食品中合成着色剂测定
高效液相色谱法同时测定食品10种合成着色剂
分析与检测高效液相色谱法同时测定食品10种合成着色剂□罗长琴重庆市万州食品药品检验所摘要：在食品工业发展过程中不可避免地要使用添加剂，其中合成着色剂因其性质稳定以及色彩明亮等具有广泛的 应用空间。
人们长期食用合成着色剂对身体具有一定的危害，因此应当对此进行控制。
本文选取了一定样本与试剂，运用 高效液相色谱法同时测定了食品中含有的10种合成着色剂，得到了比较满意的实验效果。
关键词：高效液相色谱法；食品；合成着色剂1材料选择与方法1.1仪器选择与试剂本次实验中选择的仪器是高效谱相色谱仪。
合成着色剂的标液为曰落 黄、亮蓝、柠檬黄、苋菜红以及胭脂 红，为0.5 mg/mL。
80%的诱惑红为 SIGMA-ALDRICH。
甲醛是液相色谱淋 洗液，60 m L的甲醒与40 m L的甲酸 进行混合，蒸馏水与20%的柠檬溶液 进行调节，将p H值调为6。
其他选择 的试剂是分析纯。
1.2溶液配制方法进行不同浓度的标准物质储备液的配制工作，喹啉黄为0.97 mg/mL，亮蓝为0.25mg/mL，日落黄、柠檬黄、靛蓝、胭脂红、胭脂红与苋菜红为0.5 mL,新红为0.75 mg/mL，诱惑红 为0.8mg/mL,选取2m L的储备液放置到50 m L的星瓶之中，加水混合 均匀以后将其配制成标准溶液。
基于 此绘制相应的峰面积与标准曲线。
1.3样品处理方法在样品处理方法上，首先配制样 品的溶液，根据聚酰胺吸附法进行色 素的提取工作，样品浓缩之后加水进 行溶解定容，在包括赤藓红的样品中 运用50%的甲醇进行溶解定容，之后 进行HPLC分析。
1.4液相色谱分析条件本次实验中的色谱柱为Agilent-ZORBAXSB-C 5n m, 4.6 m m X 250 mm,有机相为甲I S乙腈(3 :1), 进行梯度洗脱工作，通过多通道检测，最终达到的波长：亮蓝为625 nm，靛蓝为290 nm,新红、赤藓红与苋菜红为529 nm，柠檬黄与喹啉黄为428 nm，胭脂红与诱惑红为507 nm，日落黄为483 nm。
团体标准编制说明
团体标准编制说明《谷物食品中合成着色剂的测定–碳酸氢钠提取法》工作简况一、任务来源根据检测机构和质控样生产公司对谷物类食品中合成着色剂测定标准的需求，由宁夏粮油产品质量检测中心、江苏安舜技术服务有限公司、宁夏农林科学院和宁夏化学分析测试协会联合提出《谷物食品中合成着色剂的测定–碳酸氢钠提取法》的申请，由宁夏化学分析测试协会组织专家审议通过，于2020年11月提出了《谷物食品中合成着色剂的测定–碳酸氢钠提取法》的编制申请并获批，由申请单位宁夏粮油产品质量检测中心组织实施，筹备标准的编写。
二、标准的起草单位及起草人本标准起草单位：宁夏回族自治区粮油产品质量检测中心、江苏安舜技术服务有限公司、宁夏农林科学院、宁夏化学分析测试协会。
本标准主要起草人：张春娥、廖若宇、刘新保、孙悦、胡海祥，孙华，郭雨、袁海静、王芳、高晖、赵静、张小飞。
三、编制背景柠檬黄和日落黄的价格低廉, 作为食品药品的染色剂能使食品外观呈现出与蛋黄相差无几、诱人的黄色, 虽然我国《食品添加剂使用标准》规定了谷物制品中柠檬黄和日落黄的使用限量，但是长期过量食用会对人体产生危害。
柠檬黄是一种食品常用的食品添加剂，添加适量柠檬黄的食品颜色饱满鲜亮，常用于饮料、蜜饯、酱腌菜等食品中。
据报道，目前有不法商贩将柠檬黄添加到馒头制品中，制作出颜色鲜亮的掺假“玉米馒头”，柠檬黄是一种水溶性的偶氮染料，长期食用将对大众的身体健康产生负面影响。
近年来的“毒豆芽”和“染色馒头”事件表明，不法商贩会在食品中非法添加对人体有害的工业合成色素从而谋取利益。
因此，相关监管部门应加大对食品中的色素是否按相关规定添加使用，亟需构建精准的色素检测技术。
目前的国标检测方法在饮料和酒类等液体中色素的检测中应用良好，检测样品加标回收率高，但是在谷物加工品和面制品中色素提取工艺受限，样品加标回收率低。
而且，在食品安全风险监测任务中，存在样品种类多，检测内容多样化而标准适用范围单一的问题，标准不适用于规定检测任务的现象，可能会存在含有违禁成分或是添加剂超出 GB2760-2014 规定的最大使用限量标准要求而检不出的隐患。
食品中9种人工合成着色剂的检测
