2015-2016学年 3.2《月季的花药培养》课件
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3.2月季的花药培养ppt课件
染色体数无需加倍。 而花药培养技术取材为花药，培养的为单倍体幼 苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使 染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。
18
总结：
19
1.基因型为AaBb的水稻(２４条染色体)的花药通过无菌操
作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。
(１)愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团，
的变化，因而需要鉴定和筛选。
【思考14】为什么通过愈伤组织形成的植株会发生 染色体倍性的变化？
有些是由花粉发育形成的单倍体植株， 有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体植株。
17
【思考15】植物组织培养技术与花药培养技术有何异同？ 相同点：二者均为离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,
再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 不同点：植物组织培养技术所用的外植体为体细胞，
理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件 P1329
二、实验操作 （一）材料的选取 P39 1.选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期，
此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂 是 醋酸洋红 和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以 将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。 2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。该试剂的配制方法 是将无水酒精和冰醋酸 按体积比为 3:1 的比例 混合均匀。
22
P38第二段 9
【思考5】什么是体细胞胚？ P38小字 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为
与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦 与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。
【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为 单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
18
总结：
19
1.基因型为AaBb的水稻(２４条染色体)的花药通过无菌操
作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。
(１)愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团，
的变化，因而需要鉴定和筛选。
【思考14】为什么通过愈伤组织形成的植株会发生 染色体倍性的变化？
有些是由花粉发育形成的单倍体植株， 有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体植株。
17
【思考15】植物组织培养技术与花药培养技术有何异同？ 相同点：二者均为离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,
再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 不同点：植物组织培养技术所用的外植体为体细胞，
理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件 P1329
二、实验操作 （一）材料的选取 P39 1.选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期，
此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂 是 醋酸洋红 和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以 将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。 2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。该试剂的配制方法 是将无水酒精和冰醋酸 按体积比为 3:1 的比例 混合均匀。
22
P38第二段 9
【思考5】什么是体细胞胚？ P38小字 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为
与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦 与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。
【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为 单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
3.2月季的花药培养(经典)PPT课件
花粉的发育要经历：四分体时期、单核
期、双核期等阶段。
-
4
（一）被子植物的花粉发育
-
5
1花粉母 减分 4个小孢子(小孢子
细胞（2n）
四分体)（n）
单核居中期（n）
有分 单核靠边期（n）
1个花粉管细胞核（n）
1个生殖细胞核（n） 有分
-
2个精子 6
注意：
• ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管 细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）
-
9
（三）影响花药培养的因素
1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期） 合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间） 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种
密度等 2、培养基的组成
-
10
实验操作
材料选取
材料和 消毒
接种和 培养
-
11
（一）材料选取
月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的
伤组织。接种后2~5d，若发现外植体边缘局部污染，原
因可能是__外__植__体__消__毒不彻底
。
（3）在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形
成根，但分化出了芽，其原因可能是_培__养_基__中__生__长__素_类。
物质和细胞分裂- 素类物质用量的比值偏低18
-
1
植物的花药培养在育种上有什
么意义？
缩短了
花粉粒（1N）
育种周期， 为新品种的
单倍体植株 （1N）
培育开辟了 新途径。
二倍体纯合子 - 植株（2N） 2
花的结构
-
3
（一）被子植物的花粉发育
雄蕊
3.2《月季的花药培养》(共21张PPT)
花粉发育经 历的时期
材料与培养基 其他因素
材料的选取 实验操作 消毒 接种和培养
练习1.
答 ： F2 紫 色 甜 玉 米 的 基 因 型 组 成 可 能 为 Aasusu 或
AAsusu。如果运用常规育种方法，将F2中的紫色甜玉米与 白色甜玉米（ aasusu ）进行测交，可以选择出基因型为 AAsusu 纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐，耗时也 较长，需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药培 养的技术，在F1 产生的花粉中就可能有 Asu 的组合，再将 花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的 纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短育种周期。
单核( 居中)期(n)
单核(靠边)期(n)
( 有丝 )分裂
双核期(n)
（二）产生花粉植株的两种途径 花药中 脱分化 ① 的花粉 再分化
愈伤组织
丛芽
诱 导 生根
花药中 脱分化 ② 的花粉
胚状体
细胞在形 态上转变为与合子发育成胚非常相似的结构， 发育过程亦与合子胚类似。
退 出
练习2. 答：植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是：
培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。
两者的不同之处在于：花药培养的选材非常重要，需 事先摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组
织或胚状体也要及时更换培养基；花药培养对培养基配
方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也 可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3～5次
（三）接种和培养 1、剥取花药 ①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织
②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药
3.2《月季的花药培养》课件
选取适宜的材料和培养基的组成是花粉植株诱导成功的 关键，也是本节课的重点和难点。通过补充一些不同植物和 不同花粉发育时期的花药培养的资料，让学生认识到材料的 选择和培养基配方的重要。然后强调月季花药培养时，选择 初花期、完全未开放的花蕾、单核靠边期的花粉进行培养， 花药培养的成功率最高。
...
