甘草中甘草酸提取与分离的研究_李赞忠
实验七 甘草中甘草酸的提取分离
实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内，易溶于热水，因此可用水提取甘草酸钾盐，水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸，因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。
也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀，将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中，用三氯甲烷除去黄酮类化合物，即可得甘草皂苷。
【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸（粗品）的提取
（1）水提法：取甘草粗粉100g，加水煎煮提取2-3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。
浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。
（2）醇提法：取甘草粗粉100g，加10%乙醇渗漉，收集渗漉液酸化，放置过夜，滤过得沉淀（甘草总皂苷）。
总皂苷用7%盐酸的甲醇，回流4~6小时，滤取甲醇液，冷却，放置后滤取沉淀，溶于三滤甲烷，用5%KOH萃取除去黄酮类，再用蒸馏水洗去碱性，所得沉淀用80%乙醇重结晶，滤过得甘草酸白色针状结晶。
【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时，水提液酸化后析出的沉淀，杂质较多难以过滤，故可倾出上清液再抽滤。
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
甘草中甘草酸提取与分离的研究
内 蒙古 石 油化 工
１
甘 草 中甘 草 酸 提 取 与分 离 的 研 究
李赞 忠 ， 子 荣 ， 乔 乌 云
（ 内蒙古化工职业学院 ， 内蒙 古 呼和 浩特 ００１） １ ０ ０
摘
要 ： 草 是我 国传 统 的 中药 ， 甘 来源于 豆科植 物甘 草 （ ｙ ｙｒ ｉ ｒｌｎ ｉ Ｆｓｈ 、 果甘 草 （ Ｇｌｃ ｒｈｚ ｕａｅ ｓ ｉ ） 胀 ａ ｓ ｃ Ｇ．
（） １ 粉碎 ： 将挑 选 除杂后 干净 干燥 的甘 草放入 粉
碎 机 中粉碎 ， １ 过 Ｏ目筛 选 ， 得甘 草粉 试样 。 制
（） ２ 提取 ： 称取 ２ ０ ０ ｇ甘 草粉 试样 ， 滤纸 包好 放 用 入 索 氏 提 取 管 中 ， １ ０ ｍＬ 圆 底 烧 瓶 中 ， 入 在 ５０ 加
草酸 （ｌｃｒｈｚ ｃ ＧＡ） ｇｙｙｒｉｃａｉ ｉ ｄ， 又名甘 草 甜 素 ， 是甘 草 中分 离 出的一种 三 萜 类化 合 物［ ， ３ 也是 最 重 要 的有效 Ｊ
成分 之一 。本 文对 甘 草 中甘 草酸 及 其他 成分 的提取 分 离方 法进行 了摸 索和改进 ， 得 了较 好 的效 果 。 取 关键 词 ： 草 ； 甘 甘草 酸 ； 提取 ； 离 分 中图分 类号 ： ８ ． Ｒ２ ４ ２ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编号 ：Ｏ ６ ７ ８ （ ０ ０ ２ ～ Ｏ ０ — ０ １Ｏ — ９１ ２ １）４ ｏ１ ３
ｉｆ ｔ ａ． 或光 果甘 草 （ ｇａ ｒ ． 的干燥 根 和根 茎［ 。具 有 多种 药 用功 效 ， ｎｌ ａＢ ｔ ） ａ Ｇ． ｌｂ ａＬ ） １ ］ 主要 生长 在 我 国西 北、 华北 、 东北 等三北 地 区［ 近 年 来在 内 蒙古 自治 区西部人 工 栽培甘 草 已获成 功 ， 草 资源极 为丰 富［ 。 。 甘 引 甘
甘草中甘草酸的提取工艺研究
表 3 L9 ( 34 )正交试验结果
试验
编号
A
B
C
1
1
1
1
2
1
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3
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7
3
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8
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2
1
9
3
3
2
K1
9. 09 10. 45 9. 32
K2
9. 11 9. 37 9. 38
K3
10. 34 8. 72 9. 85
R
1. 25 1. 73 0. 53
甘草酸 甘草酸提 D 得率 / % 取率 / %
表 4 方差分析
方差来源 SS
df
A
9. 919
2
B
12. 429
2
C
1. 921
2
D 误差
4. 030
2
0. 412
18
MS 4. 960 6. 215 0. 960 2. 015 0. 023
F 216. 783 271. 643
41. 980 88. 077
sig 0. 000 0. 000 0. 000 0. 000
甘草酸工业化生产的关键是提取工艺参数的优化 ,提取 工艺参数包括溶剂浓度 、溶剂体积 、提取温度和提取时间等 , 其中 溶 剂 浓 度 对 甘 草 酸 提 取 率 影 响 最 大 [8 ] 。有 研 究 表 明 [10 ] ,用微波萃取时 ,含 0. 5%氨水的 10%乙醇溶液可使甘 草酸提取率达到最高 ,但多数文献报道是以氨水浓度为定
甘草中甘草酸的提取工艺优化研究
甘草中甘草酸的提取工艺优化研究甘草（GlycyrrhizauralensisFisch）是中草药中重要的一种植物，其中含有大量的甘草酸，这是它的一种特殊的有效成分，具有多种生物活性，而其中的甘草酸也被广泛应用于药物、食品、化妆品等领域。
由于甘草酸的抗氧化、抗炎、抗菌等作用，但其从甘草中提取的高效工艺迄今未见报道。