广东化工2019年第11期·196·第46卷总第397期食品中9种人工合成着色剂的检测吴嘉彦，戴辉(品测(上海)检测科技有限公司，上海201108)The Determination of Nine Synthetic Colors in FoodWu Jiayan,Dai Hui(Pince Testing Co.,Ltd.,Shanghai201108,China)Abstract:This study was based on the national standard method,and use ammonia-70%methanol(1︰99V/V)as extract solvent.Sample solution was purified by weak anion solid phase extraction,and finally carried out by the ultra high pressure liquid chromatography with ultraviolet detector.Analyses were separated by gradient elution and measured by the different waves.Nine types synthetic colors in food that could be measured simultaneously.The limitation of determination was0.2mg/kg,the range of calibration curves was0.2~10mg/L,the range of recoveries was85.0%~110.0%and the repeatability was2.0%~8.9%).Keywards:synthetic colors；colors in food；ultra high pressure liquid chromatography食品着色剂，又称食用色素，是种以给食品着色为主要目的的添加剂。
食品中6种人工合成着色剂的快速检测
联 系人 简 介 ： 恒 （９ ６ ） 女 ， ： 帅 ， 士 ， 究 刘 １７ ， ：程 ｌ 顾 研
色谱 分 析 。 Ｅ ｉ ｍａ
１６ ２
化 学研 究 与 应 用
第２ ３卷
测波长 在 可见 光 区 ， １ ． ％ 亚 铁 氰 化 钾 溶 液及 以 ０６
（ ｈ ｎ ｄ ｒｄ ｃ ｕ ｌｙＳ ｐ ｒ ｓ ｎ＆ ｈｓ ｃ ｔ ｎ ｌｓ ｔ Ｃ ｗ ｇ ｕ６ ０ ４ ，Ｃ ｉ ） Ｃ ｅ ｇ ｕ Ｐｏ ｕ ｔ ａ ｔ ｕ ｅｖ ｉ Ｑ ｉ ｉｅ ｉ ｃｉ ｎ ｜ｍｅ ｔ ｎ ｄ １ ０ １ ｈｎ ｐ ｏ ｉ ａ
Ａｂ ￣ ｃ ｔ Ａ ｏ ｅ ｍｅｈ ｄ ｏ ｆ ｓ ｅｅ ｍｉａ ｉｎ ｆ ｓｘ ｉｄ ｏ ｙ ｔ ｅ ｉ ｏ ） ｎ ｓ ｎ ｏ ｄ ｌ Ｉｇ ｐ ｒ ｒ ｎ ｅ ｉ ｕｄ ｓ ｒ ； ： ｎ ｖ ｌ ｃ ｔｏ ｆ ｒ ａ ｔ ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｏ ｉ ｋ ｎ ｓ ｆ ｓ ｎ ｈ ｔ ｃ ｂｒ ｔ ｉ ｆ ｏ ｓ ’ ｄ ｈ ｅｆ ｍａ ｃ ｌ ｉ ｏ ｃ ａ ｙ ｏ ｑ
成 为色 素分 析 的主 流 。 高效 液 色 谱 法 是 一 种 很 好 的分 离技 术 ， 用 高 效 液 相 色 谱 法 测定 人 １ 合 应 ： 成着 色剂 准 确 度 高 、 法 灵 敏 、 现 性 好 ， 国家 方 砸 为 标 准方 法 ， 样 品 的前 处 理 技 术 广 泛 采 媚 的 是 色 但
在 可见 光 ， 样 品 中 的杂 质 在 可 见 光 区 一般 元 且
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小 的检 测 方 法 ， 保 障 食 品 安 全 具 有 深远 的 意 对
液相色谱法测定食品中合成着色剂
液相色谱法测定食品中合成着色剂作者：***来源：《食品安全导刊·下》2024年第05期摘要：目的：建立一种液相色谱法测定食品中合成着色剂的方法。
方法：用乙醇氨水溶液提取食品中的合成着色剂，经固相萃取柱净化后，用液相色谱仪（配二極管阵列检测器）测定，外标法定量。
结果：11种合成着色剂在0.2～10.0 μg·mL-1线性关系良好，线性相关系数为0.999 4～1.000 0，加标回收率为94.2%～109.6%，相对标准偏差在0.55%～5.52%。
柠檬黄、喹啉黄、日落黄、胭脂红、新红和赤藓红的检出限均为0.5 mg·kg-1，定量限均为1.5 mg·kg-1；苋菜红、诱惑红、亮蓝、酸性红和靛蓝的检出限均为0.3 mg·kg-1，定量限均为1.0 mg·kg-1。
结论：该方法的重复性好、灵敏度高、实用性强，可以同时测定食品中多种合成着色剂的含量。
