第七章 生物标志化合物PPT课件
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生物标志化合物-油田讲课共141页PPT
生物标志化合物-油田讲课
41、俯仰终宇宙，不乐复何如。 42、夏日长抱饥，寒夜无被眠。 43、不戚戚于贫贱，不汲汲于富贵。 44、欲言无予和，挥杯劝孤影。 45、盛年不重来，一日难再晨。及时 当勉励 ，岁月 不待人 。
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
பைடு நூலகம்
41、俯仰终宇宙，不乐复何如。 42、夏日长抱饥，寒夜无被眠。 43、不戚戚于贫贱，不汲汲于富贵。 44、欲言无予和，挥杯劝孤影。 45、盛年不重来，一日难再晨。及时 当勉励 ，岁月 不待人 。
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
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生物标志化合物地球化学
生物标志化合物还可以用于评估污染物的生态影响，例如，通过比较污染区域和非污染区域的生物标志化合物，可以了解污染物对生态系统的影响。
生物标志化合物在生态风险评估中的应用
04
CHAPTER
生物标志化合物地球化学在石油勘探中的应用
生物标志化合物是石油生成过程中有机物质演化的产物，它们在石油生成和演化过程中起着关键作用。
生物标志化合物可以用于识别污染源，通过分析污染物的化学特征和来源，可以追溯污染物的来源和传播途径。
生物标志化合物可以用于区分自然源和人为源的污染物，例如，某些特定的生物标志化合物可以指示特定类型的石油或重金属污染物的来源。
生物标志化合物还可以用于评估污染物的迁移和转化，例如，通过检测不同环境介质中的生物标志化合物，可以了解污染物的迁移和转化过程。
生物标志化合物在环境监测中具有重要作用，可以用于检测和评估环境污染物的存在和浓度。例如，某些特定的生物标志化合物可以指示石油、重金属、农药等污染物的存在。
生物标志化合物可以用于监测环境污染对生态系统的影响，例如，通过检测动物和植物组织中的污染物含量，可以评估环境污染对生物多样性和生态平衡的影响。
生物标志化合物在环境监测中的应用
生物标志化合物地球化学模型
建立生物标志化合物地球化学模型，模拟生物标志化合物的分布、迁移和转化过程，预测其对环境变化的响应。
高灵敏度分析技术
利用质谱、色谱等高灵敏度分析技术，提高生物标志化合物的检测限和准确性。
生物标志化合物地球化学新技术与新方法的发展
通过研究生物标志化合物在生态系统中的作用，为保护和合理利用自然资源提供科学依据。
随着技术的不断进步和研究的深入，生物标志化合物地球化学在石油勘探中的应用将更加广泛和深入，有望为石油勘探提供更加准确和可靠的依据。
化学人教版(2019)必修第二册7.1认识有机化合物(共30张ppt)
②状态：气态
液态
固态（碳原子数≤4的烷烃为气
态③）密。度：随碳原子数增加而增大，但均比水的密度小，难溶于水。
练习1. 以下物质的沸点由高到低的排列顺序是 ①正丁烷 ②异丁烷 ③正戊烷 ④异戊烷 ⑤新戊烷 ⑥丙烷
③＞ ④＞ ⑤ ＞① ＞②＞ ⑥ 。
2、烷烃的化学性质
①. 稳定性 通常情况下，烷烃比较稳定，不与强酸、强碱或高锰酸钾等强氧化剂反应。
B 光亮处，下列有关此实验的现象和结论的叙述不正确的是（ ）
A. 试管中气体的黄绿色逐渐变浅，水面上升 B. 生成物只有三氯甲烷和氯化氢，在标准状况下均是气体 C. 试管内壁有油状液滴形成 D. 试管内有少量白雾
C 3.下列有关甲烷的取代反应的叙述正确的是 （ ）
A. 甲烷与氯气的物质的量之比为 1∶1，混合发生取代反应只生成 CH3Cl B. 甲烷与氯气的取代反应，生成的产物中 CH3Cl 最多 C. 甲烷与氯气的取代反应生成的产物为混合物 D. 1 mol 甲烷生成 CCl4 最多消耗 2 mol 氯气
