比色管‎中加入2毫‎升6mol‎/L 盐酸之后摇‎匀,在96℃水浴锅中水‎浴2小时。

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述1. 引言1.1 研究背景多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于植物、动物、微生物等生物体中。

多糖的含量对于食品、药品、化妆品等行业具有重要意义,因此对多糖含量的准确测定具有重要的研究意义。

在过去的几十年中,随着科学技术的不断发展,人们对多糖含量测定方法的研究也在不断深入。

多糖含量测定方法的不断更新和发展,为相关领域的研究工作提供了更多的选择和可能性。

传统的多糖含量测定方法虽然已经被广泛应用,但在一些特定情况下存在局限性。

近年来涌现出了许多新兴的测定方法,其原理更加先进、操作更加简便、结果更加准确。

本文将对多糖含量测定的相关方法进行综述,以便为相关领域的研究人员提供参考和借鉴。

通过对不同测定方法的优缺点比较和方法选择及应用的探讨,有助于更好地指导实际工作中的测定操作。

通过对多糖含量测定方法的综合分析和讨论,有助于促进相关领域的发展和进步。

1.2 研究意义多糖是一类生物大分子,它们在生物体内具有重要的生物功能,如提供能量、结构支持以及细胞识别等。

多糖含量的测定对于食品工业、医药领域、生物学研究以及环境监测等领域具有重要意义。

准确测定多糖含量可以帮助生产商控制产品品质,确保产品达到规定的标准;可以帮助科研人员了解生物体内多糖的含量变化,探索其对生物体功能的影响;多糖含量的测定还可以用于环境监测,帮助科学家了解环境中多糖的分布情况,从而进行环境保护和治理。

在不同领域,多糖的含量测定方法也有所不同,传统的方法主要包括酚硫酸法、酚酞法、红色邻苯二甲酸钠法等,而近年来随着科技的发展,各种新型的测定方法也在不断涌现。

对多糖含量测定方法进行综述和比较,有助于科研人员选择适合自己研究的方法,提高测定的准确性和效率。

【研究意义】2. 正文2.1 多糖含量测定方法的分类多糖含量测定方法的分类主要可以分为化学方法和物理方法两大类。

在化学方法中,常用的包括酚硫酸法、硫酸-酚反应法、巴氏酚试剂法等。

这些方法通过针对多糖中特定官能团的反应来测定其含量。

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苯酚-硫酸法测多糖含量一、原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物。

再以比色法测定。

二、试剂1、浓硫酸:分析纯,95.5%2、80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。

3、6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。

(每次测定均需现配)4、标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia)或分析纯葡萄糖。

5、15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。

6、5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。

7、6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。

8、6mol/L 盐酸三、操作1、制作标准曲线准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。

2、样品含量测定1)取样品1克(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液于10毫升离心管中,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液,重复3次。

最后一次将残渣一起到入离心管。

注意:总的溶液不要超出10毫升。

(既不要超出离心管的容量)。

2)离心,转速3000转/分钟,共三次。

第一次15分钟,取上清液。

后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。

最后滤液保持18毫升左右。

3)水浴,在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀,在96℃水浴锅中水浴2小时。

4)定容取样。

水浴后,用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。

定容至25毫升的容量瓶中。

吸取0.2 ml的样品液,以蒸馏补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。

每次测定取双样对照。

以标准曲线计算多糖含量。

四、注意1、此法简单、快速、灵敏、重复性好,对每种糖仅制作一条标准曲线,颜色持久。

2、制作标准线宜用相应的标准多糖,如用葡萄糖,应以校正系数0.9校正μg数。

3、对杂多糖,分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。

4、测定时根据光密度值确定取样的量。

光密度值最好在0.1~0.3之间。

比如:小于0.1之下可以考虑取样品时取2克,仍取0.2ml样品液,如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定,即可无碍。

蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量一、实验原理糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后,与蒽酮(C14H10O)脱水缩合,形成糠醛的衍生物呈蓝绿色。

该物质在620nm处有最大吸收,在150µg/mL范围内,其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。

该法有很高的灵敏度,糖含量在30µg左右就能进行测定。

二、试剂器材1、蒽酮试剂:精密称取0.1g蒽酮,加80%浓H2SO4100mL使溶解,摇匀。

当日配制使用;2、葡萄糖标准液:将无水葡萄糖置于五氧化二磷干燥器中,12hr后精密称取100mg,用蒸馏水定容至100ml;3、其他器材:分析天平、分光光度计、容量瓶(100ml、50ml、10ml)、烧杯、具塞试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器和废液缸等。

三、操作步骤1、葡萄糖标准曲线的制作取7支具塞试管,按下表数据精密配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液,每个浓度做2~3个重复:管号0 1 2 3 4 5 6标准葡萄糖溶液/mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 蒸馏水/mL 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL,振荡混匀,各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。

取出,迅速浸于冰水浴中冷却15min。

在625nm波长下以第1管为空白,迅速测定其余各管吸光值。

以标准葡萄糖含量(g)为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。

2、样品的测定将样品溶液糖浓度调整到测定范围,精确吸取2mL置于干燥洁净试管中,在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL,振荡混匀,各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。

取出,迅速浸于冰水浴中冷却15min,每个浓度做2~3个重复。

在625nm波长下迅速测定各管吸光值。

根据葡萄糖含量的标准曲线,由样品溶液吸光值计算各样品溶液中糖的浓度,并计算其糖含量。

四、注意事项该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物,不但可测定戊糖与已糖,且可测所有寡糖类和多糖类,包括淀粉、纤维素等(因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应),所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。

在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用蒽酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值,但在测定水溶性碳水化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中,否则会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。

