组织非特异性碱性磷酸酶活力的原位红外光谱检测-19届福州

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生物化学检验题库含答案

生物化学检验题库含答案

生物化学检验题库含答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、常见抗凝剂中,抑制凝血酶原、酶和活酶作用的是A、EDTA-NA2B、肝素钠C、草酸 NA 盐D、氟化钠E、柠檬酸钠正确答案:B2、钾测定的参考方法是A、火焰光度法B、原子吸收分光光度法C、邻甲酚肽络合铜法D、高锰酸钾滴定法E、ISE正确答案:A3、肾脏调节酸碱平衡不正确的是()A、近曲小管对 HCO3-重吸收B、近曲小管泌 H+C、远曲小管和集合管泌 H+D、远曲小管和集合管泌氨E、远曲小管和集合管泌 K+正确答案:B4、血浆清蛋白下降见于很多病理情况,但除外()A、营养不良B、手术后C、吸收功能紊乱D、急性脱水E、肾病综合征正确答案:D5、急性时相反应时血浆蛋白浓度升高的是A、清蛋白B、前清蛋白C、转铁蛋白D、结合珠蛋白E、以上都不对正确答案:D6、目前我国大医院多已开展新的缺血性冠状动脉疾病诊断组合是()A、肌红蛋白、肌钙蛋白 T 或 I、CK-MBB、LDH、AST、CKC、LDH1、AST、CK-MBD、LDH1、AST、CK 及其亚型E、LDH1、CK、CK-MB正确答案:A7、甲状腺功能紊乱的生化检测项目部包括()A、TT3、TT4B、FT3、FT4C、TBGD、TSHE、GLU正确答案:E8、血浆清蛋白减少A、肾小管功能损伤B、弥散性血管内凝血C、多发性骨髓瘤D、肾小球滤膜通透性增加E、缺铁性贫血正确答案:D9、胆红素在血中运输,主要和哪种蛋白结合()A、球蛋白B、清蛋白C、G 蛋白D、Z 蛋白E、Y 蛋白正确答案:B10、以溴甲酚绿测定血清清蛋白,发生反应的最适 pH 应是A、pH 5.6B、pH 8.6C、pH 3.0D、pH 7.4E、pH 4.2正确答案:E11、血浆胆固醇主要存在于A、HDLB、CMC、VLDLD、LDLE、IDL正确答案:D12、反应开始时,酶与底物分子结合很少,反应速度很慢,底物或产物的变化量与时间不成正比,这一时期为A、零级反应B、延滞期C、Km 值D、酶的转换率(TN)E、酶国际单位正确答案:B13、选择性蛋白尿是以哪一种蛋白尿为主()A、白蛋白B、IgGC、转铁蛋白D、β2-微球蛋白E、B-J 蛋白正确答案:A14、发射光谱分析法是下列哪类测定法的原理A、离子选择电极法B、化学比色法C、免疫比浊法D、放射免疫法E、火焰光度法正确答案:E15、高选择性蛋白尿中不存在的是()A、β2-微球蛋白B、α2-巨球蛋白C、溶菌酶D、白蛋白E、前白蛋白正确答案:B16、在正常人血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳图谱中区带最深的是A、γ 球蛋白B、α1 球蛋白C、清蛋白D、α2 球蛋白E、β 球蛋白正确答案:C17、干扰试验中加入干扰物形成的误差是A、比例系统误差B、操作误差C、随机误差D、方法误差E、恒定系统误差正确答案:E18、以下不是以自动化仪器的反应装置结构来分类的类型是A、分立式B、多通道C、干片式D、连续流动式E、离心式正确答案:B19、属血浆非特异酶的是:A、ASTB、ChEC、LCATD、脂蛋白脂酶E、铜氧化酶正确答案:A20、载脂蛋白 AI 能激活下列哪种酶A、脂蛋白脂肪酶B、卵磷脂胆固醇酰基转移酶C、肝脂肪酶D、脂肪组织脂酶E、胰脂酶正确答案:B21、尿毒症中最罕见的电解质紊乱为A、高磷血症B、低钙血症C、高钙血症D、高镁血症E、高钾血症正确答案:C22、尿液采集方法和用途,不正确的是A、24h 尿:生化检查多数定量分析常用。

上海生工-抗体

上海生工-抗体
实验目的定性定量4646sdspage环境要求方法选择半干法膜选择pvdfnc转膜条件冰浴转膜时间电流电压分子量kd转膜条件20200ma恒流1小时20100200ma恒流2小时100200200ma恒流6小时或30v恒压过夜200同上可在转膜液中加01sds丽春红检测4747nc膜pvdf膜尼龙膜物理强度软而结实背景蛋白质结合能力80100ugcm100200ugcm400ugcm使用前是否需浸润缓冲液润湿100甲醇润湿缓冲液润湿适用染色方胶体金丽春红印度墨汁酰胺黑胶体金丽春红印度墨汁酰胺黑考马斯亮兰不能用阴离子染料适用范围045um一般蛋白02um一分子量小于20kd蛋白01um一分子量小于7kd蛋白糖蛋白检测和蛋白质测低浓度小分子蛋白酸性蛋白糖蛋白和蛋白多糖主要用在核酸检测中价格价格较便宜便宜4848sdspage4过夜372h避免抗体与膜的非特异性结合封闭条件封闭液脱脂奶粉
15
交叉反应
交叉反应(cross reaction) 是指抗原(或抗体)除 与相应的抗体(或抗原) 发生特异性反应外,有 时还可与其它抗体(或 抗原)发生反应。出现 交叉反应的原因在于两 种不同的抗原分子表面 存在相同或相似的抗原 决定簇。相同或相似的 抗原决定簇可激发机体 产生相同或相似的抗 体,这种抗体可同时与 两种抗原发生特异性反 应。
*酶类标记物:
• 辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP) • 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)
*生物素(biotin) *荧光标记物:
• 异硫氰酸荧光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC) • 四甲基异硫氰酸罗丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC) • 菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5) • 藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin (PE)

