农药残留实验报告之欧阳光明创编

高效液相色谱法测定蔬菜与水果中

欧阳光明（2021.03.07）

拟除虫菊酯类农药残留量

学院：化学化工学院

班级：应用化学

姓名：

学号：

指导教师：

完成日期：年月日

高效液相色谱法测定蔬菜与水果中

拟除虫菊酯类农药残留量

一、实验目的：

1、掌握高效液相色谱法测定水果蔬菜中的农药残留量。

2、掌握综合实验的各种操作。

二、实验原理

农药是当前农业生产用于防治病、虫、杂草对农作物危害不可缺少的物质，对促进农业增产有极重要的作用。农药施用到农作物上以后，一部分因多种原因而转移到环境水体中，一部分残留在水果蔬菜上，被人食用。拟除虫菊酯类农药具有高效、低毒以及生物降解快的特点，广泛用于蔬菜、茶叶等农作物种植中害虫的防治。

因气相色谱温度高使农药发生分解，现采用高效液相色谱法测定拟除虫菊酯类中氯氰菊酯的含量，其国标含量为0.2mg/kg。

三、实验仪器及试剂

高效液相色谱仪，研钵，电子天平，超声波提取器，离心机，恒温水浴槽

有机溶剂:丙酮(分析级)，正己烷(分析级) ，市售的氯氰菊酯

四、实验步骤

1、样品的制备与提取：称取经捣碎的新鲜水果样品10g于50mL烧杯中，根据样品含水量多少加入适量的无水硫酸钠除水。然后向烧杯样品中加入13mL丙酮:正己烷((3:10，体积比)混合溶剂，混匀后在超声波提取器中提取30min，将烧杯上层提取液转移至l00mL烧杯中。逐次向烧杯样品残渣中加入5mL,3mL混合提取剂，重复以上萃取、离心分离操作两次，合并烧杯上层提取液至另一烧杯中。若合并提取液中还存在水分，再加适量无水硫酸钠除水。

2、浓缩：将烧杯中液体转移至离心管中离心，取上层清液在50℃恒温水浴槽中挥发溶剂至0.3ml，再次过滤将其转移至2ml的样品瓶中保存，用正己烷定容至1mL，加盖密封，以备液相需要。

3、标准溶液的配制：称取10mg氯氰菊酯,用正己烷溶解并定容至50ml。

4、色谱操作条件：色谱柱 ODS-C

8

检测波长 230nm

流动相乙腈

流速 0.7ml/min

进样 20L

并且设位置好其它工作条件还有如柱温，进样口温度，检测其温度，升温速度等。

5.待色谱基线平稳后，加入配制好的200μg/mL的氯氰菊酯标准溶液，得到如下图谱：

由上图可知：保留时间为3.519min时，峰面积最大为13366mAu*s,可知该物质即为氯氰菊酯。做工作曲线得：

氯氰菊酯浓度与峰面积为y（Au*s）=66.830x（μg/mL）。

6、注入我组从10克番茄和草莓中提取的清液注入，得到如下图谱：

由上图可知：3.561min时与标样时间最为接近，故可判断该时间即为氯氰菊酯的保留时间，对应的峰面积为373.773mAu*s，由方程计算得氯氰菊酯浓度为

5.593μg/mL，即0.56mg/kg高于国家标准0.2mg/kg，所以不符合标准。

五、实验注意事项

1)新鲜蔬菜与水果样品的含水量较大，因此预处理过程中要注意除水，切不可将含水分的样品制备液进样。

2)在开启色谱仪之前，先开通载气几分钟。实验结束后要先关仪器，再关闭载气。

六、思考题

1、如果农药残留物的色谱峰有重叠不能完全分开，可以通过调节哪些参数来改善色谱分离效果?

答：峰连在一起的原因有：仪器来来不及检测，相邻的物质性质十分相似等。除了基本的仪器与处理操作外，可以通过设置扩大进样延迟的时间，降低升温速度，在某一处分比较集中区域设置停止升温的缓冲时间（程序升温），降低流动速度，降低柱压，另外还有一些非参数调节如更换流动相，换极性不同的管子等。

2.样品预处理有何注意的地方？

答：实验所用的时间不能太长，所制得的待测液颜色比较浅，因为纯粹的该类农药溶液是无色的，颜色越多说明混入的杂质的量越多，对结果的影响越大。结果图谱中在相应的时间所出的峰越独立，如尖峰是比较好的，如果是没有很多杂质峰连在一起的锯齿状峰，则所造成的误差就很大了。须知，农药的含量本身就是微量，如果与杂质峰相连，那么误差一定很大！