基因工程模拟试卷一及参考答案
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
以下有关基因工程的说法错误的是（）A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。
以下在动物体内发生的过程当中，与上述细菌行为相似的是（）A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
以下相关叙述精确的是（）A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A.若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B.若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端，以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是( )。
A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别( )。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
A 3’5’DNA聚合酶B 5’3’DNA聚合酶C 5’3’DNA内切酶D 5’3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。
基因工程试卷及答案
基因工程试卷及答案(1)(总4页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--一、名词解释1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。
2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。
3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的短小反义核酸分子。
4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。
6、ａ-互补：指半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。
7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。
8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。
9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。
10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。
二、选择1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。
A. dNTP C. DMSO2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。
A.分泌表达载体融合表达载体 C.组氨酸标签表达载体 D.内含肽表达载体的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）A. 正极向负极B. 负极向正极C浓度高向浓度低. D. 浓度低向浓度高4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）A.电场强度B. 缓冲液浓度C. 温度D.脉冲时间5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）A.使用RNA酶抑制剂B.实验用具C.细致谨慎的操作D.温度控制6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )A.安全无毒B.载体DNA转化频率低C. 发酵周期短D.蛋白质分泌能力好7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点A.蛋白分泌能力差B.无终止子C.不能独立复制D.无选择压力时不稳定8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。
2023年高考生物真题模拟试题专项汇编：(15)基因工程(含答案)
（15）基因工程——2023年高考生物真题模拟试题专项汇编1.【2023年山东卷】“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。
下列叙述错误的是( )A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色2.【2023年湖北卷】用氨苄青霉素抗性基因（Amp R）、四环素抗性基因（Tet R）作为标记基因构建的质粒如图所示。
用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。
下列叙述错误的是( )A.若用Hin dⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同B.若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因C.若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否D.若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落3.【2023年浙江6月】某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。