甘草酸的提取是植物中以连续提取法、提取工艺的优化为主，以及由此引起的生物活性化学研究。
第一步是选择合适的溶剂，一般使用环氧乙烷、丙酮、乙醇等作为溶剂，然后通过溶剂提取法从甘草中提取出甘草酸，利用溶剂蒸发法进行纯化，以提高提取率和产品纯度。
其次，可以通过多种反应条件优化工艺，如溶剂浓度、温度、PH 值、提取时间、提取次数等条件来优化提取工艺，使其提取效率更高，提高成品的质量。
最后，可以利用高效液相色谱（HPLC）技术对提取的甘草酸进行分析测定，以提高分析的准确性和灵敏度。
此外，对提取出的甘草酸进行化学研究也是十分必要的。
首先，可以通过气相色谱法（GC）和核磁共振（NMR）研究甘草酸的结构。
其次，可以通过抗氧化实验、抗炎实验和抗菌实验来研究甘草酸的活性物质，最终确定其具有特异的抗氧化、抗炎和抗菌作用。
最后，可以通过众多研究的结果综合分析，形成一种有效高效的甘草酸提取工艺，探讨甘草酸的生物活性，为临床应用提供更有效的可能。
综上所述，甘草酸是一种重要的活性成分，具有多种生物活性，可以利用提取工艺的优化、多种反应条件优化以及化学研究等方法，从甘草中提取高纯度和高效率的甘草酸，为临床应用提供有效的可能。
另外，在提取过程中需要进行抗氧化、抗炎、抗菌等实验，以确定提取的甘草酸的生物活性。
因此，甘草中甘草酸的提取工艺优化研究具有重要的意义，可以用于临床应用，为植物药物的开发及其他领域的应用提供基础性的研究。
甘草有效成分的分离与纯化的研究进展[文献综述]
![甘草有效成分的分离与纯化的研究进展[文献综述]](https://img.taocdn.com/s3/m/9ea5a8b8910ef12d2af9e76b.png)
毕业论文文献综述生物工程甘草有效成分的分离与纯化的研究进展1 前言甘草是临床最常应用的药品。
生甘草能清热解毒，润肺止咳，调和诸药性；炙甘草能补脾益气，临床用量特大，出口量大。
除药用之外，食品上也大量用甘草做糕点添加剂，它的甜度是蔗糖的百倍。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等[1-2]。
研究表明[3]，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用，还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。
我国甘草资源丰富，具体分布情况如下表1.1[4-5]表1-1中国甘草资源的分布情况乌拉尔甘草新疆、甘肃、青海、陕两、宁夏、内蒙占、河北、山西、山东、辽宁、黑龙江, 光果甘草新疆和青海胀果甘草新疆刺果甘草黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、山东、江苏、河南、陕西粗毛甘草仅分布在新疆的东部和北部黄甘草甘肃云南甘草云南、四川等高寒地区侧果甘草新疆甘草的主要有效成分为草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。
此外，国内外对甘草及其制剂药理与临床应用方面也进行了研究。
本文就甘草的有效成分的分离及纯化，药理作用等方面的最新研究加以概述。
2 甘草的化学成分概述2.1 地上部分化学成分研究2.1.1 黄酮类成分有研究证明，已发现了160多种甘草黄酮类化合物，药用作用优于甘草甜素[6]，从云南甘草中已分离出12种化合物，刺果甘草中分离得42种化合物用。
2.1.2 其它化学成分1989年日本Toshio从黑龙江产乌拉尔甘草的地上部分分离得到1个香豆素类成分，后来又分离到5个其他酚类衍生物。
贾世山等从内蒙古自治区西部地区产乌拉尔甘草叶分离到1个酚酸甙类成分。
甘草酸的提取分离及鉴定实验反思
甘草酸的提取分离及鉴定实验反思甘草酸是一种重要的药用成分，具有抗炎、抗氧化、抗溃疡等多种药理活性。
因此，对甘草酸的提取分离及鉴定具有重要的研究意义。
本实验旨在探讨甘草酸的提取分离方法，并利用色谱技术对提取物进行定性与定量分析。
首先，我们采用了超声波辅助提取法来提取甘草酸。
该方法具有操作简便、提取效率高的优点。
在实验中，我们选择了甘草根作为原料，将其粉碎并混合乙醇溶剂，然后进行超声波提取。
超声波的作用能够破坏细胞壁，促进甘草酸的释放。
实验结果表明，超声波提取法能够有效地提取甘草酸，并且提取率较高。
接下来，我们进行了甘草酸的分离纯化实验。
由于甘草酸在溶剂中的溶解度较高，在大部分有机溶剂中均可溶解。
因此，我们选择了正己烷和乙醇为溶剂，并采用反应结晶法进行分离纯化。
实验中，我们将提取得到的甘草酸溶液慢慢加入冷却的正己烷中，通过结晶使甘草酸分离出来。
此方法能够有效地去除杂质，并得到较为纯净的甘草酸。
最后，我们利用色谱技术对提取物进行了鉴定。
我们选择了高效液相色谱（HPLC）进行分析。
通过比对标准品和提取物的保留时间及峰面积，我们能够定量分析甘草酸的含量。
实验结果显示，提取物中含有一定量的甘草酸，并且与标准品具有相似的色谱图谱。
整个实验中，我们遇到了一些问题。
首先，提取物中可能存在其他有机酸或杂质，导致甘草酸的纯度不高。
其次，色谱分析过程中，可能存在色谱峰重叠的问题，使得甘草酸的定量分析不够准确。
针对这些问题，我们可以进一步改进提取和分离的方法，以提高甘草酸的纯度和分析的准确性。
总之，通过本次实验，我们成功地提取分离了甘草酸，并利用色谱技术对其进行了鉴定。
通过实验反思，我们认识到了实验过程中存在的问题，并提出了改进的方向。
这些实验结果对于进一步研究甘草酸的药理活性及应用具有重要的指导意义。
甘草中甘草酸的提取工艺研究
甘草中甘草酸的提取工艺研究
杜文彬;张洪
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2008(036)025
【摘要】[目的]研究甘草中甘草酸的提取工艺.[方法]以甘草酸收率为指标,正交试验法考察提取时间、提取温度、溶剂用量及配比对甘草酸提取率的影响.[结果]提取时间、溶剂用量对甘草酸提取率有显著影响.[结论]得出甘草中甘草酸的最佳提取工艺,并通过试验得以验证.
