动植物细胞培养产酶 (3)优秀课件
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(3)植物细胞需求的氮源一般为无机氮源;
(4适)宜植温物度细在胞20一℃般-2以5℃蔗,糖酶为合碳成源温、度浓因度植为物2-种5%类。而异;
通气和搅拌 植物细胞培养要求稳定的pH,一般控制在pH5.8-6.1最好。
耗氧速率较慢,细胞比较大,较脆弱,对剪切力敏感,所以,通气
其他和搅拌不能太强烈。
光照:对一些植物酶有诱导作用或抑制作用。 刺激物:在酶合成时期,适当添加。
2、植物细胞培养
在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体 培养基中,进行振荡培养,得到分散成游离的悬浮细胞, 通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量细胞群体的一种 技术。
2、植物细胞培养
(1)植物细胞培养特点
1)提高产率
(2)23) )缩易植短于物周管期理细、减胞轻劳培动强养度的工艺流程
原生质体能再迅生速增殖、无特定结构和功能的薄壁细胞团
外植体
百度文库
插入 半固体培养基
培养
去除细胞壁后得到的微球体 灭菌、冷却
25℃
生长素、分裂素
1-3周
愈伤组织
分散、接种
3、植物细胞培养产酶的工艺特点
培养基
(1)植物细胞的生长和代谢需要大量无机盐;
培养温度和pH (2)植物细胞需要多种维生素和植物生长激素;
培养
分离
纯化
高价值药物的生产 (7)原代细胞培养50代之后即会退化死亡,需要重新分离
细胞
2、动物细胞培养方式
➢ 悬浮培养 血液、淋巴组织的细胞
➢ 贴壁培养 成纤维细胞型(fibroblast) 上皮细胞型(epithilium cell type) 游走细胞型(wondering cell type) 多形性细胞型 (polymorphic cell type)
融合
(2)pH值:一般控制在pH7.0-7.6微碱性范围内蛋,白通酶常消化
在pH7.4的条件下生长杂最交瘤好细。胞
(3)渗透压:培养液中渗透压应当与细胞内的渗透分散压 处于等渗状态,一般控制在700-850kPa范围内。
(4)溶解氧:至关重要,供氧不足时,细胞生长受到
抑制,供氧过量时,也会对细胞产生毒害。
动物细胞 :离心分离、杂交瘤技术、胰蛋白酶消化处理。
植3物.细动胞、:机植械捣物碎细或酶胞解、培诱养导愈方伤式组织?、原生质体细胞
壁再生。
4动植.动物物细细、胞胞植::悬固物浮体、、细贴液胞壁体和浅培微层养载和体液目体悬的浮?培养。
动物细胞 :疫苗、激素、多肽药物、单克隆抗体、酶、皮 肤等人体组织、器官等功能性蛋白质。 植物细胞 :色素、药物、香精、酶等次级代谢物。
外45植) )体提其高他的产选品择质和量处理→愈伤组织的诱导→ 细胞对的剪获切取力敏→感细、胞生培产周养期→长分、离生纯长和化→产物
代谢需要一定的光照。 外植体的选择与处理:
选择外植体、切取片机段械、捣消碎毒发处:理动。作轻柔
直接分离法
植物愈伤组织
过滤、离心分离
愈伤组织诱导法
酶分解法:纤维素酶、果胶酶等
动植物细胞培养产酶 (3)优 秀课件
第三章 动植物细胞培养产酶
主要内容 植物细胞培养产酶 动物细胞培养产酶
要求 了解动、植物细胞及其培养的特点; 熟悉动、植物细胞培养的工艺条件及其控
制。
一、概述
1.什么是动、植物细胞培养?
动植物细胞在体外条件下的存活或生长。
2.如何获得动、植物细胞?