CH2==CH2互为同系物的为_③__⑥__，和
①CH3CH2CH3
②
互为同分异构体的为_③__。
③CH2==CH—CH3
④
⑤
⑥
B 4、下列哪组是同系物（
）
A、CH3CH2CH2CH3
CH3CH(CH3)CH3
B、CH3CH3
CH3CH(CH3)CH3
C、CH3－CH＝CH2
CH3＝CH—CH＝CH2
正丁烷 C4H10
结构式
_____________ ________________ __________________
结构简式 _C__H_3_C_H__3
bIOMARKERS生物标志物-PPT精选文档
• Materials:
• 24 pint mason jars with lids
• composed of silica sand, kaolin
clay, peat moss, CaCO3, water • Litmus paper
• Pesticide - 0.88%
• Control series (3 jars)
• 6 series run with fungicide (3 jars/series)
• first fungicide series 4 ml fungicide
:128 ml
of water
• diluted 5 times for each successive 5 series
is not supported
• pH of each soil was taken after soil was mixed and again after the fungicide was added
• Initial pH of the soils were about 6.0 6.5
• pH after addition of fungicide ranged from 4.5 (in the more highlyconcentrated soils) to 5.5 (in the less highly-concentrated soils)
• 4th dilution: 1/16 the concentration of series 1
• 5th dilution: 1/32 the concentration of series 1
• Samples of lindsey and jason’s soil • 1. sample from the copper pipe area • 2. sample from site 1 • 3. sample from around suspicious oil
生物标志物PPT课件
10
1、得到的单体不都是木质素所特有
四甲基氢氧化铵高温 裂解法(TMAH)
2、部分木质素特征单体没有标准化 合物，不利于定量 3、适合于有机物含量高且未经过高度降
解的土壤和沉积物环境
热裂解
在600 ～ 700℃高温下几秒钟即可完成裂 解，节约了试剂和时间，但产物复杂，
缺少标准，难以定量
.
7
木质素在碱性条件下经 CuO 氧化分解后生成 11 种单体
类型
单体
对羟基酚类(P 对羟基苯甲醛、对羟陆源植物特有
紫丁香基酚类 (S类)
丁香醛、丁香酮和丁香酸
被子植物木质素
香草基酚类(V 类)
香草醛、香草酮和香草酸
所有维管植物木质素,裸子植 物几乎只含V
肉桂基酚类(C 类)
香豆酸和阿魏酸
木本植物的叶或草本植物的 木质素
.
8
参数 S/V C/V
.
5
木质素的检测
木质素是一种以苯丙基为单体"通过碳 碳键和醚键连结的天然大分子聚合物
现有的分析技术很难对其进行直接的定 量分析,利用化学分解的方法将其结构 单元转化成易于检测的小分子化合物
.
6
降解方法 碱性CuO氧化法
特点
耗时长，所用试剂多，步骤繁琐，但可 得到特征单体，应用最广
硝基苯氧化法
易产生副产物，干扰多，空白高
生物标志物
--木质素 lignin
.
1
生物标志物 木质素的指示意义 木质素的结构 木质素的分解 木质素的测定
.