血清NSE、CYFRA21-1、CEA、SCC_联合检测在肺癌早期诊断中的应用价值分析

血清NSE、CYFRA21-1、CEA、SCC_联合检测在肺癌早期诊断中的应用价值分析

CHINA MEDICINE AND PHARMACY Vol.14 No.5 March 2024157血清NSE、CYFRA21-1、CEA、SCC联合检测在肺癌早期诊断中的应用价值分析洪永灯1 黄旭苗21.广东省阳江市中医医院检验科,广东阳江 529500;2.广东省阳江市中医医院中药房,广东阳江 529500[摘要]目的 分析肺癌早期诊断中应用血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)联合检测的临床价值。

方法 选择2021年1月至2022年12月阳江市中医医院收治的肺癌患者70例(肺癌组)、肺部良性病变患者64例(良性组),并同期选择体检健康人员70名(对照组)进行回顾性分析,所有受检者均接受血清NSE、CYFRA21-1、CEA、SCC 检测,分析三组受检者检查结果,并分析血清标志物的诊断敏感度、特异度及准确度。

结果 肺癌组患者血清NSE、CEA、CYFRA21-1、SCC 指标均高于对照组与良性组,差异有统计学意义(P < 0.05);依据不同病理分型将肺癌组患者70例分为小细胞癌患者29例、非小细胞肺癌患者41例,非小细胞肺癌患者CEA、CYFRA21-1、SCC 均高于小细胞癌患者,且NSE 低于小细胞癌患者,差异有统计学意义(P < 0.05);联合诊断的敏感度及准确度均高于单一检查,差异有统计学意义(P < 0.05)。

结论 对于肺癌患者而言,早期使用血清NSE、CYFRA21-1、CEA、SCC 联合检测具有积极意义,其能有效提高诊断的敏感度及准确度,为临床医生提供可靠的参考。

[关键词]肺癌;早期诊断;联合检测;血清肿瘤标志物[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2024)05-0157-04DOI:10.20116/j.issn2095-0616.2024.05.36Analysis of the application value of combined testing of serum NSE, CYFRA21-1, CEA, and SCC in the early diagnosis of lung cancerHONG Yongdeng 1 HUANG Xumiao21. Laboratory Department, Yangjiang Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangdong, Yangjiang 529500, China;2. Traditional Chinese Medicine Pharmacy, Yangjiang Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangdong, Yangjiang 529500, China[Abstract] Objective To analyze the clinical value of combined testing of serum neuron specific enolase (NSE), cytokeratin-19-fragment (CYFRA21-1), carcinoembryonic antigen (CEA), and squamous cell carcinoma antigen (SCC) in the early diagnosis of lung cancer. Methods A total of 70 patients with lung cancer (the lung cancer group) and 64 patients with benign lung lesions (the benign group) admitted to Yangjiang Hospital of Traditional Chinese Medicine from January 2021 to December 2022, and 70 healthy physical examiners (the control group) during the same period were selected for retrospective analysis. All subjects received serum NSE, CYFRA21-1, CEA, and SCC tests. The test results of the three groups of subjects were analyzed, and the diagnostic sensitivity, specificity, and accuracy of serum markers were analyzed. Results The serum NSE, CEA, CYFRA21-1, and SCC indicators in the lung cancer group were higher than those in the control group and the benign group (P < 0.05). According to different pathological classifications, 70 patients in the lung cancer group were divided into 29 cases of small cell carcinoma and 41 cases of non-small cell lung cancer. CEA, CYFRA21-1, and SCC in patients with non-small cell carcinoma were higher than those in patients with small cell carcinoma, and NSE were lower than those in patients with small cell carcinoma, with statistically significant differences (P < 0.05). The sensitivity and accuracy of combined diagnosis were higher than those of single test, with statistically significant differences (P < 0.05). Conclusion For patients with lung cancer, early use of combined testing of serum NSE, CYFRA21-1, CEA, and SCC has a positive significance, which can effectively improve the sensitivity and accuracy of diagnosis, providing reliable reference for clinical doctors.[Key words] Lung cancer; Early diagnosis; Combined testing; Serum tumor markersCHINA MEDICINE AND PHARMACY Vol.14 No.5 March 2024158肺癌是临床上较多见的恶性肿瘤疾病,具有较高的发病率和病死率,对患者的身体健康、生命安全构成极大的影响[1]。