视频：
原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径 烟草花药培养
...
①②
③④
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径 水稻花药培养 . . .
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
...
1、材料的选择
不注同意植：物选的择诱最导成合功适率的不花同粉. 发育时期:单核靠边期 同一①植不物选的择不单同核生理期状之况前也花对药诱原导成因功：率花有药直质接地的影幼响嫩. ， 容（易一破般碎选；月季的初花期） 合适②的不花选粉择发育单期核（期单之核后居花中药期与原靠因边：期花之瓣间开） 始松动， 给2激材、素料培③）消养挑基毒选的带单组来核成困（期难花M；S药培养方基法+：不同应比当例选的择植完物全生长未调开节放的 花蕾，微生物少，易消毒。
•紫荆月季花韵.flv
“花中皇后”月季通常用扦插的方法繁殖
一、基础知识
...
（一）被子植物的花粉发育
花丝 1 雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉
2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的 单倍体的生殖细胞.
花的结构
花托 花萼 花瓣 雄蕊
雌蕊
...
花药 花丝 柱头 花柱 子房
...
...
视频：
原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径 烟草花药培养
...
①②
③④
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径 水稻花药培养 . . .
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
...
1、材料的选择
不注同意植：物选的择诱最导成合功适率的不花同粉. 发育时期:单核靠边期 同一①植不物选的择不单同核生理期状之况前也花对药诱原导成因功：率花有药直质接地的影幼响嫩. ， 容（易一破般碎选；月季的初花期） 合适②的不花选粉择发育单期核（期单之核后居花中药期与原靠因边：期花之瓣间开） 始松动， 给2激材、素料培③）消养挑基毒选的带单组来核成困（期难花M；S药培养方基法+：不同应比当例选的择植完物全生长未调开节放的 花蕾，微生物少，易消毒。
•紫荆月季花韵.flv
“花中皇后”月季通常用扦插的方法繁殖
一、基础知识
...
（一）被子植物的花粉发育
花丝 1 雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉
2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的 单倍体的生殖细胞.
花的结构
花托 花萼 花瓣 雄蕊
雌蕊
...
花药 花丝 柱头 花柱 子房
...
3.2月季的花药培养
期、双核期等阶段。
（一）被子植物的花粉发育
1花粉母 减分 4个小孢子(小孢子 细胞（2n） 四分体)（n） 单核居中期（n） 单核靠边期（n） 有分
1个花粉管细胞核（n） 1个生殖细胞核（n） 有分
2个精子
注意：
• ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管 细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） • ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前， 生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子， 这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个 精子。 • ③两个精子和一个营养核的基因型相同。
实验操作
材料选取
材料和 消毒
接种和 培养
（一）材料选取
月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的 重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向 细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法：醋酸洋红法。 某些植物的花粉细胞核不易着色， 采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成 蓝黑色。
取材为花药，培养的为 单倍体幼苗，植株弱小， 高度不育，必须用秋水 仙素处理，使染色体加 倍，恢复正常植株的染 色体数，而且为纯种。
化形成愈伤 花药培养技术 组织，再分 化成丛芽， 诱导出根， 然后进行移 栽。
课堂检测 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确 的是（ BD ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂 的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体 时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞 一侧，再移到细胞中央
