血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定
白蛋白的测定
生理盐水(ml) 生理盐水(ml) 0.20 —— 上述1~4管标 上述1~4管标 —— 0.20 准稀释液（ml) 准稀释液（ml) BCG应用液 BCG应用液 （ml) 5.0 5.0
实验试剂
1.溴甲酚绿（BCG）贮存液 1.溴甲酚绿（BCG）贮存液 取BCG 419mg，用10ml 419mg，用10ml 0.1mol/L NaOH溶解，加NaN3 100mg ，定容至1000mL。 NaOH溶解，加NaN3 ，定容至1000mL。 贮于棕色瓶备用。如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水 贮于棕色瓶备用。如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水 溶解。 2.0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH 4.2）分别配制0.1mol/L柠 2.0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH 4.2）分别配制0.1mol/L柠 檬酸和柠檬酸钠溶液，然后按12.3：7.7的体积比例混合。 檬酸和柠檬酸钠溶液，然后按12.3：7.7的体积比例混合。 每1000ml混合液加入NaN3 100mg。 1000ml混合液加入NaN3 100mg。 3.30%聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)溶液 3.30%聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)溶液 取Brij-35 30g,加 Brij- 30g,加 少量水，60℃水浴溶解，加水至100ml（此可用Tween少量水，60℃水浴溶解，加水至100ml（此可用Tween-20 或Tween-80代替)。 Tween-80代替) 4.BCG应用液 BCG贮存液250ml，0.1mol/L柠檬酸缓冲液 4.BCG应用液 BCG贮存液250ml，0.1mol/L柠檬酸缓冲液 （pH4.2)750ml,30%Brij-35 8ml(也可以用Tween-20 8ml pH4.2)750ml,30%Brij- 8ml(也可以用Tween或Tween-80 10ml代替）混合而成。 Tween- 10ml代替）混合而成。 5.标准蛋白溶液（10mg/ml) 称取人白蛋白1.00g，用生 5.标准蛋白溶液（10mg/ml) 称取人白蛋白1.00g，用生 理盐水
血清清蛋白和球蛋白测定方法及临床意义
血清清蛋白和球蛋白测定方法及临床意义血清清蛋白1.测定方法溴甲酚绿法（BCG法）：溴甲酚绿是一种阴离子染料，在pH4.2的缓冲液中，与白蛋白结合成复合物，溶液由未结合前的黄色变成蓝绿色，在628nm波长的吸光度与白蛋白浓度成正比，经与同样处理的白蛋白标准液比较，即可求得白蛋白的含量。
2.临床意义（1）清蛋白浓度增高：除严重脱水，血浆浓缩而使清蛋白增高外，尚未发现单纯清蛋白浓度增高的疾病。
（2）清蛋白浓度降低：同总蛋白浓度降低医`学教育网搜集整理。
球蛋白的含量及白蛋白与球蛋白的比例1.球蛋白的含量是通过血清总蛋白测定值减去血清清蛋白测值计算出的。
2.临床意义（1）球蛋白浓度增高：临床上球蛋白增高多见于炎症、免疫系统疾病和肿瘤。
1）细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性感染：结核病、麻风病、疟疾、黑热病、血吸虫病、病毒性肝炎。
2）自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿热、类风湿性关节炎等。
3）多发性骨髓瘤和淋巴瘤：多发性骨髓瘤是一种单克隆疾病，它是由浆细胞恶性增殖造成的异常高的单一Ig（多见于IgA或IgG0）血症。
淋巴瘤也属单克隆疾病。
（2）球蛋白浓度降低：见于血液稀释、严重的营养不良、胃肠道疾病等。
3.清蛋白与球蛋白比值（A／G比值）A／G比值反映了清蛋白与球蛋白浓度变化的关系。
正常A／G比值为1～2／1.临床上常用A／G比值来衡量肝脏疾病的严重程度，当A／G比值小于1时，称比值倒置，为慢性肝炎或肝硬化的特征之一。
白蛋白的作用为：1.增加血容量和维持血浆胶体渗透压：白蛋白占血浆胶体渗透压的80%，主要调节组织与血管之间水分的动态平衡。
由于白蛋白分子量较高，与盐类及水分相比，透过膜内速度较慢，使白蛋白的胶体渗透压与毛细管的静力压抗衡，以此维持正常与恒定的血容量；同时在血循环中，1g白蛋白可保留18ml水，每5g白蛋白保留循环内水分的能力约相当于100ml血浆或200ml全血的功能，从而起到增加循环血容量和维持血浆胶体渗透压的作用。
生物化学与分子生物学课件：实验五、TP、Alb测定
由于生物样品中常混有核酸，核酸对紫外光也有吸收，但其峰值在 260nm附近，因此可用下列经验公式计算蛋白质浓度。
