盐酸小檗碱对照品稳定性
黄藤素的质量控制及稳定性研究
1020 引言本文中所述黄藤素是以小檗碱为原料，通过化学合成法制得的产品，合成品国内尚无批准的原料药，也尚未收载在欧洲药典和美国药典及论坛中，根据工艺研究过程中使用原辅料的情况，研究者以植物提取的黄藤素【1】标准，盐酸小檗碱【2】标准为基础，参照中华人民共和国药典（以下简称“中国药典”）、ICH技术指导原则及相关文献【3-19】，重点对产品含量检测方法、有关物质检测方法，如可能存在的有机杂质，金属离子钡的残留等情况进行研究。
通过系统的方法学考察、验证等制定了相应的检测方法，同时开展了稳定性研究，根据研究结果确定了产品贮存条件和产品有效期。
1 仪器与试药1.1仪器1.2试药盐酸巴马汀对照品，批号为110732-201510；盐酸小檗碱对照品，批号为110713-201212，盐酸药根碱对照品，批号为110733-201108，均购自国家官网；非洲防己碱，批号为151108，成都普菲德生物技术有限公司；黄藤素（编号YFS16001、YFS16002、YFS16003）；乙腈为默克色谱纯试剂，三氯甲烷、甲醇、乙醇、乙醚、盐酸、氢氧化钠、磷酸、磷酸二氢铵、硝酸等均为分析纯试剂；自制超纯水。
2含量检测方法2.1 色谱条件检测柱：安捷伦碳十八柱，直径4.6毫米，长度250毫米，孔径5微米；洗脱液为350mL乙腈与0.2%磷酸溶液650mL混合得到，流速为0.8mL/分钟；测试波长为342纳米；柱温35摄氏度；上样体积为5 微升。
2.2溶液的制备2.2.1稀释液分别量取乙腈350mL、0.2%磷酸溶液650mL，混合，摇匀，超声处理，即得2.2.2空白溶剂取1ml甲醇加稀释液稀释至25ml，摇匀，即得。
2.2.3盐酸巴马汀对照品溶液取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加“2.2.1”稀释液，制成浓度为0.04mg/mL的溶液，即得。
2.2.4盐酸小檗碱储备液取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加“2.2.1”稀释液，制成浓度为0.1mg/mL的贮备溶液。
关于薄层色谱荧光分光光度法测定黄连及香连丸中盐酸小檗碱的含量
关于薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连及香连丸中盐酸小檗碱的含量【摘要】目的建立黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。
方法样品经提取、薄层展开后，采用薄层色谱-荧光分光光度法对黄连和香连丸中盐酸小檗碱进行含量测定，展开剂为苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)，激发波长Ex＝365 nm，发射波长Em＝409 nm。
结果盐酸小檗碱在0.473～3.784 μg范围内线性关系良好，r＝0.999 3。
黄连的回收率为99.03%，RSD＝1.86%。
香连丸的回收率为97.10%，RSD＝1.09%。
结论该法操作简便，分离效果好，灵敏度高。
【关键词】黄连；香连丸；荧光分光光度法；盐酸小檗碱；含量测定Key words：Coptis chinensis Franch.；Xianglian Pills；fluorescence spectrophotometry；berberine hydrochloride；content determination黄连为毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch.)、三角叶黄连(Coptis deltoides C.Y.Cheng et Hsiao)或云连(Coptis teeta Wall.)的干燥根茎，具有清热燥湿、抗菌消炎、利胆等功效，临床上用于治疗消化道感染、泻痢等疾病。
以黄连作原料的中成药香连丸气微、味苦，具有清热燥湿、行气止痛等功效，临床多用于湿热痢疾、里急后重、腹痛泄泻、菌痢、肠炎等症。
盐酸小檗碱为两者共有的有效成分，具有抗菌、抗病毒、抗凝等作用，治疗原发性高血压、糖尿病等疾病。
本试验采用薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量，为其质量控制提供依据。
1 仪器与试药RF-5000荧光分光光度计(日本岛津)，UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)，AG135(四川时运成套仪器有限公司)，80-2离心沉淀器(上海手术器械厂)，CQ-250超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。
HPLC法测定肾衰宁丸中盐酸小檗碱的含量
２ ． ６ 稳定性试验
分别精 密吸取 同一供试 品溶液 １ （ ） ｌ ，
根茎。主要成份为盐酸小檗碱 、盐酸巴马汀等。用于湿热痞 满，呕吐吞酸等症 。与本品的功能主治有密切关系，是本制 剂的主药之一。因此，以黄连中盐酸小檗碱作为含量测定指 标来控制本制剂的内在质量具有合理 。我们采用反相高效 液相色谱法测定黄连中盐酸小檗碱的含量 ，方法简便 ，易于 操作，结果准确 ，重现 Ｊ 生良好。
肾衰宁丸是由太子参、黄连、丹参、半夏 （ 制） 、陈皮 、
茯苓 、大黄等十昧中药组成。黄连为毛茛科植物黄连 Ｃ ｏ ｐ ｔ ｉ ｓ
ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ Ｆ ｒ ａ ｎ ｃ ｈ ． 三角 叶黄 连 Ｃ ｏ ｐ ｔ ｉ ｓ ｄ ｅ ｈ ｏ ｉ ｄ ｅ ａ Ｃ Ｙ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｅ ｔ
日本岛津 Ｌ Ｃ一２ Ｏ １ ０ ＡＨＴ高效液相色谱仪 ；Ａ Ｂ ２ ６ ５ 一 Ｓ
型 电子 天平 ，Ｂ Ｓ Ａ ２ ２ ４ Ｓ型 电 子天 平 。
ｍ １ ）２ ０ ｍｌ ，依法测定 ，计算 回收率 ，结果见表 １ 。
表 １ 回 收 率试 验 结 果
盐酸 小 檗碱 对 照 品 （ 批 号 ：１ １ ０ ７ １ ３ — ２ ０ ０ ２ ０ ８ ，产 地 ： 中国药品生物制 品检验所 ，规格 ：供含 量测定用） ，乙腈
钾溶液（ ３ ０： ７ ０ ） 、 乙腈 一０ ． ０ ５ ｍｏ ｌ ／ Ｌ磷酸二氢钾溶液（ ３ ０： ７ ０ ） 进行优化试验 ， 结果 ， 以乙腈 一０ ． （ ｝ ５ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ磷 酸二氢钾
为色谱 纯 ，水 为纯化水 ，其它试剂均为分析纯 。
盐酸小檗碱对照品稳定性
GMP文件验证篇盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案方案编号: SOP-COD0400年月验证方案审批表盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案目录1.目的2.背景3.稳定性研究3.1.标签3.2.对照品溶液配制3.3.贮存条件3.4.测试时间点3.5.分析方法和接受标准4.参考文件5.结果报告6.附件1.目的：确定盐酸小檗碱对照品溶液的有效期。
2.背景：因药典中没有规定对照品溶液的有效期，因此，对于没有规定有效期的盐酸小檗碱对照品溶液进行4个月的研究，来观察其稳定性，并规定其内部使用有效期。
本方案适用于常规方法—高效液相色谱法。
3. 稳定性研究：3.1.标签：用于对照品溶液效期研究的溶液瓶上需注明“用于对照品溶液效期研究”。
3.2.对照品溶液配制：根据《中国药典》2010版一部中药成方制剂—黄连上清片的含量测定项下对照品溶液制备方法。
3.3.贮存条件：按规定将配制好的盐酸小檗碱对照品溶液用封口膜封好，放在2～8℃的冰箱内贮存。
注意：用于分析前需放臵至室温。
3.4.测试时间点：分别在0天、7天、14天、30天、2个月、3个月、4个月内测试。
3.5.分析方法和接受标准:3.5.1分析方法：高效液相色谱法。
色谱条件与系统适应性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾溶液（35：65）为流动相；检测波长345nm,理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000.对照品液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成1 ml含20ug的溶液。
分别制备两份盐酸小檗碱对照品溶液（贴上“用于对照品溶液效期研究”的贴签），在零时间点，对两份对照品溶液分析两次，互相复核含量。
在零时间点以外的测试时间点，分别新鲜配制一份对照品溶液，并用新鲜配制的对照品溶液和用于研究效期的两份对照品溶液分析两次。
用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值，来重新计算用于研究效期的两份对照品溶液的含量值。
3.5.2接受标准：在每次分析前，观察测试用的对照品溶液与新鲜配制的对照品溶液的外观是否一致。
对照品(标准品)和对照药材溶液稳定性考察报告
对照品溶液稳定性考察报告（薄层色谱法用于鉴别）报告书编号：YB- 1203·0017-00-01（2013）一、考察目的：通过薄层鉴别实验，考察葛根素等共33种对照品分别用相应溶剂所配制的相应浓度的对照品溶液的稳定性，从而规定其用于薄层鉴别实验的有效期。
二、考察范围：对照品溶液稳定性考察。
三、考察类型：同步考察四、考察日期及对照品及相应溶剂种类考察日期2013 年01 月01 日至2013 年08 月30 日对照品及相应溶剂种类：大黄素（甲醇液）、大黄素（乙醇液）、丹参酮IIA（乙酸乙酯液）、丹参酮IIA （甲醇液）、丹酚酸B（75%甲醇液）、丹皮酚（丙酮液）、甘草酸铵（甲醇液）、葛根素（甲醇液）、瓜氨酸（稀乙醇液）、桂皮醛（乙醇液）、华蟾酥毒配基（乙醇液）、黄芪甲苷（甲醇液）、黄芩苷（甲醇液）、黄芩素（甲醇液）、汉黄芩素（甲醇液）、苦参碱和槐定碱（混合乙醇溶液）、苦参碱（甲醇液）、氧化苦参碱（甲醇液）、苦杏仁苷（甲醇液）、芒柄花素（甲醇液）、毛蕊花糖苷（甲醇液）、没食子酸（甲醇液）、人参皂苷R0蜕皮甾酮（混合甲醇溶液）、山栀苷甲酯（乙醇液）、8-0-乙酰山栀苷甲酯（乙醇液）、芍药苷（乙醇液）、天麻素（甲醇液）、五味子甲素(三氯甲烷液）、盐酸水苏碱（无水乙醇液）、氧化苦参碱（乙醇液）、异钩藤碱（甲醇液）、栀子苷（乙醇液）、酯蟾酥毒配基（乙醇液）、梓醇（甲醇液）、盐酸小檗碱（甲醇液）、黄芩苷（（甲醇液）。
五、考察过程中的偏差及漏项情况：考察试验过程中无偏差情况发生，考察项目无遗漏；考察实施过程中考察方案无修改，考察记录完整，实验结果符合考察要求，无需做进一步的补充试验。
六、考察过程总结：检验仪器设备均在检定效期内；试剂试液等实验条件均符合检验要求；人员具有相应的检验能力和资质。
整个考察过程严格按《对照品（标准品）和对照药材溶液稳定性考察操作规程》(方案编码：1203·0117-00)进行考察。