【总页数】2页(P10935,10946)
【作者】杜文彬;张洪
【作者单位】武汉大学药学院,湖北武汉,430072;武汉大学药学院,湖北武
汉,430072
【正文语种】中文
【中图分类】S567.9
【相关文献】
1.甘草中甘草酸的提取工艺研究 [J], 王海峰;邱芳萍
2.从甘草中提取甘草酸和甘草次酸的工艺研究 [J], 曾启华
3.甘草中甘草酸和甘草苷的提取工艺研究 [J], 魏宁;郎伟君
4.同时提取光果甘草中光甘草定和甘草酸的工艺研究 [J], 李玉会;徐德平;张连富
5.间歇式泡沫分离提取甘草中甘草酸的工艺研究 [J], 苏艳桃;韩丽;马鸿雁;王虎山;兰洁;张艳艳;杨明
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甘草中甘草酸和甘草苷的提取工艺研究
甘草中甘草酸和甘草苷的提取工艺研究魏宁;郎伟君【摘要】为优选甘草的最佳提取工艺条件，以甘草酸和甘草苷的提取率为指标，采用正交设计法对影响提取的因素进行优化．结果表明，最佳提取溶剂为乙醇，影响浸出的主要因素为乙醇体积分数、溶媒用量、提取时间和提取次数，最佳提取工艺为6倍量55％乙醇，加热回流提取3次，每次1．5 h．该工艺合理，稳定可行，适合生产．%The orthogonal design method was used to optimize the best extraction technology conditions of glycyrrhiza uralensis with extraction rate of glycyrrhizic acid and liquorice glyco-sides as index.Results indicated that the best extraction solvent was ethanol, and the main factors influencing the leaching were ethanol concentration, solvent dosage, extraction time and extraction times.In addition, the best extraction process was 6 times of the volume of 55%ethanol, heating reflux extraction for 3 times and each time for 1.5 h.This process was reasonable, stable, feasible and suitable for production.【期刊名称】《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】3页(P143-145)【关键词】甘草酸;甘草苷;正交试验;提取工艺【作者】魏宁;郎伟君【作者单位】哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨150076; 哈尔滨乐泰药业有限公司，哈尔滨150025【正文语种】中文【中图分类】R284甘草为豆科植物甘草、胀果甘草、光果甘草的根及根茎，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功能[1].甘草的主要化学成分为三萜皂苷类和黄酮类，其中甘草酸、甘草苷分别是其重要的单体活性成分，具有很强的药理活性[2].本文以甘草酸和甘草苷的提取率为指标，对提取溶剂的选择和最佳方法进行考察，旨在为甘草用于化妆品并实现工业化生产提供参考.高效液相色谱仪(日本岛津公司)：SPD-M20A型二极管阵列检测器、LC-10ATvP型泵、DGU-20A3型脱气器、CBM-20A型系统控制器、SIL-20A型自动进样器、LC solution色谱工作站、Diamonsil-C18色谱柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)(迪马公司).甘草药材(哈药集团世一堂制药厂，经哈尔滨商业大学药学院张德连副教授鉴定为真品)；甘草酸单铵盐对照品(批号：111089-201301)、甘草苷对照品(批号：111610-201301)均购自中国药品生物制品鉴定所；甲醇、乙腈、冰乙酸为色谱纯，水为双蒸水，无水乙醇为分析纯.2.1 甘草酸和甘草苷的质量浓度测定2.1.1 色谱条件1)甘草酸色谱柱：Diamonsil-C18柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)；流动相：甲醇-0.2 mol/L 醋酸铵溶液-冰醋酸(67∶33∶1)；检测波长：250 nm；流速：1 mL/min，进样量：10 μL.2)甘草苷色谱柱：Diamonsil-C18柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)；流动相：乙腈-0.5%冰醋酸(1∶4)；检测波长：276 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL.2.1.2 对照品溶液的制备1)甘草酸精密称取甘草酸单铵盐对照品5 mg，置于5mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得.2)甘草苷精密称取甘草苷对照品1.25 mg，置于5 mL量瓶中，加甲醇制成每1 mL含250 μg的溶液.2.1.3 供试品溶液的制备1)甘草酸精密量取各提取液1 mL，置50 mL量瓶中，加流动相约20 mL，超声处理30 min，加流动相稀释至刻度，精密量取续滤液10 mL，置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，取续滤液，测定并计算；2)甘草苷精密量取各提取液1 mL，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇溶液10 mL，超声处理30 min，补足减失的重量，精密量取续滤液1 mL，置50 mL量瓶中，用20%乙腈稀释至刻度，取续滤液，测定并计算.2.1.4 线性关系考察1)甘草酸精密吸取对照品溶液0.25、0.50、0.75、1.00、1.50 mL，分别置于5 mL容量瓶中，流动相稀释，摇匀.分别精密吸取10 μL注入液相色谱仪进行分析.以甘草酸单铵盐对照品的进样质量浓度(C)对其峰面积积分值(A)进行线性回归，得回归方程：A=3811.1C+683.15(r=0.999 8)，结果表明，甘草酸单铵盐对照品的进样质量浓度在50～300 μg/mL的范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系.2)甘草苷精密吸取对照品溶液0.25、0.50、0.75、1.00、1.50 mL，分别置于5 mL容量瓶中，甲醇稀释，摇匀.分别精密吸取20 μL注入液相色谱仪进行分析.