Lowry-Kalckar公式：蛋白质浓度(g/L)=1.45A280－0.74A260 Warburg-Christian公式：蛋白质浓度(g/L)=1.55A280－0.76A260 A280 、A260分别代表光径为1cm ，波长为280nm和260nm时样品 的吸光度。
(4)血浆稀释：如静脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水钠潴留。
2．血清总蛋白浓度增高 (1)蛋白质合成增加：大多见于多发性骨髓瘤患者，此时主要是异常球蛋白 增加，使血清总蛋白增加。
(2)血浆浓缩：如急性脱水(如呕吐、腹泻、高烧等)，外伤性休克(毛细血管 通透性增大)，慢性肾上腺皮质功能减退（尿排钠增多引起继发性失水）。
【操作步骤】
混匀，室温10min，630nm处用B管调零，读取As、 Au （30min内比色）。
【结果计算】
标准血清 TP含量：70g/L Alb含量：40g/L
球蛋白： G= TP- Alb A/G比值： Alb/ Glb
【参考值】
TP：65~85 g/L Alb：40~55 g/L Glb：20~30 g/L A/G：1.5~2.5/1
一、分光光度计的使用
【仪器原理】 分光光度法是利用物质特有的吸收光谱，进行物质鉴定及测定其含量
的一种技术。 光线是一种电磁波，其中可见光波长范围约由760nm的红光到400nm
的紫光，波长短于400nm的光线叫紫外光，长于760nm的叫红外光。
当光线通过透明溶液介质时，其中一部分光可透过，另一部分光被吸 收，这种光被溶液吸收的现象可用于某些物质的定性及定量分析。
血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定
血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定1.实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。
在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定一个月，-20℃保存至少可以稳定3个月。
4. 标本运输室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料:6.1 上海奥林巴斯白蛋白测定试剂盒6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。
手工测定计算方法为：Au白蛋白(g/L)= ×校准液浓度As12. 参考值范围成人35～52g/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
血清白蛋白测定及紫外分光光度计的使用
四、临床意义：
• 1、白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1，通过
计算其比值可以判定肝脏的功能情况； • 2、白蛋白降低，其比值降低或倒置： 慢性肝炎（肝细胞功能降低）、肝硬 化（肝细胞坏死、肝腹水）； • 3、球蛋白大量降低：机体免疫功能降 低。
五、方法学评价
1、操作简单、快速，受干扰因素小 2、线性范围：10～60g/L, 3、RCV＜4%（批内重复测定变异系数） 4、白蛋白的测定方法：有色氨酸含量法、 燃料结合法、电泳法、免疫化学法和电化 学测定法。
10 10
于空白管中加入蒸馏水10 μl，各管充分混匀。
2、分光光度计测定方法：波长620nm， 空白管调零，测定标准管和测定管吸光度 值，按公式计算测定结果。
计算公式：
A样 Байду номын сангаас样 C标 A标
（40g/L）
三、参考值：
总蛋白：62~82 g/L 白蛋白：35~55g/L 球蛋白：20~30 g/L 白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1
六、注意事项
1、应保持PH为3.8 2、BCG与多种蛋白呈颜色反应，及与a-球 蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白结合显色， 但血清中BCG在30秒内与白蛋白的反应最 快，且呈主导地位 3、实验小组分批间隔保温。
溴甲酚绿（BCG）与血清蛋白呈非特异性反 应，但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿（BCG）与 白蛋白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此 反应结束后应立刻比色测取吸光度。
二、测定方法
1、加样： 试管三只
试剂
空白管（B） 标准管（C） 测定管（U） 工作试剂（ml） 2 2 2
标 准 液（μl） 样 品（μl）
血清白蛋白（ALB）的测定 (Assays for Serum Albumin) （溴甲酚绿染色法）
实验11溴甲酚绿法测定血清清蛋白
二、显色时间改变对溴甲酚绿法测定 血清清蛋白结果影响
实验原理