2
生物标志物是指来自于生物体内，由于各种原因进入地质 体中，长期稳定存在，或者经降解后稳定存在，或者按照 一定可循规律缓慢降解的有机质。
生物质材料-第七章木质素ppt课件
精选ppt
32
ZHE JIANG A & F UNIVERSITY
ZAFU
2、高锰酸钾氧化降解
木素
KOH 共煮
甲基化 KMnO4 藜芦
ZAFU
1、Klason法
常用的有72％硫酸Tappi标准法和80％硫酸法（更适合非 木材原料） （1）1g（精确到0.0001g）试样，用定性滤纸包好，用线扎 住，用索氏抽提器，苯醇混合液（2：1）抽提6小时，同时 另取一份测定水份。将式样取出风干，用洁净毛笔仔细将抽 提风干后式样刷入250ml磨口锥形瓶重，加入12～15℃的72 ％硫酸15ml，摇荡1min，将锥形瓶放入18～20℃的恒温水 浴锅中，2～2.5小时，随时摇动锥形瓶。
酸溶木素含量B以每1L中的质量（克）表示：
B A D 105
精选ppt
24
ZHE JIANG A & F UNIVERSITY
ZAFU
式中： A —— 吸收值； D —— 滤液的稀释倍数； 105—— 吸光系数，L/g.cm。
X BV 100 1000W0
原料中酸溶木素含量X，以质量百分数表示： 式中：V —— 滤液总体积，ml；
ZAFU
二）、木素的分离方法
一般可将木素的分离方法分两类 ： 1、溶解碳水化合物，残渣就是木素。
（性。72%H2SO4法）——木素往往已被改 2、溶解木素，剩余物是碳水化合物。
（工业制浆法）——不能得到全部木素。
精选ppt
13
ZHE JIANG A & F UNIVERSITY
ZAFU
三）、不溶木素的分离方法
4）木质素的化学结构中某些组分和结构与高聚 糖的相似性，因此在不改变木质素化学结构的 前提下，难以将具有相似结构的高聚糖与木质 素完全分离开。
生物标志化合物-油田讲课共141页
生物标志化合物-油田讲课
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ，而是 让儿童 练习良 好道德 行为， 克服懒 惰、轻 率、不 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
பைடு நூலகம்
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ，而是 让儿童 练习良 好道德 行为， 克服懒 惰、轻 率、不 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
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51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
生物标志化合物
狮25井E31泥岩 m/z85质量色谱图
A b u n d a n c e T IC : 2 0 0 8 S 5 3 5 .D 1 .8 e + 0 7 1 .6 e + 0 7 1 .4 e + 0 7 1 .2 e + 0 7 1 e + 0 7 8 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 * 4 0 0 0 0 0 0 * 2 0 0 0 0 0 0 n C 1 2 * 1 0 .0 0 T im e --> * n C 3 5 n o r-P r P r P h n C 2 3
来源于细菌；
β-胡萝卜烷（carotane）和γ-胡萝卜烷来源于高等植物、 细菌或甲藻的色素。
第一节 基本概念
豆甾醇和谷甾醇主要存在于陆源高等植物中，它是24-乙基-胆甾 烷[C29] 的前身;
