5维生素C制剂的鉴别zl

维生素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定
2013 药物制剂班刘霞2013103129
[摘要] 维生素C (Vitamin C，Ascorbic Acid)又叫L-抗坏血酸，本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

是一种水溶性维生素，能够治疗坏血病并且具有酸性。

在化学结构上和糖类十分相似，有4种光学异构体，其中以L-构型右旋体生物活性最强。

ChP2010收载有维生素C 原料及其片剂、泡腾片、颗粒剂、泡腾颗粒剂、注射剂和复方制剂维生素C 银翘片。

本文通过查阅文献资料总结了维生素C原料药及各种剂型的鉴别，杂质检查，含量测定，并结合实验室实际情况确定实验方法。

[关键词]维生素C；鉴别；杂质检查；含量测定
1 仪器及试剂
1.1仪器
754型紫外可见分光光度计；垂熔玻璃漏斗；硅胶GF254 薄层板；；250 ml 碘量瓶；分析天平；电子天平；碱式滴定管；移液管;高效液相色谱仪；展开槽；灯紫外光；电炉；研钵等。

1.2试剂硝酸银试液、O.1mol/L硝酸溶液、硫酸铜、0. 1mol/L硝酸溶液、碳酸钠、稀醋酸、淀粉指示液、碘滴定液（O. 05mol/L)、二氯靛酚钠试液、氢氧化钠试液、稀醋酸、氯化钙试液、草酸、加稀醋酸、氯化钙试液、0. 1m o l /L硝酸溶液、硫酸铁铵、1mol/L硫酸溶液、乙酸乙酯-乙醇-水（5 : 4 :1）、无水乙醇、0. 1mo l /L的盐酸溶液；蒸馏水,维生素C对照品等。

2 方法
2.1维生素C原料
【鉴别】(1)取本品0. 2g，加水10ml溶解后，分成二等份，在一份中加硝酸银试液0. 5ml，即生成银的黑色沉淀；在另一份中，加二氯靛酚钠试液1〜2 滴，试液的颜色即消失。

(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

【检查】溶液的澄清度与颜色：取本品3.0g，加5ml，振摇使溶解,溶液应澄水清无色；如显色，将溶液4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法，在420nm的波长处测定吸光度，不得过0. 03。

草酸：取本品0. 25g，加水4. 5ml，振摇使维素C溶解，加氢氧化钠试液0.5ml、稀醋酸1m l与氯化钙试液0. 5ml，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸5mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1m l与氯化韩试液0. 5ml，摇匀，放置1小时，作为对照溶液。

供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0. 3% )。

炽灼残渣：不得过0.1%.
铁：取本品5. O g两份，分别置2 5m l量瓶中，一份中加0. 1m o l /L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(B) ;另一份中加标准铁溶液(精密称取硫酸铁铵863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，用水稀释至刻度摇匀，精密量取10ml，（置100ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。

照原子吸收分光光度法，在248. 3nm的波长处分别测定，应符合规定。

铜取本品2.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0. 1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(B) ;另一份中加标准铜溶液（精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0. 1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液(A )。

照原子吸收分光光度法，在324. 8nm的波长处分别测定，应符合规定。

重金属取本品1.0g，
加水溶解成25ml，依法检查，含重金属不得过百万分之十。

细菌内毒素取本品，加碳酸钠（170°C加热4小时以上）适量，使混合，依法检查(通则1143)，每1m g维生素C中含内毒素的量应小于0. 020EU(供注射用）。

【含量测定】取本品约0.2g，精密称，加新煮沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（O. 05mol/L)滴定，至溶液显蓝色并在30秒钟内不褪。

每l1m l碘滴定液（0.05mol/L)相当于8. 806mg的Vitamin C。

2.2维生素C片
【性状】本品为白色至略带淡黄色片。

【鉴别】（1)取本品细粉适量（约相当于维生素C 0. 2g)，加水10ml，振摇使维生素C 溶解，滤过，滤液照维生素C原料鉴别(1)项试验，显相同的反应。

(2)取本品细粉适量（约相当于维生素C 10mg)，加水10ml，振摇使维生素C溶解,滤过，取滤液作为供试品溶液，另取维生素C对照品，加水溶解并稀释制成1m l中约含1m g的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5 : 4 :1)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254nm）下检视。

供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】溶液的颜色取本品细粉适量（相当于维生素C 1. 0g)，加水20ml，振摇使维生素C 溶解，滤过，滤液照紫外-可见分光光度法，在440nm的波长处测定吸光度，不得过0. 07。

其他应符合片剂项下有关的各项规定（通则0101）。

【含量测定】取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素C 0. 2g)，置100ml量瓶中，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml的混合液适量，振摇使维生素C 溶解并稀释至刻度，摇匀，迅速滤过，精密量取续滤液50ml，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。

每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于8. 806mg 的C6 H8 0 6。

2.3维生素泡腾片
【性状】本品为白色或着色片，片面可有散在的着色小点。

【鉴别】(1)取本品细粉适量（约相当于维生素c 0. 5g),加无水乙醇25ml，振摇约5分钟使维生素C 溶解，滤过，滤液照维生素C鉴别（1）项试验，显相同的反应。

(2)取本品细粉适量（约相当于维生素C 10mg)，加水10ml，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C对照品，加水溶解并稀释制成1m l中约含1m g的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2M，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5 : 4 : 1)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254nm）下检视。

