大鼠原位肾脏移植模型的建立

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大鼠左肺原位移植模型手术技术改进

大鼠左肺原位移植模型手术技术改进＊
张俊，王胜，王建军，汪文东，丁静民，王家顺△
华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科，汉武４０２３０２
摘要：的目
探讨建立更简便有效的 பைடு நூலகம் 鼠左肺原位移植模型。方法
Ｆｏｔａｅｒｔｒａｏｍｌｉｉｄｉｏｄｒｙｍｌａｓｗｅｅｒｎｄｙｄｖｄｅｎｔｏｎｏｎｄｒｃｐｉｎｔｇｒｕｐｓｒａｅｉｅｏ．Ｒａｕｒｎｓ１ｎｔｔｏｎｍｏｄｌｒｓａｉｈｅｙＵｔｌｎｇｔａｐａａｉｅｓｗｅｅｅｔｂｌｓｄｂ — ｓｎｇｉｐｒｅｕｆｅｈｎｉｅＲｅｕｌｓＩｅｉｉｎｏｕ２ａｉａｓｄｅｄｕｉｅａｉｎ，ｎｄｔｅｒｍａｉｎ１ｉｍｏｖｄｃｆｔｃｑｕ．ｓｔｎｒｃｐｅｔｇｒｐ，ｎｍｌｉｄｒｎｇｏｐｒｔｏａｈｅｎｉｇｏｐｅａｉｅｅ８ｒｔｏｎｓｗｒ
ａｃｍｐｉｈｄｓｃｅｓｕｌ．ｅｍｅｎｏｅａｉｅｔｆｒｃｐｅｔｓ３ｃｏｌｅｕｃｓｆｌＴｈａｐｒｔｉｓｙｖｍｅｏｅｉｉｎｓｗａ（４ｍｉ．ｌｔｅ１ａｓｓｒｉｅｖｒ３ａｓａｔｒ５± ）ｎＡ１ｈｒｔｕｖｖｄｏｅ０ｄｙｆｅ８
ｌｎｇｔａｐａｎａｉｎ．ｈｒｗａｎｏｉｆｃｎｔｉｆｒｎｃｉｔｂｏｄａａｌｉｂｅｏｅｎａｔｒｌｐｐｎｔｅｉｈｔ — ｕｒｎｓｌｔｔｏＴｅｅｓｓｇｎｉｉａｄｆｅｅｅｎｈｅｌｏｇｓｎａｙｓｓｆｒａｄｆｅｃｉｉｇｈｒｇｈｉｌｌＩＣｏｌｓｏＴｈｉｅｈＳｍｏｅｓｍｐｌａｄａＵＴ．ｎｃｕｉｎｓｍｔｏｄｉｒｉｅｎｐｐｌｃｂｌａａｓｌｓｉｅ，ｎｄｃｎｂｅｕｓｄｏｓａｉｈｒｔｌｎｇｔａ — ｉａｅ．ｎｄｔｋｅｅｓｔｍａａｅｔｅｔｂｌｓａｕｒｎｓｐａａｉｏ１ｌｎｔｔｏｎｍｄｅ．Ｋｅｒｓｌｇｔａｓａａｉａｍａｙｗｏｄｕｎｒｎｐｌｎｔｔｏｎ；ｎｉｌｍｏｄｅ；ｃｆｔｃｉｕｅｌｕｆｅｈｎｑ

大鼠肾移植模型建立的进展

、

大鼠肾移植术式繁多，肾动脉、脉、但静输尿管重建的方法主要有下面几种：动脉重建的方法有： ①肾动脉端端吻合； ②供肾动脉与受体腹主动脉端侧吻合；ｕ吻合；￣Ｃｆ ④ 肾动脉内支架管吻合。静脉重建的方法有： ①肾静脉端端吻合； ②供肾静脉与受体后腔静脉端侧吻合；ｕ吻合。输 ③ｃｆ尿管重建的方法：输尿管带膀胱瓣吻合；内支架管吻 ① ② １麻醉意外：）术中呼吸骤停多与麻醉不当有关。具体的量要自己体会，正确操作可获满意的麻醉效果，且实验动物
Ｎ．６ｏ＂１
大鼠肾移植模型建立的进展
张盛成柯
（中南大学湘雅移植中心，湖南
长沙，１０３４０１）
【摘要】目的建立大鼠肾移植模型。方法用大鼠作为供体和受体，采用原位低温灌注，原位修剪，血管吻合，微输尿管带膀
胱瓣与膀胱吻合。结论此模型的建立技术成熟，操作者便于掌握，鼠存活率高，大符合肾移植实验研究的需要。
以肝素盐水冲洗血管内防止空气及血栓）。恢复血流灌注，观察有无漏血。于受体右肾肾蒂部预留体外结扎线，术后２～３ｄ结扎以代替肾切除。分离膀胱于顶部切开一小口与原供肾输尿管之膀壁以５— ０肠线连续缝合。术后处理：保
影响因素的有效方法。
近端下端切断后外套袖套备用，于腹主动脉远端（肠系膜下动脉水平以下保留长的肠系膜下动脉）分支剪开一斜行切，口插入头皮针管以４Ｃ２Ｕｍ肝素的器官保养液进行￣含５／ｌ原位灌注，剪断腹主动脉近端内放置硬膜外导管作支架，继续分离输尿管至膀胱，带膀胱一起剪除备用，肾放置于小供肾袋中，菌冰覆盖，无放置冰箱中备用。２２受体手术：．受体鼠作腹部正中切口，露腹膜后组织，暴分离左肾动脉及输尿管并先后断扎（留原左肾静脉至最保

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点目的探讨大鼠肝移植手术技巧与处理要点, 减少术后并发症，建立稳定的大鼠肝移植模型。

方法Wistar大鼠240只（供受体各120只）行二袖套法原位肝移植。

结果120例大鼠原位肝移植术后48小时存活率88.3 % ,1周存活率86.7%，建立了稳定的大鼠肝移植模型。

结论掌握技术要点与处理方法，是建立稳定的大鼠肝移植模型的保证。

Abstract：ObjectiveTo explore the surgical skills of Orthotopic Liver Transplantation in Rats and reduce the complications. MethodsOrthotopic Liver Transplantation was performed in 240 rats using two-cuff technique.ResultsThe survival rate for 48 hours was 88.3 %, the survival rate for one week was 86.7 %, and established stable liver transplantation model in rats. ConclusionMaster the surgical skills of Liver Transplantation in rats can improve achievement ratio and the steady livability of rats with orthotopic liver transplantation．Key words：Liver transplantation；Model；Rats大鼠原位肝移植是研究免疫耐受、免疫排斥、器官保存、肝脏缺血再灌注损伤等方面常用动物模型，1979年Kamada首次提出了二袖套法建立大鼠肝移植模型，简化了手术方式，提高了生存率[1]。

促红细胞生成素对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤的防护作用

李衡纳宁黄正宇缪斌
【摘要】目的
赵大强华学锋
洪良庆
探讨促红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＥＰＯ）对大鼠移植肾缺血一再灌注损伤
采用ＢＮ大鼠和Ｌｅｗｉｓ大鼠，分别随机分为实验
（ｉｓｃｈｅｍｉａ — ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉ
第４卷第５期２０１３年９月
器官移植
ＯｒｇａｎＴｒｎｓａｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
ＶｏＬ４ＮＯ．５Ｓｅｐ．２０１３
・
实验研究・
促红细胞生成素对大鼠移植肾缺血一再灌注损伤的防护作用
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｆｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎｏｎｇｒａｆｔｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ￣Ｌｆｔｅｒｒｅｎａｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎ
组和对照组，每组各ｌ５只。ＢＮ大鼠作为供体，Ｌｅｉｓ大鼠为受体，建立单侧原位大鼠肾移植模型。ｗ
实验组受体大鼠术后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ｒｈＥＰＯ）１０００Ｕ／ｋｇ，对照组大鼠同样予腹腔注射等量生理盐水。两组受体大鼠在术后５ｄ剪尾取血，检测血