通用病理学模拟题2021年(93)_真题-无答案

通用病理学模拟题2021年(93)_真题-无答案

通用病理学模拟题2021年(93)(总分98.XX98,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 冷丙酮用于免疫荧光细胞化学染色时,选用的切片方法是A. 石蜡切片法B. 冰冻切片法C. 树脂包埋切片法D. 火棉胶切片法E. 石蜡包埋半薄切片法2. 荧光显微镜的使用条件是A. 日光B. 常见光C. 灯光D. 暗室、紫外光E. 激光3. 生物素一亲和素系统放大作用的主要机制是A. 亲和素的四个生物素部位,可同时结合多价性的生物素化衍生物B. 生物素、亲和素可分别与酶、放射性核素等结合形成标志物C. 两者之间极高的亲和力D. 经化学修饰生物素成为活化生物素E. 以上均不是4. 下列可标记自然杀伤细胞的是A. CD68B. CD56C. CD3D. CD20E. CD315. 下列免疫组化结果有助于诊断皮肤Merkel瘤的是A. Vimentin(-),CK(-),NSE(+)B. Vimentin(-),CK(+),NSE(+)C. Vimentin(-),CK(+),NSE(-)D. Vimentin(+),CK(+),NSE(-)E. Vimentin(+),CK(-),NSE(+)6. 染色过程中关于脱蜡的描述错误的是A. 石蜡切片必须经过脱蜡后才能染色B. 脱蜡前切片经过烘烤C. 二甲苯的新鲜与否不影响脱蜡的效果D. 组织切片脱蜡要彻底E. 脱蜡主要取决于二甲苯的温度和时间7. 甲基绿派洛宁染色法显示DNA和RNA染液最佳pH值应是A. pH7.0B. pH4.8C. pH2.0D. pH6.5E. pH9.08. 观察各种血细胞形态常用的染色方法是A. HE染色法B. 甲苯胺蓝染色法C. 瑞氏染色法D. PAP染色法E. 镀银染色法9. SPA与免疫球蛋白有较强亲和力的部位是A. Fab段B. Fc段C. F(ab')2段D. 重链E. 轻链10. 用于标记抗体的荧光素应符合下列要求,除外A. 与蛋白质分子形成离子键B. 荧光效率高,与蛋白质结合后仍能保持较高的荧光效率C. 荧光色泽与背景组织色泽对比鲜明D. 与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生物化学和免疫学性质E. 与蛋白质的结合物稳定,易于保存11. 关于荧光显微镜图像的记录方法,下列错误的是A. 要结合形态学特征和荧光的颜色和亮度综合判断B. 要及时摄影记录结果C. 曝光速度要慢D. 荧光显微镜可用CCD与计算机连接,可将图像存在计算机硬盘上E. 暂时不观察时,应用挡板遮盖激发光12. 荧光抗体直接法的最大特点是A. 特异性差,敏感性高B. 不够敏感,不常用C. 特异性高.敏感性高D. 特异性高,方法简便快捷,敏感性较差E. 以上说法均正确13. 关于小圆细胞肿瘤的描述,下列错误的是A. 是一类细胞形态为小圆形的细胞B. 常规诊断基本可以明确诊断C. 免疫组化诊断胚胎性横纹肌肉瘤首选DesminD. 原始间叶性肿瘤诊断困难,可采取排除法E. 免疫组化诊断尤文肉瘤首选CD9914. 患者女性,57岁;左上腹隐痛不适。

灰树花多肽-锌螯合物对孕期缺锌鼠后代的改善作用

灰树花多肽-锌螯合物对孕期缺锌鼠后代的改善作用

灰树花多肽-锌螯合物对孕期缺锌鼠后代的改善作用张凤丽,李静茹,彭培植,黄文琪,赵立娜*(福建农林大学国家菌草工程技术研究中心,福建农林大学生命科学学院,福建福州 350002)摘要:灰树花多肽-锌螯合物(Grifola frondosa Polypeptide Zinc Chelate,GPs-Zn)是灰树花多肽(Grifola frondosa Polypeptide,GPs)和锌离子的螯合产物,利用电镜扫描、X-射线粉末衍射技术、红外光谱和紫外光谱等技术对GPs-Zn进行结构分析;通过构建ICR母鼠缺锌模型,进一步探究GPs-Zn对孕期缺锌鼠后代的影响。

表征结果表明,GPs和锌离子螯合成一种新的物质;红外光谱对比图发现肽链上的氨基和羧基都参与了锌离子的配位反应;紫外光谱图发现,GPs-Zn中多肽的羰基原子和锌离子结合,诱导紫外光谱的红移,表明GPs与锌离子结合形成GPs-Zn。

动物实验表明:GPs-Zn可将缺锌仔鼠胸腺指数提高78.69%(雌鼠)和87.55%(雄鼠);脾脏指数提高40.28%(雌鼠)和43.22%(雄鼠);体质量提高89.98%(雌鼠)和88.30%(雄鼠);且血清的超氧化物歧化酶(SOD)活力提高了108.07%(雌鼠)和26.16%(雄鼠);锌浓度提高14.74%(雌鼠)和29.33%(雄鼠);碱性磷酸酶(AKP)水平降低52.28%(雌鼠)和62.48%(雄鼠)。