RP-HPLC法测定复方芩连肠溶片中盐酸小檗碱的含量
RP-HPLC法测定复方芩连肠溶片中盐酸小檗碱的含量摘要】目的：建立以高效液相色谱法测定复方芩连肠溶片中盐酸小檗碱含量的方法。
方法：以Waters XterraRP18为色谱柱，流动相为乙腈-水＝55：45，检测波长为265nm，流速为1ml·min-1，柱温为25℃，进样量是10μl。
结果：盐酸小檗碱在3.071μg～24.568μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为100.2％，RSD=0.9％。
结论：本方法简便、准确、专属性强，可用于该制剂的含量测定。
【关键词】复方芩连肠溶片；高效液相色谱法；盐酸小檗碱【中图分类号】R927.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）24-0326-02Determination of the Content of Berberine Hydrochloride in Fufang Qinlian Changrong Tablets by RP-HPLC【Abstract】 Objective: To establish a method for the determination of berberine hydrochloride in fufang qinlian changrong tablets. Methods: HPLC was performed on aC18 column using acetonitrile-water (55:45) as the mobile phase at a flow rate of1ml·min-1. The detection wavelength was at 265nm. The column temperature was 25℃and the sample size w as 10μl. Results: The linear range of berberine hydrochloridewas 3.071μg～24.568μg (r= 0.9999), the average recovery was 100.2％(RSD=0.9%). Conclusions: The method is simple, accurate, special and can be used for the quality control of fufang qinlian changrong tablets.【Key words】 fufang qinlian changrong tablets; HPLC; berberine hydrochloride该肠溶片是按照中医药理论组方，经多年临床经验用于治疗溃疡性结肠炎的中药制剂，处方中主要含有黄连、黄芩、黄芪等药材。
关于盐酸小檗碱对照品使用方法的讨论
关于盐酸小檗碱对照品使用方法的讨论
乐健;刘茜;王林波;梅妮;王麟达
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2008(9)4
【摘要】当采用HPLC法测定含有盐酸小檗碱制剂（如盐酸小檗碱片）的含量时，会使用到盐酸小檗碱对照品[1]。
现在，对于盐酸小檗碱对照品如何使用和计算的
问题，主要有以下几种意见：①对照品不经处理直接使用，每分子盐酸小檗碱按含2份结晶水计算；②对照品经105℃干燥5h后使用，按含2份结晶水计算；③对照品经105℃干燥5h后使用，按不含结晶水计算，所得含量结果再乘以1．097（1．097为含2份结晶水盐酸小檗碱与盐酸小檗碱无水物分子量的比值）。
【总页数】2页(P250-251)
【作者】乐健;刘茜;王林波;梅妮;王麟达
【作者单位】上海市食品药品检验所,上海201203;上海市食品药品检验所,上海201203;上海市食品药品检验所,上海201203;上海市食品药品检验所,上海201203;上海市食品药品检验所,上海201203
【正文语种】中文
【中图分类】R921.2
【相关文献】
1.三黄片中盐酸小檗碱含量测定若干问题的讨论 [J], 周华杨;覃志高
2.盐酸小檗碱对照品干燥时间对含量测定影响的探讨 [J], 郑梓扬;何芳芳
3.黄连盐酸小檗碱对照品的制备 [J], 迟明艳;王正廷;袁洁;李俐
4.有关移液枪使用方法对移液准确性影响的讨论 [J], 于涛;赵秋蓉;吴迪
5.关于盐酸小檗碱对照品如何使用请示的回复 [J],
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HPLC法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度
2.8.3 回收率试验 分别精密称取盐酸小檗碱对照品 8、10、 12 mg，置于 100 mL 容量瓶中，分别按处方量加入辅料，用流动
相溶解并稀释至刻度，配制成相当于 80％、100％、120％浓度 的样品，按照“2.3”项下色谱条件测定，计算回收率。结果，高、 中、低的平均回收率分别为 98.77％、98.47％、99.03％，RSD＝ 0.55％，详见表 1。
RSD/％ 2.10 1.98 1.47
3 讨论
常用的溶出介质有蒸馏水、0.1 mol·L－1 盐酸溶液及不同 pH 值的缓冲液等。因 0.1 mol·L－1盐酸溶液较接近于人体胃部 环境，因此本试验选择人工胃液（0.1 mol·L－1 盐酸溶液）作为 溶出介质。
综上，本法操作简便、准确、可靠，可用于复方黄连素片的 质量控制。