关键词：合成着色剂；液相色谱法；固相萃取Determination of Synthetic Colorants in Food by Liquid ChromatographyZHU Xiaolei（Guangdong Dongguan Quality Supervision & Testing Center， Dongguan 523000， China）Abstract： Objective： To establish a method for the determination of synthetic colorants in food by liquid chromatography. Method： The synthetic colorants in food were extracted with ethanol ammonia solution， purified by solid phase extraction column， determined by liquid chromatography （ with diode array detector ）， and quantified by external standard method. Result： The linear range of 11 synthetic colorants was 0.2～10.0 μg·mL-1， the linear correlation coefficient was 0.999 4～1.000 0， the recovery rate was 94.2%～109.6%， and the relative standard deviation was 0.55%～5.52%. The detection limits of tartrazine， quinoline yellow， sunset yellow， carmine， new red and erythrosine were 0.5 mg·kg-1， and the limits of quantification were 1.5 mg·kg-1. The limits of detection of amaranth， allura red， brilliant blue， acid red and indigo were 0.3 mg·kg-1， and the limits of quantitation were1.0 mg·kg-1. Conclusion： The method has good repeatability， high sensitivity and strong practicability， and can simultaneously determine the content of various synthetic colorants in food.Keywords： synthetic colorants; liquid chromatography; solid-phase extraction着色剂在食品加工过程中可以改善食品的口感和外观，但过量使用会对人们的健康造成不良影响。
HPLC法测定保健食品胶囊壳中合成着色剂含量
HPLC法测定保健食品胶囊壳中合成着色剂含量黄玉琴（宁德市食品药品检验检测中心，福建宁德 352100）摘 要：目的：建立一种高效液相色谱法测定保健食品胶囊壳中7种合成着色剂含量的方法。
方法：用60 ℃热水溶解胶囊壳，通过聚酰胺SPE固相萃取柱富集洗脱，得到含有合成着色剂的待测样，经安捷伦ZORBAX C18色谱柱分离，甲醇-乙酸铵溶液作为流动相梯度洗脱，各合成着色剂的特征波长为检测波长，DAD检测器检测，外标法定量。
结果：7种合成着色剂分离效果良好，在1～20 µg/mL呈现良好线性关系，相对系数均大于0.999 0，回收率为86.42%～96.70%，RSD均小于1%。
检出限为0.5 mg/kg，定量限为 2.0 mg/kg。
采用该方法对13批明胶空心胶囊和4批保健食品胶囊壳进行测定，均检测出国标允许使用的合成着色剂。
结论：该方法操作简便、准确可靠，适用于保健食品胶囊壳中合成着色剂的测定。
关键词：高效液相色谱法；合成着色剂；明胶空心胶囊；保健食品胶囊壳Determination of Synthetic Colorant in Capsule Shell ofHealth Food by HPLCHUANG Yuqin(Ningde Testing Center for Food and Drug Control, Ningde 352100, China) Abstract: Objective: To establish a method for the determination of seven synthetic colorants in health food capsule shell by HPLC. Methods: the capsule shell was dissolved in 60 ℃ hot water, enriched and eluted by polyamide SPE solid