综上可知,GPs-Zn对孕期缺锌鼠后代仔鼠的胸腺指数、脾脏指数、超氧化物歧化酶活力、锌浓度和碱性磷酸酶水平有一定改善作用。

关键词:灰树花多肽-锌螯合物(GPs-Zn);结构表征;小鼠文章编号:1673-9078(2024)04-18-26 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2024.4.0394Improvement Effects of Grifola frondosa Polypeptide-Zinc Chelate on the Offspring of Zinc-deficient Pregnant MiceZHANG Fengli, LI Jingru, PENG Peizhi, HUANG Wenqi, ZHAO Lina*(National Engineering Research Center of JUNCAO Technology, College of Life Sciences, Fujian Agriculture andForestry University, Fuzhou 350002, China)Abstract: Grifola frondosa polypeptide-zinc chelate (GPs-Zn) is the chelation product of Grifola frondosa polypeptides (GPs) and zinc ions. GPs-Zn was subjected to structural characterization using scanning electron microscopy, X-ray powder diffraction, infrared spectroscopy, and ultraviolet spectroscopy. The effects of GPs-Zn on the offspring of zinc-deficient pregnant mice were explored by constructing an adult female ICR mouse model of zinc deficiency. Characterization results showed that GPs and zinc ions formed a novel substance through chelation; IR spectral comparison revealed that both amino 引文格式:张凤丽,李静茹,彭培植,等.灰树花多肽-锌螯合物对孕期缺锌鼠后代的改善作用[J].现代食品科技,2024,40(4):18-26.ZHANG Fengli, LI Jingru, PENG Peizhi, et al. Improvement effects of Grifola frondosa polypeptide-zinc chelate on the offspring of zinc-deficient pregnant mice [J]. Modern Food Science and Technology, 2024, 40(4): 18-26.收稿日期:2023-04-03基金项目:福建省重大专项项目(2021NZ029009);福建省科学技术厅对外合作项目(2021I0008);福建农林大学学科交叉融合推动菌草科学及产业高质量发展项目(XKJC-712021030);福建农林大学科技创新专项基金项目(KFb22115XA)作者简介:张凤丽(1994-),女,硕士研究生,研究方向:食品生物技术,E-mail:通讯作者:赵立娜(1984-),女,博士,副教授,研究方向:食品生物技术,E-mail:18灰树花(Grifola frondosa)是一种具有食用和药用价值的真菌[1,2] ,主要含碳水化合物、维生素、蛋白质和有多种生物活性的甾醇等[3] 。

碱性磷酸酶及其免疫标记物活性的荧光法测定

碱性磷酸酶及其免疫标记物活性的荧光法测定

碱性磷酸酶及其免疫标记物活性的荧光法测定
沈爱宝;杨梅
【期刊名称】《南通医学院学报》
【年(卷),期】1996(016)002
【摘要】为提高碱性磷酸酶(ALP)活性测定的灵敏度,对以4-甲基伞形酮磷酸酶(4-MUP0为底物的荧光法进行了研究。

结果ALP的线性范围达1.7×10^-5-1.7×10^-8IU/ml,检测限为4.0×0^-8IU/ml;用本法测定了20份人血清样品,误差为3.5%;并测定了免疫标记物IgG-ALP活性,发现其活性与荧光强度也呈线性关系。

【总页数】2页(P162-163)
【作者】沈爱宝;杨梅
【作者单位】南通医学院化学教研室;陕西师范大学化学系
【正文语种】中文
【中图分类】Q556.1
【相关文献】
1.免疫球蛋白制剂对仔猪血清碱性磷酸酶活性和断奶时增重的影响 [J], 滑静;曹永春;万善霞;张淑萍;门瑞霄
2.碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶法免疫分型在急性白血病中的临床意义 [J], 万楚成;刘瑜;周培一;夏云金;姜铧;章正华;杨华强;郭仁慈
3.顺序注射荧光法测定生鲜牛奶中碱性磷酸酶 [J], 杨梅;王欢;孙彤;崔欣
4.孕妇及新生儿脐血总碱性磷酸酶与骨碱性磷酸酶活性的比较 [J], 张会丰
5.荧光法测定碱性磷酸酶及其标记物 [J], 杨梅;沈爱宝;章竹君
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基于碳点内滤效应快速检测鲜牛奶中碱性磷酸酶活性的荧光分析方法的构建

基于碳点内滤效应快速检测鲜牛奶中碱性磷酸酶活性的荧光分析方法的构建

贾宝珠,何镇熹,黄心洳,等. 基于碳点内滤效应快速检测鲜牛奶中碱性磷酸酶活性的荧光分析方法的构建[J]. 食品工业科技,2023,44(17):334−341. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022110075JIA Baozhu, HE Zhenxi, HUANG Xinru, et al. Development of a Fluorescence Assay for Rapid Detection of Alkaline Phosphatase Activity in Fresh Milk Based on Inner Filter Effect of Carbon Dots[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(17):334−341. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022110075· 分析检测 ·基于碳点内滤效应快速检测鲜牛奶中碱性磷酸酶活性的荧光分析方法的构建贾宝珠1,何镇熹2,黄心洳1,邱芷靖1,郭琳苑1,袁钰佩1,王碧蔓2,罗 林2,*(1.广东第二师范学院生物与食品工程学院,广东广州 510303;2.广东省食品质量安全重点实验室,华南农业大学食品学院,广东广州 510642)摘 要:研究建立一种以氮掺杂碳点(Nitrogen-carbon dots ,N-CDs )为荧光探针,可快速、准确、灵敏检测鲜牛奶中碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ,ALP )的荧光分析方法。

采用水热法,用乙二胺为氮源和邻苯二酚为碳源制备一种绿色荧光N-CDs ,并采用透射电子显微镜(TEM )、紫外可见吸收光谱(UV-vis )、X 射线电子能谱(XPS )和傅里叶红外光谱(FT-IR ),对所合成的材料表面形貌、表面基团及光吸收特性进行表征,并通过对照试验对利用N-CDs 构建检测ALP 荧光分析方法的可行性进行验证。

临床免疫学和免疫检验荧光免疫技术讲义

临床免疫学和免疫检验荧光免疫技术讲义

第八章荧光免疫技术第一节概述荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。

一、荧光的基本知识1.荧光:荧光就是某些物质受到一定波长光的激发后,在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。