为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是( )A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达B.翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C.2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子D.若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子4.【2023年北京卷】抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。
为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。
以下措施不能实现上述目标( )A.在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子B.大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂C.转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植D.转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带5.【2023年新课标综合卷】某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
高考生物专题复习《基因工程》含答案
高考生物专题复习《基因工程》一、单选题1．（2023·山东青岛·高三期末）自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。
我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。
下列叙述错误的是（）A．上述获得蓝色玫瑰的方案中需要转入能调控液泡pH的基因B．将idgS基因插入Ti质粒时使用的限制酶是SpeI和SacIC．sfp和idgS基因具有各自的启动子，前者调控后者的表达D．农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上【答案】A【详解】A、分析题意，用农杆菌转化法将链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）导入白玫瑰后，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝，所以无需转入能调控pH的基因，A错误；B、分析题图可知，将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率，B正确；C、分析题图可知，sfp和idgS基因具有各自的启动子，sfp可激活idgS的表达，C正确；D、将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T—DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。
故选A。
2．（2023春·江苏徐州·高二统考期中）土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA片段转入植物的基因组。
利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是（）A．T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体DNA上B．用Ca2+处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞C．Ti质粒是一种环状DNA分子，属于细菌的拟核DNAD．目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA【答案】A【详解】A、Ti质粒上的T-DNA片段能转入植物的基因组中，因此T-DNA片段利于介导外源DNA整合到植物的染色体，A正确；B、农杆菌转化法中不需要用Ca2+处理农杆菌，应直接利用土壤农杆菌感染植物细胞，B错误；C、Ti质粒是一种环状DNA分子，是存在于细菌细胞质中的DNA，C错误；D、在农杆菌转化法中，需要将目的基因插入到T﹣DNA片段上，D错误。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
大学基因工程试题及答案
大学基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶属于哪一类酶？A. 核酸酶B. 蛋白酶C. 脂肪酶D. 淀粉酶答案：A2. 以下哪个不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的克隆B. 目的基因的表达C. 目的基因的检测D. 目的基因的复制答案：D3. 基因工程中常用的运载体有哪些？A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 所有以上答案：D二、填空题1. 基因工程中常用的_________技术可以用于目的基因的检测。
答案：PCR2. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
答案：转化3. 在基因工程中，_________是将目的基因插入到运载体中形成重组DNA分子的过程。
答案：克隆三、简答题1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断和疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的克隆过程。
答案：目的基因的克隆过程包括提取目的基因、构建基因文库、筛选含有目的基因的克隆、目的基因的扩增和纯化等步骤。
四、论述题1. 论述基因工程技术在农业中的应用及其可能带来的问题。
答案：基因工程技术在农业中的应用包括改良作物品质、提高作物产量、增强作物抗病虫害能力等。
可能带来的问题包括生态平衡的破坏、基因污染、食品安全问题等。
2. 分析基因工程中目的基因表达调控的重要性及其策略。
答案：目的基因表达调控在基因工程中至关重要，它决定了基因工程产品的功能和产量。
调控策略包括启动子的选择、增强子的应用、转录后调控等。
基因工程模拟试题及答案