单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨

ｃｐｏｐｒｔｎｔｎｎｅａｉｔｍｅｗｅｅ（７２ ± １０）ｍｉＳ（６４土１１）ｍｉｅｔｒｏｅａｉｉａｄａｈｐｔｉｒ２．２ｏｍｅｅ．３ｎＶ２．７．６ｎ，（Ｏ５士３１）ｍｉＳ（８１ ± ５．８．ＯｎＶ４．８３７）ｍｉ，（１６．０ｎ１．Ｏ士０１）ｍｉＳ（１２士００）ｍｉ．Ｔｈｕｃｓｆｌｒｔ，ｏｅｗｅｋｓｒｉａａｅｏｅｍｏｔｕｖｖｌ．１ｎＶ１．８．８ｎｅｓｃｅｓｕａｅｎ－ｅｕｖｖｌｒｔ，ｎ－ｎｈｓｒｉａ
福建医药杂志２１００年６月第３２卷第３期
ＦｊｎＭｅ，Ｊｎ００ｕｉｄＪｕｅ２１，Ｖｏ３，Ｎｏａｌ２．
６３
单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨
福建医科大学第一临床医学院肝病中心（州３００）黄启明吴燕斌福５０５刘景丰邱明链
ｅａｉｇｄｆｉｕｔｓａｄｔｃｎｑｅ．ＭｅｈｄＡｏａｆ０ｄｌｌＤａｓｗｅｅａｏｔｄＴｈｄｌｓｅｔｂｉｈｄｗｉｅｒｔｎｉｆｌｅｎｅｈｉｕｓｃｉｔｏｓｔｔｌ０ａｕｔｍａｅＳｒｔｒｄｐｅ．ｅｍｏｅｏ２ｗａｓａｌｅｔｒ — ｓｈｆｒｄｔ — ｕｆｍｅｈｄｂｉｇｅｏｅａｏｎｏｂｅｏｅａｏｓＦｉｙｃｓｓｏａｒｈｔｐｃｌｅｒｎｐａｔｔｎｒｅ — ｏｍｅＷＯｃｆｔｏｙｓｎｌｐｒｔｒａｄｄｕｌｐｒｔｒ．ｆａｅｆｒｔｏｔｏｏｉｉｒｔａｓｌｎａｉｓｗｅｅｐｒｔｖｏｆｒｄｗｉｎｉｅｙａｈｇｏｐＲｅｕｔＩｉｇｅｏｅａｏｒｕｎｏｂｅｏｅａｏｓｇｏｐ，ｄｎｒｏｅａｉｎｔｍｅｒ — ｏｍｅｔｕａｄｄｅｅｅｃｒｕ．ｈｓｌｓｎｓｎｌｐｒｔｒｇｏｐａｄｄｕｌｐｒｔｒｒｕｏｏｐｒｔｉ，ｅｏ

大鼠原位肝移植模型的研究进展

症等几个方面仍需要进行大量的研究，稳定的动物实验模型的建立就故
显得至关重要，是研究这些问题的有效途径Ｌ。与其他实验动物相比，２］大鼠具有解剖结构类似于人类，易饲养，殖较快，于观察等优点，容繁便故大鼠肝移植模型是目前基础与临床中最常用的动物模型。大鼠肝移植术式模型大体的分型有大鼠原位肝移植；鼠异位肝移植；鼠慢性大大排斥反应的建立；他的模型（体积式、助性原位部分、心跳供体其减辅无等）３。本文仅对大鼠的原位肝移植实验研究的进展作一综述Ｌ］１大鼠模型的优点基础和临床的肝移植模型主要以鼠为造模对象，鼠原位肝移植模大型是目前最常用的动物模型。ＲＯＴＭ主要有以下优点：与较大的实Ｌ ① 验动物（、）比，管肝移植实验在技术上更容易实施，得益于显狗猪相尽但微外科的发展，助手术显微镜的放大，借使用精细的显微手术器械及缝合材料（管）对细小的组织进行精细手术，ＲＴＭ的建立成为可套，使ＯＬ能［。②有大批基因型明确的纯系大鼠供我们选择，近交系动物、Ｉ］如封闭群和杂交群等。③单克隆抗体可以特异和灵敏的鉴定大鼠在免疫排斥异以及免疫耐受方面起重要作用的淋巴细胞，们目前对大鼠的免疫人分子的认识越来越多。④ 大鼠繁殖快（娠期和哺乳期较短）成本低、妊、易于饲养、有较强的抗病能力，人的解剖结构类似。⑤ 建立的模型具和具有良好的重复性，济性，经并发症与大动物肝脏移植基本相同。２大鼠的麻醉动物模型的建立是在动物的麻醉状态下进行的，模型的建立过程在中，凡是能影响麻醉效果的因素都会对模型的存活率和成功率造成影响Ｉ。由于每种动物对不同麻醉药的反应，ｓ］以及不同剂量的维持效果不同，故在动物的麻醉过程中，应选择对动物机体影响较小、作用持续时间短，而且对实验结果影响小的的麻醉剂，而达到维持稳定的麻醉效果。从大鼠原位肝移植模型，麻醉用药的选择及麻醉深度的掌握是保证手术顺利进行的关键之一，时也是减少大鼠术中及围手术期死亡率的关键因同素之一。目前用于大鼠肝移植模型手术的麻醉药物种类较多，要有乙主醚、氯胺酮和戊巴比妥等，种麻醉药有各自的优缺点和应用范围Ｌ。每６Ｊ２１麻醉药的使用情况：鼠肝移植模型建立过程中，．大目前主要使用乙醚和氯胺酮两种麻醉剂。乙醚采用吸人式给药，由于其对呼吸道的刺激作用，造成呼吸困难甚至窒息，会因此在给药前，行肌注阿托品的要预处理Ｌ。氯胺酮，７Ｊ化学名是２（一氯苯基）一２一２甲胺基一环己酮盐酸盐，Ｄｍｉ９５年引入临床后，自ｏｎ１６ｏ至今仍是非巴比妥类静脉麻醉药镇痛效果唯一确定的麻醉药［巴比妥类麻醉药目前仍在大鼠肝移植模型的建立中使用。因其比较大的肝脏毒性，严重影响肝脏的功能和但会实验结果，故很少使用。彭勇［等在用改进的二袖套法制作大鼠模型的。］过程中，大鼠随机分为对照组、醚组、氯胺酮组、合氯醛组巴将乙水戊比妥组，观察每种麻醉剂的麻醉过程、大鼠生理和肝功能的影响以及对无肝期开始后的死亡率，出各种麻醉对肝移植大鼠均有明显影响，得但乙醚具有对生理、功影响小，肝期开始后死亡率低的优点，可作为肝无故制作大鼠原位肝移植模型的首选麻醉方法。国内外许多文献报导，氯胺酮在大鼠肝移植中的麻醉多见于供体，受体多用乙醚。就其原因，而是由于大鼠肝移植要经历无肝期这一特殊过程，肝 ��

大鼠原位肝移植中预防血管并发症的体会

１１１实验动物：洁级的健康Ｗｉａ雄性大鼠（．．清ｓｒｔ由山西省中医研究所提供）体质量２０３０ｇ，５－０。供受体术前不禁水。术前１禁食。２ｈ１１２自制实验器具：．．静脉穿刺套管针外套或５７，－Ｆｔ导Ｌ
山西医科大学（３０１栗彦琪０００）
山西省人民医院张或冯变喜
【摘
要】目的通过对 “ 二袖套法” 鼠肝移植模型的训练，大总结预防血管并发症的经验。方法
早期阶
段：采用经典 “ 袖套法” 二建立大鼠原位肝移植模型，实验总数１０例。观察术中及术后血管并发症的发生发展，５
１３改进方法．１３１器具的改进：自制带皮筋爪形小拉钩．Ｊ垫（０．．／背、１
月，我们采用经典的“ 二袖套法 ”３Ｊ立大鼠原位＿，建
肝移植模型，验总数１０例。自２０实５０２年ｌ０月至
２００７年１，们采用改进的方法建立模型，０月我实
大鼠原位肝移植模型是研究器官保存、肝脏缺
血再灌注、疫抑制剂、植排斥反应及免疫耐受免移机制等方面常用的动物模型 … 。由于大鼠体积小，血管细且薄，且缺乏有效的静脉补液及呼吸辅助并措施，以对手术操作技巧要求比较严格所２。血管
素５Ｌ的乳酸林格液从腹主动脉留置针灌注肝脏。供０Ｕ／肝的修整：修剪肝上下腔静脉、门静脉、肝下下腔静脉。安

裸大鼠人高转移肝癌皮下和原位移植模型的建立

色的肿瘤组织，表面呈结节状，质地较硬，独立
表１皮下移植裸大鼠体重和瘤体积变化
１．病理取材及形态学观察处死裸大鼠，肉眼．２６大体观察皮下和原位移植瘤生长部位、体积、质
地、活动度、有无胸腹水，肝、肺、肾、脾等
雌雄兼用，１０ｇ左右。由复旦大学附属公共卫生０临床中心提供［ＣＳＸＫ（）０５００］沪２０．０１（从美国Ｃａｌｓｈｒｅ
Ｒｖｒａｏａｏｉｓｉｅｂｒｔｒ引进）Ｌｅ。裸大鼠饲养于复旦大学附属公共卫生临床中心动物中心ＳＦ屏障系统中，饲Ｐ以高压灭菌水和辐照饲料，饲养室相对湿度（０± ５１）％，温度（２４２ ℃ ，光照１０２－）ｈ明暗交替。２
１３５５．４± １６．９
ｌ１４５．４± １８．８
液化，有弹性的实性瘤体，４周左右时瘤块增大，
实验动物与比较医学ＬｂｒｔｒｉｌｎｏａａｉｅｄｉａｏａｙｍａａｄｍｐｒｔｉｎｏＡｎＣｖＭｅｃｅ
２结果
２１皮下移植模型．表２原位移植裸大鼠体重变化后时间／周体重儋
１０８０．９± １３．７１４６１．１± １６．６
２１１裸大鼠及皮下瘤的生长情况．．
连续观察皮下
１６３ ± １２２．８．０
（）ｂ，依据公式Ｖ＝ｂ２计算肿瘤体积；ａＶ原位移植和大小，以腹部出现可触及的实体性包块作为成瘤标志。当裸大鼠出现明显消瘦、弓背、精神萎靡等衰竭体征时结束实验。

大鼠同种异体肾移植模型研究进展

大鼠同种异体肾移植模型研究进展目前临床肾移植已广泛在国内外开展，有关排斥反应机制、监测、预防和治疗等日益受到重视，不断有新的研究成果报道。

大鼠肾脏移植模型一直以来是研究器官移植和移植免疫学重要实验手段之一，故建立成功稳定的大鼠肾移植模型是器官移植基础研究的必要条件。

1建立大鼠肾移植模型的意义大鼠肾移植模型在移植免疫方面的研究具有其独特的优点。

首先，大动物如猪、狗等价格昂贵，成本高；进行一次动物实验要涉及手术人员、麻醉人员及护理人员等，协调困难；遗传背景不清楚，目前尚没有培育出明确的品系，不符合动物实验选择动物标准化的要求，故器官移植动物模型多倾向于小动物模型。

而大鼠繁殖快、数量多，价格便宜；已培育出了多种品系，如近交系、突变系、杂交群动物、封闭群动物等，封闭群里包括SD大鼠、Wistar大鼠等，可满足不同层次的需求；遗传背景清楚，有关的基因结构、RNA结构可在genebank中方便地检索，相关的试剂也能较容易得到。

故随着器官移植基础研究向着免疫学、分子生物学等前沿学科的不断深入，大鼠器官移植模型越来越显示其重要性。

2大鼠肾移植的血管吻合大鼠肾移植模型手术难度较大，整个术式关键环节就是血管的吻合。

最早的Fisher等同时阻断腹主动脉和腔静脉，采用供肾动、静脉端侧吻合于受体腹主动脉、腔静脉的方式将供体右肾异位移植于腹腔。

由于右肾动脉细、右肾静脉短，大大增加了该模型的制作难度。

且该方法在吻合血管时需阻断腹主动脉、腔静脉，对大鼠生理干扰大，尤其是腔静脉的阻断，易导致大鼠后半身血管形成血栓，死亡率高。

1971年，Fabre等对这一模型进行改进，采用供体主动脉、腔静脉分别与受体的腹主动脉、腔静脉行端侧吻合。

改进后的方法虽然血管吻合有所简化，但仍未解决阻断腔静脉所致的血栓问题，失败率仍高。

除了对Fisher的模型进行改进外，许多学者也创立了自己的方法。

Daniller等采用显微外科技术，将供肾动脉与受体肾动脉端端吻合，供肾静脉与腔静脉端侧吻合。

家兔自体肾移植模型的建立

家兔自体肾移植模型的建立郭骏;樊雪频;曹桂红;武夏明;张维涛;付春香【摘要】目的建立家兔自体肾移植模型用于肾移植的实验研究.方法腹部正中切口.游离出肾动脉开口上、下方各10 cm腹主动脉及肠系膜上动脉近段.用血管夹先后阻断腹主动脉下段、肠系膜上动脉近段及腹主动脉上段.用5.5号头皮针穿刺腹主动脉下段,接冷灌注管,以0℃～4℃含肝素(100 μ/m1)的乳酸林格氏液灌注肾脏.肾脏呈灰白色、肾静脉血色变浅后停止灌注,接着用血管夹将两侧肾蒂近端阻断.顺序松开腹主动脉下段、肠系膜上动脉近段及腹主动脉上段的血管夹,恢复血流.肾脏表面覆碎冰屑.切断肾动、静脉,按自体肾移植,原位吻合肾动、静脉,恢复肾脏血供,同时清除碎冰屑.逐层关闭腹部切口.结果术后20～40 min家兔完全苏醒,能行走、饮水.共完成家兔自体肾移植模型26例,其中2例死亡,成功率93%.由于实验的需要,分别于术后第4、7、14、28天处死实验兔.开腹观察两侧肾的大小、颜色、质地无明显差别.显微镜检查两侧肾的肾小球和肾小管未见明显变化.术后第7、14天测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)值,均在正常范围内.结论家兔自体肾移植模型制作简单、科研成本低,可用于肾移植的实验研究.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2008(029)010【总页数】3页(P754-756)【关键词】自体肾移植;家兔;动物模型【作者】郭骏;樊雪频;曹桂红;武夏明;张维涛;付春香【作者单位】山医学院附属医院,山东,泰安,271000;山医学院附属医院,山东,泰安,271000;山医学院附属医院,山东,泰安,271000;山医学院附属医院,山东,泰安,271000;山医学院附属医院,山东,泰安,271000;山医学院附属医院,山东,泰安,271000【正文语种】中文【中图分类】R256.5肾移植是临床各类器官移植中最成熟的器官移植，但肾移植仍有许多问题没有完全解决。