不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅,故测定糖的混合物时,常因不同糖类的比例不同造成误差,但测定单一糖类时则可避免此种误差。

多糖含量的测定一、原理分子量大于10,000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后,加入碱性铜试剂,选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖,沉淀部分与苯酚-H2SO4反应,生成有色物质,在485nm条件下,有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。

二、适用范围参照AOAC方法。

适用于检测含有分子量大于10,000道尔顿葡聚糖的样品。

三、仪器1、分光光度计2、离心机3、旋转混匀器4、恒温水浴锅四、试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。

1、80%乙醇:800ml无水乙醇加水200ml。

2、2.5mol/L NaOH溶液:100gNaOH加蒸馏水稀释至1L,加入固体无水硫酸钠至饱和。

3、铜贮存液:称取3.0g CuSO4·5H2O,30.0g柠檬酸钠加水溶解至1L。

溶液可贮存2周。

4、铜应用溶液:取铜贮存液50ml,加水50ml混匀后加入无水硫酸钠12.5 g,临用新配。

5、洗涤液:取水50ml,加入10ml铜应用溶液,10ml 2.5mol/L NaOH溶液,混匀。

6、1.8mol/L H2SO4:取100ml浓硫酸用水稀释至1L。

7、20g/L苯酚溶液:称取2.0g苯酚,加水溶解并稀释至100ml,混匀备用。

8、葡聚糖标准液:称取500mg葡聚糖(分子量500,000D)于称量皿中,105℃干燥4h 至恒重,置于装有干燥硅胶的干燥器中冷却。

准确称取100mg干燥后的葡聚糖,用水定容至100ml,葡聚糖标准浓度为1.0mg/ml。

9、葡聚糖标准应用液:吸取葡聚糖标准液10ml,用水稀释10倍,葡聚糖终浓度为0.1mg/ml。

五、操作方法1、样品处理1)样品提取:称取样品1~5g,加水100ml,沸水浴加热2h,冷却至室温,定容至200ml (V1),混匀后过滤,弃初滤液,收集余下滤液。

2)沉淀高分子物质:准确吸取上述滤液100ml(V2),置于烧杯中,加热浓缩至10ml,冷却后,加入无水乙醇40ml,将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min,弃上清液,残渣用80%乙醇洗涤3次,残渣供沉淀葡聚糖之用。

3)沉淀葡聚糖:上述残渣用水溶解,并定容至50ml(V3),混匀后过滤,弃初始滤液后,取滤液2.0ml (V4),加入2.5mol/L NaOH 2.0ml,Cu应用溶液2.0ml,沸水浴中煮沸2mim,冷却后以3000rpm离心5min,弃上清液,残渣用洗涤液洗涤3次,残渣供测定葡聚糖之用。

4)测定葡聚糖:上述残渣用2.0mL 1.8mol/L H2SO4溶解,用水定容至100mL(V5)。

准确吸取2.0ml(V6),置于25ml比色管中,加入1.0ml苯酚溶液,10ml浓硫酸,沸水浴煮沸2分钟,冷却比色。

从标准曲线上查得相应含量,计算粗多糖含量。

2、标准曲线制备精密吸取葡聚糖标准应用液0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.50,2.00ml(分别相当于葡聚糖0.01,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.15,0.20mg),补充水至2.0mL,加入苯酚溶液1.0ml,浓硫酸10ml,混匀,沸水浴2分钟,混匀,沸水浴2分钟,冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比,测定吸光度值(A),以葡聚糖浓度为横坐标,A为纵坐标绘制标准曲线。

六、计算从标准曲线上查得样品相应含量,计算粗多糖含量。

葡聚糖(%)=c×V5×V3×V1×0.1/V6×V4×V2×m=c×250/m……………公式中:c--从标准曲线上查得样品测定管中葡聚糖含量,mg;V1--样品提取时定容体积,ml;V2--沉淀高分子物质取液量,ml;V3--沉淀葡聚糖时定容量,ml;V4--沉淀葡聚糖时取液量,ml;V5--测定葡聚糖时定容体积,ml;V6--样品比色管中取样液体积,ml;m--样品称量质量,g;0.1--将mg/g换算成g/100g的系数。

七、注意事项1、苯酚-H2SO4溶液可以和多种糖类进行显色反应,常用于总糖的测定。

所以测定过程中应注意容器及试剂中其他糖类的干扰。

2、苯酚-H2SO4溶液和不同类的糖反应,显色的强度略有不同,反映在标准曲线的斜率不同。

如果已知样品中糖的结构,应尽量以同类糖的纯品做标准品,或以含有已知浓度的同类产品做对照品进行检测分析;如果样品中糖的类型未知或结构多样,则只能以葡萄糖计或其他糖计报告结果。

3、试验证明葡萄糖、果糖等单糖,蔗糖、乳糖等双糖、低聚糖--棉子糖,淀粉、糊精等多糖及甜味剂糖精不干扰粗多糖测定。

4、本方法由北京市卫生防疫站建立,经中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所验证。

黑木耳多糖的提取、分离、纯化及初步测定一、实验目的1、学习真菌多糖的提取方法2、掌握测定多糖组成、总糖含量的基本方法3、掌握柱层析技术二、实验原理通过水提法浸提出木耳中的多糖,经过有机溶剂脱脂,Sevage脱蛋白,透析除去无机盐等小分子杂质,经干燥得粗多糖。

粗多糖经酸水解后通过纸层析或薄层层析测出多糖的单糖组成。

经酚硫酸法测得总糖含量。

获得粗多糖经G-100纯化,获得较纯多糖样品,为进一步研究奠定基础。

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