以甘草苷对照品的进样质量浓度(C)对其峰面积积分值(A)进行线性回归，得回归方程：A=19 003C+10 174(r=0.999 7)，结果表明，甘草苷对照品的进样质量浓度在6.25～37.5 μg/mL的范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系.2.2 提取工艺研究2.2.1 不同提取溶剂的选择根据文献报道[3]和2010年版《中国药典》(一部)，结合实际生产的需要，对不同提取溶剂进行筛选.选取水和65%的乙醇作为提取溶剂，以甘草酸和甘草苷的提取率为评价指标进行比较，提取方法： 1)水煎煮法：甘草粗粉50 g，用20倍量水煎煮3次，每次1.5 h，合并煎液，离心，倾取上清液，浓缩至50 mL，测定； 2)乙醇回流提取法：甘草粗粉50 g，用6倍量65%的乙醇回流提取3次，每次1.5 h，合并提取液，回收乙醇至无醇味，浓缩至50 mL，测定.不同提取溶剂下甘草酸和甘草苷的提取率见表1.注由表1可知，水煎煮法的总提取物得率比65%乙醇回流提取法的总提取物得率高一些，但65%乙醇回流提取法的甘草苷和甘草酸的提取率都比水煎煮法的高很多，综合结果优选65%的乙醇作为提取溶剂.2.2.2 优化乙醇回流提取工艺选用正交试验，优化乙醇回流提取条件.根据预实验选取乙醇体积分数(A)、溶媒用量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)4个因素，每个因素选3个水平，采用L9(34)正交设计，以甘草酸和甘草苷的提取率综合值为指标进行考察，综合值=(甘草酸提取率+甘草苷提取率)/2.因素水平见表2；正交实验结果见表3；方差分析结果见表4.由表3直观分析可知，各因素对提取效果的影响依次为D>C>B>A，优化水平是A2B3C3D3；由表4方差分析可知，提取次数(D)对甘草酸、甘草苷提取效果的影响有显著意义(P<0.05).以总提取物得率为考察指标时，直观分析表明各因素对提取效果的影响依次为D>C>B>A，优化水平是A2B3C3D3；方差分析表明，B、C、D三种因素对总提取物得率的影响均有显著意义(P<0.05)；乙醇体积分数(A)对甘草酸、甘草苷的提取率，总提取物得率的影响均无显著意义.为降低大批量生产成本，决定选用55%乙醇(A1)，则最佳工艺为A1B3C3D3，即6倍量55%乙醇，回流提取3次，每次1.5 h.该结果与正交试验中综合值最高者的搭配A1B3C3D3一致.2.2.3 验证试验称取甘草50 g，按最佳工艺A1B3C3D3进行验证试验，测得甘草酸、甘草苷提取率分别为73.41%、74.18%，接近正交试验方案中的最高值，优化条件可行.有文献报道[4]，甘草酸用氨水提取效果好.甘草苷易溶于有机溶剂，多用乙醇提取.通过查阅文献和预实验，并从甘草用于化妆品工业化生产和安全角度考虑，本试验综合优选乙醇作为提取溶剂，确定乙醇体积分数、溶媒用量、提取时间和提取次数为考察因素，通过验证放大实验表明，正交实验优选确定的最佳工艺水平是科学、可行的，有利于实际生产降低能源、节约时间，故确定甘草乙醇回流提取的最佳工艺为A1B3C3D3，即6倍量55%乙醇，回流提取3次，每次1.5 h.【相关文献】[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[M].北京: 中国医药科技出版社, 2010. 80-81.[2] 张明发, 沈雅琴, 张艳霞.甘草及其有效成分的皮肤药理和临床应用[J].药物评价研究, 2013, 36(2): 146-156.[3] 刘育辰,王文全,郭洪祝.甘草有效成分的提取纯化方法研究进展[J].中成药, 2010, 32(11): 1953-1957.[4] 杜文彬,张洪.甘草中甘草酸的提取工艺研究[J].安徽农业科技, 2008, 36(25): 10935-10946.。
甘草酸的提取实验报告
甘草酸的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从甘草中提取甘草酸的有效方法，并对提取过程中的关键因素进行研究和优化，以提高甘草酸的提取率和纯度。
二、实验原理甘草酸是甘草中的主要活性成分，具有多种药理作用。
甘草酸在水中溶解度较低，但在碱性溶液中溶解度增加。
通过将甘草粉末与碱性溶液混合，加热搅拌，使甘草酸溶解出来，然后用酸调节溶液 pH 值，使甘草酸沉淀析出，从而实现甘草酸的提取。
三、实验材料与仪器1、实验材料甘草：干燥的甘草根，购自当地药材市场。
氢氧化钠（NaOH）：分析纯。
盐酸（HCl）：分析纯。
乙醇：分析纯。
2、实验仪器电子天平：精度 0001g。
恒温水浴锅。
电动搅拌器。
真空抽滤装置。
旋转蒸发仪。
紫外分光光度计。
四、实验步骤1、甘草粉末的制备将干燥的甘草根用粉碎机粉碎，过40 目筛，得到甘草粉末，备用。
2、甘草酸的提取称取 50g 甘草粉末，放入 500ml 三口烧瓶中，加入 200ml 05mol/L的氢氧化钠溶液，在 80℃恒温水浴锅中加热搅拌 2h。
3、过滤提取结束后，将反应液冷却至室温，用真空抽滤装置过滤，收集滤液。
4、酸沉向滤液中缓慢滴加盐酸，调节 pH 值至 2-3，此时有大量白色沉淀生成。
静置 2h，使沉淀完全。
5、过滤与洗涤再次用真空抽滤装置过滤，收集沉淀。
用去离子水洗涤沉淀 3 次，以去除杂质。
6、干燥将沉淀放入干燥箱中，在 60℃下干燥至恒重，得到甘草酸粗品。
7、纯化将甘草酸粗品用适量乙醇溶解，然后通过旋转蒸发仪浓缩去除乙醇，得到纯化后的甘草酸。
五、实验结果与分析1、提取率的计算提取率＝（提取得到的甘草酸质量／甘草粉末质量）× 100%经过实验，本次提取得到的甘草酸质量为_____g，甘草粉末质量为50g，计算得出提取率为_____%。
2、纯度的测定采用紫外分光光度计测定甘草酸的纯度。
以标准甘草酸溶液绘制标准曲线，然后测定提取得到的甘草酸溶液的吸光度，根据标准曲线计算出甘草酸的纯度。
甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告
实验目的：了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
实验原理：甘草又名甘草根，是一种广泛使用的中草药。
其主要成分是甘草酸、甘草素、甘草皂苷等。
甘草酸是甘草的主要有效成分，具有降糖、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用。
该实验是利用无机酸法将甘草酸从甘草中提取出来。
实验步骤：
1.样品制备：取适量甘草，去除杂质后切碎成小片备用。
2.提取：将切碎的甘草用石英研钵研成粉末，加入适量无水乙醇，浸泡6小时后，过滤得到提取液。
3.提取液浓缩：将提取液加热至70℃左右，缓慢加入盐酸，使pH达到1左右，再继续加热浓缩。
4.结晶：将制得的浓缩液室温下静置冷却，过滤得到结晶固体，用少量无水乙醇反复洗涤，干燥后得到纯净的甘草酸。
实验结果：经过提取、浓缩和结晶得到了白色粉末状的甘草酸，对其进行紫外分光光度计检测其吸收峰在235nm处。
经过质谱实验表明，得到的结晶物是纯净的甘草酸。
实验讨论与分析：通过本实验我们可以了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
甘草酸是甘草中的主要有效成分，具有重要的药理作用。
本实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
不过，无机酸法提取时要注意浓