慢性肾炎实验动物模型研究进展

慢性肾炎实验动物模型研究进展尼日特;杨巧芳【摘要】慢性肾小球肾炎是临床常见的难治性多发性疾病,是导致慢性肾衰竭的重要原因之一,几种常见的慢性肾炎也随着相关研究的深入总结形成了相应的实验用动物模型:微小病变型肾小球肾炎(MCD)和局灶节段性肾小球硬化(FSGS)常用阿霉素肾炎模型和嘌呤霉素氨基核苷肾炎模型;系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)常选用BSA肾炎模型和Thy-1抗血清肾炎模型;膜性肾病(MN)常用Heymann肾炎模型和C-BSA肾病模型等.根据实验需要造模动物常选用家兔、大鼠、小鼠等.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2014(043)001【总页数】4页(P145-148)【关键词】慢性肾炎;动物模型;综述【作者】尼日特;杨巧芳【作者单位】010050 呼和浩特,内蒙古医科大学;010050 呼和浩特,内蒙古医科大学【正文语种】中文【中图分类】R692慢性肾炎 (chronic nephritic)是指以蛋白尿、血尿、水肿等为基本临床表现，可有不同程度的肾功能减退，起病方式各有不同，病情迁延，病变缓慢进展，最终将发展为慢性肾衰竭的一组肾小球疾病。

常见的慢性肾小球肾炎可分为微小病变性肾病、局灶节段性肾小球硬化、膜性肾病、系膜增生性肾病等。

本病病因和发病机制复杂，经过近百年的发展，随着人们对本病的研究的不断深入，学者们更多地认识到机体免疫系统在本病发病过程中的重要作用，研究发现免疫复合物(IC)在肾小球中沉积是肾小球肾炎致病的重要环节，肾小球基膜原位的免疫复合物形成，导致肾小球病变，导致肾病综合征。

围绕对肾小球疾病的不断的研究发现，发展产生了不同的动物实验模型，本文旨在围绕慢性肾炎实验研究中几种常用的动物模型近年来的实验发展进行综述。

一、常见的慢性肾炎及其实验模型1．微小病变型肾炎和局灶性节段性肾小球硬化:微小病变性肾病(minimal change disease，MCD)为常见的肾小球疾病。

脂肪肝模型大鼠自体原位肝移植后的脂质代谢变化

《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research文章编号:2095-4344(2018)36-05821-07 5821www.CRTER .org·研究原著·丁晨，男，1986年生，汉族，福建省南平市人，主要从事肝胆外科基础与临床方面的研究。

通讯作者：江艺，博士，教授，博士生导师，解放军南京军区福州总医院肝胆外科，福建省福州市 350025中图分类号:R318 文献标识码:B稿件接受：2018-08-07Ding Chen, Department of Hepatobiliary Surgery, the Third Affiliated Hospital of Fujian Medical University & Fujian Medical University Union Hospital, Fuzhou 350001, Fujian Province, ChinaCorresponding author: Jiang Yi, MD, Professor, Doctoral supervisor, Department of Hepatobiliary Surgery, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Fuzhou 350025, Fujian Province, China脂肪肝模型大鼠自体原位肝移植后的脂质代谢变化丁晨1，江艺2，潘凡2，蔡秋程2 (1福建医科大学附属第三医院，福建医科大学附属协和医院肝胆外科，福建省福州市 350001； 2解放军南京军区福州总医院肝胆外科，福建省福州市 350025)DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0560 ORCID: 0000-0002-9368-5525(丁晨)文章快速阅读：文题释义：自体肝移植：是指应用肝移植技术，使肝脏处于全离体或半离体情况下，在低温保存及低温持续灌注条件下，完成病灶的切除和余肝的修整，最后将修整好的余肝重新移植回体内的一种外科技术。

大鼠原位膀胱癌模型的建立与CT诊断价值

大鼠原位膀胱癌模型的建立与CT诊断价值唐小莹;潘春武;孙俊;黄蔚;王华枫;沈周俊【摘要】目的研究N-甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型的构建过程以及计算机断层扫描对大鼠原位膀胱癌的诊断价值.方法 50只SD大鼠随机分为两组,对照组A组15只,实验组B组35只.B组大鼠经尿道膀胱内灌注MNU每两周一次,每次2 mg,共4次.A组大鼠用生理盐水以同样的方法灌注.于第14周末对两组大鼠进行膀胱CT扫描诊断,并且处死后取膀胱组织行病理学观察.结果 B组28只大鼠CT扫描膀胱均见明显异常,表现为局部肿块突起或膀胱壁不规则增厚、密度不均,病理诊断均为膀胱癌.A组13只大鼠经CT扫描未发现膀胱肿瘤,病理检查未见肿瘤组织.结论 MNU可以诱导大鼠原位膀胱癌模型的建立.CT扫描可作为大鼠原位膀胱癌诊断的可靠方法,并能为肿瘤的化疗或放疗等后续实验提供更好的大鼠模型.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2010(018)001【总页数】4页(P6-8,彩2)【关键词】MNU;原位膀胱癌;CT诊断【作者】唐小莹;潘春武;孙俊;黄蔚;王华枫;沈周俊【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R737.14膀胱癌是我国泌尿系统中最高发的肿瘤,构建膀胱癌动物模型对于研究人类膀胱癌有着重要的意义。

N-甲基亚硝基脲(N-m ethyl-nitrosourea,MNU)作为化学致癌剂用于建立原位膀胱癌动物模型虽然在国内外已有研究和报道[1],但是模型建立后通常是应用处死后的病理学诊断来判断模型是否成功建立,从而无法对建模后的动物进一步行体内实验研究。

SD大鼠原位肝癌模型构建及影像学检查

SD大鼠原位肝癌模型构建及影像学检查李鑫;刘凤永;袁宏军;管阳;付金鑫;王茂强【摘要】目的探讨一种成瘤周期短、操作便捷、安全性高、适用于肝癌治疗研究的SD大鼠原位种植型肝癌模型制作方法,同时进行彩色超声、增强CT、MR等3种影像学检查和诊断.方法 20只SD大鼠随机分为McA-RH7777组和N1S1组,每组10只.称重后将McA-RH7777和N1S1肝癌细胞分别注入两组大鼠肝左中叶内,术后连续3 d腹腔注射青霉素(20万U/只)和地塞米松(2.5 mg/只),以抗感染和免疫抑制治疗.术后7 d,采用彩色超声、增强CT、MR鉴别肝脏肿瘤,记录模型鼠体重,取出肿瘤组织进行形态学观察和病理学检查.结果术后7 d,McA-RH7777组、N1S1组大鼠分别死亡2只、1只,影像学检查显示成活大鼠全部成瘤,建模成功率分别为80％(8/10)和90％(9/10),差异无统计学意义(P=0.86);大鼠体重分别减轻(50.00±24.93)g、(36.44±7.75)g;肿瘤体积分别为(316.43±265.84)mm3、(188.58±137.47)mm3.两组大鼠处死后,尸检结果与影像学检查一致;肉眼观察McA-RH7777肝癌外观呈团块状,N1S1肝癌呈结节状.HE染色显示McA-RH7777肝癌为高分化肝癌,N1S1肝癌为低分化肝癌.结论该方法能成功、高效地构建SD大鼠原位肝癌模型,同时通过不同影像学技术实现诊断和评价,为肿瘤介入治疗研究提供了一种可供选择的实验工具.【期刊名称】《介入放射学杂志》【年(卷),期】2018(027)012【总页数】5页(P1177-1181)【关键词】肝癌;大鼠;McA-RH7777肝癌细胞;N1S1肝癌细胞;动物模型;彩色超声;增强CT;磁共振成像【作者】李鑫;刘凤永;袁宏军;管阳;付金鑫;王茂强【作者单位】100853 北京解放军总医院介入放射科;100853 北京解放军总医院介入放射科;100853 北京解放军总医院介入放射科;100853 北京解放军总医院介入放射科;100853 北京解放军总医院介入放射科;100853 北京解放军总医院介入放射科【正文语种】中文【中图分类】R735.7目前临床上尚未出现原发性肝癌有效治疗方法，其发生、治疗、预后及进展等始终是医学研究热点和重点［1-2］。