要彻底除去花丝？
接种花药 每个培养瓶接种 （7～10 ） 个花药？
培养
主要原因是 营养核和生 殖核融合造 成的
课件15：3.2 月季的花药培养
月季的花药培养
一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育 花丝
1.雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉
2.花粉: 由花粉母细胞（小孢子母细胞）历经减数分裂、有丝分裂 而形成，是单倍体的生殖细胞。
3.花粉发育阶段：
小孢子四 分体时期
单核期 双核期
4.被子植物花粉的发育过程
减数分裂
小孢子 母细胞
4个 小孢子
培养基的组成
在1000mL MS 培养基配方中添加
2.4—D
0.4 mg
KL
0.2 mg
IAA
4 mg
调节PH至5.8
亲本生长条件、材料低 温处理、接种密度等
生长旺盛植株花药较易形成花 粉植株；栽培条件的好坏也影 响花粉植株的诱导率。
主要影响因素：材料的选择 培养基的组成
（一）材料的选取
二、实验操作
体细胞胚（胚状体）。 来源：直接由器官产生；由单个细胞产生； 由愈伤组织产生。
特别提醒：
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及
其浓度配比。
（三）影响花药培养的因素
1.材料的选择
花期：初花期。
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养 时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。
特点：细胞质浓厚
1个小孢子 （单核居中期）
精子 精子
营养 细胞
有丝分裂 生殖 细胞
花粉管 细胞核
生殖 细胞核
有丝分裂
（二）产生花粉植株的两种途径
① 花药中 的花粉
② 花药中
脱分化 脱分化
胚状 体
愈伤
分化 再分化
丛芽
诱导 生根
移 栽
的花粉
一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育 花丝
1.雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉
2.花粉: 由花粉母细胞（小孢子母细胞）历经减数分裂、有丝分裂 而形成，是单倍体的生殖细胞。
3.花粉发育阶段：
小孢子四 分体时期
单核期 双核期
4.被子植物花粉的发育过程
减数分裂
小孢子 母细胞
4个 小孢子
培养基的组成
在1000mL MS 培养基配方中添加
2.4—D
0.4 mg
KL
0.2 mg
IAA
4 mg
调节PH至5.8
亲本生长条件、材料低 温处理、接种密度等
生长旺盛植株花药较易形成花 粉植株；栽培条件的好坏也影 响花粉植株的诱导率。
主要影响因素：材料的选择 培养基的组成
（一）材料的选取
二、实验操作
体细胞胚（胚状体）。 来源：直接由器官产生；由单个细胞产生； 由愈伤组织产生。
特别提醒：
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及
其浓度配比。
（三）影响花药培养的因素
1.材料的选择
花期：初花期。
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养 时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。
特点：细胞质浓厚
1个小孢子 （单核居中期）
精子 精子
营养 细胞
有丝分裂 生殖 细胞
花粉管 细胞核
生殖 细胞核
有丝分裂
（二）产生花粉植株的两种途径
① 花药中 的花粉
② 花药中
脱分化 脱分化
胚状 体
愈伤
分化 再分化
丛芽
诱导 生根
移 栽
的花粉
课件10：3.2 月季的花药培养
是
()
A．材料的选择最常用的方法是焙花青-铬矾法，这
种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色
B．材料消毒时需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或
次氯酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗
C．接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株
形成后需要光照
D．若接种的花药长出愈伤组织或形成胚状体后，要
适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株
[跟随名师·解疑难]
1．镜检花粉发育时期的方法比较
项目
醋酸洋红法
焙花青-铬矾法
方法的 使用
常用的方法
花粉细胞核不易着色时，使用 该方法
不
花药在卡诺氏固定液中固定
将花药放在载玻片→滴1滴
同
20 min→取出，放在载玻片上
步骤 1%醋酸洋红→用镊柄捣碎
点
→焙花青-铬矾溶液染色→盖
花药→盖上盖玻片→镜检