胆甾醇（cholestanol）主要存在于水生生物和甲壳动物体内， 它是胆甾烷[C27]的前身；
第一节 基本概念
姥鲛烷（ pristane）、植烷 (phtane)、降姥鲛烷（ norpristane）和法呢烷（ farnesane）等系列类异戊二稀烷
烃（isoprenoids）等的前身物是叶绿素的α侧链植醇；
高碳数的藿烷来源于四羟基细菌烷脱羟基后经加氢还原的 产物；
桉叶油烷（eudesmane）来自高等植物β-桉叶油醇； 8β（H）补身烷（ drimane）。是由锥满醇合成的，主要
C 3 8
5 .0 1 0 0 .0 1 0 5 .0 2 0 0 .0 2 0 5 .0 3 0 0 .0 3 0 5 .0 4 0 0 .0 4 0 5 .0 5 0 0 .0 5 0 5 .0 6 0 0 .0 6 0 5 .0 7 0 0 .0 7 0 5 .0 0 T i m e -->
生物标志化合物-油田讲课
②碳 数 分 布
在原始有机质中，正构烷烃液态烃碳数分布非常宽，可达C6－ C70，由于采用的抽提方法及分析仪器的限制，正构烷烃的碳数 分布的差异较大。以索氏抽提法和GC/MS仪器分析为例： 索氏抽提法一般使用的溶剂为氯仿（也有加入部分强极性溶剂） 或石油醚，其回流温度在80℃左右，在抽提过程和溶剂挥发定 量过程中，轻组分损失较大。一般可从n C10检测出。
①生物标志化合物是生物自身合成的 ②这些化合物具有稳定的基本碳骨架
③这些化合物能够提供一些重要信息
第一节 基本概念
生物标志化合物是生物自身合成的
这些化合物具有明显的生物母源可追溯：他们来源 于高等动物、陆生植物、水生植物、浮游动物以及 细菌微生物的机体；或者是这些机体中的生物先驱 物在热力、压力及其各种催化作用或微生物作用下， 经过复杂的化学、物理变化转化而来的。
第一节 基本概念
姥鲛烷（pristane）、植烷(phtane)、降姥鲛烷（norpristane）和法呢烷（farnesane）等系列类异戊二稀烷
烃（isoprenoids）等的前身物是叶绿素的α侧链植醇；
高碳数的藿烷来源于四羟基细菌烷脱羟基后经加氢还原的 产物；
桉叶油烷（eudesmane）来自高等植物β-桉叶油醇； 8β（H）补身烷（drimane）。是由锥满醇合成的，主要
0
柴达木盆地咸水湖相烃源岩(E)饱和烃GC-MS总离子流图
A b u n d a n c e T IC : M 5 .5 e + 0 7 5 e + 0 7 4 .5 e + 0 7 4 e + 0 7 3 .5 e + 0 7 3 e + 0 7 2 .5 e + 0 7 2 e + 0 7 1 .5 e + 0 7 1 e + 0 7 5 0 0 0 0 0 0 1 0 .0 0 T i e --> m 2 0 .0 0 3 0 .0 0 4 0 .0 0 5 0 .0 0 6 0 .0 0 C 3 9 7 0 .0 0 C 1 1 P r P h C 1 8 C 1 7 S 1 0 0 6 9 .D
油气地球化学第七章 生物标志化合物
特征碎片离子峰：指 化合物的分子离子裂 解成具有一定规律性 的碎片离子在质谱图 上所产生峰，取决于 化合物的结构和键的 强度。
基峰
分子离 子峰
特征离子峰
三环萜
C24四环 萜
Ts Tm
五环三萜
1=C14倍半萜；3=4,4,8,8,9-五甲基萘烷；4，5，8，10=C15倍半萜； 6=4,4,8,9,9-五甲基萘烷；7=8β(H)锥满烷（C15)； 9=8α(H)锥满烷（C15）；11，12，14，15= C16倍半萜； 13= 8β(H)升锥满烷（C16）；16=C17 倍半萜
n常见的生物标志化合物类型
包括正构烷烃、无环异戊二烯烷烃、萜烷、甾烷四大类 Ø正构烷烃