度和pH值的控制，以免影响提取效率。
同时，在结晶过程中还需要注意温度和过滤的方式和时间，以得到高纯度的甘草酸。
实验总结：本次实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
通过本次实验，我们了解了分离纯化技术的应用、掌握了无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作，同时也体验了一把科学实验并学到了新的实验技能。
甘草有效成分的提取与分离
2012-2013学年第二学期药用植物资源与开发论文名称甘草化学成分的提取与分离年级2010学院中药材学院专业植物科学与技术学号07107216姓名徐玉强任课教师张永刚完成时间2013-5-11甘草中化学成分的提取与分离摘要：本文主要介绍了甘草中主要的化学成分以及这些化学成分的含量和性质，并简述了甘草酸，甘草次酸和甘草甘的提取和有效成分的含量测定，为进一步的生产实践做出贡献。
关键词：甘草化学成分提取正文：甘草属于豆科甘草属，以根和根状茎入药。
甘草在我国集中分布于三北地区（东北、华北和西北各省区），而以新疆、内蒙古、宁夏和甘肃为中心产区。
随着药学及其相关学科以及科研设备的发展，甘草中主要含有的甘草酸、甘草次酸、黄酮、生物碱和氨基酸等化学成分，具有广泛的生物活性。
一、化学成分药用甘草质量与其化学成分的组成、积累变化有直接的关系。
先后从甘草属植物中提取、分离、鉴定了200多种化学成分，涉及甘草属植物10个种。
其中最重要并已证实具有生物活性的成分主要是甘草酸等三萜皂苷类、黄酮类、香豆素类、多糖、生物碱、氨基酸等。
三萜皂苷类化合物：甘草属植物中三萜皂类成分具有量高、生理活性强的特点，甘草的许多药理作用都与这类成分有直接关系。
至今在甘草属植物中已鉴定得到61种三萜类化合物，其中苷元45个。
这些三萜类化合物其苷元均为 3 B - 经基齐墩果烷型化合物的衍生物；皂苷一般为3B -羟基上的氧苷，糖元多为D- 葡萄糖酸或D-葡萄糖。
甘草酸一直被认为是甘草中最重要三萜类化合物，《中国药典》把甘草酸的量作为评价甘草药材及其制品质量的重要指标，通常要求不低于2%。
黄酮类成分：是近年来研究最活跃的天然活性成分之一，广泛存在于植物界中。
这类化合物的存在对植物生长、发育、开花、结果以及抵御异物的侵入起着重要的作用。
目前，从甘草属植物中已发现黄酮及其衍生物153种，它们的基本母核结构类型有15种，其中包括：黄酮、黄酮醇、双氢黄酮、双氢黄酮醇、查尔酮、异黄酮、双氢异黄酮、异黄烷、异黄烯等。
甘草中甘草酸提取与分离的研究_李赞忠
甘草中甘草酸提取与分离的研究李赞忠,乔子荣,乌 云(内蒙古化工职业学院,内蒙古呼和浩特 010010) 摘 要:甘草是我国传统的中药,来源于豆科植物甘草(Gly cy rrhiza uralensis Fisch)、胀果甘草(G.inflata Bat .)或光果甘草(G .glabra L .)的干燥根和根茎[1]。
具有多种药用功效,主要生长在我国西北、华北、东北等三北地区[1]。
近年来在内蒙古自治区西部人工栽培甘草已获成功,甘草资源极为丰富[2]。
甘草酸(glycyrr hizic acid,GA)又名甘草甜素,是甘草中分离出的一种三萜类化合物[3],也是最重要的有效成分之一。
本文对甘草中甘草酸及其他成分的提取分离方法进行了摸索和改进,取得了较好的效果。
关键词:甘草;甘草酸;提取;分离 中图分类号:R 284.2 文献标识码:A 文章编号:1006—7981(2010)24—0001—03 甘草是一种常用的中草药,又名美草、蜜甘、甜根子,多生长在我国西北、华北、东北等许多地区,为多年生草本植物[1]。
研究证明,甘草酸是甘草中最重要的有效成分之一,也是甘草甜味的主要成分,通常称为干草甜素,它随产地的不同其含量亦不同,一般在7～14%之内。
通常使用的是甘草酸的水溶性的盐,如甘草酸钠、甘草酸二钠、甘草酸三钠、甘草酸铵等。
甘草酸为白色或淡黄色结晶性粉末,分子式C 42H 62O 16,相对分子质量822.9,熔点220℃,其结构式如下图所示。
甘草酸具有特殊甜味,其甜度约为蔗糖的250倍,溶于热水和热的稀乙醇,不溶于无水乙醇和乙醚,甘草酸遇酸则沉淀[4]。
甘草酸具有高甜度、低热能、安全无毒等特点,能与多种生物碱、抗生素、氨基酸等生成复盐或复方制剂,具有协同、增溶、增加药物稳定性、起泡性和溶血作用很低、提高生物利用度及降低毒副作用的功效[5]。
甘草酸的许多金属盐,人体可适当吸收,不易造成元素的积蓄中毒。
甘草中有效成分的分离提取
甘草中有效成分的分离提取摘要：甘草具有多种药用功效，自古以来就是一味重要的药材。
本文简要探讨对甘草中有效成分的分离提取方法，以期为甘草的研究与应用提供参考依据。
关键词：甘草有效成分分离与提取一、甘草简介甘草属于豆科多年生草本植物。
作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。
甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。
据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。
因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。
二、甘草中的有效成分1.甘草甜素甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。
它的甜度是蔗糖的2～3百倍。
它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。
2.甘草次酸甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。
3.甘草黄酮甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。
4.甘草多糖它是将甘草提纯后获得的一种α-D-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。
三、甘草有效成分的提取方法1.甘草酸的提取方法1.1溶剂提取法指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。
根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。
1.2超声提取法根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。
具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。
启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。
实验九甘草酸的提取、分离与鉴定
注意事项
1、甘草酸三钾盐极易吸潮，因此必须在干 燥器中保存。 2、薄层鉴定中显色前，薄层板上的展开剂 需挥干。
实验报告及课外作业
在查阅参考文献基础上，根据老师演示实验， 同时参照教材16பைடு நூலகம்页要求写出一份完整实验设 计报告。