《基因工程》模拟试题1一、选择题1．我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，经提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫基因的受体细胞占A．全部B．大部分C．一半D．很少2．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦3．下列含有内含子的生物是A.大肠杆菌B.青霉C.放线菌D.蓝藻4．基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A.细胞B.细胞器C.分子D.原子5．细胞内合成RNA聚合酶的场所是A.细胞核B.核区C.核糖体D.内质网6．下列属于基因运载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A. ①②B.③④C. ①③D. ②④7．细菌抗药性基因存在于A．核DNA B．质粒C．RNA D．小的直线型DNA 8．（多选）目前常被使用的基因载体有A．质粒 B．噬菌体C．染色体D．动、植物病毒9．某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明A．蛋白质合成是在核糖体上进行的 B．各种生物共用一套遗传密码C．兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 D．兔子的基因发生了突变10．小麦根尖细胞基因分布在A.染色体，核糖体B.染色体，叶绿体C.染色体，线粒体D.染色体，线粒体，叶绿体11．人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。
人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。
其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。
工作艰巨可见一斑。
科学家应对多少染色体进行分析A.46条B.24条C.23条D.22条12．基因治疗是把健康的外源基因导入A.有基因缺陷的细胞中B.有基因缺陷的染色体中C.有基因缺陷的细胞器中D.有基因缺陷的DNA分子中13．下列不属于获取目的基因的方法是A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法D.根据已知氨基酸序列合成法14．用“鸟枪法”提取目的基因的步骤为①用限制性内切酶将供体细胞DNA切成许多片段②将许多DNA片段分别载入运载体③选取目的基因片段插入运载体④通过运载体转入不同的受体细胞⑤让供体DNA片段在受体细胞内大量繁殖⑥找出带有目的基因的细胞，并分离出目的基因A．①③④⑤⑥B．①②④⑤⑥C．①②③④⑤⑥D．①②③④⑤15．关于真核细胞基因结构的表达中，正确的是A.不同基因中外显子的碱基对在整个基因碱基对中所占比例很大B.外显子所含碱基对一般多于内含子C.内含子是不能转录，不能编码蛋白质的序列D.非编码区对基因的表达起调控作用16．有关基因工程的叙述正确的是A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可以作为运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料17．细胞核基因与细胞质基因相比，相同的是A.载体B.数目C.分离时机D.随机分离18．植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是A．彼此性状极为相似B．都是单倍体植株C．植株的变异频率较高D．都是纯合体植株19．控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA ②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A．①③④B．①②④C．②①③D．②①④20．基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A．质粒、线粒体、噬菌体B．染色体、叶绿体、线粒体C．质粒、噬菌体、动植物病毒D．细菌、噬菌体、动植物病毒21．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌抗体。
基因工程模拟试卷一及参考答案
基因⼯程模拟试卷⼀及参考答案模拟试卷⼀及参考答案⼀、名词解释（20分）1.基因⼯程;2.基因⽂库;3. RT-PCR ;4. 同裂酶;5. gel retardation;6. Oligonucleotide-directed mutagensis;7. 反义RNA技术;8. α-互补;9. YAC（Yeast artificial chromosome）;10. 基因治疗⼆、填空（20分）1. _________ 、_____________和逆转录酶的发现是基因⼯程诞⽣的三⼤技术⽀持。
2. 1977年第⼀次在E. coli中合成了第⼀个⼈类蛋⽩。
3. 质粒是存在于细菌细胞中能独⽴于染⾊体DNA⽽⾃主复制的、、环状的双链DNA分⼦。
4. DNA提取过程中，苯酚的作⽤是。
⼄醇或异丙醇的作⽤是。
5. 将噬菌体DNA转⼊细菌的⽅法主要有、两种。
6. M13载体最多只能插⼊3kb的⽚段，⽽pUC8与M13的杂交载体称为，如pEMBL8可以克隆10kb的⽚段。
7. 建⽴⽣物的基因⽂库需要的克隆数⽬，可以通过公式进⾏计算。
8. Ti质粒分⼦太⼤，很难找到单⼀酶切位点，不适于直接作为载体使⽤，为此可以采⽤、两种策略。
9. E. coli中，基因表达的启动与终⽌依赖于基因周围的⼀组信号，其中最重要的三个信号是、、。
10. 碱性磷酸酯酶可以去掉DNA分⼦5’端的基团，防⽌载体⾃连，提⾼重组率。
11. 酵母中，主要有YEp、YIp、YRp三种类型的载体，其中的转化频率最⾼，⽽最稳定。
12. 受体细胞经过⼀些特殊⽅法的处理后，细胞膜的通透性发⽣变化，成为能容许有外源DNA的载体分⼦进⼊的细胞，这种细胞称为。
13. 限制性内切酶Eco R I，其中Eco表⽰_________________，R表⽰___________，I表⽰_________________。
14. PCR反应的每⼀次循环都包括、、_____________三个步骤，这样通过25-30cycles，可以扩增⼤量的⽬的⽚段。