来源于活的生物体或脂肪酸、蜡质等脂类化合物，在低成熟原油中常具有 奇碳数优势，但随成熟度增加，这种优势逐渐消失
高分子量（nC25～nC33）的奇碳数正构烷烃：主要来源于高等植物的角质 蜡，常出现在富含高等植物的碎屑岩系有机质及其生成的原油中，恒量奇 碳数优势可用CPI和OEP值来加以表示：
偶碳数优势的正构烷烃：常出现在碳酸盐岩或蒸发岩系中，是在还原环境 中由正脂肪酸、醇以及植烷酸、植烷醇还原形成
Ø无环异戊二烯类烷烃
指具有异戊二烯结构单元的支链烷烃，异戊二烯结构单元可以头—头、 头—尾、尾—尾方式连接；在原油中分布最广的是头—尾连接方式，从 C9 ～C25系列化合物中都存在头—尾连接的规则异戊二烯类烷烃，但其中最 重要和研究最多的是姥鲛烷和植烷，它们来源于植物叶绿素的植醇侧链， 在氧化条件下植醇先形成植烷酸，经脱羧作用形成姥鲛烷，而在还原条件 下，植醇保存iC20骨架，加氢形成植烷，因此，可以利用Pr/Ph比值来指示 有机质沉积环境的氧化还原条件
Ø萜类化合物
基峰
分子离 子峰
特征离子峰
三环萜
C24四环 萜
Ts Tm
五环三萜
1=C14倍半萜；3=4,4,8,8,9-五甲基萘烷；4，5，8，10=C15倍半萜； 6=4,4,8,9,9-五甲基萘烷；7=8β(H)锥满烷（C15)； 9=8α(H)锥满烷（C15）；11，12，14，15= C16倍半萜； 13= 8β(H)升锥满烷（C16）；16=C17 倍半萜
n常见的生物标志化合物类型
包括正构烷烃、无环异戊二烯烷烃、萜烷、甾烷四大类 Ø正构烷烃
来源于活的生物体或脂肪酸、蜡质等脂类化合物，在低成熟原油中常具有 奇碳数优势，但随成熟度增加，这种优势逐渐消失
高分子量（nC25～nC33）的奇碳数正构烷烃：主要来源于高等植物的角质 蜡，常出现在富含高等植物的碎屑岩系有机质及其生成的原油中，恒量奇 碳数优势可用CPI和OEP值来加以表示：
偶碳数优势的正构烷烃：常出现在碳酸盐岩或蒸发岩系中，是在还原环境 中由正脂肪酸、醇以及植烷酸、植烷醇还原形成
Ø无环异戊二烯类烷烃
指具有异戊二烯结构单元的支链烷烃，异戊二烯结构单元可以头—头、 头—尾、尾—尾方式连接；在原油中分布最广的是头—尾连接方式，从 C9 ～C25系列化合物中都存在头—尾连接的规则异戊二烯类烷烃，但其中最 重要和研究最多的是姥鲛烷和植烷，它们来源于植物叶绿素的植醇侧链， 在氧化条件下植醇先形成植烷酸，经脱羧作用形成姥鲛烷，而在还原条件 下，植醇保存iC20骨架，加氢形成植烷，因此，可以利用Pr/Ph比值来指示 有机质沉积环境的氧化还原条件
Ø萜类化合物
生物标志化合物
生物标志物立体化学
如果该碳原子不是环系体系的一部分 就可以根据4个不同取代基质量的先后顺 序将这两种构型描述为“R”和 “S”.
第一步 把最小取代基团（一般是H 原子）设在纸平面的后面， 使此基团与非对称碳原子 的连线垂直于纸平面
第二步 把位于纸平面上的取代基 团赋予优先权，基团越大， 优先权越高。（CH3 ＜ CH2CH3 ＜ CH（CH3)2等）
四环萜烷也较广泛分布于原油和岩石抽 提物中。目前认为这个系列的化合物由五 环三萜烷类烃热降解或生物降解而成 （Aquino Neto等，1983） 。目前发现的 该系列化合物分布于C24～C27，有可能分布 到C35（Peters等，1993），常以C24丰度最 高。
(3) 长链三环萜烷
长链三环萜的结构特征是环上带有－个异戊二烯 结构单元的长链。这类化合物在油和沉积物中广泛 分布，并且其碳数一般以C19～C30为主，但在一些 原油中也检测出了C19～C45的三环萜，甚至碳数更 高，可达C54 。
碳环开环破裂而衍生。
花侧柏烯
雪松烷
杜松烷
补身烷
桉叶油烷
常见的倍半萜类化合物