[解析] 确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋 红法，有些植物细胞核不易着色时，需采用焙花青-铬矾法。 在形成愈伤组织或胚状体前，没有叶绿素的形成，不进行光 合作用，不需要光照；幼小植株形成后开始进行光合作用， 需要光照。花药离体培养的不同阶段，对主要营养的需求不 一样，所以要适时转换培养基。
[答案] A
答案：(1)生殖细胞 营养细胞 (2)小孢子四分体时期单核期 双核期 8 2 (3)醋酸洋红 (4)70%的酒精、0.1%的氯化汞 溶液(或 1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液) (5)与花丝 相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成
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月季组织培养中的三种培养基及使用顺序 (1)脱分化培养基：1 000 mL MS 培养基加入 0.4 mg 2， 4-D、0.2 mg KIN、4 mg IAA。 (2)生芽培养基：MS 培养基中添加 GA、IBA 和 BA，质 量浓度分别为 0.1 mg/L、0.5 mg/L 和 1 mg/L。 (3)生根培养基：MS 培养基各成分用量减半，添加 IAA， 质量浓度为 1.5 mg/L。 三者使用的顺序为：先用脱分化培养基，再用生芽培养 基，然后用生根培养基。如果先用生根培养基，再用生芽培 养基，则不能生芽。
月季的花药培养PPT教学课件
合子）。
2021年10月20日星期三
30
中国黄牛
ⅹ
荷斯坦牛 中 国 荷 斯 坦 牛
例1：小麦抗锈病（T）对易染锈病（t）为显性，易倒
伏（D）对抗倒伏（d）为显性。Tt位于一对同源染色体
上，Dd位于另一对同源染色体上。现有抗锈病但易倒伏
的纯种和易染锈病抗倒伏的纯种杂交，来培育抗锈病又
抗倒伏的高产品种。请回答：
点滴收获之2：单倍体育种
一、依据原理： 染色体变异
二、常用方法：花药（花粉）离休培养 三、优点： 明显缩短育种年限 四、缺点： 技术复杂且须与杂交育种配合 五、应用：
小麦高秆（D）对矮秆（d）为显性，抗锈病（T） 对不抗锈病（t）为显性，现有纯合的高秆抗锈病的小 麦（DDTT）和矮秆不抗锈病的小麦（ddtt），如果你是 袁隆平，怎样才能得到矮秆抗病的优良品种（ddTT）且 育种年限要最短？
小麦 DDTT×ddtt
↓ DdTt ↓×
D_T_，D_tt， ddT_，ddtt
亲本杂交
种植F1代，自交 种植F2代， ( 选 矮 秆 、 抗 病 ddT_ ） ， 继续自交，期望下代获得 纯合体
遗传图解
2021年10月20日星期三
28
根据自由组合定律，在F2中高产抗病（一显一隐）品种 占总数的 3/16 ，其中有 2/16 的植株是杂合子，它们 的下一代会出现 性状分离 。因此，要想得到可以代代
2．消毒 常 用 消 毒 液 为 ___7_0_%__的__酒__精____ 和 0.1% 的 氯 化 汞 溶 液，消毒时间分别为30 s和2～4 min。 3．接种和培养 (1) 接 种 要 求 ： 在 无 菌 条 件 下 除 去 萼 片 、 花 瓣 和 __花__丝__，并将花药立即接种到培养基上。 (2)培养条件：温度在25 ℃左右，幼小植株形成后需 要__光__照__。 (3)鉴定和筛选：在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现_染__色__体__倍__性___的变
2021年10月20日星期三
30
中国黄牛
ⅹ
荷斯坦牛 中 国 荷 斯 坦 牛
例1：小麦抗锈病（T）对易染锈病（t）为显性，易倒
伏（D）对抗倒伏（d）为显性。Tt位于一对同源染色体
上，Dd位于另一对同源染色体上。现有抗锈病但易倒伏
的纯种和易染锈病抗倒伏的纯种杂交，来培育抗锈病又
抗倒伏的高产品种。请回答：
点滴收获之2：单倍体育种
一、依据原理： 染色体变异
二、常用方法：花药（花粉）离休培养 三、优点： 明显缩短育种年限 四、缺点： 技术复杂且须与杂交育种配合 五、应用：
小麦高秆（D）对矮秆（d）为显性，抗锈病（T） 对不抗锈病（t）为显性，现有纯合的高秆抗锈病的小 麦（DDTT）和矮秆不抗锈病的小麦（ddtt），如果你是 袁隆平，怎样才能得到矮秆抗病的优良品种（ddTT）且 育种年限要最短？
小麦 DDTT×ddtt
↓ DdTt ↓×
D_T_，D_tt， ddT_，ddtt
亲本杂交
种植F1代，自交 种植F2代， ( 选 矮 秆 、 抗 病 ddT_ ） ， 继续自交，期望下代获得 纯合体
遗传图解
2021年10月20日星期三
28
根据自由组合定律，在F2中高产抗病（一显一隐）品种 占总数的 3/16 ，其中有 2/16 的植株是杂合子，它们 的下一代会出现 性状分离 。因此，要想得到可以代代
2．消毒 常 用 消 毒 液 为 ___7_0_%__的__酒__精____ 和 0.1% 的 氯 化 汞 溶 液，消毒时间分别为30 s和2～4 min。 3．接种和培养 (1) 接 种 要 求 ： 在 无 菌 条 件 下 除 去 萼 片 、 花 瓣 和 __花__丝__，并将花药立即接种到培养基上。 (2)培养条件：温度在25 ℃左右，幼小植株形成后需 要__光__照__。 (3)鉴定和筛选：在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现_染__色__体__倍__性___的变
课件4：3.2月季花药培养