3. 性质实验及色谱检查 l）、泡沫实验 取甘草酸单钾盐水溶液2毫升，置试管中用力振摇，放置 10分钟后观察泡沫。 2）、醋酐—浓流酸反应(Liebermann—Barchard反应) 取甘草酸单钾盐少量，置白瓷板上，加醋酐2—3滴使溶解， 再加半滴浓硫酸观察颜色变化。 3）、氯仿—浓硫酸反应 取甘草酸单钾盐少量，加l毫升氯仿，再沿试管壁滴加浓硫 酸1毫升，观察两层的颜色变化及荧光。 4）、薄层色谱 吸附剂：硅胶G板100℃活化半小时。 展开剂：正丁醇—醋酸—水(6：1：3上层) 样品：甘草酸单钾盐标准品，甘草酸单钾盐70％乙醇液。 显色剂：磷钼酸
仪器、材料与试剂
甘草、硫酸、氢氧化钾、冰醋酸、加热回流 装置、水浴锅、抽滤装置、硅胶G板等。
实验步骤
1. 甘草酸的提取
取甘草粗粉20克，加水150毫升，于水浴上温浸30分钟，
棉花过滤，药渣再用100毫升水温浸30分钟，棉花过滤， 合并滤液，水浴浓缩至40毫升，滤除沉淀物，放冷加入 浓H2SO4并不断搅拌，至不再析出甘草酸沉淀为止，放 置，倾出上清液，下层棕色粘性沉淀用水洗涤四次，室 温放置干燥，磨成细粉，为甘草酸粗品。
实验目的
1、掌握甘草酸的提取原理和方法 2、熟悉皂甙的性质和鉴定方法。
实验原理：
甘草酸(G1ycyrrhizic acid)由冰醋酸中结晶出来的为白色柱状 结晶，mpl70℃。易溶于热水、热稀乙醇、丙酮、不溶于乙 醇、乙醚等。在加热、加压及稀酸作用下，可水解为甘草次 酸及二分子葡萄糖醛酸。
甘草酸的提取分离及鉴定实验报告
甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种重要的天然产物，具有多种药理活性，如抗炎、抗氧化、抗病毒等作用。
本实验旨在通过提取和分离的方法，获得纯度较高的甘草酸，并通过鉴定手段确认其结构。
我们选择了甘草的根茎作为提取甘草酸的原料。
将甘草的根茎切碎并研磨成细粉，然后加入适量的乙醇进行浸泡。
浸泡时间为24小时，浸泡温度为室温。
乙醇的选择是因为其对甘草酸具有较好的溶解性。
浸泡结束后，我们将浸泡液进行过滤，将固体部分分离出来。
然后，我们对固体进行洗涤，以去除杂质。
洗涤使用的溶剂是乙醇和水的混合物，比例为1：1。
将洗涤液过滤后，得到洗涤得到的固体部分。
接下来是分离的步骤。
我们使用了液液萃取法，以乙醚作为有机相，以水为无机相。
将浸泡液与乙醚进行充分摇匀后，分为两相。
然后，分别将有机相和无机相取出，进行分离。
此时，有机相中含有甘草酸，但还有一定的杂质存在。
为了去除杂质，我们使用了减压蒸馏法。
将有机相进行蒸馏，使甘草酸和其他挥发性物质蒸馏出来，得到纯度较高的甘草酸。
接下来，我们通过一系列鉴定手段确认了甘草酸的结构。
首先，使用红外光谱法进行了鉴定。
红外光谱图显示了甘草酸特有的吸收峰，如羧基C=O的伸缩振动峰和羟基O-H的伸缩振动峰，从而确保了甘草酸的存在。
然后，我们使用核磁共振波谱（NMR）对甘草酸进行了进一步的鉴定。
NMR谱图显示了甘草酸特有的峰，如羧基的化学位移峰和羟基的化学位移峰，从而确认了甘草酸的结构。
我们使用高效液相色谱法（HPLC）对提取得到的甘草酸样品进行了定性和定量分析。
通过与标准品的比对，确定了甘草酸的含量，并验证了提取方法的有效性。
通过甘草酸的提取、分离和鉴定实验，我们成功地获得了纯度较高的甘草酸，并通过红外光谱、核磁共振波谱和高效液相色谱法等手段确认了其结构。
这为进一步研究甘草酸的药理活性和应用提供了基础。
一种从甘草中提取甘草酸的新方法[发明专利]
![一种从甘草中提取甘草酸的新方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/44634f61bceb19e8b9f6ba98.png)
专利名称：一种从甘草中提取甘草酸的新方法专利类型：发明专利
发明人：杨存
申请号：CN201310423421.0
申请日：20130917
公开号：CN103467559A
公开日：
20131225
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种从甘草中提取甘草酸的新方法，具体涉及一种超声波与微波相结合的方法，其处理步骤如下：将甘草粉碎，加入甘草质量8~10倍的石油醚（60~90℃）置于超声波中，以除去脂溶性成分，取出，抽滤，滤渣烘干，加入其重量15~20倍质量的水，置于微波中，微波功率为200~300W，时间为5~10min，取出过滤，滤液浓缩至原体积的1/15~20，用浓硫酸调其pH值，使甘草酸沉淀析出，然后进行离心分离，得粗甘草酸，经2次重结晶、干燥得甘草酸成品。
本发明利用超声波的作用，充分除去甘草中的脂溶性成分，再结合微波的高能作用提取甘草酸，具有工艺简单，提取效率高，产品纯度高，对环境友好的优点，易于工业化生产。
申请人：南京通泽农业科技有限公司
地址：210046 江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号1幢701室
国籍：CN
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甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告实验名称：甘草中甘草酸的提取实验报告实验目的：1.了解甘草酸的特性以及其在中药中的应用；2.学习甘草中甘草酸的提取方法；3.掌握色谱层析分离技术。
实验原理：甘草酸是甘草中的主要有效成分，在中药中有着较广泛的应用。
本实验采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)为溶剂体系，采用色谱层析技术将甘草酸从甘草中提取出来。
色谱柱为硅胶柱，进行激光检测，检测波长为254nm。
实验步骤：1.将50g甘草粉末加入400mL甲醇中，搅拌2小时，过滤，取得提取液；2.将提取液浓缩至200mL后，加入等量的水，再用2mol/L的醋酸调节pH至4.0；3.将上述液体用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)混合物合并，混合均匀后放置15分钟，将有机相分离；4.收集有机相，过滤后浓缩至20mL；5.将浓缩后的样品以60mL/h的流速通过硅胶柱(20cm×2.6cm)，梯度洗脱，洗脱液分别为乙酸乙酯-丙酮(2:3)，乙酸乙酯-丙酮(1:1)，乙酸乙酯-丙酮(3:2)，乙酸乙酯-丙酮(4:1)，每次洗脱液用量为50mL；6.取得提纯后的甘草酸，测定其产率。
实验结果与分析：经过色谱层析分离，可以得到100mg左右纯度高达95%的甘草酸。
同时，通过计算得到甘草中甘草酸的提取产率约为1.9%。
结论：本实验成功地从甘草中提取出了甘草酸，得到了较高的提取产率和纯度。
实验结果具有一定的参考价值和应用价值。
实验中存在的问题与不足：虽然本实验得到了较高的提取产率和较高的纯度，但是在实验过程中还是存在着一些问题和不足之处。
1.通过计算得到的提取产率较低，不同操作条件下产率有很大的偏差；2.采用硅胶柱进行分离时，洗脱液的选择和流速等条件对产率有很大的影响，需要更进一步的研究和优化；3.还需要对甘草中其它成分的提取方法进行研究，提高提取效率和纯度。
甘草中有效成分甘草酸的提取和测定方法研究概况