取“2.2.1”项下对照品溶液 10 μL，连续进样 6 次，测定峰面 积。结果，峰面积的 RSD＝0.47％。 2.6 重复性试验
取同一批样品（批号：080716）5 份，按样品测定法测定，按 外标法以峰面积计算含量。结果，样品含量平均值（n＝5）为 100.2％，RSD＝0.49％。 2.7 稳定性试验
取供试品溶液适量，按照“2.3”项下色谱条件在放置 1、2、 4、8、24 h 各测定 1 次。结果，放置 1 h 和 24 h 的含量测定结果 误差为 0.78％，峰面积 RSD＝0.8％（n＝6），说明供试品溶液在 24 h 内基本稳定。 2.8 溶出度测定 2.8.1 溶出方式确定 以经脱气处理的 0.1 mol·L－1盐酸溶液 1 000 mL，转速为 120 r·min－1，溶出温度为（37±0.5）℃，取 6 片 样品按“2.1”项下条件操作，在 45 min 时取 10 mL 溶出液，滤 过，精密量取续滤液 2.0 mL 置于 10 mL 容量瓶中，加入 0.1 mol·L－1盐酸溶液至刻度，摇匀，采用 0.45 μm 滤膜滤过，滤液 照“2.3”项下方法测定每个样品的溶出量。 2.8.2 空白辅料干扰 取 6 片空白辅料片，按“2.1”项下方法 操作；另按处方比例取空白辅料适量置于 100 mL 容量瓶中，加 流动相溶解并稀释至刻度，按照“2.3”项下色谱条件测定。结 果显示，空白辅料对试验几乎无影响。
盐酸小檗碱质量标准
干燥失重取本品，在100℃干燥5小时，减失重量不得过12%（《中国药典》2000年版二部附录 L）。
炽灼残渣取本品1.0g，依法检查（《中国药典》2000年版二部附录 N），遗留残渣不得过0.2%（提取品）或0.1%（合成品）。
重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（《中国药典》2000年版二部附录 H第二法），含重金属不得过百万分之二十（合成品）。
氰化物取本品0.5g，依法检查（《中国药典》2000年版二部附录 F第一法），应符合规定（合成品）。
有机腈取研细的本品0.25g，置25ml具塞锥形瓶中，加无水乙醚5ml，振摇5分钟，用垂熔漏斗(G5)滤过,用无水乙醚洗涤3～4次(每次2ml),合并滤液与洗液，浓缩至约0.5ml,作为供试品溶液；另取胡椒乙腈对照品适量，加氯仿制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典二部附录ⅤB)试验,吸取对照品溶液10ul和全部供试品溶液,分别点于同一硅胶G(厚度0.5mm)薄层板上,以苯－冰醋酸（25：0.1）为展开剂，展开后，晾干，喷以5%钼酸铵硫酸溶液，在105℃加热10～20分钟，检视，供试品溶液在与对照品溶液所显主斑点的相应位置上，不得显杂质斑点（合成品）。
RP-HPLC法测定甘海胃康胶囊中盐酸小檗碱的含量
RP-HPLC法测定甘海胃康胶囊中盐酸小檗碱的含量摘要：目的RP-HPLC法测定甘海胃康胶囊中盐酸小檗碱的含量。
方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：甲醇—水 (80:20)，检测波长为270nm；流速为1.0mL/min。
色谱柱为PhenomenexHyper Clone 5u BDS C18130A(250×4.60mm 5 micron)；柱温为30℃。
结果：盐酸小檗碱进样量在0.515～5.15m g范围内，线性关系良好，A=2.86*106C+7477，r=0.99993。
平均回收率为99.53%，RSD=2.9%。
结论：本方法简便准确、重现性好，可对甘海胃康胶囊进行质量控制。
关键词：甘海胃康胶囊；高效液相色谱法；盐酸小檗碱酮Ⅱ甘海胃康胶囊是由甘草、海螵蛸、沙棘、枳实、白术、黄柏、延胡索、绞股蓝总苷等中药组成的复方制剂。
具有健脾和胃，收敛止痛。
用于脾虚气滞所致的胃脘痛，及慢性浅表性胃炎见上述症状。
黄柏[1]为该制剂的主要药物之一，含有盐酸小檗碱等有效成分。
原标准中未收载含量测定项 ,本文采用高效液相色谱法对该制剂中的盐酸小檗碱含量进行研究 ,实验结果表明，该法简便易行，灵敏度高，能准确地反映盐酸小檗碱的含量[2]，为更好的控制本品的内在质量提供了科学依据。
1 仪器与试药Agilent 1100LC高效液相色谱仪，G1311A四元泵，G1313A自动进样器，G1316A柱温箱，G1315BDAD检测器，Agilent 1100化学工作站，BP211D电子天平。
盐酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检定所提供；甘海胃康胶囊为医院售；甲醇为色谱纯；水为双蒸水；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Phenomenex HyperClone 5uBDS C18130A(250×4.60mm 5 micron)；流动相：甲醇-水(80：20) [3]；流速：1.0mL/min检测波长：270nm；柱温：30℃；进样量：10μ1。
HPLC法测定三颗针提取物中盐酸小檗碱含量
万方数据药物研究Ｔｈｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓｔｕｄｙ中国民族民￥ｕ１医药Ｃｈｉｎｅｓｅｊｏｕｍａｌｏｆｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ·３３·０．７３５。
Ｉｔ＂＝０．９９９８。