藿 烷 三 环 萜 烷
14 8
R R=H Cn H2n-1 （ n=2-8） 8-14键 开 裂 C环 开 环
12 13
降 解
8-14键 开 裂 C环 开 环
C16
8-14键 开 裂 C环 开 环
C19 C23 C21 C28 C26
0
15
20
25
30
15 10
5 0
西 非 下 白 垩 统 2425 m
10 5 0 15
突 尼 斯 古 新 始 2074m
岩 石 抽 提 物
生物标志物实验pptPowerPointPresen(1)
蛋白浓度
式中：OD620为待测样品620nm下的吸光度；K为 牛血清蛋白标准样曲线的斜率。
生物标志物实验 pptPowerPointPresen(1)
5 结果与报 告 1.急性毒性试验结果记录
曝气水 溶剂组 林丹 林丹 林丹 林丹 林丹 空白 对照 1ug/L 3ug/L 6ug/L 12ug/L 24ug/L
生物标志物实验 pptPowerPointPresen(1)
4 步骤与方 法
2．酶活力的测定 将1.5 mL离心管从超低温冰箱中取出，加入100uL
的冷的组织破碎缓冲液（pH=6.5）。捣碎研磨管内的钩 虾20～30min，加入9uL冷的冲洗缓冲液DB（pH=6.5）。 4℃下14000g离心3min，取100uL的上清。将此上清移 另一置于生物冰袋上的离心管中。往新的离心管内加入 900uL空白缓冲液BB（pH=6.5）后充分混匀，待用。
生物标志物实验 pptPowerPointPresen(1)
4 步骤与方 法
从上述的反应体系中取出200uL和Bio-Rad反应过 的蛋白液（钩虾组织破碎液上清，牛血清蛋白），每组 设三个平行，加入96孔板内。25℃下，摇动96孔板20s 后，用酶标仪测定620nm下的吸光度。根据牛血清蛋 白标准液的读数汇出标准曲线，计算出曲线的斜率K。
法
3．总蛋白的测定
以牛血清蛋白为校正标准，用Bio-Rad公司的试剂盒 检测定钩虾组织破碎液中的蛋白质浓度。将牛血清蛋白溶 于磷酸缓冲液（pH=6.5）中，配制成200mg/L的蛋白标准 液。取 0mL、0.25mL、0.75mL、1.00mL和1.35mL该蛋 白标准液，先加入8mL磷酸缓冲液（pH=6.5），再加入空 白缓冲液BB（pH=6.5），配制成浓度依次为0mL、 5.0mL、10.0mL、15.0mL、20.0mL和25.0mL的蛋白标 准液系列。从每个浓度的蛋白标准液中取出800uL至干净 的EP管中，加入200uL Bio-Rad产品。稀释缓冲液取 80uL的虾组织液上清至一个干净的EP管中，加入80uL的 0.1％的Triton X-100，用640uL磷酸缓冲液（pH=6.5）稀 释混合液至800uL，加人200uL Bio-Rad产品。
式中：OD620为待测样品620nm下的吸光度；K为 牛血清蛋白标准样曲线的斜率。
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5 结果与报 告 1.急性毒性试验结果记录
曝气水 溶剂组 林丹 林丹 林丹 林丹 林丹 空白 对照 1ug/L 3ug/L 6ug/L 12ug/L 24ug/L
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4 步骤与方 法
2．酶活力的测定 将1.5 mL离心管从超低温冰箱中取出，加入100uL
的冷的组织破碎缓冲液（pH=6.5）。捣碎研磨管内的钩 虾20～30min，加入9uL冷的冲洗缓冲液DB（pH=6.5）。 4℃下14000g离心3min，取100uL的上清。将此上清移 另一置于生物冰袋上的离心管中。往新的离心管内加入 900uL空白缓冲液BB（pH=6.5）后充分混匀，待用。
