抗核抗体检测及临床意义-张瑾PPT课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
❖ SLE标记性/高特异性自身抗体 敏感性：58%-66% （优于抗dsDNA及抗Sm） 特异性：98%-100% （与抗dsDNA相当）
2021
抗核抗体谱（ANAs）
抗核不溶成分 抗DNA抗体
抗核小体抗体
dsDNA ssDNA
ANAs
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4 抗Sm,U1RNP,SSA,SSB 抗Scl-70,Jo-1,PM-1 抗rRNP,PCNA…….
抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体
❖ 至少用两种方法做（报告结果时注明方法学）,互为补充。 如：IIF法+ ELISA法 2021
2021
2021
抗dsDNA抗体临床意义
❖ SLE 的血清特异性抗体 ❖ 多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关 ❖ 与LN与SLE疾病活动性相关，活动期达90％
可用于SLE 疾病活动期判断＆药物疗效观察 ❖ 与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞
2021
ANA检测方法-IIF法
ANA滴度 ANA核型
2021
ANA滴度的意义
❖ 结缔组织病的粗筛（>1:160） ❖ 阳性标本还需进一步识别 ❖ 感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性 ❖ ANA阴性基本可以除外SLE ❖ ANA滴度与疾病活动性无明确相关性
2021
荧光显微镜下ANA的染色型别
风湿免疫性疾病诊断方法
❖症状、体征 ❖自身抗体 ❖影像学检查 ❖病理
2021
风湿免疫性疾病相关自身抗体
❖ 抗核抗体谱（ANAs） ❖ 类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP等) ❖ 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） ❖ 抗自身免疫性肌炎谱 ❖ 自身免疫性肝病相关抗体谱 ❖ 抗磷脂抗体谱
2021
抗核抗体谱检测的意义
抗着丝点抗体（ACA) 抗5sRNA
抗dsDNA检测方法
❖ 以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF) ：≥1:5
❖ 短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。
❖ 优点：特异性好
2021
抗dsDNA检测方法
❖ 酶联免疫吸附法（ELISA）: ≥100IU/ml 优点：敏感性最高 缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而 这两种致病力均不强
❖ 部分与抗核包膜蛋白有关 抗板层素 抗gp210 出现在PBC中
2021
核 膜 型 (M)
2021
斑 点 型 (S)
❖ 与抗ENA成分有关 抗Sm 抗RNP 抗SS-A 抗SS-B
❖ 出现在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等
2021
斑 点 型 (S)
2021
核 仁 型 (N)
❖ 与抗核仁蛋白有关 抗Scl-70 抗RNA多聚酶I 抗PM-Scl
❖ 放射免疫法(Farr): ≥20% 优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF 缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响
❖ 蛋白印迹法（WB） 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果
❖ 不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果： everything is possible
2021
抗核抗体
❖ 自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分 的抗体
❖ ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶） 的抗体。ANA存在一个谱。
❖ ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白 (Nucleoprotein)抗体总称
❖ 某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
❖ 有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；
❖ 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体
❖ 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
2021
❖基本概念 ❖ANA荧光核型 ❖ANAs中的常见抗体
❖ 其他结缔组织病：23-30% 如：RA、PBC、SSc等2021
抗核小体抗体（ANuA）
核小体是真核细胞染色质的基 本复制单位，由组蛋白与DNA 组成。
参与SLE发病机制： 多克隆B细胞活化剂 产生ANuA，先于其他ANA 促进抗dsDNA与AHA形成 参与LN的发生
2021
抗核小体抗体临床意义
减少等有关
2021
2021
抗组蛋白抗体（AHA） （酶联免疫吸附法X2SD)
❖ 可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性
❖ SLE ：50% 活动期SLE 可达90.2% 与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性
❖ 药物性狼疮（DIL）：>90% 如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等 仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL
见于 PM/DM
2021
胞 浆 型 (C)
2021
ANA荧光核型小结
❖ 均质型（H）：像大饼，SLE相关 ❖ 核膜型（M)： 像圈圈，SLE相关 ❖ 斑点型（S）：像藕片，抗ENA ❖ 核仁型（N）：像纽扣，SD相关 ❖ 着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA ❖ 胞浆型（C）：像空心大饼,SLE PM/DM PBC相关 ❖ 混合型：稀释后检测有助于区分
❖ 均质型（H）
❖ 核膜型（M)
❖ 斑点型ห้องสมุดไป่ตู้S）
❖ 核仁型（N）
❖ 着丝点型（ACA）
❖ 胞浆型（C）
混合型 ❖
2021
均 质 型 (H)
❖ 抗组蛋白 ❖ 抗ds/ssDNA ❖ 抗核小体 ❖ 主要出现在SLE中
2021
均 质 型 (H)
2021
核 膜 型 (M)
❖ 主要与抗dsDNA有关 与抗原底物片固定方法和备制过程有关 出现在SLE中
❖ 出现在SSc中
2021
核 仁 型 (N)
2021
着 丝 点 型(ACA)
❖ 与抗着丝点染色质有关 存在于有丝分裂期
❖ 出现在SSc、CREST综合征等中
2021
着 丝 点 型(ACA)
2021
胞 浆 型 (C)
❖ 与抗胞浆成分有关 ❖ 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 ❖ 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ ❖ 抗信号识别颗粒（SRP) ❖ 抗线粒体：出现在PBC中 ❖ 抗高尔基体 ❖ 抗溶酶体 ❖ 等等
2021
抗核抗体谱（ANAs）
抗核不溶成分 抗DNA抗体
抗核小体抗体
dsDNA ssDNA
ANAs
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4 抗Sm,U1RNP,SSA,SSB 抗Scl-70,Jo-1,PM-1 抗rRNP,PCNA…….
抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体
❖ 至少用两种方法做（报告结果时注明方法学）,互为补充。 如：IIF法+ ELISA法 2021
2021
2021
抗dsDNA抗体临床意义
❖ SLE 的血清特异性抗体 ❖ 多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关 ❖ 与LN与SLE疾病活动性相关，活动期达90％
可用于SLE 疾病活动期判断＆药物疗效观察 ❖ 与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞
2021
ANA检测方法-IIF法
ANA滴度 ANA核型
2021
ANA滴度的意义
❖ 结缔组织病的粗筛（>1:160） ❖ 阳性标本还需进一步识别 ❖ 感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性 ❖ ANA阴性基本可以除外SLE ❖ ANA滴度与疾病活动性无明确相关性
2021
荧光显微镜下ANA的染色型别
风湿免疫性疾病诊断方法
❖症状、体征 ❖自身抗体 ❖影像学检查 ❖病理
2021
风湿免疫性疾病相关自身抗体
❖ 抗核抗体谱（ANAs） ❖ 类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP等) ❖ 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） ❖ 抗自身免疫性肌炎谱 ❖ 自身免疫性肝病相关抗体谱 ❖ 抗磷脂抗体谱
2021
抗核抗体谱检测的意义
抗着丝点抗体（ACA) 抗5sRNA
抗dsDNA检测方法
❖ 以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF) ：≥1:5
❖ 短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。
❖ 优点：特异性好
2021
抗dsDNA检测方法
❖ 酶联免疫吸附法（ELISA）: ≥100IU/ml 优点：敏感性最高 缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而 这两种致病力均不强
❖ 部分与抗核包膜蛋白有关 抗板层素 抗gp210 出现在PBC中
2021
核 膜 型 (M)
2021
斑 点 型 (S)
❖ 与抗ENA成分有关 抗Sm 抗RNP 抗SS-A 抗SS-B
❖ 出现在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等
2021
斑 点 型 (S)
2021
核 仁 型 (N)
❖ 与抗核仁蛋白有关 抗Scl-70 抗RNA多聚酶I 抗PM-Scl
❖ 放射免疫法(Farr): ≥20% 优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF 缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响
❖ 蛋白印迹法（WB） 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果
❖ 不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果： everything is possible
2021
抗核抗体
❖ 自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分 的抗体
❖ ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶） 的抗体。ANA存在一个谱。
❖ ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白 (Nucleoprotein)抗体总称
❖ 某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
❖ 有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；
❖ 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体
❖ 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
2021
❖基本概念 ❖ANA荧光核型 ❖ANAs中的常见抗体
❖ 其他结缔组织病：23-30% 如：RA、PBC、SSc等2021
抗核小体抗体（ANuA）
核小体是真核细胞染色质的基 本复制单位，由组蛋白与DNA 组成。
参与SLE发病机制： 多克隆B细胞活化剂 产生ANuA，先于其他ANA 促进抗dsDNA与AHA形成 参与LN的发生
2021
抗核小体抗体临床意义
减少等有关
2021
2021
抗组蛋白抗体（AHA） （酶联免疫吸附法X2SD)
❖ 可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性
❖ SLE ：50% 活动期SLE 可达90.2% 与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性
❖ 药物性狼疮（DIL）：>90% 如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等 仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL
见于 PM/DM
2021
胞 浆 型 (C)
2021
ANA荧光核型小结
❖ 均质型（H）：像大饼，SLE相关 ❖ 核膜型（M)： 像圈圈，SLE相关 ❖ 斑点型（S）：像藕片，抗ENA ❖ 核仁型（N）：像纽扣，SD相关 ❖ 着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA ❖ 胞浆型（C）：像空心大饼,SLE PM/DM PBC相关 ❖ 混合型：稀释后检测有助于区分
❖ 均质型（H）
❖ 核膜型（M)
❖ 斑点型ห้องสมุดไป่ตู้S）
❖ 核仁型（N）
❖ 着丝点型（ACA）
❖ 胞浆型（C）
混合型 ❖
2021
均 质 型 (H)
❖ 抗组蛋白 ❖ 抗ds/ssDNA ❖ 抗核小体 ❖ 主要出现在SLE中
2021
均 质 型 (H)
2021
核 膜 型 (M)
❖ 主要与抗dsDNA有关 与抗原底物片固定方法和备制过程有关 出现在SLE中
❖ 出现在SSc中
2021
核 仁 型 (N)
2021
着 丝 点 型(ACA)
❖ 与抗着丝点染色质有关 存在于有丝分裂期
❖ 出现在SSc、CREST综合征等中
2021
着 丝 点 型(ACA)
2021
胞 浆 型 (C)
❖ 与抗胞浆成分有关 ❖ 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 ❖ 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ ❖ 抗信号识别颗粒（SRP) ❖ 抗线粒体：出现在PBC中 ❖ 抗高尔基体 ❖ 抗溶酶体 ❖ 等等