phase extraction column to obtain the sample to be tested containing synthetic colorant. It was separated by Agilent ZORBAX C18 chromatographic column, and gradient eluted by methanol ammonium acetate solution as mobile phase. The characteristic wavelength of each synthetic colorant was the detection wavelength, detected by DAD detector and quantified by appearance method. Results: the separation effect of the seven synthetic colorants is good, showing a good linear relationship in the range of 1～20 µ g/mL, the relative coefficients are greater than 0.999 0, the recovery is 86.42%～96.70%, and the RSD is less than 1%. The detection limit is 0.5 mg/kg and the quantitative limit is 2.0 mg/kg. 13 batches of gelatin hollow capsules and 4 batches of health food capsule shells were determined by this method, and the synthetic colorants allowed by the national standard were detected. Conclusion: the method is simple, accurate and reliable. It is suitable for the determination of synthetic colorants in health food capsule shell.Keywords: high performance liquid chromatography; synthetic colorants; Gelatin hollow capsule; health food capsule shell如今人们对于合成着色剂的添加认知多是在饮料、果冻、熟肉制品中，在这些食品中，国家规定其能够添加一定量的合成色素，但本文所探究的保健食品胶囊壳是否超范围添加合成着色剂却往往容易被人们所忽视。
食品中合成着色剂的测定标准操作规程
目录Table of Contents一、目的Objective -------------------------------------------------------------------------------------------2二、适用范围Scope -----------------------------------------------------------------------------------------2三、职责Responsibilities -----------------------------------------------------------------------------------2四、工作程序Contents --------------------------------------------------------------------------------------2五、相关文件Related Documents -------------------------------------------------------------------------3六、相关记录Related Records -----------------------------------------------------------------------------3七、历史修订记录Revisions ------------------------------------------------------------------------------3八、附录Appendix ------------------------------------------------------------------------------------------4文件审批记录Review And Approval1 目的为了规范食品中合成着色剂的检测。