2.发射光谱:发射光谱是指固定激发光波长,在不同波长下所记录到的样品所发射的荧光强度谱图。

激发态电子回到的能级不同,发出的荧光波长就不同。

荧光物质在吸收光能后,即刻发射荧光,一旦停止供能,荧光随即消失。

3.激发光谱:激发光谱是指固定检测发射光荧光波长,用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。

4.荧光效率;在一定范围内,荧光强度与激发光强度呈正相关,即激发光越强,荧光越强,但过强的激发光会使荧光很快褪去。

5.荧光寿命:荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。

6.荧光淬灭:荧光物质在某些理化因素(如紫外线照射、高温、苯胺、酚、1-、硝基苯等)作用下,发射荧光减弱甚至消退称为荧光淬灭。

7.荧光偏振。

二、荧光物质(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或乙醇等溶剂。

分子量为389.4kD, 最大吸收光波长为490〜495nm,最大发射光波长为520〜530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。

其主要优点是:①人眼对黄绿色较为敏感;②通常切片标本中的绿色荧光少于红色荧光。

2.四乙基罗丹明(RB200):不溶于水,易溶于乙醇和丙酮。

性质稳定,可长期保存。

最大吸收光波长为570nm,最大发射光波长为595〜600nm,呈橘红色荧光。

3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):最大吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光。

4.藻红蛋白(R-RE):最大吸引光波长为565nm,最大发射光波长为578nm,呈明亮的橙色荧光。

(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以致3+应用最广。

EU3+螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于时间分辨荧光免疫测定。

不同产地斑叶兰及近缘种植物中两种内酯苷类成分的含量测定

不同产地斑叶兰及近缘种植物中两种内酯苷类成分的含量测定

接收日期:2023-10-03接受日期:2023-11-11基金项目:福建省卫生健康委员会中青年骨干人才培养项目(2021GGA057) *通信作者。

E-mail:*************;***************不同产地斑叶兰及近缘种植物中两种内酯苷类成分的含量测定敖艳霞1,冯 峰2,陈慧玲1,梁秀婷1,韩 玉1,吴锦忠1,吴岩斌1*,吴建国1*(1. 福建中医药大学药学院,福建 福州 350122;2. 福建省级机关医院药剂科,福建 福州 350003)摘 要:比较不同产地斑叶兰Goodyera schlechtendaliana 及近缘种植物中两种内酯苷类成分的含量,为斑叶兰药材的质量控制提供参考。

采用HPLC-ELSD 法,以ChromCore AQ C18 (3 μm ,4.6 mm×250 mm)为色谱柱,超纯水为流动相,等度洗脱;流速0.5 mL·min –1,柱温30 ℃,蒸发光散射检测器雾化温度70 ℃;载气流速2.5 mL·min –1,进样量5 μL ,测定30批不同产地斑叶兰及近缘种内酯苷类成分含量。

结果表明,斑叶兰苷和金线莲苷含量的线性范围均为62.5~1500 μg·mL –1,相关系数r 分别为0.9995、0.9996,精密度、重复性、稳定性的RSD 均小于3%;平均加样回收率分别为101.41%和101.16%,RSD 分别为1.53%和1.36%。

30批斑叶兰及近缘种植物的斑叶兰苷含量在28.31~243.07 mg·g –1之间,平均含量为134.31 mg·g –1,存在较大的差异(RSD =38.40%);30批斑叶兰及近缘种植物的金线莲苷含量在0~184.37 mg·g –1之间,平均含量为34.50 mg·g –1,也存在较大的差异(RSD =141.30%)。

该方法操作简便、快捷、稳定性和重复性良好,具有较好的精密度和准确度,可用于斑叶兰及近缘种内酯苷类成分含量分析。

SERS简介

SERS简介
• 将银溶胶在10000rpm的转速下,离心12分 钟浓缩十倍,。将定量滤纸剪成规格为 0.5cm*1cm的滤纸片将其浸泡于含氯离子的 银溶胶中自组装过夜,取出后用超纯净水 冲洗,除去吸附不紧密的Ag氧化物,晒干 后,就得到二维的纳米银膜,备用。
四、拉曼光谱实验
• 拉曼光谱是使用激光 共振拉曼分析系统获 得。实验使用的激发 光波长为632.8nm,采 用相关软件处理拉曼 光谱即可。
PVP
• 是一种非离子型高分 子化合物,是N-乙烯 基酰胺类聚合物中最 具特色,且被研究得 最深、广泛的精细化 学品品种。具有亲水 性易流动白色或近乎 白色的粉末,有微臭。 • 用作气相色谱固定液
实验部分
一、试剂与仪器 碱性磷酸酶、磷酸、硝酸银、氯 化钾、柠檬酸钠、拉曼光谱仪等
碱性磷酸酶(ALP)
2、化学增强机理(CM)
为了解释电磁场增强机理无法解释的现象,研究者 们提出化学增强模型来弥补电磁场增强模型的不足。 目标分子与金属表面之间相互作用形成化学键,是 一种短程作用 作用:化学增强模型主要考察目标分子与SERS之间的 相互作用
电磁场增强对SERS的贡 献最大
四、SERS在生物分析中的应用
3、SERS在DNA检测中的应用
吸附基底DNA 检测(早期)
非标记型 DNA检测 标记型 碱基特征光谱 检测(现代) SERS分子修饰 DNA检测
4、SERS在细胞和细菌检测中的应用
(1)SERS可用于生物体内复杂体系的研究 (2)借助灵敏度和选择性高的SERS标记物研 究细胞 (3)以银或金纳米颗粒作为SERS活性基底, 直接将其涂层到细菌的细胞壁上或吸附到 细胞壁上。
拉曼散射
小结
• 目前,SERS活性基底的制备,是SERS 研究领域的热点,高活性的SERS的发 展不仅可以拓宽SERS的应用范围,还 可以作为SERS理论模型不断推动SERS 技术的发展,我们尝试构建灵敏度高、 重现性好、制作简单的SERS基底,用 于化学和生物分子的分析检测。