2．培养基 花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂 的水平和配比起决定作用。 (1)诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用 2,4－D、IAA和KT。 (2)诱导分化的培养基常除去2,4－D而以IBA或BA 等代之。
3．花药供体植株的生长条件和预处理 (1)花药供体植株的生长条件影响花药的发育程度。 发育良好、健康的花药诱导率高，供体植株年龄 对花药培养有影响，年龄过大，其诱导率低。 (2)培养前的低温预处理很有必要，处理一般在4～ 10℃下保持10～20d。
[解析] 花粉是由花粉母细胞经减数分裂形成的； 其发育经历了四分体时期、单核期和双核期等阶段。 四分体时期指4个单倍体细胞连在一起，而减数分 裂的四分体时期是指同源染色体配对后，1个四分 体含4个染色单体的阶段；花粉粒内的生殖细胞再 经有丝分裂得到2个精子。答案为B。
[答案] B
2、形成过程和培养过程进行的细胞分裂依次为( D ) A．减数分裂、有丝分裂 B．有丝分裂、减数分裂 C．有丝分裂、有丝分裂 D．减数分裂和有丝分裂、有丝分裂 [解析] 形成花粉的最初的母细胞为小孢子母细胞， 小孢子母细胞经过一次减数分裂形成4个小孢子，每 个小孢子再经过一次有丝分裂形成花粉粒。花粉粒 通过有丝分裂被培养成单倍体植株。
温馨提示：①接种月季花药的选择时期是5月份初花 期，花蕾完全未开放时，此时花药处于单核期，花 瓣未松动，菌少、易消毒，易诱导成功。 ②对花药进行低温预处理时，注意温度、时间要恰 当，温度过高、过低，时间过长、过短，都会影响 诱导结果，一般选择4～10℃，预处理10～20d。 ③不同种植物花药培养所需的培养基种类、激素种 类及浓度不同，对培养也有重要影响。
特别提示：(1)成熟的花粉粒，有的只含花粉管细胞核(营养核) 和生殖细胞核，这样的花粉粒称二核花粉粒。另一些植物的花 粉，在成熟前生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这 样的花粉在成熟时有一个营养核和两个精子，这样的花粉粒称 三核花粉粒。 (2) 小 孢 子 母 细 胞 减―数―分→裂 4 个 小 孢 子 (n) 有―丝―分→裂 4个花粉管细胞核n 4个生殖细胞核n有―丝―分→裂8个精子n (3)同一生殖细胞核形成的两个精子，其基因组成完全相同。
《月季花药培养》课件
花药处理
去除花药周围的残留花瓣和叶片 ，确保花药暴露在培养基上，以 便于后续操作。
花药的消毒与去雄
消毒方法
使用适宜的消毒剂对花蕾进行表面消毒，以去除表面微生物 。
去雄步骤
在显微镜下操作，用镊子小心去除花药中的雄蕊，确保雌蕊 不受损伤。
花药的接种与培养
接种技术
将处理好的花药移植到准备好的培养基上，确保花药与培养基紧密接触。
技术进步
随着生物技术的不断进步，未来月季花药 培养的成功率和技术难度有望得到进一步
改善。
经济效益提升
随着技术的成熟和成本的降低，月季花药 培养有望为花卉产业带来更大的经济效益
。
应用领域拓展
月季花药培养不仅可用于月季新品种的培 育，还可应用于其他花卉、果树、药用植 物等领域，具有广阔的应用前景。
社会效益增强
通过花药培养，可以繁殖大量优质月 季，保护和保存珍贵的花卉资源，避 免品种退化和消失。
月季花药培养的未来发展方向
优化培养条件
进一步研究月季花药培养的最优条件 ，提高花药培养的成功率和效率。
基因编辑技术的应用
结合基因编辑技术，定向改造月季的 性状，提高花药的再生能力和花苗的 质量。
拓展应用范围
将花药培养技术应用于其他花卉和农 作物，扩大其应用范围，为农业生产 提供更多帮助。
月季花药培养的原理
月季花药培养的基本原理是植物细胞的全能性。
月季花药中的单倍体细胞在适宜的培养条件下，能够诱导分化形成完整的植株。
通过花药培养获得单倍体植株后，再经秋水仙碱诱导加倍后筛选纯合二倍体植株， 可进行遗传转化和基因工程改良。
01
月季花药培养的过 程
花药的选择与处理
选择健康的花药
去除花药周围的残留花瓣和叶片 ，确保花药暴露在培养基上，以 便于后续操作。
花药的消毒与去雄
消毒方法
使用适宜的消毒剂对花蕾进行表面消毒，以去除表面微生物 。
去雄步骤
在显微镜下操作，用镊子小心去除花药中的雄蕊，确保雌蕊 不受损伤。
花药的接种与培养
接种技术
将处理好的花药移植到准备好的培养基上，确保花药与培养基紧密接触。
技术进步
随着生物技术的不断进步，未来月季花药 培养的成功率和技术难度有望得到进一步
改善。
经济效益提升
随着技术的成熟和成本的降低，月季花药 培养有望为花卉产业带来更大的经济效益
。
应用领域拓展
月季花药培养不仅可用于月季新品种的培 育，还可应用于其他花卉、果树、药用植 物等领域，具有广阔的应用前景。
社会效益增强
通过花药培养，可以繁殖大量优质月 季，保护和保存珍贵的花卉资源，避 免品种退化和消失。
月季花药培养的未来发展方向
优化培养条件
进一步研究月季花药培养的最优条件 ，提高花药培养的成功率和效率。
基因编辑技术的应用
结合基因编辑技术，定向改造月季的 性状，提高花药的再生能力和花苗的 质量。
拓展应用范围
将花药培养技术应用于其他花卉和农 作物，扩大其应用范围，为农业生产 提供更多帮助。
月季花药培养的原理
月季花药培养的基本原理是植物细胞的全能性。