高效液相色谱法对肉制品中人工合成着色剂的测定
名称测定结果(mg/L)回收率(%)平均本底值加标量加标实测值柠檬黄5.720.024.192.080.080.393.2苋菜红10.520.027.691.580.073.892.1胭脂红0.020.018.492.080.075.294.0日落黄0.020.018.793.580.075.794.6亮兰0.020.018.492.080.074.192.6高效液相色谱法对肉制品中人工合成着色剂的测定文/王群于洪芳刘强合成着色剂作为一种添加剂广泛用于食品中,国家对其使用有明确的限量标准,但在市场上却时有发现这些人工合成着色剂被滥用,对它的检测监管是相当重要的,国标中测定这些人工合成着色剂方法有高效液相色谱法、薄层色谱法、示波极谱法,但无论哪一种方法都涉及样品前处理。
国标中第一法高效液相色谱法是将食品中人工合成着色剂用聚酞胺吸附法制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和峰面积比较进行定量。
在大量的实验过程中发现,当遇到含有多量蛋白质、脂肪等固体样品如熟肉制品时,按国标法测定提取色素困难,合成着色剂无法被聚酞胺粉完全吸附,样品回收率低。
我们在原基础上加以改进,能较好地将样品中的着色剂提取,从而大大地提高测定的精密度和准确度。
1、材料与方法(1)仪器与试剂。
L C1100高效液相色谱仪,带紫外检测器(Agile nt ,美国);超声波清洗器;乙腈(HPLC 级);石油醚(沸程30℃～60℃);无水乙醇-氨水-水(7+2+1)溶液;乙酸铵溶液(0.02m ol/L),经0.45μm 滤膜过滤;硫酸锌溶液(300g/L);铁氰化钾溶液(150g/L);合成着色剂标准溶液为国家标准物质稀释而成;实验用水为超纯水。
(2)仪器工作条件。
色谱柱:ODS-C184.5m m ×100m m 柱温:30℃;流动相:乙腈:乙酸铵溶液(0.02m ol/L );流速:1mL/m i n ;紫外检测器,254nm 波长;梯度洗脱:0min95%乙酸铵5%乙腈10min 70%乙酸铵30%乙腈12min95%乙酸铵5%乙腈(3)试样处理。
浅谈食品检测中合成着色剂的测定方法
浅谈食品检测中合成着色剂的测定方法俗话说“人是铁，饭是钢，一顿不吃饿得慌”，可见食品对于人类的重要性。
随着全球经济的高速发展，食品安全成了民众关心的大事，如何才能确保食品安全则成为热点问题，其中作为食品安全的一种监控手段，食品检测的重要性就在过程中凸显出来了。
食品中的着色剂的检测是食品检测中的一项重要检测项目，受到了相关部门的高度关注。
鉴于此，作者全面分析了食品检测中合成着色剂的检测方法，以期提高食品检测的效率，保障食品安全。
标签：食品检测；合成着色剂；测定方法与食品安全相对的就是食品安全危害，食品安全危害可以大致分为生物危害、化学危害和物理危害。
食品添加剂就是化学危害的一个重要来源。
按照国家食品添加剂的管理规定，对允许使用的添加剂按照规定量添加使用不会对人产生危害，但是对于在食品添加剂名单上明确规定不可以添加或是超量添加允许添加的添加剂，都会产生食品安全危害。
合成着色剂目前的使用范围广、用量大，长期过量摄入会对人体产生很大的危害。
但是要想对为数繁多的食品进行是否含有合成着色剂的检测，则需要采取适宜的测定方法，方可提高检测效率，提高监管力度和监管的有效性，从而打击违法添加有害物质的行为，保障人民的生命安全。
1 合成着色剂概述着色剂作为食品添加剂使用的主要作用就是改变食品的色彩，是一种相对传统的食品色彩调节方法。
根据市场调查分析，消费者在购买食品时，一般会考虑食品的色、香、味、形情况，同时，根据研究显示，食品的色彩对于人的食欲有刺激作用，可以勾起消费者的购买欲。
因此，食品生产商为了所生产食品的销量，在食品色彩上大下功夫，着色剂也就被广泛的应用开来。
近年来，国际国内的食品安全事故频发，其中不乏着色剂的滥用导致的食品安全事故。
事故频发导致了民众对于着色剂产生了怀疑与强力排斥，同时也受到了国家相关部门的关注与大力监督治理，在消费者的排斥与国家部门的监管下，着色剂滥用的情况得到了一定的遏制。
但是一些不法商家为了经济利益，不惜冒着触犯法律的风险，试图通过食品检测的漏洞来避免不法行径被发现。
食品中八种人工着色剂的测定——高效液相色谱法
Science and Technology & Innovation ┃科技与创新·95·文章编号：2095－6835（2015）16－0095－02食品中八种人工着色剂的测定——高效液相色谱法张璐璐，耿 莉，张岩岩（阜阳市产品质量监督检验所，安徽 阜阳 236000）摘 要：采用固相萃取—高效液相色谱法检测了8种人工合成着色剂。