BCG与清蛋白结合的特异性较低，不但与 清蛋白呈色，而且还可与其他蛋白质呈色，其中 α1-球蛋白，TRF、Hp最明显。但BCG与不同蛋 白质反应速度不同，清蛋白可立即反应（快反 应），其他蛋白质反应慢（慢反应）。
试剂与器材
同溴甲酚绿法测定血清清蛋白
操作步骤
1．生化自动分析仪分析法 各参数见有关仪器操作 说明书。
2．手工操作法 取试管3支，按表操作。
加入物(ml) 血清 清蛋白标准液 蒸馏水 BCG试剂
空白管 － － 0.02 4.0
标准管 － 0.02 － 4.0
测定管 0.02 － － 4.0
混匀，室温10min，在波长630nm处用空白管调零，读取标准管和 测定管吸光度。
操作步骤
1. 按表3-2操作。 2. 各管混匀，室温放置，显色时间分别为：30s、 1min、5min、10min、15min及20min，每一个显色 时间作9个测定管，在波长630nm处用空白管调零， 读取标准管和测定管吸光度。
计算
1. 计算各组 X 、S。 表3-3 不同显色时间清蛋白测定结果（g/L）
返回总目录
返回总目录ຫໍສະໝຸດ 编号 1 2 … 8 9X
S
30s
1min 5min 10min 15min 20min
计算
2. 对6组不同显色时间测定的结果进行方差分 析，计算F值（F值计算参见医学统计学教 材），查F界值表（），比较F、F表。
结果判断
若F>F表，则说明不同显色时间对溴甲酚绿法测 定清蛋白结果有显著性差异。
返回实验目录
三、pH改变对溴甲酚绿法测定血清 清蛋白结果影响
实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41
实验十四血清白蛋白测定（溴甲酚绿法）一、实验目的与要求1 了解血清白蛋白（albumin）在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2 掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理在具有表面活性剂的酸性环境中，血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合，形成绿色。
最高吸收峰628nm，颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。
三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2）四孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组与仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3）可调微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5）吸耳球1个；（6）搪瓷盘1个；（7）微量加样滴头；（8）吸水纸。
3 本试剂盒内含2种试剂：（1）溴甲酚绿试剂100ml×3瓶；（2）白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。
四、实验步骤1 于一系列试管中，按下表加入各溶液：表141系列反应管中所加溶液的量空白管标准管测定管血清标本(μl)——5.00蛋白标准血清(μl)—5.00—蒸馏水(μl)5.00——溴甲酚绿试剂(ml)1.001.001.002 以上各管充分混匀,室温放置10min。
3 于721分光光度计/ AT648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。
五、实验结果与分析A628nm测定A628nm标准×标准血清白蛋白浓度（g/L）＝血清白蛋白（g/L）线性范围：在0~60g/L范围内线性良好。
六、实验报告参照《营养学》、《生物化学》原理分析。
七、注意事项1 试剂为空白对照；2 每组样品做2～3个平行实验；3 正常参考范围： 55～75g/L。
溴甲酚绿法测定血清白蛋白(论文资料)
八、临床意义
1. 血清清蛋白 ：常见于严重脱水所致的血浆浓缩。（比 较少见） 2. 血清清蛋白 :临床比较重要和常见，常与总蛋白降低的 原因大致相同。 急性 ：多见于大出血和严重烧伤。 慢性 ：肾病蛋白尿、肝功能受损，肠道肿瘤及结核伴 慢性出血、营养不良和恶性肿瘤。 若低于20g/L，临床上出现水肿。 3. A/G比值：正常人A/G>1.0 某些病人可同时出现清蛋白减少和球蛋白升高的现象， 若A/G<1.0，称为A/G比值倒置，常见于多发性骨髓瘤和 聚球蛋白升高。 4.先天性清蛋白缺乏症：有文献报道，因清蛋白合成障碍， 血清中几乎没有清蛋白而导致清蛋白缺乏。
+
+OH
- R CH COO-
+H+
NH2
pH<pI 阳离子
pH=pI 氨基酸的兼性离子
pH>pI 阴离子
在pH4.2的缓冲液中，清蛋白带正电荷
二、实验原理