➢ 固定化细胞培养
3、动物细胞培养的工艺条件及其控制
(1)动物细胞获取过程:
(2体)细动胞 物细胞培养杂交基瘤细的胞组成成分:动物细胞
培养过程
(3氨)基动酸、物维细生胞素肿培、瘤无养细机胞基盐条淋、巴件葡细萄胞:糖、激素、细生胞长因子。
(1)温度:一般控制在36.5℃,允许温度波动范围在
0.25℃之内。
例:动物细胞培养获得的产物
例:植物细胞培养获得的产物
动、植物细胞培养和微生物细胞培养比较
二、植物细胞培养产酶
1、从天然植物材料中直接提取 2、从大规模培养的植物细胞中提取
1、从现成植物材料中提取酶的一般步骤
取材→预处理→加提取液捣碎→离心或过滤除去固体物, 收集粗酶液→适当浓缩→纯化→成品加工
三、动物细胞培养产酶
1、从动物材料中直接提取 2、从大规模培养的动物细胞中提取
1、动物细胞培养的特点
(1)主要用于功能蛋白质和多肽的生产 (2)生长较慢,15-100h (3)需要添加抗生素以防染菌 (4)无细胞壁,体积较大,对剪切力敏感,要求严格控制
培养条件如通风、搅拌、pH、渗透压等 (5)大部分动物细胞有锚地依赖性,需要贴壁培养 (6)培养基成分复杂,分离纯化复杂,成本较高,多用于
(4适)宜植温物度细在胞20一℃般-2以5℃蔗,糖酶为合碳成源温、度浓因度植为物2-种5%类。而异;
通气和搅拌 植物细胞培养要求稳定的pH,一般控制在pH5.8-6.1最好。
耗氧速率较慢,细胞比较大,较脆弱,对剪切力敏感,所以,通气
其他和搅拌不能太强烈。
光照:对一些植物酶有诱导作用或抑制作用。 刺激物:在酶合成时期,适当添加。
2、植物细胞培养
在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体 培养基中,进行振荡培养,得到分散成游离的悬浮细胞, 通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量细胞群体的一种 技术。
2、植物细胞培养
(1)植物细胞培养特点
1)提高产率
(2)23) )缩易植短于物周管期理细、减胞轻劳培动强养度的工艺流程
原生质体能再迅生速增殖、无特定结构和功能的薄壁细胞团
外植体
百度文库
插入 半固体培养基
培养
去除细胞壁后得到的微球体 灭菌、冷却
25℃
生长素、分裂素
1-3周
愈伤组织
分散、接种
3、植物细胞培养产酶的工艺特点
培养基
(1)植物细胞的生长和代谢需要大量无机盐;
培养温度和pH (2)植物细胞需要多种维生素和植物生长激素;
培养
分离
纯化
高价值药物的生产 (7)原代细胞培养50代之后即会退化死亡,需要重新分离
细胞
2、动物细胞培养方式
➢ 悬浮培养 血液、淋巴组织的细胞
➢ 贴壁培养 成纤维细胞型(fibroblast) 上皮细胞型(epithilium cell type) 游走细胞型(wondering cell type) 多形性细胞型 (polymorphic cell type)
融合
(2)pH值:一般控制在pH7.0-7.6微碱性范围内蛋,白通酶常消化
在pH7.4的条件下生长杂最交瘤好细。胞
(3)渗透压:培养液中渗透压应当与细胞内的渗透分散压 处于等渗状态,一般控制在700-850kPa范围内。
(4)溶解氧:至关重要,供氧不足时,细胞生长受到
抑制,供氧过量时,也会对细胞产生毒害。
动物细胞 :离心分离、杂交瘤技术、胰蛋白酶消化处理。
植3物.细动胞、:机植械捣物碎细或酶胞解、培诱养导愈方伤式组织?、原生质体细胞
壁再生。
4动植.动物物细细、胞胞植::悬固物浮体、、细贴液胞壁体和浅培微层养载和体液目体悬的浮?培养。
动物细胞 :疫苗、激素、多肽药物、单克隆抗体、酶、皮 肤等人体组织、器官等功能性蛋白质。 植物细胞 :色素、药物、香精、酶等次级代谢物。
外45植) )体提其高他的产选品择质和量处理→愈伤组织的诱导→ 细胞对的剪获切取力敏→感细、胞生培产周养期→长分、离生纯长和化→产物
代谢需要一定的光照。 外植体的选择与处理:
选择外植体、切取片机段械、捣消碎毒发处:理动。作轻柔
直接分离法
植物愈伤组织
过滤、离心分离
愈伤组织诱导法
酶分解法:纤维素酶、果胶酶等
动植物细胞培养产酶 (3)优 秀课件
第三章 动植物细胞培养产酶
主要内容 植物细胞培养产酶 动物细胞培养产酶
要求 了解动、植物细胞及其培养的特点; 熟悉动、植物细胞培养的工艺条件及其控
制。
一、概述
1.什么是动、植物细胞培养?
动植物细胞在体外条件下的存活或生长。
2.如何获得动、植物细胞?
➢ 固定化细胞培养
3、动物细胞培养的工艺条件及其控制
(1)动物细胞获取过程:
(2体)细动胞 物细胞培养杂交基瘤细的胞组成成分:动物细胞
培养过程
(3氨)基动酸、物维细生胞素肿培、瘤无养细机胞基盐条淋、巴件葡细萄胞:糖、激素、细生胞长因子。
(1)温度:一般控制在36.5℃,允许温度波动范围在
0.25℃之内。
例:动物细胞培养获得的产物
例:植物细胞培养获得的产物
动、植物细胞培养和微生物细胞培养比较
二、植物细胞培养产酶
1、从天然植物材料中直接提取 2、从大规模培养的植物细胞中提取
1、从现成植物材料中提取酶的一般步骤
取材→预处理→加提取液捣碎→离心或过滤除去固体物, 收集粗酶液→适当浓缩→纯化→成品加工
三、动物细胞培养产酶
1、从动物材料中直接提取 2、从大规模培养的动物细胞中提取
1、动物细胞培养的特点
(1)主要用于功能蛋白质和多肽的生产 (2)生长较慢,15-100h (3)需要添加抗生素以防染菌 (4)无细胞壁,体积较大,对剪切力敏感,要求严格控制
培养条件如通风、搅拌、pH、渗透压等 (5)大部分动物细胞有锚地依赖性,需要贴壁培养 (6)培养基成分复杂,分离纯化复杂,成本较高,多用于