月季花药中的单倍体细胞在适宜的培养条件下，能够诱导分化形成完整的植株。
通过花药培养获得单倍体植株后，再经秋水仙碱诱导加倍后筛选纯合二倍体植株， 可进行遗传转化和基因工程改良。
01
月季花药培养的过 程
花药的选择与处理
选择健康的花药
3.2月季的花药培养课件
（二）材料的消毒
阅读“（二）材料的消毒”，填写下列流程图：
花 蕾
70%酒精） （______ （_______ 无菌水）
浸泡约 30s 清洗
无菌吸水纸 （ __________）
吸干水分
（_______ 无菌水 ） 冲洗3～5次
1% 1% 次氯酸钙溶液 氯化汞溶液 1% 氯化汞溶液） 饱和漂白粉溶液 （____________ 消毒2～4min
9.草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后 代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培 育出无病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本过程如下：外植 体 ① 愈伤组织 ② 芽、根 植株 请回答： （1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取 茎尖、根尖不含病毒 _________ ___ 。 茎尖、根尖 作为外植体，其依据是_ （2）在过程①中，常用的MS培养基主要成分包括大量 有机物 元素、微量元素和______ ，在配制好的培养基中，常常需 要添加________ ，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组 植物激素 织。接种后2~5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可 能是__________ 。 外植体消毒不彻底 （3）在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形 成根，但分化出了芽，其原因可能是_____________ 。 培养基中生长素类 物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低
为什么花瓣松动会给 为什么花瓣松动会给材 材料的消毒带来困难？ 料的消毒带来困难？
答：花瓣松动后，微
生物就可能侵入到花药，
给材料的消毒带来困难。
2.培养基的组成：
花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂的 水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用 2， 4-D、IAA； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA代之。
人教版《月季的花药培养》课件ppt1〔完美版〕
3 通常每瓶接种花药 7-10个，温度控制在 25℃ 左 右，不需要光照。幼小植株形成后才 需要光照。
4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变 化
每个人的心灵深处都有着只有他自己 理解的 东西。 对具有高度自觉与深邃透彻的心灵的 人来说 ，痛苦 与烦恼 是他必 备的气 质。 在一切创造物中间没有比人的心灵更 美、更 好的东 西了。 唯有心灵能使人高贵。所有那些自命 高贵而 没有高 贵的心 灵的人 ，都像 块污泥 。 一个人只要他有纯洁的心灵，无愁无 恨，他 的青春 时期， 定可因 此而延 长。 能充实心灵的东西，乃是闪烁着星星 的苍穹 ，以及 我内心 的道德 律。 你的心灵常常是战场。在这个战场上 ，你的 理性与 判断和 你的热 情与嗜 欲开战 。 无所事事并非宁静，心灵的空洞就是 心灵的 痛苦。
胚状体发育途径 烟草花药培养
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径 水稻花药培养
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
1、材料的选择
不同植物的诱导成功率不同. 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有 直接的影响. （一般选月季的初花期）
花中皇后月季又称“月月红”，自然花期5至11月， 开花连续不断 ，通常扦插就可以成活。
知识回顾
• 单倍体育种的过程？
正常植株（2N）
花药离体培养（N） 单倍体植株（N）
植株（2N）
秋水仙素处理， 使染色体翻倍
特点：1 明显缩短育种年限
2 后代植株都为纯合子。
课题2 月季的花药培养
花的结构
花托 花萼 花瓣 雄蕊
生殖细胞将再进行一次有丝分裂，形成两个精子
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注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的 细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞 核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。
（二）产生花粉植株的两种途径
...