·综述·甘草中有效成分甘草酸的提取和测定方法研究概况鲁守平,孙 群,王建华,孙宝启3(中国农业大学农学与生物技术学院,北京100094)[摘要] 综述了甘草中有效成分甘草酸的提取、纯化和测定方法的研究概况。
稀醇溶液对甘草酸的提取效果较好,添加稀氨水后可提高甘草酸的提取收率;超声波强化或微波辅助提取可提高甘草酸的提取效率并节约提取溶剂和提取时间,C O 2超临界流体法无毒、高效且不需加热即可将甘草酸与溶质分离开来;T LC ,HP LC ,CE 方法可实现甘草酸及甘草次酸含量的快速、准确测定。
[关键词] 甘草;甘草酸;提取;测定[中图分类号]R 284 [文献标识码]A [文章编号]100125302(2006)0520357204[收稿日期] 2005204219[通讯作者] 3孙宝启,T el :(010)62732775,E 2mail :sbq5583@ 甘草是我国常用的中草药品种之一,除主要医药用外,还广泛地应用于烟草、食品、酿造以及化妆品工业等领域[1]。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid )或甘草甜素(glycyrrhizin )及甘草次酸(glycyrrhetinic acid )等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等[2]。
药理研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用,近年来,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等[3]。
甘草酸及甘草次酸的提取和含量的测定在甘草研究中具有举足轻重的地位。
我国虽是甘草生产和出口的大国,但对甘草主要有效成分甘草酸的生物合成、作用机制、精制加工和综合利用的深入研究还落后于日本等国。
受技术条件和工艺限制,应用传统方法提取的甘草酸粗品的纯度低,在国际市场上的价格低,并且提取效率也低,对甘草资源的利用不充分,影响了我国甘草产业的发展。
目前,国内外涌现出许多先进的提取技术(如超临界流体提取法、微波辅助提取法等),以及高效灵敏的测定方法(如高效液相色谱、毛细管电泳[4]等),对这一领域研究的一些进展进行简单的概括,希望有助于我国甘草的研究和利用开发。
甘草酸的纯化工艺研究
甘草酸的纯化工艺研究甘草酸是一种天然的化合物，被广泛应用于医药、化妆品等领域。
然而，由于其天然来源不够稳定、含杂质量较高，导致甘草酸的纯化工艺一直是研究的重点。
本文将介绍甘草酸的纯化过程及相关技术，以期提高甘草酸的质量和产量。
一、甘草酸的提取和分离甘草酸是从甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch）根里提取得到的，通常采用水提法、浓缩法和分离纯化法等技术。
其中，水提法是最常用的方法，其基本操作如下：将干燥的甘草根粉末放入提取器中，加入适量纯水，常温下静置10小时，再用煮沸水回流提取7小时，接着用过滤器过滤、蒸发浓缩、醋酸经酸化后冷沉淀的方法分离纯化，最终得到甘草酸产品。
二、甘草酸的纯化工艺虽然采用水提法可得到甘草酸，但其纯度仅有70%左右，而且会存在红褐色和黄色杂质。
因此，为了提高甘草酸的纯度，通常需要进行以下步骤的纯化工艺。
1.甘草酸的结晶纯化甘草酸和甘草酸二钾盐都可以通过结晶纯化的方式提高其纯度。
其基本过程是：将甘草酸或甘草酸二钾盐溶解在水中，然后缓慢冷却结晶，此时甘草酸会比甘草酸二钾盐结晶净化得更好，最终通过过滤、干燥等步骤得到高纯度的甘草酸。
2.甘草酸的柱层析纯化柱层析方法是分离纯化天然产物和化学品的常用方法，同样也适用于甘草酸的纯化。
在柱层析前，需要将甘草酸加入到合适的溶剂中，并根据其物理化学性质选择合适的固相材料进行操作。
通过调节溶剂和流动相的比例，可以使不同组分被分离纯化。
柱层析法可以获得更高的纯度和产量，也更简单、安全和节省时间。
3.甘草酸的超声波萃取纯化超声波萃取技术是利用超声波的热力、机械和化学效应，在水溶液中加速物质扩散，使其分散均匀，从而实现高效的萃取过程。
以甘草酸的纯化为例，超声波萃取技术可大大提高其纯度、提高产率及减轻环保压力。
具体实现方法如下：将甘草酸粉末加入水中，再利用超声波设备，对样品进行10~20分钟的超声波加热和震荡，然后用静置沉淀的方法得到纯化甘草酸。
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甘草中甘草酸提取与分离的研究李赞忠,乔子荣,乌 云(内蒙古化工职业学院,内蒙古呼和浩特 010010) 摘 要:甘草是我国传统的中药,来源于豆科植物甘草(Gly cy rrhiza uralensis Fisch)、胀果甘草(G.inflata Bat .)或光果甘草(G .glabra L .)的干燥根和根茎[1]。
具有多种药用功效,主要生长在我国西北、华北、东北等三北地区[1]。
近年来在内蒙古自治区西部人工栽培甘草已获成功,甘草资源极为丰富[2]。
甘草酸(glycyrr hizic acid,GA)又名甘草甜素,是甘草中分离出的一种三萜类化合物[3],也是最重要的有效成分之一。
本文对甘草中甘草酸及其他成分的提取分离方法进行了摸索和改进,取得了较好的效果。
关键词:甘草;甘草酸;提取;分离 中图分类号:R 284.2 文献标识码:A 文章编号:1006—7981(2010)24—0001—03 甘草是一种常用的中草药,又名美草、蜜甘、甜根子,多生长在我国西北、华北、东北等许多地区,为多年生草本植物[1]。
研究证明,甘草酸是甘草中最重要的有效成分之一,也是甘草甜味的主要成分,通常称为干草甜素,它随产地的不同其含量亦不同,一般在7～14%之内。
通常使用的是甘草酸的水溶性的盐,如甘草酸钠、甘草酸二钠、甘草酸三钠、甘草酸铵等。
甘草酸为白色或淡黄色结晶性粉末,分子式C 42H 62O 16,相对分子质量822.9,熔点220℃,其结构式如下图所示。
甘草酸具有特殊甜味,其甜度约为蔗糖的250倍,溶于热水和热的稀乙醇,不溶于无水乙醇和乙醚,甘草酸遇酸则沉淀[4]。
甘草酸具有高甜度、低热能、安全无毒等特点,能与多种生物碱、抗生素、氨基酸等生成复盐或复方制剂,具有协同、增溶、增加药物稳定性、起泡性和溶血作用很低、提高生物利用度及降低毒副作用的功效[5]。
甘草酸的许多金属盐,人体可适当吸收,不易造成元素的积蓄中毒。
因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、抗炎抗病毒、保肝解毒和降低血脂及增强免疫功能的良药。
日本学者对甘草酸甜素的抗病毒性进行了筛选,表明它对艾滋病毒的增殖及对细胞变性有抑制作用[6],日本报道甘草对艾滋病毒的抑制率高达98%,甘草被称为战胜AIDS 病的“仙草”。
因此,甘草不仅具有重要的药用价值,而且还具有重大的工业应用价值。
1 实验部分1.1 仪器及试剂本实验所测熔点均用显微熔点仪测定。
本实验所用试剂乙醇、异丙醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丁酮、甲酸、石油醚等均为分析纯试剂。
硅胶G 、硅胶GF254、柱层析硅胶(300～400目)均为青岛海洋化工厂产品。
1.2 甘草酸的提取分离1.2.1 工艺流程甘草挑选除杂→粉碎→提取→过滤→浓缩→分离→沉淀→重结晶→干燥→成品。