血清清蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷， 在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷 的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物，在波 长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与清蛋白的浓 度成正比。 与同样处理的清蛋白标准比较，可求得血清 中清蛋白含量。 清蛋白+ BCG + pH4.2 Brij-35
实验五 溴甲酚绿法测定血清清蛋白
一、实验目的
掌握：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的基本原理和操作。 熟悉：血清清蛋白测定的临床意义。 了解：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的特点和注意事项。
二、实验原理
血清清蛋白的pI为：4-5.8 R CH COOH
R CH COOH NH3+
+OH
ALB测定
血清(浆)清蛋白(Alb)测定
清蛋白主要功能是调节血液的胶体渗透压，血浆胶体渗 透压的75～80％靠清蛋白维持，血浆清蛋白浓度过低时， 其胶体渗透压下降，可导致组织间隙潴留水分过多，呈现 水肿甚至腹水，此症多见于长期营养不良及肝癌、肝硬化 等清蛋白生成障碍的患者。
临床上主要用于治疗失血创伤和烧伤等引起的休克、脑 水肿，以及肝硬化、肾病引起的水肿或腹水等危重病症， 以及低蛋白血症病人，俗称“生命制品”、“救命药”。
妊娠，尤其是妊娠晚期，由于体内对蛋白质需要量增加，又 同时伴有血浆容量增高，血清清蛋白可明显下降，但分娩后可迅 速恢复正常。
血清(浆)清蛋白(Alb)测定
血清ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ蛋白临床意义
（1）球蛋白浓度增高：临床上常以γ-球蛋白增高为主，多见于 炎症、免疫系统疾病和肿瘤：
①细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性感染：结核病、麻风病、 疟疾、黑热病、血吸虫病、病毒性肝炎。
血清清蛋白临床意义
1. 清蛋白浓度增高：除严重脱水，血浆浓缩而使清蛋白增高外， 尚未发现单纯清蛋白浓度增高的疾病。
2. 清蛋白浓度降低：同总蛋白浓度降低。
急性清蛋白浓度降低，主要由于急性大量出血或严重烫伤时 血浆大量丢失。
慢性清蛋白浓度降低主要由于肝脏合成清蛋白功能障碍、腹 水形成时清蛋白的丢失和肾病时尿液中的丢失，严重时清蛋白浓 度可低于10g/L。清蛋白浓度低于20g/L时，由于胶体渗透压的下 降，常可见到水肿等现象。
②自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿热、类 风湿性关节炎等。
③多发性骨髓瘤和淋巴瘤：多发性骨髓瘤是一种单克隆疾病， 它是由浆细胞恶性增殖造成的异常高的单一Ig血症。淋巴瘤也属 单克隆疾病。此时γ-球蛋白可增至20~50g/L。 （2）球蛋白浓度降低：主要是合成减少，也可见于血液稀释、 严重的营养不良、胃肠道疾病等。
两种仪器测定血清白蛋白的方法比较
两种仪器测定血清白蛋白的方法比较摘要目的：分析溴甲酚绿法(BCG)与干化学法在测定血浆白蛋白(ALB)时的偏倚，为实间评估提供依据。
方法：依据美国国家临床实验室标准化委员会(NC—CLS)EP9-A文件，每天随机选取临床标本8份，分别用2种方法测定样本白蛋白含量，共5天，记录检验结果，应用统计分析软件对所测得的结果进行统计分析，并计算方法间的偏倚。
结果：以溴甲酚绿法(x)对干化学法(Y)进行评估，干化学法(Y)和溴甲酚绿法(X)测定血清白蛋白(ALB)的回归方程为：Y=1.1346X+7.3919，相关系数X2=0.9949。
白蛋白浓度为30g/L、40g/L、50g/L 时，干化学法(Y)相对偏倚分别为11.6％、5.5％、1.8％。
结论：溴甲酚绿法与干化学法测定血清白蛋白时，测定结果相对预期偏倚随白蛋白浓度的增大而降低，建议各临床实验室对不同方法建立不同的参考值。
关键词白蛋白类干化学法溴甲酚绿法材料与方法仪器：HITACHI 7080(日本)及VITROS 250(美国)全自动生化分析仪。
临床样本：48份来自甘肃省中医院检验科健康体检样本，无溶血、无脂浊、肝素钠抗凝。
白蛋白试剂及定标液：HITACHI7080应用郎道公司提供的白蛋白试剂(批号：0505004)，定标液为RANDOX公司提供的Cfas校准批号：357UN；干化学法所用试剂定标液为美国VITROS公司生产，批号为09287441。
质控品：由RANDOX公司提供的As—sayed human 8era level I和levelⅡ质控品，批号分别为2350和2352。
测定及分析方法：①溴甲酚绿法(X)在HITACHI 7080上测定；干化学法(Y)在VITROS 250上测定。
②每天选取8份临床病人样本，分别用2种方法按顺序1→8进行样本测定，再按相反顺序8→1重复测定。
③记录测定结果(xij和Yij)，计算每个样本测定结果的均值(Xi和Yi)。
血清白蛋白测定
【临床意义】
3、血清白蛋白浓度增高：常见于严重脱水所 致的血浆浓缩；