结果表明盐酸小檗碱在２．１５—２１．５ｐ，ｇ·ｌＩｌｌ。
范围内线性关系良好。
图１盐酸小檗碱对照品图２盐酸小檗碱保留时间为２．８ｍｉｎ１．３．５．２精密度实验精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液１０止，测定峰面积，重复进样５次，求得盐酸小檗碱峰面积ＲＳＤ＝０．５２％。
１．３．５．３稳定性试验于０，４，８，１２，２４ｈ分别吸取盐酸小檗碱对照液、样品液各１０山测定，盐酸小檗碱对照品峰面积ＲＳＤ＝０．６３％，样品液峰面积ＲＳＤ＝１．５４％，说明２４ｈ内稳定性良好。
１．３．５．４重复性试验分别取同一样品５份，按供试品溶液的制备的方法和测定方法进行测定，盐酸小檗碱峰面积积分值的ＲＳＤ＝１．８７％，表明本试验方法重复性良好。
１．３．５．５加样回收率试验取已知含量的供试品，分别加入一定量的盐酸小檗碱对照品，按含量测定项下操作，结果见表１，平均回收率为９９．００％，符合要求。
衰１盐酸小檗碱的回收率试验２结果分别精密吸取样品溶液和对照品溶液各ｌＯ止，注入液相色谱仪，测定，对照品及样品色谱图见图ｌ，２，（图中横坐标为保留时向，纵坐标为峰高），结果见表２。
裹２盐酸小檗碱的含量测定结果３讨论３．１本试验测定三颗针提取物中盐酸小檗碱的平均含量为１５．４０％，由于三颗针来源广泛，采收季节不同、部位不同，均会对其提取物中盐酸小檗碱含量有影响拍１，我们按８５％规定下限，因此，规定该提取物中盐酸小檗碱含量不低于１３．１％。
３．２比较甲醇，水，磷酸不同用量和流动相不同ｐＨ值对盐酸小檗碱的保留时间及其相邻峰分离度的影响。
结果表明甲醇一水一磷酸（２５：７５：０．２），保留时间适当分离效果较好，与其它方法相比，该方法所采用的流动相具有简便，柱污染小，分离度好的优点。
清热祛浊胶囊的质量标准研究
龙源期刊网 清热祛浊胶囊的质量标准研究作者：杨美娜王世信来源：《健康必读（上旬刊）》2018年第08期清热祛浊胶囊是由我院经典验方发展而来的中药复方制剂，在临床上用于肥胖型2型糖尿病疗效确切，但由于目前缺乏全面的质量控制方法。
为了确保制剂安全有效，稳定可控，本试验利用高效液相色谱法对该制剂进行含量测定以及质量标准的研究。
1 薄层色谱鉴别1.1 黄连的薄层色谱鉴别取清热祛浊胶囊及阴性对照品内容物各4g，精密称定，加甲醇40ml，80℃水浴回流提取15分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。
另取盐酸小檗碱对照品，制成0.5mg/1ml的甲醇溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（《中国药典》2015年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述五种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液（12：6：3：3：1）为展开剂，置氨蒸气中饱和15分钟，展开，展距15cm，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。
经过薄层色谱鉴别，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
重现性良好，阴性无干扰。
1.2大黄的薄层色谱鉴别取清热祛浊胶囊及阴性对照品内容物2g，加甲醇40ml，超声提取20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml、氯仿10ml加热回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液用氯仿萃取2次（10、10ml），合并氯仿液，挥干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液及阴性对照品溶液。
另取大黄酚、大黄素对照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述各供试品溶液及阴性对照品溶液各5μl、对照品溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，预饱和30分钟，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂[1]，展开，展距9cm，取出，晾干，氨熏后日光下检视。
高效液相色谱法测定清热解毒颗粒中盐酸小檗碱的含量
高效液相色谱法测定清热解毒颗粒中盐酸小檗碱的含量万勇1，杨毅生2，付志文3，周志强2，洪挺21.江西省药品检查员中心，江西南昌330029；2.江西省药品检验检测研究院，国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室，江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心，江西南昌330029；3.江西康恩贝中药股份有限公司，江西上饶 334400［摘要］目的：建立高效液相色谱（HPLC）法测定清热解毒颗粒中盐酸小檗碱的含量。
方法：采用SunFire-C18色谱柱（4.6×250 mm，5 µm），以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾（22∶78）为流动相；流速为1.0 mL/min；柱温30 ℃；检测波长346 nm。
结果：盐酸小檗碱进样量在0.003 958~0.494 8 μg（r=0.999 9）之间呈良好的线性关系，平均回收率为97.7 %，RSD为1.6%（n = 6）。