大鼠肝脏移植模型制作

大鼠肝脏移植模型制作大鼠原位肝移植是研究器官保存、肝脏缺血再灌注损伤、免疫抑制剂、移植排斥反应以及免疫耐受机理等方面常用的动物模型。

最初由Lee在1973年报道，经过许多学者的改进，其手术基本稳定，根据肝上下腔静脉吻合方式，大鼠原位肝移植可分为“二袖套法”和“三袖套法”，下面简单的将大鼠肝脏移植的模型制作介绍一下。

一、手术器械显微外科手术器械包，手术显微镜1台，自制S拉钩（用橡皮筋一端带弯成S形大头针）4个，眼科剪1把，其它外科器械若干及纱布、棉球、棉片和橡皮条等。

二、供、受者大鼠的选择根据不同的研究目的选择不同的动物品系，在同种移植模型中，一般采用两种纯系健康大鼠，如Lewis大鼠，Brown Norway 大鼠（BN），DA大鼠等，国内应用Wistar，SD大鼠也比较多。

如果是异种移植可以选用豚鼠－大鼠，仓鼠－大鼠等不同品系的动物。

三、术前准备供、受者术前禁食14h，自由饮水，采用乙醚吸入麻醉麻醉的方法，提高手术的安全性，受者术前肌肉注射阿托品0.03mg，防治分泌物阻塞呼吸道。

四、供者手术麻醉成功后，经阴茎背静脉注射50U/ml肝素稀释液3.0ml，使供者全身肝素化。

十字切口入腹，经腹主动脉穿刺灌洗供肝；灌洗前，剪开膈肌，阻断腹主动脉，离断胸腔段肝上下腔静脉，灌洗至流出液澄清为止，约需灌洗液20～30ml。

游离肝下下腔静脉，分离结扎离断右肾静脉和右肾上腺静脉，自肠系膜上静脉置管，缓慢注入20ml含肝素的林格氏液，于右肾静脉下方离断肝下下腔静脉，剪开胆总管前壁，近肝端插入外径1.0mm，长4.0mm 的聚乙烯管约2.0mm（可用硬膜外导管制成），结扎固定后远肝端离断之，分离结扎离断肝固有动脉；游离门静脉，结扎离断其分支幽门静脉、脾静脉，于脾静脉下方离断门静脉，锐性分离肝周韧带，结扎左膈下静脉，绕肝上下腔静脉环切膈肌及其腱膜，保留2.0mm边缘，取下供肝置于4℃林格氏液中保存。

五、血管套管的准备供肝置4℃冰浴中，作血管套管放置。

大鼠胰腺原位灌注实验模型的建立及可行性研究

因素干扰，较准确评价研究因素对胰腺组织中胰岛
射麻醉，按文献卫操作步骤将胰腺与脾、胃和结肠等组织器官分离；在腹主动脉的腹腔干上方结扎，在肠系膜上动脉开口下方１ｅｍ处腹主动脉壁上剪一切口，置人灌注管并固定；于门静脉肝门分叉处剪一
由于整个机体与器官间的相互影组和对照组各５只，并进行下列处理：食禁
１，２ｈ自由饮水，用戊巴比妥钠（０ｍｇｋ）４／ｇ行腹腔注
进行某一器官的生理学和药理学研究非常困难。胰腺离体灌注作为一种体外技术可有效排除体内其他
中图分类号：５７Ｒ８文献标志码：Ｂ文章编号：０２２６２１）３０３－２１０－６Ｘ（０１４－０６０
模型较体外灌注模型更易于操作，且同样具备可定量、可重复、可动态观察等优点；为胰岛Ｂ细胞功能的研究提此
糖仪。
组大鼠放在３７℃恒温加热器上保温，按图１连接蠕动泵，用３先７℃ Ｍｏｉｅｒｂ．ｉｇｒＨＰＳ缓冲ｄｄＫｅｓＲｎｅＥＥｉｆ
液以１ｍ／ｉｌｍｎ流速预灌注４ｎ使胰腺组织的温０ｍｉ，
度和功能状态近似生理水平。其后观察组分别以低
基金项目：际糖尿病研究协会中欧合作基金资助项目（ＦＤ，国ＥＳ２０）天津市重大科技攻关项目（９ＣＤＦ４０）天津应用基础６０；０ＺＺＳ０５０；
及前沿技术研究计划重点项目（８ｃＤＪ２０。ＯＪｚＣ５ｏ）１３６
葡萄糖刺激的胰岛素分泌率。结果

细胞保护蛋白在大鼠慢性移植肾肾病模型中的表达

ＳｉｕｎＵｎｖｒｉｃａｉｅｓｔｈｙ；＊ｏｒｓｏｄｉｇａｔｏＺＣｒｅｐｎｎｕｈｒ，ＨＡＮＧａ－ａｇ，ｍａｌｚａｇａｇｎ２０ＹｈｇｎＥ－ｉ：ｈｎｙｎａｇ０３＠１６．０７，２￣７ＬＵ —ｉｇ，ｍａｌｌＹｉｎＥ－ｉ：ｐ
ｌｒｆｎｐｒｐｔｙＣＮ）ｏａｅｈｏａｈ（Ａ．ＭｅｏｓＳｒｇｅａｅｔｅａｇａｔｗｒｏｔｏｏｉｌａｓｌｔｄｉｔｉａｔｆｌｗｎｇｔｔｄｐａｕ－ｗｌｒｎｌｒｆｅｅｒｔｐｃｌｔｎｐａｅｏｓｒａｌｇｈＤｙａｒｓｈａｙｒｎｎＷｔｒｓｏｏｉ
ｔｅｐｏｅｕｅｏｏｉｅｍａａＴｈｘｒｓｎｏｙｏｒｔｔｅｐｏｅｓ２，－ｄＢ一（ｗｅｅｎｌｚｄｉｌａｔｉ— ｈｒｃｄｒｆｄｉＫａｄ．ｅｐｅｉｆｔｐｏｅｉｒｔｎ０ＨＯ１ｄ）ＬｒａａｅａｆｋｍｆｄｅｓｏｃｃｖｉＡｎａｙｎｌｇｅｄｒｄ
重庆维普
・
５２・２
山西医科大学学报（ｈｎｉｅｉ）２０ＪＳａｘｄＵｎｖ０８年６月，３（Ｍ９６
文章编号：１０ —６１（０８０ —０２０７６１２０）６５２—０４
细胞保护蛋白在大鼠慢性移植肾肾病模型中的表达
的发生、展。发
细胞保护基因高表达有利于阻止慢性移植肾肾病
关键词：慢性移植肾肾病；细胞保护蛋白；Ａ０ＨＯ１ＢｌＬ２；－；ｅＸ —