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4 步骤与方 法
从上述的反应体系中取出200uL和Bio-Rad反应过 的蛋白液（钩虾组织破碎液上清，牛血清蛋白），每组 设三个平行，加入96孔板内。25℃下，摇动96孔板20s 后，用酶标仪测定620nm下的吸光度。根据牛血清蛋 白标准液的读数汇出标准曲线，计算出曲线的斜率K。
法
3．总蛋白的测定
以牛血清蛋白为校正标准，用Bio-Rad公司的试剂盒 检测定钩虾组织破碎液中的蛋白质浓度。将牛血清蛋白溶 于磷酸缓冲液（pH=6.5）中，配制成200mg/L的蛋白标准 液。取 0mL、0.25mL、0.75mL、1.00mL和1.35mL该蛋 白标准液，先加入8mL磷酸缓冲液（pH=6.5），再加入空 白缓冲液BB（pH=6.5），配制成浓度依次为0mL、 5.0mL、10.0mL、15.0mL、20.0mL和25.0mL的蛋白标 准液系列。从每个浓度的蛋白标准液中取出800uL至干净 的EP管中，加入200uL Bio-Rad产品。稀释缓冲液取 80uL的虾组织液上清至一个干净的EP管中，加入80uL的 0.1％的Triton X-100，用640uL磷酸缓冲液（pH=6.5）稀 释混合液至800uL，加人200uL Bio-Rad产品。
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i通常取C23
中分子量（nC15～nC21）的奇碳数正构烷烃：常出现在海相或深湖相沉积有 机质生成的烃类化合物中，来源于藻类和水生浮游生物，以nC15或nC17为主 峰，由浮游植物或底栖藻类中nC16或nC18脂肪酸通过脱羧作用形成
偶碳数优势的正构烷烃：常出现在碳酸盐岩或蒸发岩系中，是在还原环境 中由正脂肪酸、醇以及植烷酸、植烷醇还原形成
➢无环异戊二烯类烷烃
指具有异戊二烯结构单元的支链烷烃，异戊二烯结构单元可以头—头、 头—尾、尾—尾方式连接；在原油中分布最广的是头—尾连接方式，从 C9 ～C25系列化合物中都存在头—尾连接的规则异戊二烯类烷烃，但其中最 重要和研究最多的是姥鲛烷和植烷，它们来源于植物叶绿素的植醇侧链， 在氧化条件下植醇先形成植烷酸，经脱羧作用形成姥鲛烷，而在还原条件 下，植醇保存iC20骨架，加氢形成植烷，因此，可以利用Pr/Ph比值来指示 有机质沉积环境的氧化还原条件
高分子量（nC25～nC33）的奇碳数正构烷烃：主要来源于高等植物的角质 蜡，常出现在富含高等植物的碎屑岩系有机质及其生成的原油中，恒量奇 碳数优势可用CPI和OEP值来加以表示：
CP 1I C 25 C 33 C 25 C 33 2 C 24 C 32 C 26 C 34
OEPCi4C6iC 1i2C iC3i的漂移情况，基线越平越好 2. 姥鲛烷和nC17、植烷和nC18两对峰的分离程度，要求分离度大于50% 3. 峰形是否对称 色谱图的识别
➢色谱—质谱分析
图谱识别
基峰：指质谱中强度 最大的峰。
分子离子峰：指分子 受到电子轰击后失去 一个外层电子形成正 离子而在质谱上产生 的峰，位于质谱的最 后位置。
➢萜类化合物
包括倍半萜、二萜、三环萜、四环萜和五环三萜类，在原油和沉积岩 中，不同的萜类化合物具有不同生物母质来源，通常陆源母质中比海 相母质含有更多的倍半萜前身物；二萜类主要分布于高等植物中；三 环萜没有特殊的前身物，但大多认为它们来源于微生物和藻类；四环 萜由五环三萜经热降解或生物降解形成，有学者认为它们是碳酸盐岩 或蒸发岩沉积环境标志，但实际绝大部分原油中都含有四环萜；五环 三萜根据其碳骨架特征可分为藿烷系列和非藿烷系列，其差别在于藿 烷系列的E环为五员环，而非藿烷系列多为六员环，藿烷系列化合物的 特殊分布可能具有指相意义；非藿烷系列化合物主要有奥利烷、羽扇 烷、伽马蜡烷等，奥利烷主要出现在白垩系及其以新的地层中，高含 量的伽马蜡烷是咸水沉积环境的标志物
