血清胸苷激酶1检测及其在肿瘤治疗监测和预后中的作用

ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｌｉｌ且ｒｋｅｒ ｆｏｒ ｂｒｅａｓｔ
ｃａｎｃｃｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ
Ｐｒｅｙ．２００１．２５：８一１５．
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［６］ＬＩＨ ｘ，ＺＨＡＮＧ Ｓ，ＬＥＩＤ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｒｕｍｔｈｙｍｉｄｉｎｅｌ
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ｐｒｏｇ－
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本均无溶血、脂血，收集血清后置一２０。Ｃ冰箱中保存。 １．２仪器和试剂 采用华瑞同康生物技术（深圳）有 限公司生产的ＣＩＳ系列化学发光数字成像分析仪及胸 苷激酶１诊断试剂盒。 １．３方法空腹采静脉血２
ｒＩｌｌ，３
率明显高于良性疾病组和正常对照组，差异有显著性 （Ｐ＜０．００１）。将未经治疗肿瘤患者组与治疗预后不 佳、治疗症状缓解组、正常对照组和良性疾病组分别进 行比较，肿瘤患者未经治疗组阳性率，与治疗效果不佳 组、治疗缓解组差异均有显著性（Ｐ＜０．００１）。见表２。
血清胸苷激酶ｌ是
肿瘤是当今世界严重威胁人类健康和生命的一种 细胞异常增殖性的恶性疾病。长期以来人们致力于寻 找一种能够尽早检出恶性肿瘤的指标，并在将血液或 体液、组织液中已经发现的一些物质称之为肿瘤标志
物（ｔｕｍｏｒ ｍａｒｋｅｒ，ＴＭ）。胸苷激酶１（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ
离心８—１０ ｒａｉｎ分离血清，一２０℃冰箱保存备检。ＴＫｌ 浓度测定采用免疫印迹增强化学发光法，具体操作严 格按照试剂盒说明书进行。 １．４参考值和阳性判断值
ｈ内以４
０００ ｒ／ｒａｉｎ
万方数据
广东医学２００８年６月第２９卷第６期
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表２不同受检人群组血清胸苷激酶ｌ阳性检出率
患有恶性肿瘤的血清标志物，以２ ｐｍｏｌ／Ｌ为临界值， 即大于２ ｐｍｏｌ／Ｌ为阳性，该方法检测ＴＫｌ的灵敏度为 ７４．１％，特异度为９７．３％。 本试验结果还表明ｓＴＫＩ浓度同多种不同类型癌
准确性。见图ｌ。
１．Ｏ
某些良性疾病也能引起ｓＴＫｌ的升高已有报道…。
本试验结果表明良性疾病患者的ｓＴＫｌ平均水平为
Ｏ．８
７．４１（０．５４—７．１４）ｐｍｏｌ／Ｌ，但与正常对照组或肿瘤患
魁０．６ 帮 嚼Ｏ．４
Ｏ．２
者组相比差异有显著性（Ｐ＜０．００１）。本试验中有一
年轻女性因怀疑宫颈炎后来医院体检时检测ｓＴＫＩ，因
０．３９（０．１４—２．１５）ｐｍｏｌ／Ｌ，与肿瘤患者组相比差异有
常，平均水平为（１．Ｏｌ±０．１０）ｐｍｏＬ／Ｌ，但其某些肿瘤标 志物检测仍明显高于正常（分别为ＣＡｌ９—９
ＣＡｌ９—９ １３９５．５，ＴＰＡ ８４２２．４，
５．６）。这表明ｓＴＫｌ水平与肿瘤
细胞增殖速度变化的相关性要优于现在应用的某些标 志物，ｓＴＫＩ浓度与我们临床观察到的患者治疗后症状
见表１。
表１ 各缉ｓＴＫ！浓度比较
［Ｍ（ｒａｉｎ—ＩⅫ）］ｐｒａｏｔ／Ｌ
一般资料收集２００６年１月至２００７年５月期间
在广东省中医院就诊并经活检、病理细胞学检查确诊 的８９例恶性肿瘤患者血清。其中肠癌１７例、肝癌１４ 例、肺癌１０例、卵巢癌１２例、乳腺癌７例、鼻咽癌７例， 其他癌症２２例，年龄２５—８２岁，平均（５７．５６ ４－１２．５７） 岁。根据收集患者血清时的临床诊治资料，将肿瘤患 者分为３组：未经治疗组、手术或放／化疗效果不佳组、 手术或放／化疗后症状缓解组。另外，收集２２例患有 肌瘤、囊肿等良性疾病患者血清及７３例正常体检人群
活质量。
２．３血清ｓＴＫｌ浓度用于肿瘤检测中的灵敏度和特异 度以ｓＴＫｌ浓度大于２ ｐｍｏｌ／Ｌ为阳性判断标准， ｓＴＫｌ诊断肿瘤的灵敏度为７４．１％，特异度为９７．３％。