基因工程试题及答案
基因工程试题及答案# 基因工程试题及答案## 一、选择题1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 限制性内切酶B. DNA聚合酶C. 逆转录酶D. DNA连接酶2. 基因工程中，用于目的基因的克隆通常使用：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 转座子3. 下列哪项不是基因工程的应用领域？A. 农业改良B. 疾病治疗C. 能源开发D. 武器制造## 二、填空题1. 基因工程中，常用的宿主细胞包括________、________和________。
2. 基因枪法是一种________技术，可以将目的基因直接导入植物细胞。
## 三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 基因工程在医药领域的应用有哪些？## 四、论述题1. 论述基因工程对现代农业的影响及其潜在风险。
## 参考答案### 一、选择题1. 答案：A, D。
限制性内切酶和DNA连接酶是基因工程中用于切割和连接DNA片段的常用工具酶。
2. 答案：A。
质粒是基因工程中常用的载体，用于克隆和表达目的基因。
3. 答案：D。
基因工程的应用领域广泛，但武器制造不属于其应用范围。
### 二、填空题1. 答案：大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞。
这些是基因工程中常用的宿主细胞，用于表达外源基因。
2. 答案：基因转移。
基因枪法是一种基因转移技术，通过高速微粒子将DNA射入细胞内。
### 三、简答题1. 答案：基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、载体的选择与构建、目的基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有目的基因的细胞、目的基因的表达与检测。
2. 答案：基因工程在医药领域的应用包括：生产重组蛋白药物、基因治疗、疫苗开发、疾病诊断等。
### 四、论述题1. 答案：基因工程对现代农业的影响主要体现在作物改良、提高产量、增强抗病虫害能力等方面。
通过基因工程，可以培育出抗旱、抗盐碱、抗病的作物新品种，提高作物的适应性和产量。
然而，基因工程也存在潜在风险，如基因流可能导致非目标物种的基因改变，以及转基因作物对生态环境的影响等。
生物选修基因工程试题及答案
生物选修基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中，常用的运载体不包括以下哪一项？A. 质粒B. 噬菌体C. 病毒D. 染色体答案：D2. 基因枪法是一种用于将外源基因导入植物细胞的方法，它主要利用了什么原理？A. 电穿孔B. 显微注射C. 基因重组D. 粒子轰击答案：D3. 在基因工程中，PCR技术的主要作用是什么？A. 基因测序B. 基因克隆C. 基因扩增D. 基因编辑答案：C二、填空题4. 基因工程中，常用的限制性内切酶能够识别特定的_______序列，并在这些序列的特定位置切割DNA分子。
答案：核苷酸5. 基因工程中，将目的基因插入到运载体中后，需要通过_______技术将重组DNA导入宿主细胞。
答案：转化三、简答题6. 请简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断等。
例如，利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物；通过基因编辑技术治疗遗传性疾病；利用基因芯片技术进行疾病相关的基因检测。
四、论述题7. 论述基因工程在农业中的应用及其潜在的伦理问题。
答案：基因工程在农业中的应用主要包括转基因作物的培育、抗病抗虫作物的开发、作物品质改良等。
例如，通过基因工程培育出抗虫害的棉花、抗旱的玉米等。
然而，基因工程也引发了一些伦理问题，如转基因作物对环境的影响、对生物多样性的潜在威胁、以及公众对食品安全的担忧等。
结束语：通过本试题，我们对基因工程的基本概念、技术方法及其在不同领域的应用有了更深入的了解。
同时，我们也认识到了基因工程在实际应用中可能遇到的伦理和环境问题，这需要我们在进行基因工程研究和应用时，更加谨慎和负责任。
基因工程测试题(附解析)
基因工程测试题（附解析）一、基础题点练1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( ) ↓↓A．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====，产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。
3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A．蛋白质工程的基础是基因工程B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析：选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
高考生物基因工程试题及答案
高考生物基因工程试题及答案一、选择题1. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A. 基因工程中目的基因的获取是基因工程的核心步骤B. 基因工程中限制酶只能从原核生物中分离得到C. 基因工程中运载体必须具备限制酶的切割位点D. 基因工程中目的基因的检测与鉴定是基因工程的最后步骤答案：A2. 基因工程中常用的运载体是（）A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 以上都是答案：D3. 基因工程中，将目的基因导入植物细胞最常用的方法是（）A. 农杆菌转化法B. 基因枪法C. 脂质体法D. 电穿孔法答案：A4. 基因工程中，用于检测目的基因是否导入受体细胞的方法是（）A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：D5. 基因工程中，用于检测目的基因是否转录出了mRNA的方法是（）A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：C二、填空题1. 基因工程的基本操作步骤包括____、____、____和____。