泽泻醇A保护血脑屏障改善脑缺血

泽泻醇A保护血脑屏障改善脑缺血

泽泻醇 A保护血脑屏障改善脑缺血 /再灌注 损伤的作用和机制研究
邓云飞1,李惠红1,魏 伟2,周阳杰1,薛偕华2,3,4
(1.福建中医药大学康复医学院,福建 福州 350122;2.福建中医药大学附属康复医院,福建 福州 350003; 0122;4.福建省认知功能康复重点实验室,福建 福州 350003)
关键词:脑缺血 /再灌注损伤;基质金属蛋白酶 9;泽泻醇 A; 血脑屏障;神经保护;分子对接
开放科学(资源服务)标识码(OSID):
脑缺血 /再灌注损伤(cerebralischemiareperfu sioninjury,CIRI)是 缺 血 性 脑 卒 中 再 灌 注 治 疗 后 缺 血脑区血流再通和复氧引发的脑组织继发性损伤, 其机制与炎症、氧化应激和蛋白水解等相关[1-2],且 难以完全避免,其改善对缺血性脑卒中的治疗具有 重要意义。 CIRI主 要 由 血 脑 屏 障 (bloodbrainbarrier, BBB)破坏介导,脑缺血 /再灌注 (cerebralischemia reperfusion,CI/R)时 BBB破坏导致外源性免疫细 胞和炎症因子等进入脑组织,加重 CIRI[3-4]。BBB 由脑毛细血管的基膜、内皮细胞、周细胞和星形胶质 细胞终足构成,是脑组织和血液之间的物理屏障,阻 挡了神经毒性物质、血细胞和病原体等进入脑组织, 同时调控脑组织的代谢,对维持中枢神经系统的稳 态具有重要意义[4]。基质金属蛋白酶 9(matrixmet alloproteinase9,MMP9)是 CI/R过 程 中 破 坏 BBB 的重要病理因素,其属于基质金属蛋白酶家族,为一 种 Zn2+依赖的蛋白水解酶,可降解和重塑细胞外基 质。通过酶解 IV型胶原蛋白、层黏连蛋白和纤维连 接蛋白等,可破坏脑血管基底膜导致 BBB损伤[5]。 研究发现在 CIRI过程中 MMP9生成增多,而抑制 MMP9水平可有效改善 CIRI[6]。 目前临床上主要采用消炎和抗氧化应激药物治 疗 CIRI[7],但其具有疗效单一、用药条件严格和副

福州地区血清SCC和CYFRA21-1参考区间的初步建立

福州地区血清SCC和CYFRA21-1参考区间的初步建立

福州地区血清SCC和CYFRA21 1参考区间的初步建立沈秀卿1,沈 菁2,吴文冰2,徐如梅2,蒋丽莉1,陈发林1,2(1.福建医科大学省立临床医学院检验科,福建福州350000;2.福建省立医院检验科,福建福州350000)DOI:10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2020.05.013收稿日期:2019 11 04;修回日期:2019 12 11基金项目:福建省自然科学基金(编号:2017J0105)通讯作者:陈发林,福建省立医院检验科主任。

E mail:falinchen@126.com摘要:目的 检测福州地区体检人群血清鳞状细胞癌抗原(SCC)、细胞角蛋白 19片断抗原(CYFRA21 1)水平,建立适合参考区间,协助肿瘤辅助诊断、疗效判断及预后评估。