大鼠同种异体原位肾移植动物模型的建立

ＣｌｆａａｅＡｓｃ１８，３：４—２．ｅｔＰｌｔｓｏ，９９２２１５
［］ｎＪＤｒａｏ，０８４（）：８Ｊ．Ｉｔｅｍｔ２０，７２１３—６ｌ．
诸禹平，，男教授，任医师，士生导师，任作者，主硕责Ｅ
ｍａｌｚｕｐｎｒｖｐ．ｉａｃｎｉ：ｈｙ — ｌ＠ｉｓｎ．ｏ
立已久，但是在该模型上作进一步研究的报道却较
少，因此我们建立了一种稳定的大鼠原位肾移植动
ｄｃｅｓｄｆｒｃｔＪ．ＪｎｅｅｏＣｔｋｎＲｓ２０，７ｅｒａｅｂｏｙｅｉｓ［］Ｉｔｒｒｎｙｏｉｅｅ，０７２ｆ
（】９１—３．１）：２０
ＬｅＪＨ，ＫｉＳＥ，ＬｅＡＹ．Ｅｆｃｓｏｎｅｅｏ —ｌｈ２ｂｏｅｅｍｅｆｔｆｉｔｒｒｎａｐａｎｋ — ｅｆ
安徽医科大学学报
ＡｔｎｖｒｔｔｄｃａｉＡｈｉ２０ｃ；３５ｃＵｉｓａｉＭｅｉｎｌｎｕ０８Ｏｔ４（）ａｅｉｓｉｓ
。２５３・
大鼠同种异体原位肾移植动物模型的建立
项
摘要目的
平，禹平，诸陈
吴，峻，肖黄
涛
治腭裂术后裸露骨面瘢痕形成的实际疗效。参考文献
［］１
Ｇｉ，ｕａａ，ａａｉｍａＨＳｎｋｗａＨＡｒｋｋＫ，ｔａ．Ａｉｔｌｇｃｌｓｕｙｏｅ１ｈｓｏｏｉａｔｄｎ