２．４
ＲＯＣ曲线分析ｓＴＫｌ浓度对恶性肿瘤早期诊断的
价值本试验ＲＯＣ曲线下面积为０．９０，其面积的９５％ 可信区间为（０．８４２，０．９３６），经检验，差异有显著性（Ｐ ＜０．００１），表明ｓＴＫＩ对恶性肿瘤早期诊断具有较高的
１资料与方法
１．１
ｐｍｏｌ／Ｌ，大于２ ｐｍｏｌ／Ｌ即为ｓＴＫｌ阳性。 １．５统计学方法运用ＳＰＳＳ １３．０统计软件对数据 进行秩和检验、ｘ２检验和ＲＯＣ曲线分析。
２结果 ２．１各试验组ｓＴＫｌ浓度测定结果组间比较，差异
有显著性（Ｚ＝１３４．６８，Ｐ＜０．００１）。分析提示，肿瘤患 者组ｓＴＫｌ浓度明显高于良性疾病组和正常对照组。
度为Ｏ．１４—２．１５ ｐｍｏｌ／Ｌ，平均浓度为０．５３ ｐｍｏｌ／Ｌ，阳性率２．７３％），差异有显著性（Ｐ＜０．００１）；肿瘤患者未经治
疗组、治疗效果不佳组与治疗缓解组ｓＴＫＩ平均浓度比较，差异有显著性（Ｐ＜０．００１）。结论 肿瘤诊断和预后判断的有价值的指标。 【关键词】 胸苷激酶ｌ 肿瘤标志物 免疫印迹增强化学发光法
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血清胸苷激酶１检测及其在肿瘤治疗监测和 预后中的作用
陈曲波１
刘瑞萍１
黄惠１
李强１
张健媛１
郑松柏１
李倩琚１
荆宁２郑丽２
１广东省中医院检验科（广州５１０１２０）；２华瑞同康生物技术（深圳）有限公司（广东深圳５１８１０１） 【摘要】 目的探讨胸苷激酶ｌ（ｓＴＫｌ）在肿瘤诊断和预后判断中的价值。方法利用免疫印迹增强化学发 ｓＴＫＩ诊断肿瘤的灵敏度是
症的恶性程度相关，它能够反映对肿瘤的治疗效果。 我们将未经治疗（手术或放、化疗）的肿瘤患者组血清 ＴＫｌ浓度分别与预后不佳、症状缓解组、健康人对照组 和良性疾病组进行比较分析，结果均显示差异有显著 性。与未行任何治疗的恶性肿瘤患者ｓＴＫＩ水平相比，
与未经治疗组比较｝Ｐ＜Ｏ．０５，・・尸＜０．００１
虽然手术或放、化疗后效果不佳的肿瘤患者阳性率较 高，但ｓＴＫｌ的水平没有持续在治疗前的水平，可能的 原因是术后仍有残留癌，或手术／放、化疗效果不佳导 致患者复发或转移，导致肿瘤细胞继续增殖。因此我 们认为ｓＴＫｌ作为独立的预后因子，是个可信赖的作为 肿瘤治疗成效监控标志物。它可以在影像还不可能观 察到之前预测患者是否可能有肿瘤再复发或癌转移， 从而让临床给予患者合理的治疗放案，提高患者的生
显著性（Ｐ＜０．００１）。ｓＴＫｌ可作为辅助诊断机体是否
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Ｊ竺：型！！！型：望！翌！：！
缓解的表现具有较好的一致性。所以我们认为ｓＴＫｌ 水平在临床上可以用来代替某些指标对肿瘤患者预后 效果进行评估。当然这需更多的进一步研究。 虽然目前有许多肿瘤标志物有相对辅助诊断特异 性，如ＡＦＰ用于肝癌、ＣＡｌ５—３用于乳腺癌、ＰＳＡ用于 前列腺癌等，但其中大多数肿瘤标志物的局限性是对 早期肿瘤筛查缺乏特异性和灵敏度，不适于人群筛查。 虽然ＣＥＡ可以作为广谱肿瘤标志物，但其灵敏度和特 异度都较低，作为监控和预后尚有争议¨…。Ｋｉ６７等细 胞增殖标志物虽与细胞增殖有良好的相关性，但只适 合用组织化学方法对其进行检测，在临床应用中具有 很大的局限性。而ｓＴＫｌ检测采用免疫印迹增强化学 发光法，具有广谱性和检测方便等优点，在肿瘤的早期 筛查、辅助诊断及预后监控中具有较大的应用价值。
（志谢：本文承蒙广州中医药大学第二附属医院流行病 学办公室欧爱华教授审阅并提出宝贵修改意见，特致谢忱！） 参考文献
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［５］ＺＨＡＮＧ
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２
ｓＡ合成及细胞增殖密切相关 的关键酶，其水平在细胞周期的合成前期Ｇ１和合成期 Ｓ期交界处开始升高，直至Ｓ期和合成后期Ｇ２期交界 处达到高峰。由于ＴＫｌ水平与细胞生长状态相关，故 ＴＫＩ可作为一种细胞增殖标记物来检测细胞的增殖活 性…，也可作为一极具生命潜力的肿瘤标记物来检测 恶性肿瘤的增殖度悼。４。。本试验利用免疫印迹增强化 学发光法对恶性肿瘤患者和健康人血清ＴＫｌ（ｓＴＫｌ） 水平进行检测，探讨其在肿瘤患者治疗效果和预后、 人群筛查及临床辅助诊断中的意义。