方法 收集福建省立医院2019年1月至3月间福州地区健康体检者共计366例,罗氏Cobase602全自动免疫分析仪用于检测血清SCC、CYFRA21 1的水平。

随后对不同性别及年龄段血清指标进行统计学分析,并利用单侧95%参考区间法计算各自的参考范围。

结果 365例SCC、366例CYFRA21 1的参考区间分别为0~2.46ng/mL和0~4.46ng/mL。

SCC水平男性组高于女性组,中位数分别为1.23ng/mL和0.99ng/mL。

统计学分析发现,SCC在各年龄组(P<0.001)及男女组(P<0.001)中血清水平差异具有统计学意义,故SCC参考区间建立应根据年龄和性别进行分组。

CYFRA21 1统计结果显示各年龄组差异有统计学意义(P<0.05),而在男女组无差异(P=0.11),故应根据年龄段分组。

结论 初步建立福州地区健康人血清肿瘤标志物SCC和CYFRA21 1的参考区间。

关键词:肿瘤标志物; 鳞状细胞癌抗原; 细胞角蛋白 19片断抗原; 参考区间中图分类号:R392.7 文献标识码:ATheInitialEstablishmentofReferenceIntervalofSCCandCYFRA21 1inFuzhouAreaSHENXiuqing1,SHENJing2,WUWenbing2,XURumei2,JIANGLili1,CHENFalin1,2(1.DepartmentofClinicalLaborabtonalExamnation,ClinicalMedicalCollegeofFujianMedicalUniversity,Fuzhou350000,China;2.DepartmentofClinicalLaboratorialExamination,FujanProvincalHospital,Fuzhou350000,China)Abstract:ObjectiveTofacilitatetheearlydiagnosis,effectiveevaluationandprognosisestimationofsquamouscellcarcinoma.Wemeasuredthelevelofsquamouscellcarcinomaantigen(SCC)andcytokeratin 19fragmentantigen(CYFRA21 1)fromphysicalexaminationpopulationinFuzhouarea,andestablishedthereferencerangeofSCCandCYFRA21 1.MethodsAtotalof366physicalexaminationsubjectswerecollectedfromFujianProvincialHospitalinFuzhoubetweenJanuary,2019andMarch,2019.ThelevelsofserumSCCandCYFRA21 1weredetectedbyRocheCobase602automaticimmuneanalyzer.Serumindexesofdifferentgendersandagegroupswerestatisticallyanalyzed,andtheirreferencerangeswerecalculatedbytheunilateral95%referenceinterval.ResultsThereferencerangeofSCCandCYFRA21 1were0 2.46ng/mLand0 4.46ng/mLinthispresentstudy,respectively.SCCinthefemalegroupwashigherthanthemalegroup,andmedianwere1.23ng/mLand0.99ng/mL,respectively.Accordingtothestatisticalanalysis,thelevelsofserumSCChadsignificantdifferencesamongagegroups(P<0.001),andgendergroups(P<0.001).Therefore,itwasnecessarytostratifiedbyageandsex.ThelevelsofserumCYFRA21 1hadsignificantdifferencesamongdifferentagegroups(P<0.05).However,itwasnotsignificantlydifferentbetweenmaleandfemalegroups(P=0.11).Therefore,itwasnecessarytostratifiedbyage.ConclusionThepreliminarilyreferencerangesofserumtumormarkersSCCandCYFRA21 1fromphysicalexaminationpopulationinFuzhouareaareestablishedinthecurrentstudy.Keywords:Tumormarker; Squamouscellcarcinomaantigen(SCC); Cytokeratin 19fragmentantigen(CYFRA21 1); Referenceinterval577标记免疫分析与临床 2020年5月第27卷第5期 肺癌已成为全球肿瘤相关死亡的最主要因素,严重威胁人类生命健康[1]。

组织非特异性碱性磷酸酶基因突变与低磷酸酶血症:2个新突变位点

组织非特异性碱性磷酸酶基因突变与低磷酸酶血症:2个新突变位点

组织非特异性碱性磷酸酶基因突变与低磷酸酶血症:2个新突变位点邵冲;郑慧;傅文贞;何进卫;汪纯;章振林【期刊名称】《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》【年(卷),期】2014(000)003【摘要】Objective We aimed to analyze the clinical manifestations to identify the disease-causing mutations in Chinese hypophosphatasia patients , and to realize the racial difference between diversified ethnic groups .Methods In family 1, a 35 year-old nonconsanguineous male was the proband with the severe clinical manifestation of hypophos -phatasia, his mother displayed mild clinical symptoms .In family 2, the proband was a 5-year-old boy, and his consan-guineous parents had no abnormalsign .All 12 exons and the exon-intron boundaries of the ALPL gene were amplified and directly sequenced in two probands from two unrelated Chinese families .The mutation sites were validated in other unaf-fected members of these two families and 200 healthy controls.Results In family 1, one novel missense mutation c.532T>C which consisted of a heterozygous T >C transition at nucleotide 532 in exon 6 was detected in the proband and his mother.In family 2, the proband revealed two missense mutations in exon 4 and exon 9 respectively, the one in exon 4 was a novel mutation (c.269A>G) which resulted in p.Asp90Gly in the mature ALPL polypeptide.Another mutation was c.871G>A in exon 9, which had beenalready reported in 1998.His mother was a health carrier who harbored the same missense mutation in exon 4 without any clinicalmanifestations .Conclusion Our study showed that two novel mu-tations of the ALPL gene c.532T>C in exon 6 and c.269A>G in exon 4, taking responsibility for hypophosphatasia in Chinese patients .%目的:对2例低磷酸酶血症( HPP)患者及家系进行分析和基因突变检测,拓展国人HPP致病基因库,探讨HPP的致病机制。

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收稿日期:2016-04-30 修订日期: xxxx基金项目:国家自然科学基金委项目(21373101)、吉林省教育厅“十三五”科研项目(2016137)、吉林化工学院博士启动基金(2016002)资助。

作者简介:任重远,原吉林大学博士生;现工作于吉林化工学院讲师 *通讯联系人E-mail: yqwu@组织非特异性碱性磷酸酶活力的原位红外光谱检测任重远1, 3,Saida Mebarek 2,René Buchet 2,吴玉清3*1吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林,1320222Laboratory ODMB UMR 5246, UniversitéLyon I, Villeurbanne France 696223吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室,长春,130012摘要 本文以孵育17天的小鸡胚胎中,富含组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的细胞外微结构——基质囊泡(MVs)作为研究模型,利用焦磷酸盐(PP i )作为TNAP 酶的天然底物,在近生理条件下,以红外(IR)光谱为监测工具,原位检测MVs 水解PP i 的反应过程,根据红外谱图特征吸收峰的变化,计算TNAP 酶活力值。

关键词:基质囊泡;生物底物;IR 光谱;原位检测;酶活力 中图分类号:O657.3 文献标识码:A 文章编号:组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)是人体骨骼矿化形成的生物标志物,其酶活力的高低能够直接反映矿化形成能力的强弱。

目前,测试TNAP 酶活力的主要方法是利用其外源性荧光底物——4-硝基苯磷酸(p -NPP)、在碱性条件下(pH=10.4)监测405 nm 处荧光强度来检测TNAP 的酶活力值。

但是,这种测试条件与人体生理环境下的pH 值相距甚远。

因此,开发一种在生理条件下、以生理化合物作为检测底物的快速、经济的检测碱性磷酸酶活性的方法,将作为热点研究。

在骨骼中,具有矿化能力的成骨细胞、成牙细胞以及肥大的软骨细胞等,能够将含有高TNAP 活性表达的基质囊泡(MVs )释放至细胞外环境中,并从而引发矿化形成[1];MVs 是细胞外微观结构,能够为无机磷酸离子及钙离子提供沉积位点,是矿化产物羟磷灰石(HA )晶体形成的场所,因此MVs 也可视为新骨骼产生矿化的基本单位[2]。