答案：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2. 限制酶具有特异性，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割磷酸二酯键，具有这种特性的核苷酸序列被称为____。
答案：限制酶的识别序列。
3. 在基因工程中，常用的运载体有____、____和____等。
答案：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
4. 基因工程中，将目的基因导入动物细胞最常用的方法是____。
答案：显微注射技术。
5. 基因工程中，用于检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是____。
答案：抗原-抗体杂交技术。
三、简答题1. 简述基因工程的原理。
答案：基因工程的原理是基因重组，即按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。
2. 简述基因工程在农业上的应用。
济南生物基因工程试题及答案
济南生物基因工程试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 生物基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的检测3. 基因枪法主要用于：A. 植物基因工程B. 动物基因工程C. 微生物基因工程D. 所有生物的基因工程4. 基因编辑技术CRISPR-Cas9的基本原理是：A. 利用酶切割DNAB. 利用RNA指导酶切割DNAC. 利用DNA指导酶切割RNAD. 利用RNA指导酶切割RNA5. 基因工程中，用于筛选转化细胞的方法是：A. 抗生素筛选B. 酶联免疫吸附测定C. 聚合酶链反应D. 凝胶电泳答案：1. A 2. D 3. A 4. B 5. A二、填空题（每空1分，共10分）6. 基因工程的核心技术是_________。
7. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的方法之一。
8. 基因工程在医学领域的应用包括_________和_________。
9. 基因工程在农业领域的应用包括_________和_________。
10. 基因工程在环境保护中的应用包括_________和_________。
答案：6. 基因克隆 7. 转化 8. 基因治疗、疾病诊断 9. 抗虫植物、抗病植物 10. 污染治理、生物修复三、简答题（每题10分，共20分）11. 简述基因工程在食品工业中的应用。
12. 简述基因工程在生物制药领域的主要应用。
答案：11. 基因工程在食品工业中的应用主要包括：（1）通过基因改造提高作物的营养价值；（2）生产具有特定功能的微生物，用于食品发酵；（3）利用基因工程改良食品的风味和质地；（4）开发新型食品添加剂等。
12. 基因工程在生物制药领域的主要应用包括：（1）生产重组蛋白药物，如胰岛素、生长激素等；（2）开发单克隆抗体药物，用于治疗癌症和自身免疫疾病；（3）利用基因工程改造微生物生产疫苗；（4）开发基因治疗药物，治疗遗传性疾病。
基因工程综合测试一答案
二、填空题（每空 0.5 分，共 5 分） 得分： 1、基因工程的两个基本特点是：(1) 分子水平的操作，(2) 细胞水平的表达。 2、如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于 同一个不亲和 群，
学
这是因为它们的 复制机制相同 所致。 3、PCR 技术反应过程包括高温变性、低温退火 和 中温延伸三个循环步骤。 4、启动子 是 DNA 链上一段能与 RNA 聚合酶结合并能起始 mRNA 合成的序列，它位于 基因的上游。 5、不与细菌的任何蛋白或多肽融合在一起的表达蛋白称为 非融合蛋白 。 6、个体之间 DNA 限制性片段长度的差异叫 RFLP 分） （1 2）具有两种可供利用的抗生素抗性选择标记。 分） （1 3）具有多种限制性核酸内切酶的单一酶切位点。 分） （1 4）具有较某一特定组织，在某种环 境条件下的基因表达情况，并不能包括该生物有机体示基因组的全部结构信息 （1 分） 。 3、简述 PCR 技术的原理。 分） （5 答：首先是双链 DNA 分子临近沸点的温度下加热时便会分离成两条单链的 DNA 分子， （1 分）然后 DNA 聚合酶（1 分）以单链 DNA 为模板（1 分） ，在一对寡核苷酸引物（1 分）的“引导”下，利用反应混合物中的 4 种脱氧核苷三磷酸（dNTP） 分）合成新生 （1 的 DNA 互补链，是通过 3 个温度依赖性步骤完成的反复循环。
三、判断题（每题 1 分，共 5 分，正确的划“√”错误划“×” ）
它们脱磷酸。( × )
1、用同一种酶切割载体和外源 DNA 得到粘性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP 将 2、所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒载体。( √ ) 3、能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸 酶识别的序列。( × )
基因工程测试题及答案
基因工程测试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 基因工程中常用的限制酶主要来源于：A. 病毒B. 细菌C. 真菌D. 植物答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的降解答案：D3. 基因工程中常用的载体不包括：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 病毒答案：D4. 基因工程中，用于连接目的基因和载体的酶是：A. 限制酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶D. 反转录酶答案：B5. 基因工程中，用于将重组DNA导入受体细胞的方法不包括：A. 转化B. 转染C. 转导D. 转录答案：D二、填空题（每题2分，共10分）1. 基因工程中，将外源基因导入植物细胞的方法主要有______和______。