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
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谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
2.其母体化合物有较高的浓度，其主要结构特征在沉积和早期埋藏过程 中具有化学稳定性
3.分子结构有明显的特异性，即具有特殊的碳骨架
常见的生物标志化合物类型
包括正构烷烃、无环异戊二烯烷烃、萜烷、甾烷四大类
➢正构烷烃
来源于活的生物体或脂肪酸、蜡质等脂类化合物，在低成熟原油中常具有 奇碳数优势，但随成熟度增加，这种优势逐渐消失
特征碎片离子峰：指 化合物的分子离子裂 解成具有一定规律性 的碎片离子在质谱图 上所产生峰，取决于 化合物的结构和键的 强度。
基峰
分子离 子峰
特征离子峰
三环萜
C24四环 萜
Ts Tm
五环三萜
1=C14倍半萜；3=4,4,8,8,9-五甲基萘烷；4，5，8，10=C15倍半萜； 6=4,4,8,9,9-五甲基萘烷；7=8β(H)锥满烷（C15)； 9=8α(H)锥满烷（C15）；11，12，14，15= C16倍半萜； 13= 8β(H)升锥满烷（C16）；16=C17 倍半萜
第七章 生物标志化合物
教学目的
➢ 了解生物标志化合物的概念，熟悉生物标志化合物的来源、 分析方法、图谱识别和应用
主要内容
➢ 生物标志化合物的概念 ➢ 常见生物标志化合物类型及来源 ➢ 生物标志化合物的分析方法及图谱识别 ➢ 生物标志化合物的应用
重点及难点
➢ 生物标志化合物的图谱识别及其应用
生物标志化合物的概念
➢甾烷
分为规则甾烷、重排甾烷、甲基甾烷和芳香甾烷四类；通常认为在规则 甾烷中，C27甾烷主要来源于低等水生生物和藻类，C29甾烷可以来源于 藻类和陆源高等植物，因此常根据C27、C28、C29甾烷的分布来确定原油 的母质来源和进行油源对比
生物标志化合物分析与图谱识别
➢色谱分析 将样品用微量注射器从色谱仪进样口注入，在具有一定压力和流速的载气 带动下进入汽化室，样品汽化后，随载气进入色谱柱，由于各组分的沸点 不同，在色谱柱中流速不同，因而样品流经色谱柱时各组分得到分离并按 一定顺序从色谱柱中馏出，用检测器检测各组分并加以记录便得到色谱图
生物标志化合物又称为生标物、指纹化合物、地球化学化石、分子化石， 它是沉积物或岩石中来源于活体生物，并基本保存原始生化组分碳骨架 的，记载原始生物母质特殊分子结构信息的有机化合物
必须具备的三个特征：
1.化合物的结构表明它曾经是或者可能是生物体的一种成分，存在于沉 积物中，尤其是在原油、煤、岩石中能够检测到
Pr/nC17与Pr/nC18：是受母质类型和成熟度影响的参数，通常随成熟度 的增加，比值降低；可以利用这两个参数的交绘图来判识烃源岩的母 质类型，但要考虑生物降解作用的影响
甾烷和萜烷
➢具有地质时代意义的生物标志化合物
➢作为指示成熟度参数的生物标志化合物
➢作为判断生物降解程度的参数
常用的生物标志化合物参数
➢母质输入和沉积环境的参数
碳数分布曲线：一般低等水生生物富含类脂化合物，由该类母质生成 的原油在饱和烃色谱上低碳数组分占优势；而高等植物来源的原油则 以高碳数组分占优势
Pr/Ph：是判断烃源岩沉积环境氧化还原条件的有效指标，一般氧化 环境中比值较大，而还原环境中该比值较小；有研究者认为，根据该 值可以判断海相和陆相烃源岩，海相Pr/Ph在1.5～4.3之间，陆相在2～ 12之间