短链挥发性脂肪酸的测定

短链挥发性脂肪酸的测定

样品预处理：

样品经高速离心（12000 g，15 min）、过滤（微孔滤膜，0.45 μm）处理后，收集污泥上清液以用于VFA的测定。将1 mL滤液转入1.5 mL棕色气相色谱瓶中，并加入50～100 μL 3%的H3PO4调节样品pH值至近似4.0左右，样品保存于4 o C冰箱并于96 h内完成VFA测试。

（注意事项：1、SCOD特别高时，需对样品进行事先稀释；2、若上清液本身的pH 为4左右，则无需另外加H3PO4溶液进行调节。）

VFA组分的测试：

VFA组分采用Shimadzu GC－2010型气相色谱仪（环境楼2楼）进行直接测定（无需萃取后再做测试分析）。气相色谱测试条件为：氢火焰检测器，色谱柱为DB－FFAP：30 m x 0.25 mm x 0.25 mm；载气为氮气，其流速为25 mL min-1；进样量为1 μL；进样口与检测器的温度分别为200 o C和250 o C；采用程序升温，起始炉温120 o C运行2 min，然后以13 o C min-1的速率升温到200 o C，并停留2 min。一个样品的整个运行时间约10 min。

（注意事项：1、可直接对水溶液样品的VFA组分进行测试；2、升温速率的设置可适当调整，尽量使测试时各VFA组分的吸收峰能明显分开；3、必须有2次以上的重复测定，VFA组分浓度较高时，最好测试完样品后用纯水做次空白样的测试，以消除样品中某些有机组分对后续测试过程的干扰；4、VFA标样测试时按低浓度→高浓度做样品测试，以保证标线有较高的R2值。）

VFA组分的气相色谱图：

保留时间1.5 min处的吸收峰为乙醇，除此之外，从左至右6个峰依次为乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸和正戊酸，其相应的保留时间为3.2、4.0、4.3、5.1、5.6和6.4 min左右（针对上面的运行程序而言）。

012345678

4000

800012000

1600020000

A 6

5

4

3

2

1

*

Time (min)

01234

567

8

15000

3000045000

600007500090000B

Time (min)

VFA 组分的气相色谱图（（A ）VFA 标样；（B ）污泥样品）

（l —乙酸，2—丙酸，3—异丁酸，4—正丁酸，5—异戊酸，6—正戊酸，*—乙醇)

VFA 组分的定量：

通过标准曲线的峰面积与浓度的关系计算出测试样品中6种VFA 组分的含量（均以mg L -1 COD 计），并将该6种有机酸的COD 值相加得到总VFA 含量（即TVFA ）。6种VFA 的COD 当量浓度以及VFA 组分的密度、含量及其在标准状态下的沸点如下表所示。

表六种VFA 组分的性质（标准状态下）

VFA constituents Density(g mL -1)

Boiling point (o C)

COD (Mw) (g COD/g)

Acetic acid 1.05 118.1 1.07 Propionic acid 0.991～0.995 137～141 1.51 iso-butyric acid 0.955～0.961 154.5 1.82 n-butyric acid 0.946～0.950 161～165 1.82 iso-valerie acid 0.936～0.942 173～176 2.04 n-valeric acid

0.929～0.937

184～187

2.04