结论：建立的方法灵敏度高，重复性好，专属性强，可为清热解毒颗粒质量标准控制提供参考。
［关键词］清热解毒颗粒；高效液相色谱法；盐酸小檗碱；含量测定DOI: 10.19939/ki.1672-2809.2021.05.04The Content of Berberine Hydrochloride in Qingre Jiedu Granule was Determined by HPLC WAN Yong1, YANG Yisheng2, FU Zhiwen3, ZHOU Zhiqiang2, HONG Ting21. Jiangxi Provincial Inspector Center for Drug, Nanchang Jiangxi 330029, China;2. Jiangxi Institute for Drug Control, NMPA Key Laboratory of Quality Evaluation of Traditional Chinese Patent Medicine, Jiangxi Province Engineering Research Center of Drug and Medical Device Quality, Nanchang Jiangxi 330029, China;3.Jiangxi Conba Traditional Chinese Medicine Co., Ltd., Shangrao Jiangxi 334400, China.[Abstract] Objective: HPLC method was establish for determination of Berberine Hydrochloride in Qingre Jiedu granules. Methods: SunFire-C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 µm) was used, the mobile phase comprising of acetonitrile-0.05 mol/L monopotassium phosphate (22∶78), the column temperature was 30 ℃, the velcoity was 1.0 mL/min and the detection wavelength was 346 nm. Results: The linear range of Berberine Hydrochloride was 0.003 958~0.494 8 μg (r=0.999 9)，the average recovery was 97.7%，RSD=1.6% (n=6). Conclusion: The established method has high sensitivity, good repeatability and specificity, can provide reference for the quality control of Qingrejiedu granules.[Key Words] Qingre Jiedu granules; HPLC; Berberine hydrochloride; Content determination·药物研究·清热解毒颗粒是由金银花、连翘、黄连、知母、石膏、水牛角、玄参、地黄、大青叶等九味中药材组成，具有清热解毒，养阴生津，泻火等功效。
高效液相色谱法测定妇舒保凝胶中小檗碱的含量
２ 方法和结果
２１检测波长的选择 ．
２６３重现性试验 ．．
经全波长扫描 ，盐取小檗碱有 二个最大吸收波长，选择其
中之一 （４ ｎ ３ ６ ｍ）作为检测波长 。 ２ ． ２色谱条件 汉 邦公 司 Ｋ ｏ ｓ． ８ （ｕ ０ｒｍＸ４６ ｍ） ｒｍａｉＣ１ 柱 ５ ，２ ０ｎ ｌ ． ａ ｒ ；柱温 ：
２ ． ６方法学考察 ２６１系统适应性考察 ．． 分别取上述对照液 、 供试液和阴性对照液 １ｕ 进样 ， ０ｌ 记录 色谱图，盐酸 小檗碱色谱峰与相邻 峰 Ｒｆ１ ，理论塔板数按盐 ＞． ５ 酸小檗碱计算不低于 ３ ０ 。 ０ ０
２６２标准工作 曲线的制备 ．．
１ 仪器和材料
日本岛津 Ｌ 一０ Ｔ高效液相色谱仪，岛津 Ｓ Ｄ １Ａ紫外 Ｃ １Ａ Ｐ ．０ 检测器，Ｃａｓ ＣＩ 色谱工作站 。三批中试产 品由江苏吉贝尔 ｌ ． Ｏ ｓＬ 药业有限公司生产 。
２６４稳定性试验 ．．
精密吸取批号为 ０ ０ １ ７８ ０的第二个供试液 １ｕ，每间隔 １ ０ｌ
小时进一针，连续考察 ７ 小时，结果见表 ３（ 个 附后 ） 。
２７样 品中盐酸小檗碱 的含量测定 ．
精密吸取各样品供试液 ｌｕ，各进 ２针，采用随行标准 ， Ｏｌ
用外标二点法定量 ，根据取样量和稀释度 ，计算含量 。结果见
中西医结合 的创新和发展 。 编号 ：Ｅ １０ ０ ４ 修回 ：２ １． １ １ ．０ １ １ １（ ０ ００－ ） ２
依据的，但多数疾病 出现症状时 已经错过 了最佳治疗时期，而 这些疾病大多在 出现症状和体征之前就 已发生了生理学指标 的改变 。检验医学可以检测到这些客观 指标 的变化情况，为 中 医学发挥作用提供更大的舞台，使 中医药尽早发挥效能，为挽
和胃止痛片薄层鉴别论文(精)
和胃止痛片薄层鉴别论文【摘要】目的建立和胃止痛片的质量标准。
方法采用高效液相色谱法测定方中黄连药材中盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）的含量。