丛芽
诱导
花药中 ① 的花粉
花药中 ② 的花粉
脱分化
分化
胚状体
再分化
脱分化
愈伤组织
丛芽 生根
移栽 原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径
烟草花药培养
.Байду номын сангаас.
①
②
③
④
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径
水稻花药培养
...
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
...
1、材料的选择 不同植物的诱导成功率不同 . 注意：选择最合适的花粉发育时期 :单核靠边期 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响 . ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩， （一般选月季的初花期） 容易破碎； 合适的花粉发育期 （单核居中期与靠边期之间） ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动， 2、培养基的组成（ MS培养基+不同比例的植物生长调节 给材料消毒带来困难； 激素）
（二）材料的消毒
...
讨论：
为什么花瓣松动会给
为什么花瓣松动会给材 材料的消毒带来困难？ 料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生 物就可能侵入到花药，给材料 的消毒带来困难。
... 1 灭菌后花蕾，要在 无菌条件下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。 2 在剥离花药时，要尽量 不损伤花药 （否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 主要原因是 胚状体的形成。 花粉管核和 25℃ 3 通常每瓶接种花药 7-10个 ，温度控制在 左 生殖核融合 不需要光照 右， 。幼小植株形成后才 需要光照 造成的 。
③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的 花蕾，微生物少，易消毒。 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
...
（一）材料选取
1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核靠边期 从花蕾看：完全未开放的
...
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色) 焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)
课题2 月季的花药培养
...
1.说出被子植物花粉发育的过程及花药培 养产生花粉植株的两种途径. 2.说出影响花药培养的因素. 3.学习花药培养的基本技术，尝试用月季 或其他植物的花药进行培养。
... 以视频《月季花展》为情境，提出问题：月季一般怎 样繁殖？除了扦插、嫁接外，还可以用单倍体育种，导入新 课：《月季的花药培养》。基础知识部分，先学生自学、讨 论，后教师结合图片、流程图归纳分析：花粉的发育过程， 花粉植株产生的两种不同途径。实验操作中，确定花粉发育 时期的最常用的方法是醋酸洋红法。实验步骤、注意事项、 原因等。讲解清楚后，播放视频：《月季的花药培养》，直 观地再现实验各个环节的规范操作。 选取适宜的材料和培养基的组成是花粉植株诱导成功的 关键，也是本节课的重点和难点。通过补充一些不同植物和 不同花粉发育时期的花药培养的资料，让学生认识到材料的 选择和培养基配方的重要。然后强调月季花药培养时，选择 初花期、完全未开放的花蕾、单核靠边期的花粉进行培养， 花药培养的成功率最高。
...
月季花药培养时的花粉粒最好是（ C )
A、四分体时期
C、单核期
B、二核或三核花粉粒
... 1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5、无菌水冲洗3～5次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
...
视频：
•紫荆月季花韵.flv
“花中皇后”月季通常用扦插的方法繁殖
一、基础知识
...
（一）被子植物的花粉发育 花丝 1 雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉 2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的 单倍体的生殖细胞.
花的结构
花托
...
花萼
花瓣 雄蕊 花药
花丝 柱头
雌蕊
花柱 子房
被子植物花粉的发育过程
...
小孢子母细胞 减数分裂 4个小孢子 (小孢子四分体时期) 小孢子(单核居中期) 小孢子(单核靠边期)
小孢子 有丝分裂 生殖细胞核+花粉管细胞核 （花粉粒的双核期）
... 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ BD） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、 双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细 胞中央
不同点
1 培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本 相同。 2 都经过了脱分化 1 花粉是生殖细胞，得 1 离体培养的外植体 到的单倍体植株，弱小 且高度不育。 为体细胞。 2 有丝分裂的过程， 2秋水仙素处理，染色 染色体数量不变。 体加倍，恢复正常的染 色体数，为纯种。
...