两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进

两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进作者：李军，窦科峰，赵青川，张洪涛，孔亚林，张福琴【关键词】原位肝移植Establishment and improvement of rat orthotopic liver transplantation model with twocuff technique【Abstract】 AIM: To improve the model of rat orthotopic liver transplantation and study the rates of success and longterm survival of the model. METHODS: On the basis of twocuff technique of Kamada, weve improved the techniques of separating, perfusing donor liver, the shearing and anastomosis of the superior and inferior caval veins, the bile duct anastomosis, and so on. RESULTS: Operation had been performed 80 times with improved techniques and 92 times with conventional techniques. In contrast to conventional techniques, the improved techniques reduced the average time of donor operation and that of recipients to （±）min and (±) min（P<）, elevated 48hour survival rate to %(73/80) and 1week survival rate to %(70/80)（P<）. CONCLUSION: The improved techniques have raised the quality of donor liver and the success rate of the model.【Keywords】 orthotopic liver transplantation; rat; model; improvement【摘要】目的: 改进两套袖法大鼠原位肝移植模型，研究其手术成功率和远期存活率. 方法：在Kamada两套袖法基础上,着重对供肝分离、灌注、肝上下腔静脉切取，肝上下腔静脉吻合，胆管吻合等手术方法作了进一步改进. 结果：改进方法共施行手术80次，与以往92次传统手术法相比，供体手术时间（±）min和受体手术时间(±) min缩短（P<），48 h存活率% (73/80)和1 wk存活率% (70/80)明显提高（P<）. 结论：改进的两套袖法大鼠原位肝移植能明显提高供肝的质量和受体手术成功率.【关键词】原位肝移植；大鼠；模型；改进0引言大鼠原位肝移植是肝移植基础研究的理想模型. 1973年，Lee等首次提出“缝合法”大鼠原位肝移植［1］，此后，二套袖法(门脉、肝下下腔静脉套袖吻合)、三套袖法(门脉、肝上下腔静脉、肝下下腔静脉均用套袖吻合) 及各种改良方法相继出现［2-4］. 目前，二套袖法因成功率高已成为主要建模方法,但由于操作复杂，影响成功的因素多，故而难以推广应用. 我们在传统二套袖法基础上进行改进, 成功建立了模型，降低了其制作难度，并提高了手术成功率.1材料和方法材料雄性SD大鼠160只,体质量200～250 g(购于第四军医大学实验动物中心) , 受体体质量略重于供体（30 g左右），供、受体术前12 h禁食. 自制聚乙烯袖套:门脉袖套内径～ mm,肝下下腔静脉袖套内径～ mm，胆管插管由硬膜外麻醉管制成，长～ mm. 双极电凝器, 上海手术器械厂显微外科手术器械包,乙醚麻醉筒，清洁手术.方法供体手术术前肌注阿托品～ mg，乙醚吸入麻醉，仰卧位,背部垫1 mL注射器作为腰桥. 取上腹部大十字切口，上至剑突，下至耻骨联合，左右至腋后线. 进腹后, 暂不分离肝脏. 将肠管推向左下腹，暴露第一肝门及肝下下腔静脉. 将尾状叶推向左侧，显露右肾上腺，电灼切断肾上腺静脉. 分离右肾静脉与肝下下腔静脉. 结扎切断右肾蒂，下腔静脉游离完成. 游离胆管，尽量保留周围组织，以防术后缺血坏死，在肝管汇合部远端 cm处剪开胆总管前壁,向近端插入支撑管,丝线结扎并保留. 插管前可用显微镊轻扩胆管，注意插入不要过深，以防堵塞盘状乳头叶胆管. 于下腔静脉远端注射2 mL肝素生理盐水(25 U/mL)全身肝素化. 结扎切断幽门静脉，在门脉左侧结扎肝固有动脉. 阻断肠系膜上静脉远端，近端插入自制灌注管，立即用0～4℃肝素生理盐水(5 U/mL)经输液器匀速灌注. 剪开下腔静脉远端及肝上下腔静脉胸段，使灌注液顺利流出，同时向肝脏淋撒0～4℃生理盐水降温. 待肝脏变成土黄色后，剪断肝下下腔静脉、门静脉，残端尽量留长. 由下向上剪断肝周韧带，直至肝上下腔静脉. 靠肝脏缝扎膈肌静脉，略微分离肝上下腔静脉后方组织，轻轻下牵肝脏，“一剪法”剪下肝上下腔静脉，使其不带隔肌组织.供肝修整供肝置于0～4℃生理盐水中. 选取口径合适套管，管柄统一置于血管前壁用以定位，将门静脉牵入套管中，血管夹固定套管和血管，夹柄部固定. 外翻血管套在袖套上，丝线固定. 操作中注意避免血管扭转. 同法处理肝下下腔静脉. 肝上下腔静脉无需修整,在其左右侧角各缝吊80缝线,备吻合时用. 修整完毕后置4℃冰箱中保存.受体手术术前处置同供体. 取上腹部弧形切口，电灼切开肌肉. 剪断肝周韧带, 缝扎左膈静脉，电灼离断肝食管间血管及右肾上腺静脉,适当分离肝下下腔静脉至右肾静脉汇入处. 于胆管汇合处上方切断肝管，将左肝管于汇入处斜行剪除. 切断肝动脉. 分离门脉至幽门静脉处. 阻断肝下下腔、门静脉. 于门脉左右分支处穿刺,推平衡盐2 mL驱血,至肝脏变为土黄色. 用自制血管夹连带部分膈肌阻断肝上下腔静脉. 下牵肝脏,剪断肝上下腔,保留足够长度残端. 剪断门脉时保留左右分支，肝下下腔残端保留部分肝组织. 取出肝脏，撤除麻醉，原位放入供肝,肝前、后放湿沙布. 将肝上下腔两侧吊线与受体静脉左右两端内进外出缝合打结，然后从左至右连续外翻缝合肝上下腔后壁,至右侧角打结，同理缝合静脉前壁. 显露第一肝门，于受体门脉左右分支缝牵引线，向头侧牵开，于分支汇合处剪开其前壁，松血管夹排除少量血液，供肝门脉套入受体门脉中,丝线固定,套入同时冲洗吻合口. 开放门脉,肝上下腔静脉,结束无肝期. 温生理盐水腹腔复温. 此时肝脏迅速充血，肠管淤血减轻,数分钟即可见胆汁流出. 若有局部灌注不良区可通过按摩手段改善. 同法完成肝下下腔吻合. 用1∶5～7的碳酸氢钠和乳酸林格液2 mL在肝下下腔和左肾静脉分叉平面下方注入补液，可以稀释血液并对抗无肝期造成的酸中毒，还可以增加血容量［5］. 冲洗胆管支撑管及受体胆管，供肝胆管结扎线向下牵引固定后，支撑管套入受体胆管中，供受体胆管结扎线拉拢打结. 大膜覆盖胆管吻合处. 冲洗腹腔,全层连续缝合腹壁切口. 术后光照6 h保暖，定期皮下补充平衡盐. 24 h后可随意进食.统计学处理：采用SPSS 统计软件分析数据，各组资料数据用x±s表示,均数间比较采用u检验,存活率间采用χ2检验.P<表示差异有显著性.图1“一剪法”供肝切取示意图（略）图2改进的胆管修剪法示意图（略）2结果按照以上改进方法共行80次手术. 供体手术时间(±)min，受体手术需(±)min，供肝热缺血0 min,冷缺血(±) min，修肝需(±) min,安装袖套(±) min. 肝上下腔静脉吻合(±)min,门脉和肝下下腔静脉吻合各需(±)min, 无肝期(±)min,胆管吻合(±)min. 48 h存活率%(73/80),1 wk存活率%(70/80). 术后48 h内死亡为手术失败, 共计7例. 肝上下腔吻合口出血3例, 门脉袖套脱落出血及血栓各1例, 胆道支撑管脱出1例, 肺栓塞1例. 术后第3天肺部感染死亡1例, 第5日胆管坏死、胆漏2例. 其余均存活1 wk以上. 以往采用Kamada 传统方法共行92次手术，供体手术(±) min，受体手术(±)min，48 h存活率%（72/92）,1 wk存活率%（68/92）. 两组供、受体手术时间及存活率间差异显著(P<).3讨论本实验通过改进原有方法，明显提高了模型成功率，总结如下：①采用类似人肝移植手术切口，供体采用上腹部大十字切口，受体采用上腹部弧形切口. 术野显露充分，无需腹壁牵开器，能很好的满足手术需要. ②大鼠肝脏质地娇嫩，过多翻动亦可引起损伤. 提高供肝质量关键之一在于减少术中翻动. 目前切肝时多先游离肝周组织，然后灌注. 我们在取肝时先不游离，肝脏保持原位灌洗. 切肝时利用下腔静脉远端和胆管结扎线作牵引，不触及肝脏，由下向上锐性剪取，因而减小了损伤机会，供肝质量明显提高. ③直接、简便快速的灌洗是获得良好供肝的重要保证. 我们采用门脉灌洗法. 经肝下下腔远端行全身肝素化，为减少热缺血时间，幽门静脉、脾静脉及肝动脉待灌洗前再结扎，同时用冰盐水使肝脏迅速降温. 灌注管用小儿头皮针塑料管，前端剪成斜面制成，经输液器匀速灌注，液面高度距操作台40 cm,灌注速度约40～50滴/min（<3 mL/min），共约10～20 mL盐水. 目前亦有学者采用经腹主动脉灌注，认为可起到双重灌注效果［6］. 我们也试用过该法，但因操作较复杂，明显增加热缺血时间，供肝质量未见明显改善. ④传统供肝切取均保留隔肌，待后修整. 我们处理肝上下腔时略微分离其后组织，轻轻下牵肝脏，眼科剪紧贴隔肌“一剪法”剪下肝上下腔，使其不带隔肌环(图1). 此法切取后肝上下腔可保留足够长度，残端整齐，吻合口有足够大小，无需修整，明显缩短了修肝及冷缺血时间，同时也保证了高质量的吻合. ⑤供肝修整. 修肝的关键在于避免血管扭曲. 静脉周围组织应尽量剥干净，以防上套管后管腔狭窄. 根据右肾静脉、幽门静脉结扎线位置辩明血管方向. 套管柄统一置于血管前方定位. 上完套管后向其内推少量盐水，血管应充盈良好，无扭曲等. ⑥受体自身输血. 大鼠血容量少，出血总量超过2～3 mL者术后极难存活. 为避免切肝后回心血量骤减，阻断肝上下腔静脉前，在门静脉左右分支处穿刺推注平衡盐液2 mL，可驱使1～2 mL肝内血液进入体循环，类似于自体血液回输，可补充血容量，增加手术耐受性，利于防止血栓形成. ⑦肝上下腔吻合是受体存活的关键，决定了无肝期的长短. 无肝期超过26 min则难以存活. 高质量吻合的前提在于充分的术野显露. 大鼠膈下空间小而深，不利显露. 我们用注射器作为腰桥，使其背部弓起，肝下垫纱布，稍向下牵，同时通过调整肝上阻断钳位置来保证静脉端的对合. 采取不保留隔肌环连续外翻法吻合静脉前后壁，边距约1 mm，针距约2 mm，针脚均匀，保证静脉内膜光整. 左右侧角是术后出血的常见部位，应多缝几针加强. 本实验术后出血率仅为％. 有学者也采用带膈肌环的静脉吻合［7］，但缝合时进出针困难，吻合后内膜欠光整，狭窄、阻塞等发生较多. ⑧门脉及肝下下腔吻合. 注意静脉吻合口的准备，受体门脉应保留左右分支，肝下下腔应保留少量肝组织（静脉口可自动张开），吻合时辨清方向，先将静脉左右角缝线牵引，向头侧牵开固定，松血管夹排除少量血液及血栓，然后牵开其前壁，夹住套管柄套入，同时淋撒肝素生理盐水，以防气泡进入. ⑨胆道重建. 大鼠胆管细，吻合难度大. 传统法吻合口位于胆总管处，位置低，开口小，术后插管易脱出. 我们在供肝切取时于供体左肝管汇入处斜行剪开，在此进行吻合，提高了吻合口的位置，且扩大了胆管开口，提高了吻合速度及成功率，避免了反复插管对胆道的损伤(图2). 吻合完成后，可按Tanaka 等［8］的方法，将胆管支架管用大膜覆盖后再固定在门脉袖套上，可避免术后胆总管滑脱或扭曲成角造成的梗阻及胆漏. 总之, 高质量的供肝获取，熟练的吻合技术，尽量缩短无肝期是决定成败的关键. 改进的术式操作简便,成功率高,大大方便了其普及应用.【参考文献】［1］ Lee S, Charters AC, Chandler JG, et al. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat［J］.Transplantation,1973,16(6):664-669.［2］ Kamada N,Calne RY. Orthotopic liver transplantation in the rat. Techniques using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage ［J］.Transplantation,1979,28(1):47-50.［3］ Inoue S, Tahara K, Shimizu H, et al. Rat liver transplantation for total vascular reconstruction, using a suture method［J］. Microsurgery,20XX,23(5):470-475.［4］ Tan F, Chen Z, Zhao Y, et al. Novel technique for suprahepatic vena cava reconstruction in rat orthotopic liver transplantation ［J］. Microsurgery， 20XX,25(7):556-560.［5］刘金彪,郑树国,张玉君,等. 提高大鼠原位肝移植手术质量的技巧和注意事项［J］. 中华器官移植植杂志,20XX, 26(8): 500-502.［6］马毅,何晓顺,陈规划.大鼠原位肝移植模型的手术技巧及并发症的预防［J］.中华显微外科杂志，20XX,26(1)：45-47.［7］徐峰,杨甲梅,阚彤,等. 改良Kamada法大鼠原位肝移植模型的建立［J］. 中华肝胆外科杂志,20XX,7(12):758-759.［8］ Tanaka H, Hashizume K, Enosawa S, et al. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: A technical innovation［J］. J Surg Res, 20XX,110(2):409-412。