光法检测肿瘤患者组、良性疾病组和正常对照组的血清ｓＴＫＩ浓度及阳性率。结果
７４．１％，特异度是９７．３％；肿瘤患者组ｓＴＫＩ浓度为０．９９～４０．６３ ｐｍｏｌ／Ｌ，平均浓度为４．７０ ｐｍｏｌ／Ｌ，阳性率７４．１％， 明显高于良性疾病组（浓度为Ｏ．５４—７．１４ ｐｍｏＬ／Ｌ，平均浓度为１．７０ ｐｍｏｌ／Ｌ，阳性率１８．１％）和健康人对照组（浓
结果为阳性（５．０４ ｐｍｏｌ／Ｌ），随后追踪调查发现该女士
以前患有乳腺纤维瘤，本次体检还检测出幽门螺旋杆
菌（Ｈｐ）呈阳性。幽门螺旋杆菌与胃炎及消化性溃疡
０．０ ０．２ ０．４ ０．６ ０．８ １．０
０．Ｏ
特异度 田ｌ ｓＴＫｌ浓度诊断恶性肿瘤的ＲＯＣ曲线分析
呈正相关，近年来对Ｈｐ感染的大量研究中提出了许 多幽门螺旋杆菌致胃癌的可能机制哺Ｊ。这些追踪结 果与我们本次ＴＫｌ检测的阳性相符合：ＴＫｌ值呈阳性 提示该女士①乳腺纤维瘤可能出现复发或者转移病 灶，因此建议入院或借助其他途径进一步检测，以便医 生更好地确诊并开展治疗。②基于ｓＴＫｌ水平升高预 示细胞增殖速率迅速的理论，建议患者应尽早进行内 窥镜检查，以确定是否有胃癌的存在。所以我们认为 当体检时发现ｓＴＫ有明显升高趋势，提示今后可能会 有肿瘤疾病的风险，应作进一步追踪观察。 肿瘤标志物最主要和最有价值的应用范围就是它 对肿瘤疗效评估和预后判断一。。尽管一些肿瘤标记物 在临床中已经被应用几十年，但是由于不能满足上述 要求，所以也就并没有被临床完全接受。本试验中也 观察到有此现象：３例恶性肿瘤患者经放、化疗后，临
床症状已经明显得到缓解，ｓＴＫｌ水平也明显下降至正
３讨论
人类胸苷激酶（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ，ＴＫ）是嘧啶合成 的补救酶，催化胸苷磷酸化形成胸苷一磷酸。细胞中 ＴＫ主要有两种同工酶：细胞质胸苷激酶（ＴＫｌ）和线粒 体胸苷激酶（ＴＫ２），它们由不同的基因所编码。ＴＫｌ 基因定位于染色体１７ｑ１３．２—２５．３，靠近半乳糖激酶基 因。它是参与ＤＮＡ合成的关键酶之一，为Ｓ期特殊 酶。ＴＫｌ水平取决于细胞的增殖度，在增殖细胞的Ｇ１ 和ｓ期交界处开始升高，直至Ｓ期达到高峰，在肿瘤细 胞中这种高ＴＫｌ水平从ｓ晚期可持续到Ｍ早期，其浓 度将伴随着肿瘤细胞的急剧增殖而升高，所以被认为 是一极具生命潜力的肿瘤标记物。ＴＫＩ在非增殖细胞 和健康人血清中，ｓＴＫｌ含量极微或检测不到。在乳腺 癌和肺癌患者的研究中发现，ｓＴＫｌ是个用于监测肿瘤 治疗效果的有价值标记物”‘６－。 本试验结果显示健康对照组的ｓＴＫｌ平均水平为
ｍｉｄｉｎｅ
ｋｉｎａｓｅ
ｆｏｒ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ
ｄｏｇｓ ｗｉｔｈ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｌｙｍｐｈｏｍａ，ａ
ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ
ｐｏｔｅｎｔ Ｉｎｔ
ｌｌｉａｌ＇ｋｅｒ
ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ
ａｎｄ
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ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｊ Ｖｅｔ
Ｍｅｃｌ，２００４．１８：６９６—７０２．
［４］ＯＨＲＶＩＫ Ａ，ＬＩＮＤＨ Ｍ，ＥＩＮＡＲＳＳＯＮ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ
血清。年龄４５～７５岁，平均（５３．０ ４－５．３７）岁。所有标
・与未经治疗组比较Ｐ＜０．ＯＯｌ；▲与治疗预后不佳组比较Ｐ＜
Ｏ．００ｌ
２．２不同受检人群组ｓＴＫｌ阳性检出率
以ｓＴＫｌ浓
度大于２ ｐｍｏｌ／Ｌ为阳性标准，肿瘤患者组未经治疗时
阳性率７４．１％，良性疾病组阳性率为１８．１％，正常对
照组阳性率为２．７３％。可见，肿瘤患者组的ｓｌ＂Ｋ１阳性