供试品溶液所显主斑点的
位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】酸度取本品1片，加15°C的水100ml（1g规格）或50ml(0. 5g规格)使崩解，待崩解完全无气泡后，依法测定,pH值应为3. 8〜4. 8。

【含量测定】取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素c 0. 2g），加新煮沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使维生素C 溶解，加淀粉指示液1ml，立用碘滴定液（0. 05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续3 0秒钟不褪。

每lm l碘滴定液（0. 05mol/L ）相当于8. 806mg的C6H80 6。

2.4维生素C泡腾颗粒
【性状】本品为淡黄色颗粒;气芳香，味酸甜。

【鉴别】（1)取本品细粉适量（约相当于维生素c 0. 2g），加水10ml使维生素C 溶解，滤过，滤液照维生素C 鉴别（1）项试验，显相同的反应。

( 2 )取本品细粉适量（约相当于维生素C 1 0m g ），加水10ml，振摇使维生素C 溶解，滤
过，滤液照维生素C 鉴别（1）项试验，显相同的反应。

( 2 )取本品细粉适量（约相当于维生素C 1 0m g ），加水10ml，振摇使维生素C 溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C 对照品，加水溶解并稀释制成1m l中约含1m g 的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5 ：4 : 1）为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254nm）下检视。

供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】酸度取本品7. 5g，加水100ml，待溶解完全无气泡后，依法测定，pH值应为4. 5〜5. 5。

其他应符合颗粒剂项下有关的各项规定（通则0104）。

【含量测定】取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于维生素C 0. 2g)，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使维生素C 溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。

每1ml碘滴定液（0. 05mol/L)相当于8. 806mg的C6H80。

2.5维生素C注射液
【性状】本品为无色至微黄色的澄明液体。

【鉴别】（1）取本品，用水稀释制成1m l中含维生素C 10mg的溶液，取4ml，加0. lm o l /L的盐酸溶液4ml，混匀，加0. 05%亚甲蓝乙醇溶液4滴，置40°C水浴中加热，3分钟内溶液应由深蓝色变为浅蓝色或完全褪色。

(2)取本品，用水稀释制成1m l中约含维生素C 1m g的溶液，作为供试品溶液;另取维生素C 对照品,加水溶解并稀释制成 1m l中约含1m g的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各2 0，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5：4 :1)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254nm）下检视。

供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】pH值应为5.0〜7. 0。

颜色取本品，用水稀释制成每1ml中含维生素C 50mg的溶液，照紫外-可见分光光度法，在420nm的波长处测定，吸光度不得过0. 06。

草酸取本品，用水稀释制成每1m l中约含维生素C 50mg的溶液，精密量取5ml，加稀醋酸1m l与氯化钙试液0. 5mU摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置小时，作为对照溶液。

供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0. 3% ）。

细菌内毒素取本品，依法检查。

每1m g维生素C 中含内毒素量应小于0. 020EU。

其他应符合注射剂项下有关的各项规定(通则0102)。

【含量测定】精密量取本品适量（约相当于维生素C 0. 2g)，加氺15ml与丙酮2ml，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液(0. 05mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。

每1m l碘滴定液(0. 05mol/L)相当于8. 806mg 的C6H80 6。

2.6维生素颗粒
【性状】本品为黄色颗粒；味甜酸。

【鉴别】（1）取本品4g加10ml溶解后，照维生素C鉴别（1）项试验，显相同的反应。

(2)取本品细粉适量（约相当于维生素C 10mg)，加水10ml，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C对照品，加水溶解并稀释制成1m l中约含1m g 的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5 : 4 : 1)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254nm)下检视。

供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】应符合颗粒剂粒度、干燥湿重、水分、溶化性、装量差异，装量相关质量检查的规
定。

【含量测定】取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于维生素C 0. 2g)，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使维生素C 溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0. 05mol/L)滴定，至溶液显蓝色并在30秒钟内不褪。

每 1m l碘滴定液（0.05mol/L）相当于8. 806mg的C6H80）
3参考文献：1.第七版《药物分析》
2.2010版药典
3. 2015版药典
附：实验所用试剂的配制如下：
（1）部分试剂的配制如下：
（1）淀粉指示剂：称取0.5 g可溶性淀粉，加水5 mL搅拌均匀，缓缓加入100 mL沸水中，边加边搅拌，煮沸2 min，放冷，取上清液，应新鲜配制。

（2）稀醋酸：量取冰醋酸6 mL，加水定容至100 mL。

（3）碱性酒石酸铜：称取硫酸铜结晶6.93 g,加水溶解定容至100 mL；称取酒石酸碱钠34.6 g,氢氧化钠10 g,加水溶解定容至100 mL；用时等量混合。

（2）稀醋酸：量取冰醋酸6 mL，加水定容至100 mL。

（3）碱性酒石酸铜：称取硫酸铜结晶6.93 g,加水溶解定容至100 mL；称取酒石酸碱钠34.6 g,氢氧化钠10 g,加水溶解定容至100 mL；用时等量混合。

（4）二氯靛酚钠试液：取2,6-二氯靛酚钠0.1g,加水100ml溶解后，滤过即得。

（5）氢氧化钠试液：取氢氧化钠4.3g加水使溶解成100ml，即得。

（6）氯化钙试液：取氯化钙7.5g加水使溶解成100ml，即得。

（7）醋酸盐缓冲液(pH3.5):取醋酸铵25g，加水25ml，加7mol/L溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml即得。