本文选择孵育17天的小鸡胚胎中所提取并纯化的细胞外微结构——基质囊泡(MVs),并将其作为研究模型,红外光谱技术为检测工具,利用焦磷酸盐(PP i )作为TNAP 酶的天然底物,在近生理条件下,监测MVs 水解PP i 的反应过程。

同时,根据红外谱图特征吸收峰的变化,计算TNAP 酶活力值。

PP i 作为TNAP 酶的底物,水解过程中产生2个无机磷酸盐(P i )分子,因此,我们首先对反应过程中的反应物(PP i )及产物(P i )进行红外表征。

实验结果显示,在红外指纹区(1300-900 cm -1),相同浓度(50 mM)的PP i 与无P i 的红外光谱谱图存在明显的差异,而且它们相互之间不发生重叠。

PP i 在1107 cm -1位置存在一个明显特征峰,而P i 在1076及990 cm -1分别存在两处明显的吸收峰,这是由于磷酸盐分子中HPO 42-反对称伸缩振动与对称伸缩振动所引起的[3]。

在37 °C ,pH 8.0反应条件下,利用红外光谱技术对MVs 水解PP i 过程实时监测,每隔5min 红外扫描一次,并持续60分钟。

红外光谱检测结果显示,4000-1300 cm -1的光谱范围在整个水解过程中并未明显特征峰的变化。

然而,在1300-900 cm -1的红外区域内却发生了明显的特征峰的变化(Fig.1)。

Fig. 1 Difference IR spectra of MVs with PP i (spectrum recorded at the indicated time minus that recorded immediately). Significant variation in the intensity ofabsorption bands of PP i located at 1120-1100 cm-1 as well as other variations attributed to P i at 1075-1080 cm-1and 990 cm-1 were observed.如红外差谱结果所示(Fig.1),在60分钟反应内,作为底物的PP i在1107 cm-1处不但发生了明显的强度减弱,还产生了一定的红移(1120 cm-1);与此同时,P i在1070-1080 cm-1范围内及990 cm-1位置的红外吸收峰强度随时间逐渐升高。

PP i在1120 cm-1产生负吸收峰,而P i在1076 cm-1及990 cm-1两处同时产生正吸收峰。

这说明,MVs能够有效水解PP i并同时产生其水解产物P i。

这种连续、动态的反应过程,通过红外光谱监测能够很清晰地展示出来。

基于以上实验结果,我们对TNAP酶活力进行分析。

利用1100-1120 cm-1、1070-1080 cm-1及990 cm-1三处红外特征吸收峰的变化,根据Beer-Lambert 定律(A = ε⋅l⋅C),我们可以利用光吸收强度的变化,计算出水解反应过程中反应物及产物的浓度变化,而单位时间内反应物及产物的浓度变化,即反映了TNAP水解能力(酶活力值)。

通过对反应物PP i及水解产物P i的摩尔吸光系数的计算,我们获得了不同蛋白浓度MVs下TNAP酶活力的比活值(Table. 1)。

(ε-PPi-1107= 2158 ± 211 M-1.cm-1, ε-Pi-1080= 1215 ± 131 M-1.cm-1, ε-Pi-990= 443 ± 50 M-1.cm-1)Table. 1Specific activities of TNAP in the different concentration of MVs.MVsmg/mLSpecific ActivityU/mg1 1.4841.5 1.3682 1.5662.5 1.83然而,原位红外检测TNAP酶活力方法在实际应用过程中仍存在局限性。

例如,以α-G-1-P、β-GP等生物底物进行水解时,峰位选取不准确和谱带重叠将给酶活力的测试结果带来偏差。

因此,将数据进行二维相关分析[4],可对计算结果校准改进。

参考文献[1] Anderson HC. The role of matrix vesicles in physiological and pathological calcification.Curr OpinOrthop.2007 18, 428.[2] Anderson HC, Garimella R, Tague SE. The role of matrix vesicles in growth plate development andbiomineralization. Front Biosci. 2005 10, 822.[3] Ren ZY, Do LD, Bechkoff G, et al Direct determination of phosphatase activity from physiological substratesin cells. PLoS One. 2015,10, e0120087.[4] Noda I, Ozaki Y, Two-dimensional correlation spectroscopy-applications in vibrational and opticalspectroscopy. Wiley Press, Chichester, 2004.In Situ Infrared Spectroscopic Determination of Tissue Non-Specific Alkaline Phosphatase ActivityREN Zhongyuan1, 3,Saida Mebarek 2,René Buchet 2, WU Yuqing 3*1.College of Biology and Food Engineering, Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 132022, Chinaboratory ODMB UMR 5246, UniversitéLyon I, Villeurbanne, 69622, France3. State Key Laboratory of Supramolecular Structure and Materials, Jilin University, Changchun, 130012, ChinaAbstract In this work, we chose matrix vesicles as a modeling which extracted from femurs of 17-day-old chicken embryo chondrocytes was rich in tissue nonspecific alkaline phosphatase (TNAP). To assay TNAP activity, we demonstrated the ability of IR spectroscopy to directly determine in situ a phosphatase activity using natural substrates under near physiological condition.Keywords Matrix Vesicles; Natural Substrate; Infrared Spectroscopy; In Situ Assay; Enzymatic activity * Corresponding author。

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