从加标回收率结果来看，本方法符合要求。
采用高效液相色谱法同时检测8种人工合成着色剂，有利于节约检测时间和检测资源，为基层检测部门日常的合成着色剂检测提供参考条件。
关键词：高效液相色谱法；着色剂；色素；固相萃取中图分类号：TS202.3 文献标识码：A DOI ：10.15913/ki.kjycx.2015.16.095人工合成着色剂又称人工合成色素，常以苯、甲苯等为原料，先制备色素中间体，再将一种或两种中间体进行磺化、偶合、缩合和偶氮化等化学反应而制成。
现有的检测标准有《食品中合成着色剂的测定》（GB/T 5009.35—2003），使用高效液相色谱仪检测新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红、亮蓝。
按照《食品中诱惑红的测定》（GB/T 5009.141—2003）规定，使用纸色谱法测定食品中的诱惑红。
按照《食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量测定 高效液相色谱法》（SN/T 1743—2006）规定，使用高效液相色谱法检测诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄。
《水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法》（GB/T 21916—2008）规定，使用高效液相色谱检测罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红。
不同标准共涉及柠檬黄、新红、酸性红、诱惑红、靛蓝、赤藓红、日落黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝10种人工合成色素，而且以上四种标准的检测条件各不相同，这就给检测工作带来了巨大的不便，不但浪费了我们宝贵的检测时间，还要购置大批实验设备，造成极大的浪费。
食品中着色剂的测定
食品科学学院本科实验项目实验7 食品中着色剂的测定1 实验目的(1) 学习各类色素测定的原理与方法；(2) 掌握纸层析定性法与提纯色素的定量法。
2 实验原理聚酰胺是具有二极性的化合物，水溶性酸性染料在酸性条件下被聚酰胺吸附，而在碱性条件下解吸附，再用纸色谱法或薄层色谱法进行分离后与标准比较定性、定量。
3 试剂与仪器主要试剂：聚酰胺粉(尼龙6)、硫酸（1：10）、甲醇-甲酸溶液（6：4）、甲醇、20％柠檬酸溶液、10％钨酸钠溶液、石油醚、海砂、乙醇-氨溶液、50％乙醇溶液、硅胶G、盐酸（1：10）、5％氢氧钠溶液、碎瓷片、展开剂[a、正丁醇-无水乙醇-1％氨水(6：2：3)；b、正丁醇-吡啶-1％氨水(6：3：4)；c、甲乙酮-丙酮-水(7：3：3)；d、甲醇-乙二胺-氨水(10：3：2)；e、甲醇-氨水-乙醇(5：1：10)；f、2.5％柠檬酸钠-氨水-乙醇(8：1：2)。
]：供薄层色谱用、色素标准品（胭脂红；苋菜红；柠檬黄；靛蓝；日落黄；亮蓝：纯度均为60％。
）。
主要仪器：分光光度计、微量注射器或色素吸管、展开槽（25×6×4cm）、层析缸、薄层板（5×20cm）、电吹风机、水泵。
4 操作与结果(1) 样品处理①果味水、果子露、汽水：吸取50.0毫升样品于100毫升烧杯中，汽水需加热驱除二氧化碳。
②配制酒：吸取100.0毫升样品于烧杯中，加碎瓷片数块，加热驱除乙醇。
③硬糖：蜜饯类，淀粉软糖：称取5.0或10.0克粉碎的样品，加30毫升水，温热溶解，若样液PH值较高，用20％柠檬酸溶液调至PH4左右。
④含蛋奶的样品a奶糖：称取10.0克粉碎均匀的样品，加30毫升乙醇-氨溶液溶解，置水浴上浓缩至约20毫升，立即用1：10硫酸调溶液至微酸隆再加1.0毫升1：l0硫酸，加1毫升l0％钨酸钠溶液，使蛋白质沉淀，过滤，用少量水洗涤，收集滤液。
糕点中四种人工合成着色剂的测定
引言糕点是目前市场上最为常见的一类小吃，因种类繁多，口味多元，而受到人们的广泛喜爱。
根据国家标准GB/T 20977-2007《糕点通则》，糕点可按加工方式分为热加工糕点和冷加工糕点两大类，其中，热加工糕点占主导，其因产品制作工艺和本身特色的不同又可分为五大类：烘烤糕点、油炸糕点、水蒸糕点、熟粉糕点和其他类。
蛋糕、水晶饼、麻花等就是糕点大类中的一部分。
然而，许多不法商家为了提升糕点的色泽，纷纷往糕点中违规添加合成着色剂，合成着色剂没有营养价值，长期过量食用会对身体健康产生一定影响[1]。
食品中合成着色剂的测定方法目前已知的有：示波极谱法[2]、分光光度法[3]、液相色谱串联质谱法[4]、高效液相色谱法[5]等。