4、A/G 某些病人可同时出现白蛋白减少和 球蛋白升高的现象，严重者比值可＜1。这种 情况称为A/G比值倒置。
5、文献报道还有极少见的因白蛋白合成障碍， 血清中几乎没有白蛋白的先天性白蛋白缺乏 症。
二、商品BCG试剂重复性能评价试验
血液清蛋白测定
与 重复性实验
血液清蛋白测定与重复性实验
一、BCG法测定血液清蛋白试验 二、商品BCG试剂重复性能评价试验
一、BCG法测定血液清蛋白试验
1.血液清蛋白测定的临床意义 2.BCG法测定血液Alb的实验原理 3.实验材料 4.实验方法 5.实验结果 6.结果处理、分析（讨论）
1.血液清蛋白测定的临床意义
(2) 如果离群值是两个或两个以上都分布在同一侧，X1、 X2都是离群值，则首先检验最内侧的一个数据（X2），即 通过检验G2来决定X2是否应该舍弃。如果X2应该舍弃，X1 自然应该舍弃。如果X2不应舍弃，则再检验X1，但在检验 X1时，测定次数不应该做为少了一次。
(3) 如果离群值有两个或两个以上，而且又分布于均数两 侧，例如X1和Xn都同属于离群值，则分别检验X1和Xn，是 否应该舍弃。如果有一个数据决定舍去，那么在检验另一 个数据时，测定次数应该作为减少一次来处理，而且此时 应该选择的99%置信水平。
天内：对低、中和高浓度，分别在上午、中 午、下午、晚上，进行m轮，每轮n次重复 测定，分别求取三种浓度的精密度数据
天间：对低、中和高浓度，每天测定1次，连 续监测20天以上，分别求取三种浓度的精 密度数据
3.实验材料
试剂：商品试剂盒 器材：试管、加样枪、722分光光度计
4.实验方法
血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定-检验科生化室作业书
血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物2.标本采集2.1病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆。
3.标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。
在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定一个月，-20℃保存至少可以稳定3个月。
4.标本运输室温条件下运输5.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6.实验材料:6.1上海申能白蛋白测定试剂盒（货号：11202271701，8×70ml）6.1.1试剂组成柠檬酸盐缓冲液pH4.230mmol/L溴甲酚绿(BCG)0.26mmol/L表面活性剂适量6.1.2试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11.计算方法：以TruCalU复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。
SOP标准操作程序-ALB
SOP标准操作程序ALB 白蛋白（货号：OSR6102，OSR6202）实验原理：血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。
血清白蛋白升高通常见于脱水的。
血清白蛋白降低多见于肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。
1965年，Rodkey介绍了用一种中性缓冲液溴甲酚绿（BCG）作为指示剂直接测定血清白蛋白的浓度。
1971年，Doumas等人，对以上方法进行改良，加入了非离子表面活性剂，消除浊度，改善线性与敏感度。
奥林巴斯AU640的白蛋白是Doumas和Rodkey方法的改良方法，应用的是不同的缓冲系统。
在PH值4.0，溴甲酚绿与白蛋白形成强烈的绿色复合物。
白蛋白—溴甲酚绿的复合物在双波长（600/800nm）下的吸光度与白蛋白的浓度成正比。
PH 4.2白蛋白+溴甲酚绿---------------绿色化合物标本：病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
类型：血清、肝素或EDTA血浆，标本最好不要溶血。
留取标本后请尽快分离血清/血浆。
标本稳定性：在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定一个月。
仪器与材料:仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪材料：奥林巴斯AU640白蛋白（ALB）参与反应成份的最终浓度：琥珀酸盐缓冲液（PH 4.2）100 mmol/L溴甲酚绿0.2 mmol/L其中含有稳定剂与保护剂。
注意：1.此试剂为体外诊断用。
2.不要入口，吞下有害。
试验用试管的直径在12～16mm。
定标液：奥林巴斯定标液（Cat. No. DR0040）试剂准备：奥林巴斯AU640的ALB试剂是即开即用的。
无需特殊准备。