并同时对黄连、延胡索、木香进行薄层鉴别。
结果盐酸小檗碱含量测定进样量在0.085～0.850μg有良好的线性，r=0.9999，平均回收率96.7%，RSD为1.53%。
TLC定性鉴别阴性无干扰，对照品与供试品溶液斑点对应整齐、清晰。
结论该检测方法方便，准确，重现性好，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】和胃止痛片；薄层鉴别；高效液相色谱法；盐酸小檗碱前言和胃止痛片收载于《国家中成药标准汇编·中成药地方标准上升国家标准部分》，由大红袍、鸡矢藤、管仲、金荞麦、黄连、砂仁、延胡索、木香8味药材组成。
功能主治彝医：猜尼围快，围斯希；中医：行气活血，和胃止痛。
用于肝胃气滞，湿热淤阻所致的急慢性胃肠炎、胃及十二指肠溃疡、慢性结肠炎。
和胃止痛片是中成药中治疗这类疾病的良药，市场需求量大。
为了控制质量笔者对方中的黄连、延胡索、木香进行薄层鉴别，用高效液相色谱法对黄连中的盐酸小檗碱的含量测定进行了研究。
1仪器与试药 1.1仪器 AgilentG1311AQuatPump，G1314AVWD，G1379ADEGASSER，AT-330柱温箱，XtemaRp18（150mm×3.9mm，5μm）色谱柱，塞多利斯全自动电子天平(德国塞多利斯)。
1.2试药硅胶G（青岛海洋化工厂）;色谱纯乙腈;其它试剂均为分析纯；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所提供，编号为110713-200208，为供含量测定用）;延胡索乙素对照品（中国药品生物制品检验所提供，延胡索乙素对照品批号：110726-200208,供定性测定用）;和胃止痛片样品（自制）。
2方法与结果 2.1定性鉴别2.1.1黄连的薄层鉴别［1］取本品25片，研细，加氨试液1.5ml使润湿，加三氯甲烷30ml，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
盐酸小檗碱不同测定方法的比较
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ａｂｅ ｔ ｅ Ｔａ ｅ ｅ ａ ｌ ｏ ｅ ｂ ｒｎ ｄ ｏ ｈ ｏ ｉｅ，ｏ ａｅ ｔｔａ ｉｎ ｍｅ ｈ ｄ ｓｒ ｃ ｊｃｉ ： ｋ ｘ ｍｐ ｅ ｆｒ Ｂ ｒ ｅｉ ｅＨｙ ｒ ｃ ｌ ｒｄ ｃ ｍｐ ｒ ｉｒ ｔ ｔ ｏ ｖ ｏ
ｗｉ ｔ ＴＬ — ｍｅ ｈ ｄ． ｅ ｈ ｄ： ｅ ｔｔａ ｉ ｎ ｍｅ ｈ ｎ ｈ Ｃ ｔ ｏ Ｍ ｔ ｏ Ｕｓ ｉ ｒ ｔｏ ｔ ｏｄ ａ ｄ ＴＬＣ — ｍｅ ｈ ｄ ｔ ｅ ｔ ｔ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ｏ ｔ ｏ ｏ ｔｓ ｈ ｏ ｔｎ ｆ Ｂ ｒ ｅ ｉ ｅ Ｈｙ ｒ ｃ ｌ ｒｄ ． ｎ ｌ ｓ ｎ： ｅ ｂ ｒｎ ｄ ｏ ｈ ｏ ｉ ｅ Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｏ ＴＬＣ－ ｍ ｅ ｈ ｄ ｉ ｍｏ ｅ ｅ ａ ｔａ ｏ ｖ ｎ ｅ ｔ ｔ ｅ ｉ ａ ｉ ｎ － ｔ ｏ ｓ ｖ ｘ ｃ ｎ ｃ ｎ ｅ ｉｎ ｈ ｎ ｔｔ ｔ ｄ ｒ ｏ ｍｅ ｈ ｄ ｔｏ ． Ｋｅ ｒ ｓ Ｂ ｒ ｅ ｉ ｅ Ｈｙ ｒ ｃ ｌ ｒ ｄ ＴＬ Ｔｉｒ ｔ ｎ ｙ ｗｏ ｄ ｅ ｂ ｒ ｄ ｏ ｈ ｏ ｉ ｅ； Ｃ； ｔ ａ ｉ ｎ ｏ
小檗 碱 具 有 抗 微 生 物 及 原 虫 、 血 压 、 弛 血 降 松
并 定容至刻 度 ， 摇匀 、 备用 。
管、 兴奋子宫 、 降胆固醇等作用 ， 中西药 中均被广 在 泛 使用 。 含量的 测定方 法也 很多 ， 其 西药方 面 以滴 定
法 “为 主 ， 中药 方 面 则 以 Ｔ Ｃ， 法 ， Ｐ Ｃ法 而 Ｌ ｕｖ Ｈ Ｌ 为 多 。本 文 以 盐 酸 小 檗 碱 片 为 例 ， 对 滴 定 法 与 仅
Ｃｏ ｐａ ａ ｉ ｎ ｏ ｈ ｆ ｅ ｅ ｓ ｅ ｈ ｄ ｆ ｒ Ｂｅ ｂ ｒｎｅ Ｈ ｙ ｒ ｃ ｌ ｒ ｄ ｍ ｒ ｔｏ ｆｔ ｅ Ｄｉｆ ｒ ｎｔＴｅ ｔＭ ｔ ｏ ｏ ｒ ｅ ｉ ｄ Ｏ ｈ Ｏ ｉ ｅ
紫外分光光度法测定黄柏中盐酸小檗碱含量
（ ５ ， 明 仪 器精 密 度 良好 。 ｎ＝ ）表 ２ ６ 样 品含 量 测 定 ．
取 同一供试 品溶液 ， 温避光放 置 ， 室 分别 于 ０， ， ６ ２ ，６ ２ ４， ，４ ３ ， ４ ８ｈ时 ， ４ ０ｎ 在 ２ ｍ波长处测其吸光度 。 结果吸光度基本无变化 ， 表 明供试品溶液稳定性 良好 。
取 盐酸小檗碱对照 品， 配制成质量浓 度为 ２ｍ ／ Ｌ的盐酸小 ｇ ｍ 檗碱甲醇溶液 ， 精密 吸取 １０ ２ ０ ３ ０ ４ ０ ５ ０ｍ ， ． ，． ，． ，． ，． Ｌ 分别置具塞刻 度试管 中 ， 挥干溶剂 ， 精密加入 １ ％盐 酸甲醇溶液 ５０ｍ ， ． Ｌ 摇匀 ， 于
药 物鉴定
２１ 年第 １ 卷第 ｌ 期 ００ ９ ２
紫外分光光度法测定 黄柏 中盐酸小檗碱含量
徐 宁
２６ ５ ） ４０ ２ （ 安庆 医药高 等专科 学校 ， 安徽 安庆
摘 要 ： 的 改 进 黄 柏 中盐 酸 小 檗 碱 含 量 的测 定 方 法 ， 除还 原 剂 对 测 定 结 果 的 影 响 。 法 用 紫 外 分 光 光 度 法 测 定 其 含 量 ． 定 波 长 为 目 消 方 测 ４ ０ａ 结 果 盐 酸 小 檗碱 平 均 回 收 率 为 ９ ．２ ， Ｓ 为 ２ ９ ％ （ ＝ ）结 论 该 方 法 简单 、 ２ ｍ。 ７６％ Ｒ Ｄ ．０ ６ 。 快速 、 确 ， 于 实 际应 用 。 准 便