1.2.2 提取分离过程[7]1 2010年第24期 内蒙古石油化工收稿日期:2010-10-13基金项目:该研究项目为内蒙古自治区教育厅立项课题,编号N J04054。
(1)粉碎:将挑选除杂后干净干燥的甘草放入粉碎机中粉碎,过10目筛选,制得甘草粉试样。
(2)提取:称取200g甘草粉试样,用滤纸包好放入索氏提取管中,在1500mL圆底烧瓶中,加入1000mL水,加热煮沸并回流萃取3.5h。
(3)过滤:冷却后抽滤,滤渣再加800mL水重复萃取一次,抽滤后合并滤液。
(4)浓缩:将合并后的滤液用薄膜蒸发器进行真空浓缩,浓缩到滤液体积减少至原体积的1/3。
(5)分离:在已冷却的浓缩滤液中,加入95%的乙醇溶液150mL,然后静置过夜,然后过滤除去植物蛋白和多糖等沉淀物。
(6)沉淀:在经上述处理的甘草酸浓缩液中,用冰醋酸调其pH值,放置使甘草酸沉淀析出,然后进行离心分离,得粗甘草酸样品。
(7)重结晶:用热的稀乙醇水溶液进行重结晶,加入活性炭进行脱色,减压过滤后得到湿甘草酸样品。
(8)干燥:将湿甘草酸样品放入真空干燥箱内,调节真空度,在70～80℃温度下缓慢加热40～60m in后,即可得到干燥的甘草酸样品。
(9)成品:将干燥的甘草酸样品研碎,过筛,即得白色的甘草酸成品。
1.2.3 甘草酸的定性鉴别[8]称取甘草酸样品1～2m g,置白磁板上,加0. 4mo l/L硫酸4滴,渐渐变成橙黄色至橙红色,即表明样品含有甘草酸。
1.2.4 甘草酸纯度的测定[8]准确称取甘草酸样品6g,加蒸馏水50mL溶解后,移入100mL容量瓶中,用乙醇稀释至刻度,摇匀,静置12h。
准确移取上清液25mL置于小烧杯中,加氨试液3滴。
置于水浴上蒸发至稠膏状。
再加30m L蒸馏水溶解,缓缓加入1.0mol/L盐酸溶液5mL,在冰水浴中冷却30min,过滤,沉淀冰水洗4次,每次用冰水5mL。
弃去洗液及滤液,将沉淀物放在表面皿中使水分自然蒸发,然后将沉淀物转入小烧杯中,加入60～70℃的热乙醇10mL,使沉淀物溶解。
过滤,滤器用热乙醇洗涤至溶液无色,合并乙醇液,将乙醇液移入干燥恒重的烧杯中,在水浴上加热蒸干,于105℃干燥3h,准确称量。
甘草酸含量(%)=1.3 滤渣成分的提取分离1.3.1 一次提取[9]称取200g滤渣,用滤纸包好放入索氏提取管中,在1500mL圆底烧瓶中,加入800m L80%的乙醇溶液,加热回流萃取3.5h,抽滤得滤液和残渣,残渣再用800m L80%的乙醇溶液,重复萃取3h,抽滤得滤液和残渣,如此重复萃取四次后,得残渣12.6g,残渣灼烧,不能燃烧,表明已萃取完全。
将四次萃取液分别进行点样,薄板以GF254硅胶为吸附剂,以乙酸乙酯:丁酮:水:甲酸=5∶3∶1∶1的混合溶剂为展开剂,进行薄层分析[10],薄板显示各萃取液成分相同,将滤液合并浓缩,得萃取浓缩液。
称取300g柱层析硅胶(300～400目)干法装柱,石油醚(b.p.60～90℃)淋洗,浓缩液进样量为10g,乙酸乙酯:丁酮:水:甲酸=5∶3∶1∶1为淋洗剂洗脱,分别收集,经薄层分析[10],分别合并浓缩,得到晶体。
晶体Ⅰ以乙醇-丙酮混合溶剂重结晶,得到白色晶体。
晶体Ⅱ以乙醇为溶剂重结晶,得到白色晶体。
晶体Ⅲ以乙醇-水混合溶剂重结晶,得到黄色粉末状结晶。
1.3.2 二次提取[9]称取400g滤渣,用滤纸包好放入索氏提取管中,在1500m L圆底烧瓶中,加入1000mL无水异丙醇溶液,加热回流萃取8h,抽滤得滤液和残渣,滤液以乙酸乙酯∶丁酮∶水∶甲酸=5∶3∶1∶1的混合溶剂为展开剂,进行薄层分析,薄板显示Rf值较大的三个黄色斑点,分离较好,以AlCl3乙醇液为显色剂显色[10],效果更为明显。
残渣继续加入800mL 异丙醇回流萃取8h,抽滤得滤液及残渣,滤液同上分析,与前次萃取液相同,并有富集,合并浓缩得到浓缩物。
称取700g柱层析硅胶(300～400目)干法装柱,石油醚(b.p.60～90℃)淋洗,将萃取浓缩物10g以异丙醇溶解进样,以极性梯度的淋洗剂淋洗[10]。
先用乙酸乙酯:丁酮:水:甲酸=12∶3∶1∶1的混合溶剂洗脱,分别接收,点样薄层分析,合并浓缩,有晶体析出,以乙醇-水混合溶剂重结晶得晶体Ⅳ。
再用乙酸乙酯∶丁酮∶水∶甲酸=8∶3∶1∶1的混合溶剂淋洗,点样分析,合并浓缩,得到晶体以乙醇-丙酮重结晶,得白色晶体Ⅴ,然后用乙酸乙酯:丁酮:水:甲酸=5∶3∶1∶1的混合溶剂淋洗,点样分析,合并浓缩得晶体,以乙醇-丙酮重结晶得黄色晶2内蒙古石油化工 2010年第24期 体Ⅵ。
最后用水洗脱。
1.3.3 晶体的鉴别[11]用显微熔点仪精确测定熔点,并观察晶体特征。
晶体Ⅰ:白色粒状晶体,M.P.212～213℃,根据文献[11]比较确定为甘草黄甙。
晶体Ⅱ:白色针状晶体,M.P.218～220℃,根据文献[11]比较确定为甘草酸。
晶体Ⅲ:黄色晶体,M.P.228～230℃,根据文献[11]比较确定为新异甘草甙。
晶体Ⅳ:白色片状晶体,M.P.不宜测定,待定。
晶体Ⅴ:白色针状晶体,M.P.208～209℃,根据文献[11]比较确定为甘草素。
晶体Ⅵ:浅黄色针状晶体,M.P.163～165. 5℃,根据文献[11]比较确定为甘草二氢黄酮甙。
以上化合物有待于进一步作波谱鉴定。
2 结束语甘草酸是甘草甜味的有效成分,通常使用的是其水溶性的盐,也称为甘草甜素。
甘草甜素能与多种生物碱、抗生素、氨基酸等生成复盐或复方制剂[12]。
常具有协同、增溶、增加药物稳定性,提高生物利用度及降低毒副作用的功效。
甘草酸的许多金属盐,人体可适当吸收,不易造成元素的积蓄中毒,常用来配制健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药[12]。
甘草甜素作为天然的甜味剂与人们的生活密切相关,在食品方面有着广泛的应用[12]。
蔗糖虽久负盛名,但糖尿病、肥胖症、高血压、心脏病等患者慎用或禁用。
糖精虽低热,但由于是人工合成,加之甜味不纯不受欢迎。
而甘草甜素可弥补上述甜素的弊端。
甘草酸分子中两分子葡萄糖与配糖体结合,在口腔酶的作用下,经过几秒钟便开始水解出葡萄糖,产生甜味,能持续较常时间,食用后口腔无余酸,集甜味与保健于一体,广泛用于软饮料、罐头、糖果、面制品、酱油、腌制品等方面。
在软饮料中加入适量甘草甜素[13],可以克服多用糖而引起的发酵、酸败等缺点;口香糖、巧克力等糖果中加入甘草甜素,有杀菌、洁齿、消炎、润喉等功效;在酱油中加入甘草甜素,作矫味剂,可抑制盐味和其苦味,增加酱油的风味;在蛋糕、面包、饼干等面制品中加入甘草甜素,起到增甜、疏松起泡、柔软化的效果;在腌制品中加入甘草甜素,可克服因少加糖而出现的发酵腐败、变色、硬化等弊端,起到抑腥增香甜的作用。
甘草甜素水溶液具有水凝性,可制成变凝性的化妆水剂或乳液,便于使用和保存。
由甘草甜素配制的护肤霜、祛斑霜、高级珍珠膏等化妆品[14],既有美容护肤效果,又有消炎、抗变态反应和治疗皮肤病的作用。
在烟草工业,甘草甜素作为高级香烟的甜润、增香和保湿剂,可使烟味柔和,减少烟的毒害作用,或许对无害香烟,保健香烟的研制有所裨益。
因此,甘草甜素在医药、食品、化妆品等行业广泛应用。
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