执行参数（性能参数）：以下数据是根据奥林巴斯AU640 ALB试剂已经建立的程序。
重复性：重复性的评估是根据NCCLS推荐的典型方法，AU640批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
ALB测定
血清(浆)清蛋白(Alb)测定
清蛋白主要功能是调节血液的胶体渗透压，血浆胶体渗 透压的75～80％靠清蛋白维持，血浆清蛋白浓度过低时， 其胶体渗透压下降，可导致组织间隙潴留水分过多，呈现 水肿甚至腹水，此症多见于长期营养不良及肝癌、肝硬化 等清蛋白生成障碍的患者。
临床上主要用于治疗失血创伤和烧伤等引起的休克、脑 水肿，以及肝硬化、肾病引起的水肿或腹水等危重病症， 以及低蛋白血症病人，俗称“生命制品”、“救命药”。
7. BCG试剂的pH必须严格控制在pH4.15±0.05，pH升高可使 染料空白增高，与清蛋白结合率下降。所以，控制反应液 的pH是本法测定的关键。
8. Brij-35是一种非离子去垢剂，它可增强BCG-清蛋白复合 物的溶解度，消除BCG同清蛋白反应时可能产生的沉淀，它 的浓度高于或低于所指定的浓度时，均导致敏感度降低和 直线性丧失，对测定结果有较大影响。故其配制浓度和所 加试剂量一定要准确。
血清清蛋白临床意义
1. 清蛋白浓度增高：除严重脱水，血浆浓缩而使清蛋白增高外， 尚未发现单纯清蛋白浓度增高的疾病。
2. 清蛋白浓度降低：同总蛋白浓度降低。
急性清蛋白浓度降低，主要由于急性大量出血或严重烫伤时 血浆大量丢失。
慢性清蛋白浓度降低主要由于肝脏合成清蛋白功能障碍、腹 水形成时清蛋白的丢失和肾病时尿液中的丢失，严重时清蛋白浓 度可低于10g/L。清蛋白浓度低于20g/L时，由于胶体渗透压的下 降，常可见到水肿等现象。
5. BCG系一种pH指示剂，它受酸、碱影响较大，所用器材 必须清洁，无酸、碱污染。
血清(浆)清蛋白(Alb)测定
6. 高胆红素血症和溶血标本对本法不产生干扰。严重高脂血 症可使结果偏高，应采用标本空白校正。若标本混浊，可 做标本空白（血清0.02ml，加琥珀酸缓冲液4ml），用测定 管吸光度减去标本空白管吸光度后再计算结果。
血清白蛋白测定的两种方法学分析
血清白蛋白测定的两种方法学分析
张宪华
【期刊名称】《河南职工医学院学报》
【年(卷),期】1999(000)004
【摘要】目的：为了提高血清白蛋白的测定水平。
方法：采用溴甲酚绿染料结合法（BCG法）和速率比浊法对定值血清同步进行白蛋白的重复性和准确性检测，并对以上两种方法所测结果进行统计学分析。
结果：两种方法的重复性很好，BCG法与速率比浊法的20次测定结果分别为44．020．269g/L，CV＝0.613％和40.770．280g/L，CV＝0687％，而其准确性则有差异（t＝2.298，P＜0．05），BCG法与速率比浊法10个样本20次测定值与预期值的符合率分别为（94.899.659）g/L，CV=10.17％和（99．860．536）％，CV=0．537％。
结论：对于血清白蛋白测定速率比浊法优于BCG法。
【总页数】2页(P10-11)
【作者】张宪华
【作者单位】安阳市第五人民医院检验科!安阳455000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.两种检测方法测定质控血清及样本血清白蛋白的结果分析 [J], 范德胜
2.茜素红S直接光度法测定血清白蛋白的方法学评价 [J], 金月玲;胡云良
3.免疫透射比浊法与干化学法测定血清白蛋白的方法学比较及偏倚评估 [J], 冯品宁;高玲;喻雄文;林少宾
4.溴甲酚绿法测定血清白蛋白配方的正交实验及方法学评价 [J], 李树华;庞定国;朱月武;王正书;邵代凤;叶晓红
5.BCG测定血清白蛋白正交实验及方法学评价 [J], 李树华;顾华强
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血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定
1.实验原理
在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2
白蛋白+溴甲酚绿------------ 绿色化合物
2.标本米集
2.1病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆。
3.标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。
在室温条件下（15〜25 C ）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（2〜8 C）稳定一个月，-20 C保存至少可以稳定3个月。
4.标本运输室温条件下运输
5.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6.实验材料:
6.1上海奥林巴斯白蛋白测定试剂盒