好。
２ ３ ４ 样 品含 量 测 定 ． ．
表 明供 试 品溶 液 中的 葛 根 素在 ３ ６ｈ内基 本 稳 定 。 重 现 性 试 验 ： 同一 批 号 （ 号 为 Ｙ ８ ７ ９ 粉 葛 饮 片 ６份 ， 取 批 ０００ ） 依 法 测 定 含 量 。 果 的 Ｒ Ｄ 为 ０ ８ （ｚ ） 表 明 方 法 重 现 性 良 结 Ｓ ． ％ ，＝６ ，
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GMP文件验证篇
盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案
方案编号: SOP-COD0400
年月
验证方案审批表
盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案目录
1.目的
2.背景
3.稳定性研究
3.1.标签
3.2.对照品溶液配制
3.3.贮存条件
3.4.测试时间点
3.5.分析方法和接受标准
4.参考文件
5.结果报告
6.附件
1.目的：确定盐酸小檗碱对照品溶液的有效期。
2.背景：因药典中没有规定对照品溶液的有效期，因此，对于没有规定有效期的盐酸小檗碱对照品溶液进行4个月的研究，来观察其稳定性，并规定其内部使用有效期。
本方案适用于常规方法—高效液相色谱法。
3. 稳定性研究：
3.1.标签：用于对照品溶液效期研究的溶液瓶上需注明“用于对照品溶液效期研究”。
3.2.对照品溶液配制：根据《中国药典》2010版一部中药成方制剂—黄连上清片的含量测定项下对照品溶液制备方法。
3.3.贮存条件：按规定将配制好的盐酸小檗碱对照品溶液用封口膜封好，放在2～8℃的冰箱内贮存。
注意：用于分析前需放置至室温。
3.4.测试时间点：分别在0天、7天、14天、30天、2个月、3个月、4个月内测试。
3.5.分析方法和接受标准:
3.5.1分析方法：高效液相色谱法。
色谱条件与系统适应性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾溶液（35：65）为流动相；检测波长345nm,理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000.
对照品液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成1 ml含20ug的溶液。
分别制备两份盐酸小檗碱对照品溶液（贴上“用于对照品溶液效期研究”的贴签），在零时间点，对两份对照品溶液分析两次，互相复核含量。
在零时间点以外的测试时间点，分别新鲜配制一份对照品溶液，并用新鲜配制的对照品溶液和用于研究效期的两份对照品溶液分析两次。
用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值，来重新计算用于研究效期的两份对照品溶液的含量值。
3.5.2接受标准：在每次分析前，观察测试用的对照品溶液与新鲜配制的对照品溶液的外观是否一致。
如出现浑浊，或者色谱图中出现显著的杂质峰，则停止对照品溶液的测试。
在每次分析时，必须首先保证系统满足该方法的系统适用性（重复性、拖尾因子、分离度、理论塔板数等等）。
在零时间点，每份对照品溶液互相复核的结果不得过2.0%，在每个分析测试点，对照品溶液的活性成分含量与零点的差异不得过2.0%。
4.参考文件：《中国药典》2010版一部
5.验证报告
6.附件：液相分析数据结果报告
液相分析数据结果报告
分析方法：分析项目：
醉鱼草皂苷Ⅵb对照品溶液有效期验证方案
复核者：日期：
方案编号: SOP-COD0100
盐酸小檗碱对照品溶液稳定性研究报告
年月
年月
盐酸小檗碱对照品溶液稳定性研究报告
盐酸小檗碱对照品溶液稳定性研究报告目录
1.目的
2.设备
3.对照品名称和测试过程
4.贮存条件
5.结果
6.变更
7.结论
1.目的：依据盐酸小檗碱对照品溶液稳定性研究方案（SOP—COD0400），评估黄连上清片中含量测定方法中对照品溶液的稳定性，制订盐酸小檗碱对照品溶液的内部使用有效期。
3.对照品名称和测试过程：
3.2测试过程：高效液相色谱法。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾溶液（35：65）为流动相；检测波长345nm,理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000.
对照品液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成1 ml含20ug的溶液。
测定法分别精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定。
4.贮存条件：验证用的盐酸小檗碱对照品溶液用封口膜封好，放在2～8℃的冰箱内贮存。
5.结果：在零时间点，对两份对照品溶液分析两次，互相复核含量。
在零时间点以外的测试时间点。
用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值，来重新计算用于研究效期的两份对照品溶液的含量值。
结果见附件1。
具体计算见附页。
6.结论：
附件1 液相分析数据结果报告
分析方法：分析项目：
复核者：日期：。