...
1.课本 P40练习 2. 预习专题4
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织 或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便 进一步分化出再生植株。
（三）接种和培养
4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的 变化
...
月季的花药培养
... 植物组织培养技术与花药培养技术的比较
项目 相同点 植物组织培养 花药培养技术
（二）产生花粉植株的两种途径
...
丛芽
诱导
花药中 ① 的花粉
花药中 ② 的花粉
脱分化
分化
胚状体
再分化
脱分化
愈伤组织
丛芽 生根
移栽 原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径
烟草花药培养
.Байду номын сангаас.
①
②
③
④
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径
水稻花药培养
...
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
...
1、材料的选择 不同植物的诱导成功率不同 . 注意：选择最合适的花粉发育时期 :单核靠边期 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响 . ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩， （一般选月季的初花期） 容易破碎； 合适的花粉发育期 （单核居中期与靠边期之间） ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动， 2、培养基的组成（ MS培养基+不同比例的植物生长调节 给材料消毒带来困难； 激素）
（二）材料的消毒
...
讨论：
为什么花瓣松动会给
为什么花瓣松动会给材 材料的消毒带来困难？ 料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生 物就可能侵入到花药，给材料 的消毒带来困难。
... 1 灭菌后花蕾，要在 无菌条件下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。 2 在剥离花药时，要尽量 不损伤花药 （否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 主要原因是 胚状体的形成。 花粉管核和 25℃ 3 通常每瓶接种花药 7-10个 ，温度控制在 左 生殖核融合 不需要光照 右， 。幼小植株形成后才 需要光照 造成的 。
③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的 花蕾，微生物少，易消毒。 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
...
（一）材料选取
1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核靠边期 从花蕾看：完全未开放的
...
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色) 焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)
课题2 月季的花药培养
...
1.说出被子植物花粉发育的过程及花药培 养产生花粉植株的两种途径. 2.说出影响花药培养的因素. 3.学习花药培养的基本技术，尝试用月季 或其他植物的花药进行培养。
... 以视频《月季花展》为情境，提出问题：月季一般怎 样繁殖？除了扦插、嫁接外，还可以用单倍体育种，导入新 课：《月季的花药培养》。基础知识部分，先学生自学、讨 论，后教师结合图片、流程图归纳分析：花粉的发育过程， 花粉植株产生的两种不同途径。实验操作中，确定花粉发育 时期的最常用的方法是醋酸洋红法。实验步骤、注意事项、 原因等。讲解清楚后，播放视频：《月季的花药培养》，直 观地再现实验各个环节的规范操作。 选取适宜的材料和培养基的组成是花粉植株诱导成功的 关键，也是本节课的重点和难点。通过补充一些不同植物和 不同花粉发育时期的花药培养的资料，让学生认识到材料的 选择和培养基配方的重要。然后强调月季花药培养时，选择 初花期、完全未开放的花蕾、单核靠边期的花粉进行培养， 花药培养的成功率最高。
...
月季花药培养时的花粉粒最好是（ C )
A、四分体时期
C、单核期
B、二核或三核花粉粒
... 1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5、无菌水冲洗3～5次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
...
视频：
•紫荆月季花韵.flv
“花中皇后”月季通常用扦插的方法繁殖
一、基础知识
...
（一）被子植物的花粉发育 花丝 1 雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉 2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的 单倍体的生殖细胞.
花的结构
花托
...
花萼
花瓣 雄蕊 花药
花丝 柱头
雌蕊
花柱 子房
被子植物花粉的发育过程
...
小孢子母细胞 减数分裂 4个小孢子 (小孢子四分体时期) 小孢子(单核居中期) 小孢子(单核靠边期)
小孢子 有丝分裂 生殖细胞核+花粉管细胞核 （花粉粒的双核期）
... 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ BD） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、 双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细 胞中央
不同点
1 培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本 相同。 2 都经过了脱分化 1 花粉是生殖细胞，得 1 离体培养的外植体 到的单倍体植株，弱小 且高度不育。 为体细胞。 2 有丝分裂的过程， 2秋水仙素处理，染色 染色体数量不变。 体加倍，恢复正常的染 色体数，为纯种。
...
...
1.课本 P40练习 2. 预习专题4
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织 或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便 进一步分化出再生植株。
（三）接种和培养
4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的 变化
...
月季的花药培养
... 植物组织培养技术与花药培养技术的比较
项目 相同点 植物组织培养 花药培养技术