答案：农杆菌介导法；基因枪法2. 在基因工程中，______是将目的基因插入到载体DNA分子中的关键步骤。
答案：克隆3. 基因工程中，______是将重组DNA导入受体细胞的常用方法。
答案：转化4. 基因工程中，______是将目的基因表达成蛋白质的步骤。
答案：表达5. 在基因工程中，______是检测目的基因是否成功表达的重要手段。
答案：分子杂交三、简答题（每题5分，共20分）1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的获取方法。
答案：目的基因的获取方法包括从基因文库中筛选、利用PCR技术扩增、人工合成等。
3. 解释基因工程中载体的作用。
答案：载体在基因工程中的作用是携带目的基因进入受体细胞，并在其中复制和表达。
4. 阐述基因工程中转化过程的重要性。
答案：转化过程是将重组DNA导入受体细胞的关键步骤，它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在和表达。
四、论述题（每题10分，共20分）1. 论述基因工程在农业领域的应用及其可能带来的问题。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 下列关于基因工程的描述，错误的是：A. 基因工程是一种在体外对DNA分子进行改造的技术B. 基因工程可以用于生产重组蛋白C. 基因工程可以用于治疗遗传性疾病D. 基因工程不能用于植物的遗传改良答案：D2. 在基因工程中，限制性内切酶的主要作用是：A. 连接目的基因和运载体B. 切割目的基因和运载体C. 提取目的基因D. 将目的基因导入受体细胞答案：B3. 基因工程中常用的运载体不包括：A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 细菌答案：D4. 基因工程中，将目的基因导入植物细胞最常用的方法是：A. 显微注射法B. 农杆菌转化法C. 电穿孔法D. 脂质体介导法答案：B5. 基因工程中，检测目的基因是否成功表达的方法不包括：A. 分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. DNA测序D. 基因枪法答案：D二、填空题1. 基因工程的基本操作步骤包括____、____、____、____。
答案：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2. 限制性内切酶具有____性，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定的切点上切割磷酸二酯键。
答案：特异性3. 在基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____等。
答案：抗生素抗性基因、荧光标记基因4. 基因工程中，____是将目的基因导入微生物细胞最常用的方法。
答案：转化5. 基因工程中，____是将目的基因导入植物细胞最常用的方法。
答案：农杆菌介导的转化三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括：- 农业：通过基因工程改良作物的抗病、抗虫、抗旱等特性，提高作物产量和品质。
- 医学：利用基因工程技术生产重组蛋白药物，如胰岛素、干扰素等，以及用于基因治疗。
- 工业：利用基因工程生产工业用酶、生物燃料等。
- 环保：利用基因工程处理环境污染，如利用基因工程菌处理污水。
高三生物基因工程练习题及答案
基因工程同步练习第一卷：选择题一、单择题1.有关基因工程的叙述正确的是（）A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料2.基因工程常用的受体有（）①大肠杆菌②枯草杆菌③支原体④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体（）A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA4.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（）A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达5.不是基因工程方法生产的药物是（）A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗6.在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，需使用（）A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶7.在基因工程中用来修饰改造基因的工具是（）A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8.下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件（）A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有多个限制酶切点9.正确表示基因操作“四部曲”的是（）A.提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因与运载体的结合→目的基因的检测和表达B.目的基因的检测和表达→提取目的基因→目的基因与运载体的结合→目的基因导入受体细胞C.提取目的基因→目的基因与运载体的结合→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达D.目的基因与运载体的结合→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达10.水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测出来D.使目的基因容易成功表达11.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
