[课件]二维液相色谱进展与应用PPT
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为对于复杂体系分离时最受关注,发展最迅速的技术。
展望
Thank you
......
二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用
天然药物成分复杂,包括从无机物到有机物,从极性到非极性,从小分子到生 物大分子的各种成分,预处理费时费力,操作困难。2D-LC串联质谱技术简化了预 处理过程,提高了峰容量与选择性。用2D-LC系统来分析天然药物中的非挥发性成 分,并针对不同成分摸索了LC的选择和合适的条件,其中分别采用了强酸性阳离子 交换柱或氨基柱与反向C18柱组成二维系统,接口三通阀内接15mmX4mm的C18 富集柱来浓缩欲分离组分。进样12分钟后,富集柱上的组分被有机溶剂反洗到第二 维分析柱中,并采用质谱检测。两种系统分别对生物碱组分和单唾液酸神经节苷酯 等组分表现出良好的富集效果和分离能力。
二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用
由于复杂体系样品分离需要更强的分离能力,二维色谱能使样 品组分在两个不同的分离条件下进行分离,显著提高分离能力,降低色 谱峰重叠,同时改善色谱峰鉴定的可靠性,在中药质量控制中发挥重要 作用。不同的二维色谱技术中,在线全二维液相色谱技术由于其在较短
时间内可以获得高峰容量、样品损失低、重现性好及自动化程度高,成
二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用
建立 SAX - RP 模式的在线二维液相色谱系统,并将其应用于鹿茸蛋白的分离、分 . 析中。方法样品首先由第一维强阴离子交换色谱( COSMOGEL QA Glass Packed Column,75 mm ×8.0 mm I. D)在 pH 9.16的 Tris -HCl 缓冲体系中以0.8 mL / min 的流 速洗脱分离,采用不连续的逐步增加盐浓度的8步台阶梯度方式洗脱,洗脱产物富集在与
反相柱相同填料的捕集柱顶端,通过阀切换将富集在捕集柱上的组分反向冲入第二维反相
分析柱( Shodex Rspak RP18~415,150 mm ×4.6 mm I. D)继续分析。结果鹿茸蛋白 在所构建的二维系统上得到了较好的分离,与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率在 一定程度上得到了提高,系统总出峰数为30,总峰容量为240。结论使用常规尺寸的色谱 柱构成的二维液相色谱系统仪器要求简单,对鹿茸为代表的动物类中药的分离、分析有一 定指导意义
二维液相色谱的构成:
二维液相色谱的分类:
根据切换系统不同进行分类: 1)传统的中心切割技术色谱 2)全二维液相色谱
二维液相色谱的应用
二维液相色谱法的应用
二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用 二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用
二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用
二维液相色谱法在差异蛋白质组学中的应用 二维液相色谱法在羊草地上部总蛋白分离中的应用 二维液相色谱法在体内药物分析中的应用
二维液相色谱的发展
尽管二维液相色谱技术目前还没有被广泛使用,但这方面的潜力是巨大的。 大型公司,如安捷伦和岛津,都在投入资金开发这种仪器,让科学家能够 回答之前无法回答的问题。目前,一些优秀的产品已上市。这种强大的技 术可用在各种不同的领域,如制药、生物制药、天然产物的研究和食品分 析等。二维液相色谱有望成为分析中等至高度复杂的混合物的强大工具。
二维液பைடு நூலகம்色谱进展与应用
多维液相色谱理论:
多维色谱理论最早由Giddings 提出。 他提出多维色谱的两条标准: 1)样品组分必须经过两种或两种以上的不同分离模式。 2)经一种模式分离的样品组分不应该在其后续的分离中被混合。
二维液相色谱:
将分离机理不同又相互独立的两根色谱柱串连起来构成的分离系统。
展望
Thank you
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二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用
天然药物成分复杂,包括从无机物到有机物,从极性到非极性,从小分子到生 物大分子的各种成分,预处理费时费力,操作困难。2D-LC串联质谱技术简化了预 处理过程,提高了峰容量与选择性。用2D-LC系统来分析天然药物中的非挥发性成 分,并针对不同成分摸索了LC的选择和合适的条件,其中分别采用了强酸性阳离子 交换柱或氨基柱与反向C18柱组成二维系统,接口三通阀内接15mmX4mm的C18 富集柱来浓缩欲分离组分。进样12分钟后,富集柱上的组分被有机溶剂反洗到第二 维分析柱中,并采用质谱检测。两种系统分别对生物碱组分和单唾液酸神经节苷酯 等组分表现出良好的富集效果和分离能力。
二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用
由于复杂体系样品分离需要更强的分离能力,二维色谱能使样 品组分在两个不同的分离条件下进行分离,显著提高分离能力,降低色 谱峰重叠,同时改善色谱峰鉴定的可靠性,在中药质量控制中发挥重要 作用。不同的二维色谱技术中,在线全二维液相色谱技术由于其在较短
时间内可以获得高峰容量、样品损失低、重现性好及自动化程度高,成
二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用
建立 SAX - RP 模式的在线二维液相色谱系统,并将其应用于鹿茸蛋白的分离、分 . 析中。方法样品首先由第一维强阴离子交换色谱( COSMOGEL QA Glass Packed Column,75 mm ×8.0 mm I. D)在 pH 9.16的 Tris -HCl 缓冲体系中以0.8 mL / min 的流 速洗脱分离,采用不连续的逐步增加盐浓度的8步台阶梯度方式洗脱,洗脱产物富集在与
反相柱相同填料的捕集柱顶端,通过阀切换将富集在捕集柱上的组分反向冲入第二维反相
分析柱( Shodex Rspak RP18~415,150 mm ×4.6 mm I. D)继续分析。结果鹿茸蛋白 在所构建的二维系统上得到了较好的分离,与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率在 一定程度上得到了提高,系统总出峰数为30,总峰容量为240。结论使用常规尺寸的色谱 柱构成的二维液相色谱系统仪器要求简单,对鹿茸为代表的动物类中药的分离、分析有一 定指导意义
二维液相色谱的构成:
二维液相色谱的分类:
根据切换系统不同进行分类: 1)传统的中心切割技术色谱 2)全二维液相色谱
二维液相色谱的应用
二维液相色谱法的应用
二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用 二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用
二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用
二维液相色谱法在差异蛋白质组学中的应用 二维液相色谱法在羊草地上部总蛋白分离中的应用 二维液相色谱法在体内药物分析中的应用
二维液相色谱的发展
尽管二维液相色谱技术目前还没有被广泛使用,但这方面的潜力是巨大的。 大型公司,如安捷伦和岛津,都在投入资金开发这种仪器,让科学家能够 回答之前无法回答的问题。目前,一些优秀的产品已上市。这种强大的技 术可用在各种不同的领域,如制药、生物制药、天然产物的研究和食品分 析等。二维液相色谱有望成为分析中等至高度复杂的混合物的强大工具。
二维液பைடு நூலகம்色谱进展与应用
多维液相色谱理论:
多维色谱理论最早由Giddings 提出。 他提出多维色谱的两条标准: 1)样品组分必须经过两种或两种以上的不同分离模式。 2)经一种模式分离的样品组分不应该在其后续的分离中被混合。
二维液相色谱:
将分离机理不同又相互独立的两根色谱柱串连起来构成的分离系统。