(医疗药品)中药药效毒理学

1．常用的药物依赖性实验方法有哪几种（包括精神依赖性和身体依赖性）？

一、身体依赖性试验：评价新药的身体依赖性潜力，根据新药所属类别不同，需分别进行以下几方面试验：

1、自然戒断试验：自然戒断试验属于慢性实验，对实验动物通常以剂量递增法给于试验药物；有的也采用恒量法。自然戒断实验的戒断症状发作慢，持续时间长，对戒断症状的定量有一定困难。但现已能在小鼠，大鼠，狗和猴等多种动物定量评价阿片类药物的身体依赖性潜力。试验原则是连续给予动物一段时间的受试药后突然停药，观察动物出现的戒断症状，与同类的代表药物作对比，按照戒断症状的严重程度判断受试药的依赖性潜力。

2、替代试验：替代试验是研究受试药物对药物戒断症状的抑制能力，进而评价受试药物与阿片类药物身体依赖性特征和强度的类似性。但抑制戒断症状试验可能出现假阳性和假阴性。有些症状仅在某种动物出现,另一些症状则在几种动物中出现。所以评价受试药物对多种戒断症状的抑制能力是非常重要的。

3、催促试验：试验原则是在短时间内给予动物大剂量受试药，然后注射受体对抗剂，观察和记录是否出现戒断症状及其程度。此法只适用于竞争性受体对抗剂的阿片类药物。

4、诱导试验：大部分镇静催眠药无竞争性受体对抗剂，因而不可能进行催促试验，可采用诱导试验。试验原则是判断镇静催眠药的一项重要指标是惊厥。在自然戒断试验中，动物需进行较长时间给药才有可能在断药后出现自发性惊厥，而诱导试验可以应用各种诱发惊厥的方法如听源性发作（audiogenicseizures）、戊四唑（pentylenetetrazole）惊厥，在试验中只采用阈下刺激强度，它们对正常动物不引起惊厥发作，但对镇静催眠药产生身体依赖性的动物，在断药期间出现反跳性兴奋，原来的阈下刺激就可能诱发惊厥。

二、精神依赖性试验：评价新药的精神依赖性潜力，可采用“自身给药”（selfadministration）试验，这是一种操作式条件行为（operantbehavier）试验，测定静脉注射药物对动物的强化效应

（reinforcingeffect），是当前国际上通用的评价药物精神依赖性潜力的试验方法。此外，常用的还有药物辨别试验和条件位置偏爱试验。

1、自身给药实验方法：自身给药试验方法是一种操作式行为药理学实验，人们可以应用行为分析的原理依据自身给药实验结果研究对行为的影响。基本原理：具有依赖性的药物与食物和水一样具有强化效应，可以作为强化剂使动物形成稳定的操作式条件反射性行为。一种本身无强化作用的刺激（如光）或行为，以一定的方式有规律的与给予该种药物相联系，那么这种刺激或行为也会使动物产生药物的强化作用。

2、药物辨别试验：药物辨别试验与自身给药试验一样，属操作式条件行为试验，方法依据的原理也相同。它可以判断一种药物在控制行为方面是否具有辨别刺激功能，即能否使动物辨别或区分两种或两种以上的药物情形，继而产生不同的行为反应。由于药物辨别试验中动物不需手术插管，维护较易，可长时间进行实验所以应用较宽。

3、条件性位置偏试实验：条件性位置偏爱实验是1979年建立并逐渐完善的一种非操作式行为药理学实验方法。方法简单，近年来应用广泛。

2．用中西医理论解释中药镇痛的机理？目前对镇痛实验方法有何新的进展？中医理论认为，疼痛是由于正气虚弱，以致邪毒内蕴，气滞血瘀，不通则痛，因此中药镇痛的机理为补气养阴，活血化瘀，通络止痛。

西医理论认为疼痛产生是由于损伤炎症缺血导致缓激肽、组织胺、p物质、K+、H+、5-HT、前列腺素E2等物质的释放，作用于神经末梢导致疼痛。因此西医镇痛的机理是作用于疼痛产生的各个环节，包括阻断致痛物质的释放、阻断神经末梢的作用以及神经传递等。

镇痛实验方法的新进展：

1、热刺激法：系利用一定强度的温度来刺激动物躯体的某一体部位，使其产生疼痛反应。常用方法有辐射热测痛法（大白鼠或小白鼠辐射热致痛引起甩尾反应）、小白鼠热板法等。

（1）辐射热刺激法（又称光热法）：用小型聚光灯产生一定强度的光束，通过透镜聚焦照射大白鼠（或小白鼠）的尾巴或家兔鼻部来致痛。大白鼠以甩尾时间为痛反应指标，家兔则以甩头为痛反应指标。此法仪器装置简单，反应灵敏；若固定照射时间能准确测出阈值及刺激强度。对筛选麻醉性镇痛药及非麻醉性镇痛药均适用。

（2）小鼠热板法：小鼠的足底无毛，皮肤裸露，在温度为55±0.5℃的金属板上产生疼痛反应，表现为舔后足、踢后腿等现象。此法仪器装置简单，指标明确；痛反应潜伏期长，便于观察及测出药物之间的较小差异，有利于比较药物镇痛作用的强弱、快慢及持续时间。是目前常用的方法之一。主要用于筛选麻醉性镇痛药

2、化学刺激法：许多化学物质如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，接触到完整的皮肤和粘膜时，即引起疼痛反应。因此，将某些化学物质涂布于开口的皮泡基部暴露的神经末梢上或注入动脉、静脉或腹腔内，均可造成疼痛模型，作为研究疼痛生理及筛选镇痛药物的方法。

（1）小鼠扭体法：应用有些化学刺激物注入小鼠腹腔内，引起深部的、大面积而较持久的疼痛刺激，致使小鼠产生“扭体”反应（腹部内凹、躯干与后腿伸张、臀部高起）。本法对筛选弱镇痛药是一种敏感、简便、重复性好的方法，但缺乏特异性。

（2）钾离子皮下透入致痛法：饱和氯化钾溶液，采用一定强度的直流电经动物不同部位的皮下透入，可使家兔缩腿、挣扎、扬爪，或使大鼠甩尾、嘶叫等，均可作为致痛的指标。此法简便灵活，输入电流强度与钾离子透入及其引起的痛反应呈正比，在研究疼痛生理中较多采用。

（3）缓激肽动脉注射法：动脉内逆行注入缓激肽，使动物产生一些症状，称为假情感反应，表现有嘶叫、肢体屈曲、呼吸加深、血压升高、角膜反射与膝反射阳性等，可作为测定镇痛药的指标。此法可以用作鉴别外周作用的实验方法。

3、机械刺激法：对大鼠或小鼠尾根或尾尖施加一定的压力，可产生嘶叫，以此作为痛反应的指标。此法指标明确，使用简便，是筛选镇痛药的常用方法之一。本法主要有大鼠尾尖压痛法和小鼠尾根压痛法。