6.1.1试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2〜25 C ,若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，
不能继续使用
6.1.4 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
6.3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
7.仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪
8.操作步骤
8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化
分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件
9.检验结果的判断与分析
10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11.计算方法：以TruCal U 复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。
手工测定计算方法为：
Au
白蛋白（g/L）= x校准液浓度
As
12.参考值范围
成人35〜52g/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13.临床意义：白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要组分。
血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。
血清白蛋白升高通常见于脱水的。
血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。
白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断
与监视。
此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。
14.操作性能
14.1线性范围2〜60g/L
14.2精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内重复性小于3%,总不精密度小于3%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
14.3方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂
盒(x),同时对59个样品进行ALB检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x-1.1g/L ；r=0.998
14.4灵敏度：2g/L。
14.5病人结果可报告范围：2〜60g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。
15.超出范围结果处理本法线性上限为60g/L。
如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9 %氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。
16.病危报警值的处理
17.方法局限性
17.1本法线性上限为60g/L。
如样品测定值超过上限时, 应将样品用0.9 %氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。
17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度空1704」mol/L，胆红素浓度-684l mol/L，血红蛋白浓度-4.00g/L ，甘油三酯浓度
-5.63mmol/L时没有观察到干扰。
18.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
19.参考文献
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7.Tietz,N.W.,Clinical Guide to Laboratory Tests,2
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8. NCCLS,Interferenee Test ing in Cli
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9.Young,D.S.,Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests,4 th Editio n,AACC Press,1995.
10.NCCLS,Guideli ne EP5-T2,1992.
20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。