《基因工程》练习
《基因工程》练习一、选择题1．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是（）A．整个提取过程中可以不使用离心机B．研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰2．如图表示构建重组质粒和筛选含人胰岛素原基因的细菌的过程，其中I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落。
下列有关叙述正确的是（）（注：⑦过程表示用灭菌绒布从含氨苄青霉素培养基中蘸取菌种，再按到含四环素培养基中培养）A．①②只能用同一种限制性核酸内切酶进行切割B．I表示抗氨苄青霉素基因，II表示抗四环素基因C．3、5菌落是筛选出的含有人胰岛素原基因的细菌D．该基因工程成功的标志是细菌合成具有生物活性的胰岛素3．用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），酶切位点及酶切产物分离结果如图。
下列叙述错误的是（）A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B．图1中酶催化反应的化学键是氢键C．图2中②可能是用Xho I处理得到的酶切产物D．用XhoI和SalI同时处理该DNA，电泳后得到6种产物4．下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述中，正确的是()A．用鸡血作为材料，原因是鸡血红细胞有细胞核，其他动物红细胞没有细胞核B．用不同浓度的NaCl溶液进行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同C．用酒精进行提纯，原因是DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精D．用二苯胺试剂进行鉴定，原因是DNA溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色5．菊花是一种双子叶植物，易感桃蚜而影响植物生长。
某科研团队获得了转GNA基因（表达产物能有效抑制桃蚜生长）菊花，流程如图所示。
下列相关叙述错误的是（）A．过程a、b分别表示逆转录和PCR，可获得大量GNA基因B．图中用到的Ti质粒是取自土壤中农杆菌的一种天然质粒C．图中c过程需要将GNA基因插入到Ti质粒的T-DNA中D．通过桃蚜接种实验可以检测图中菊花植株对桃蚜的抗性6．PCR 技术不仅可用于基础研究，还适用于日常的临床诊断、法医学调查和农业生物技术研究。
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模拟试卷一及参考答案一、名词解释（20分）1.基因工程;2.基因文库;3. RT-PCR ;4. 同裂酶;5. gel retardation;6. Oligonucleotide-directed mutagensis;7. 反义RNA技术;8. α-互补;9. YAC（Yeast artificial chromosome）;10. 基因治疗二、填空（20分）1. _________ 、_____________和逆转录酶的发现是基因工程诞生的三大技术支持。
2. 1977年第一次在E. coli中合成了第一个人类蛋白。
3. 质粒是存在于细菌细胞中能独立于染色体DNA而自主复制的、、环状的双链DNA分子。
4. DNA提取过程中，苯酚的作用是。
乙醇或异丙醇的作用是。
5. 将噬菌体DNA转入细菌的方法主要有、两种。
6. M13载体最多只能插入3kb的片段，而pUC8与M13的杂交载体称为，如pEMBL8可以克隆10kb的片段。
7. 建立生物的基因文库需要的克隆数目，可以通过公式进行计算。
8. Ti质粒分子太大，很难找到单一酶切位点，不适于直接作为载体使用，为此可以采用、两种策略。
9. E. coli中，基因表达的启动与终止依赖于基因周围的一组信号，其中最重要的三个信号是、、。
10. 碱性磷酸酯酶可以去掉DNA分子5’端的基团，防止载体自连，提高重组率。
11. 酵母中，主要有YEp、YIp、YRp三种类型的载体，其中的转化频率最高，而最稳定。
12. 受体细胞经过一些特殊方法的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许有外源DNA的载体分子进入的细胞，这种细胞称为。
13. 限制性内切酶Eco R I，其中Eco表示_________________，R表示___________，I表示_________________。
14. PCR反应的每一次循环都包括、、_____________三个步骤，这样通过25-30cycles，可以扩增大量的目的片段。
15. PCR反应中的一个引物序列为AGACTCAGAGAGAACCCTTT，其Tm值大约是。
16. 当体系中存在酶量过大，甘油浓度过高等情况时，限制性内切酶酶切往往产生额外片段，这种现象称为。
17. 研究发现，的细菌质粒，可以重组整合到植物染色体中，受这一现象的启发产生了直接转移技术。
18. lacZ’基因插入失活鉴定需要在培养基中添加、两种物质，根据蓝白斑选择重组克隆。
19. RNase H可以降解RNA:DNA杂交分子中的。
20. 有些质粒在宿主体内只能产生1至几个拷贝，属于严谨型，另一些质粒在宿主体内可产生10-200个拷贝，称之为质粒。
三、选择题（10分）1. 在植物遗传转化中，可以利用P1噬菌体，它含有基因，可以识别靶序列并将其切割下来。
因此，我们可以将kan抗性基因置于其靶序列中间，利用这一系统将kan抗性基因从转基因植株中剔除。
a. Creb. NPT IIc. trad. Cos2. 以下那种措施不能提高外源DNA与载体的重组率（）a. 载体除磷b. 外源片段：载体=2:1~10:1, 增加碰撞机会，减少自身环化c. 利用TdT在3’端增加人工粘性末端，防止载体自身环化d. 只增加载体浓度3. 为了提高质粒DNA的产量，在细菌培养过程中，可加入（）增加质粒的拷贝数。
a. 噬菌体b. 氯霉素c. Kand. amp4. 下列哪种方法不能用于重组噬菌体的选择（）a. 利用lacZ’基因、cI基因的插入失活鉴定。
