血清总蛋白测定原理步骤

血清总蛋白测定原理步骤

一、原理：

1. 用具有特定波长的光照射样品时，光束经过样品后会发生吸收。波长为546nm（黄色光）时，血清总蛋白对光的吸收能力较高。

2. 样品中的蛋白质会吸收部分波长为546nm的光，使光通过样品后强度减弱。

3.把强光通过样品前后的强度差值与已知总蛋白浓度的标准曲线进行比较，可以确定样品中总蛋白的浓度。

二、步骤：

1.样品预处理：

a.取少量患者血清，放置室温静置一段时间，使其凝固。

b.使用离心机将血液离心分离，得到澄清的血清。

c.将澄清血清转移至干净的试管或离心管中，可进行测定。

2.试剂配制：

a. 准备血清总蛋白浓度标准品，通常使用已知浓度的Bovine Serum Albumin（牛血清白蛋白）作为标准品。

b.配制比色试剂，比色试剂可使用五氯酚酚或伯胺蓝溶液。

3.比色测定：

a.取一系列含有不同浓度的标准品，称取适量分别加入试管中。

b.每个试管中加入等量的比色试剂，充分混合。

c.把试管放入比色计中，使用光谱分析仪读取光强度差。

d.使用标准曲线，将测量得到的光强度差值转化为总蛋白浓度。

4.计算结果：

以标准曲线上所对应光强度差值和总蛋白浓度为坐标，制作图线。将

测试样品的光强度差值代入标准曲线中，并利用线性关系计算出样品中总

蛋白的浓度。

总结:

血清总蛋白测定是一项常见的临床检验方法，用于评估患者的营养状态、肝功能和免疫功能。其原理是通过血清中总蛋白对特定波长的光吸收，使用比色法进行测定。测定过程主要包括样品预处理、试剂配制、比色测

定和计算结果。通过标准曲线，可以根据光强度差值计算出样品中总蛋白

的浓度。这项检测技术广泛应用于临床实验室中，为医生提供了有价值的

生化指标。