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中国组织工程研究与临床康复第15卷第18期 2011–04–30出版Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research April 30, 2011 Vol.15, No.18 ISSN 1673-8225 CN 21-1539/R CODEN: ZLKHAH3347 Department of Urology, Affiliated Hospital, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, ChinaMai Hai-xing★, Master, Departmentof Urology, Affiliated Hospital, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China maimark24@ Correspondence to: Chen Li-jun, Doctor, Professor, Master’s supervisor, Department of Urology, Affiliated Hospital, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China chenlijun829@ Received: 2010-10-26 Accepted: 2010-12-02解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科，北京市100071麦海星★，男，1981年生，广东省阳江市人，汉族，2008年解放军第四军医大学毕业，硕士，主要从事肾脏移植的研究。

maimark24@ 通讯作者：陈立军，博士，教授，硕士生导师，解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科，北京市100071 chenlijun829@ 中图分类号:R617文献标识码:B文章编号:1673-8225 (2011)18-03347-04收稿日期：2010-10-26 修回日期：2010-12-02 (20101026009/W • W)大鼠原位肾脏移植模型的建立★麦海星，曲楠，赵立，黄晨，王亚林，李学超，李建涛，陈立军Rat models of orthotopic kidney transplantationMai Hai-xing, Qu Nan, Zhao Li, Huan Chen, Wang Ya-lin, Li Xue-chao, Li Jian-tao, Chen Li-junAbstractBACKGROUND:There are many ways to prepare kidney transplantation models in rats; however, there are still many problems about operation time, transplantation effect and so on.OBJECTIVE: To study the microsurgical technique of establishing a reliable rat model of orthotopic kidney transplantation. METHODS: Kidney transplantation was performed from SD to Wistar strain (allogeneic),the donor’s artery and renal vein were put on the self-make rubber septum and underwent the end to end anastomosis surgeon with the receptor’s arteriae renalis and renal vein. After that, the donor’s bladder valva was inosculated with the receptor’s bladder. All the rats were divided into two groups: control group and Cyclosporin A (CsA) group, each group included 30 rats. The control group received 1 mL D-hanks each day after transplantation; the CsA group received subcutaneous injection of CsA for 15 mg/kg. The serum creatinine levels were observed at days 3, 5 and 10 after transplantation, pathological changes were also observed at 10 days after transplantation.RESULTS AND CONCLUSION: Rat orthotopic kidney transplantation was performed in 60 rats, and the successful rate was 85%. The serum creatinine level in the CsA group was lower than that in the control group (P < 0.05), but the survival time in the CsA group was longer than that in the control group (P < 0.05). Allografts of the control group exhibited typical severe acute rejection. It is indicated that this rat model of kidney transplantation is a reliable model with good reproducibility and high achievement ratio.Mai HX, Qu N, Zhao L, Huan C, Wang YL, Li XC, Li JT, Chen LJ.Rat models of orthotopic kidney transplantation. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu. 2011;15(18): 3347-3350. [ ]摘要背景：目前已有多种大鼠肾移植模型建模方式,但在移植时间、移植效果等方面都存在各种问题。

目的：探讨建立稳定、可靠的大鼠原位肾脏移植模型的方法。

方法：以SD大鼠为供体Wistar大鼠为受体行原位肾移植术。

供体肾动脉、肾静脉在自制橡胶垫片上分别与受体的肾动脉、肾静脉端端吻合，供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合。

将实验动物随机分为2组，对照组移植后每日腹腔内输注1 mL D-hanks 液；环孢素A组移植后每日皮下注射环孢素A 15 mg/kg。

记录大鼠生存时间并于移植后第3，5，10天测定血肌酐值，移植后第10天，光镜下观察移植肾病理改变。

结果与结论：大鼠原位肾脏移植成功率为85%。

移植后第5，10天环孢素A组血清肌酐值显著低于对照组(P < 0.05)。

环孢素A组大鼠肾移植后存活天数明显长于对照组(P < 0.05)，移植肾病理可见排斥明显减轻。

提示该模型稳定性强、重复性好，具有较高的成功率。

关键词：模型，动物；肾；移植；显微外科；大鼠doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.18.028麦海星，曲楠，赵立，黄晨，王亚林，李学超，李建涛，陈立军.大鼠原位肾脏移植模型的建立[J].中国组织工程研究与临床康复，2011，15(18):3347-3350. [http://www.crte ]0 引言大鼠是目前器官移植实验中最常用的实验动物[1-5]。

由于大鼠的肾血管短，手术视野小，端端吻合难度较大，因而以往实验大多采用端侧吻合，但这须阻断大鼠体循环，导致其下半身在吻合期间处于缺血状态。

当开放血管夹后，将发生严重的缺血-再灌注损伤[6-9]。

有的方法采用带有与供肾动脉和肾静脉相连的主动脉和下腔静脉片，分别与受者肾动脉、肾静脉端端吻合，膀胱与膀胱吻合，但术中往往发现主动脉与肾动脉管径相差甚远，吻合后容易漏血。

另一种方法利用供、受体动、静脉袖口式套叠，此方法提高了受体的存活率并缩短了手术时间，但因所用的套管管径有限，在翻转血管壁形成袖口时，使血管腔变狭小，影响移植肾脏血流的恢复，腹腔静脉与肾静脉作端端吻合时，因静脉壁薄弱常引起静脉壁撕裂而导致手术失败。

不阻断大鼠体循环的肾血管端端吻合原位肾移植技术的建立，避免了上述的缺点，采用端端吻合法减少了供肾的缺血-再灌注损伤，术后动物的存活率较采用端侧吻合者有明显提高[10-12]。

实验采用供体肾动脉、肾静脉分别与受体的肾动脉、肾静脉端端吻合，供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合的方法。

施行大鼠肾移植。

麦海星，等. 大鼠原位肾脏移植模型的建立P .O. Box 1200, Shenyang 110004 3348www.CRTER .org1 材料和方法设计：单一样本观察。

时间及地点：实验于2008-01/2009-01在解放军第四军医大学动物实验中心完成，生物安全的防护水平， P4，国家级重点实验室。

材料：健康成年雄性的清洁级SD 大鼠60 只，体质量250~300 g ；Wistar 大鼠60只，饲养条件符合SPF 标准。

动物由解放军第四军医大学实验动物中心提供。

器械及试剂：自制肾动静脉吻合用的无菌黄色或绿色橡胶垫片采用彩色气球先以生理盐水冲洗，戊二醛浸泡消毒，再剪成6 cm×6 cm 的小片，一端修成半圆形。

实验方法：供受体各60只，均在术前禁食12 h ，自由饮水，10 g/L 戊巴比妥钠30 mg/kg 剂量腹腔麻醉。

麻醉效果满意后，仰卧，背部放置背垫1 块，四肢及牙齿5 点固定于鼠板上，20 g/L 碘伏常规消毒，清洁手术[13-15]。

供体处理：麻醉后，动物取仰卧位，消毒术区皮肤。

取腹部正中直切口，上至剑突下至耻骨联合，逐层进入腹腔。