b. 利用λ噬菌体对P2前噬菌体抑制的敏感性。
c. 根据噬菌斑的大小。
d. 根据λ基因组的大小。
5. 低等真核生物如酵母、丝状真菌等的染色体可以通过下列哪种电泳方法进行分离。
( )a. 琼脂糖凝胶b. 聚丙烯酰胺凝胶c. OFAGEd. 变性琼脂糖凝胶6. Sanger-Coulson测序法需要单链的DNA，因此一般用作为克隆载体。
a. M13b. plasmidc. λ载体d. YAC7. PCR反应中，普通的Taq 酶可以在3’端增加一个( )，利用这一特点，可以使用特殊的载体将PCR片段克隆出来。
a. Ab. Gc. Cd. T8. 利用E. coli生产某些人类蛋白存在一些问题，其中大部分问题可以解决，但( )到目前为止仍无法解决。
a. 偏爱密码子b. 重组蛋白易降解c. 基因中含有内元d. 糖基化9. 根癌农杆菌上的Ti质粒可划分为四个区域，其中( )可识别植物创伤信号，启动基因转移。
a. Vir区;b. T-DNA区;c. Con区;d. Ori10. 大肠杆菌质粒克隆基因片段的大小是下列哪种情况？（）a. <3kb;b. <8kb;c. 20kbd. 40kb四、分析题（10分）1.在下列6种限制性酶图谱中，有一种排列方式与凝胶电泳的带型是一致的。
3种酶分别是：E-EcoR I、N-Nco I、A-Aat II。
1） 根据电泳中DNA 带型，选择正确的图谱。
2） 将这块凝胶转移后进行Southern 杂交分析，带星号的是与pep 基因杂交的信号带，说明pep 在图谱中的位置。
2. 下图是Sanger 法测序的部分结果，图中A,T,G ,C 分别代表加入ddATP, ddTTP, ddGTP,ddCTP 的反应管的电泳结果，根据电泳图谱读出所测片段的DNA 序列。
A T G C五、简答题（25分）1. 植物基因转移的方法有哪些？各自有哪些优缺点？2. 如何测定DNA 的浓度和纯度？3. 怎样提高平头末端的连接效率?4. 标记探针的方法有哪些？5. 分子标记技术在植物育种中有哪些应用？6. 限制性内切酶的命名的基本原则是什么？六、论述题（15分）1. 结合农作物的育种目标，谈谈基因工程在作物品种改良中有哪些应用？迁移方向参考答案三、名词解释（20分）2.基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
3.基因文库：某种特定的生物所含有的能够包含所有基因的足够数目的克隆的集合。
4.RT-PCR：又称为反转录PCR，首先利用逆转录酶合成cDNA，然后添加引物和聚合酶扩增目的基因或基因片段。
5.同裂酶：识别位点相同，切割位点也相同，但来源不同的限制性内切酶。
6.gel retardation：DNA结合蛋白后，分子量将会增加，电泳时的迁移率降低。
7.Oligonucleotide-directed mutagensis：寡聚核苷酸介导的突变，以单链DNA为材料，通过与目的片段互补但在特异位点碱基已经改变的寡聚核苷酸引物合成一条新链，并通过选择得到突变的分子。
8.反义RNA技术：与天然mRNA反向互补的RNA分子，在基因工程中用来阻止内源mRNA的表达，从而改变生物的性状。
9.α-互补：lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体可以与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶隐性突变体之间实现互补。
10.YAC（Yeast artificial chromosome）：酵母人工染色体。
11.基因治疗：用正常基因取代病人细胞中的缺陷基因，以达到战胜分子病的目的。
包括基因诊断、基因分离、载体构建、基因转移等步骤。
四、填空（20分）1. 限制性内切酶和连接酶的发现、载体的发现2.生长激素抑制素3. 共价、闭合4. 抽提蛋白质、沉淀核酸5. 转染、体外装配6. 噬菌粒7. N=ln(1-P)/ln(1-a/b)8. 双元载体系统、共整合载体系统9. 启动子、终止子、核糖体结合位点10. 磷酸11. YEp、Yip 12. 感受态细胞13. 属名和种名、抗性质粒、第一种酶14. 变性、退火、延伸15. 58ºC 16. 星号活力17. 超螺旋结构18. X-gal、IPTG 19. RNase 20. 松弛型三、选择题（10分）1. a2. d3. b4. c5. c6. a7.a8. d9. a10. b四、分析题（10分）1. 1）第5种2)Nco I和Aat II之间2. 凝胶序列：5’ATTGCCGTCACGA TTACGGTAAC 3’所测片段序列：5’GTTACCGTAATCGTCGGCAAT 3’五、简答题（25分）7.植物基因转移的方法有哪些？各自有哪些优缺点？直接基因转移技术：基因枪法，适于单子叶植物原生质体法PEG介导的方法生物为媒介的方法：农杆菌介导转化法病毒为媒介的转化8.如何测定DNA的浓度和纯度？浓度：1）测定260nm的吸光值，1OD相当于50ug双链DNA/ml。
2）电泳检测纯度：A260/A280=1.8，<1.8 表示含有酚或蛋白质；>2.0说明含有RNA。
9.怎样提高平头末端的连接效率?加大酶用量（10倍）加大平头末端底物的浓度加入10%PEG（8000），促进分子间的有效作用加入单价阳离子，150-200mM NaCl提高反应温度10.标记探针的方法有哪些？End fillingNick translation随机引物法11.分子标记技术在植物育种中有哪些应用？分子图谱的构建品种、品系鉴定和杂交种纯度分析亲缘关系分析基因标记及标记辅助育种（Marker-assisted Selection，MAS）数量性状因位点（QTL）的分子标记辅助选择12.限制性内切酶的命名的基本原则是什么？取属名的第一个字母大写，取种名的前两个字母小写，构成基本名称。
该种中发现的不同的酶按照顺序编号I, II, III等。
如存在变种和品系，取变种或品系的一个字母。
若酶存在于质粒上，则需大写字母表示非染色体遗传因子。
六、论述题（15分）1. 结合农作物的育种目标，谈谈基因工程在作物品种改良中有哪些应用？作物育种目标包括：高产、抗病、抗逆、品质等方面，目前，基因工程在作物品种改良中发挥了重要作用，并且在以下方面取得了重要进展。
延迟果实成熟抗虫抗病耐除草剂改变花型及花色抗非生物胁迫提高品质。