其中，高效液相色谱法因定性定量准确而应用最为普遍，国家标准GB 5009.35-2016《食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定》采用此法，但是标准适用范围为：饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品，糕点并未在其列。
本文拟建立糕点中四种人工合成着色剂的液相色谱测定法。
1仪器与试剂1.1仪器岛津LC-20液相色谱仪(二元泵，柱温箱，自动进样器，二极管阵列检测器SPD-M20A)，分析天平（CPA224S ，德国赛多利斯），纯水器（AWL-1002-M ，台湾艾科浦）；组织捣碎匀浆机（JJ -2（2003-61），常州国华电器有限公司）；离心机（LD4-2A ，北京医用离心机厂）；超声波清洗器（KQ-500E,昆山市超声仪器有限公司）；漩涡混合器（VORTEX 3，德国IKA ）。
1.2试剂超纯水由艾科浦纯水器制备（再经0.45μm 滤膜过滤），甲醇（色谱纯，阿拉丁试剂）；乙酸铵（优级纯，国药集团）；石油醚（分析纯，沸程30~60℃,国药集团）；乙醚（分析纯，国药集团）；氯化钠（分析纯，国药集团）；乙酸锌（分析纯，国药集团）；亚铁氰化钾（分析纯，国药集团）；冰醋酸（分析纯，国药集团）；柠檬黄标准物质：GBW (E)100158，苋菜红标准物质：GBW(E)100160，胭脂红标准物质：GBW(E)100161,日落黄标准物质：GBW(E)100159,均购于中国计量科学研究院。
食品中合成着色剂的测定
食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定1范围本标准规定了饮料㊁配制酒㊁硬糖㊁蜜饯㊁淀粉软糖㊁巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝色锭)的测定方法㊂本标准适用于饮料㊁配制酒㊁硬糖㊁蜜饯㊁淀粉软糖㊁巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝色锭)的测定㊂2原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂3.1试剂3.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂3.1.2正己烷(C6H14)㊂3.1.3盐酸(H C l)㊂3.1.4冰醋酸(C H3C O OH)㊂3.1.5甲酸(H C O O H)㊂3.1.6乙酸铵(C H3C O O N H4)㊂3.1.7柠檬酸(C6H8O7㊃H2O)㊂3.1.8硫酸钠(N a2S O4)㊂3.1.9正丁醇(C4H10O)㊂3.1.10三正辛胺(C24H51N)㊂3.1.11无水乙醇(C H3C H2O H)㊂3.1.12氨水(N H3㊃H2O):含量20%~25%㊂3.1.13聚酰胺粉(尼龙6):过200μm(目)筛㊂3.2试剂配制3.2.1乙酸铵溶液(0.02m o l/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1000m L,溶解,经0.45μm微孔滤膜过滤㊂3.2.2氨水溶液:量取氨水2m L,加水至100m L,混匀㊂3.2.3甲醇-甲酸溶液(6+4,体积比):量取甲醇60m L,甲酸40m L,混匀㊂3.2.4柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100m L,溶解混匀㊂3.2.5无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比):量取无水乙醇70m L㊁氨水溶液(3.2.2)20m L㊁水10m L,混匀㊂3.2.6三正辛胺-正丁醇溶液(5%):量取三正辛胺5m L,加正丁醇至100m L,混匀㊂3.2.7饱和硫酸钠溶液㊂3.2.8p H6的水:水加柠檬酸溶液调p H到6㊂3.2.9p H4的水:水加柠檬酸溶液调p H到4㊂3.3标准品3.3.1柠檬黄(C A S:1934-21-0)㊂3.3.2新红(C A S:220658-76-4)㊂3.3.3苋菜红(C A S:915-67-3)㊂3.3.4胭脂红(C A S:2611-82-7)㊂3.3.5日落黄(C A S:2783-94-0)㊂3.3.6亮蓝(C A S:3844-45-9)㊂3.3.7赤藓红(C A S:16423-68-0)㊂3.4标准溶液配制3.4.1合成着色剂标准贮备液(1m g/m L):准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄㊁日落黄㊁苋菜红㊁胭脂红㊁新红㊁赤藓红㊁亮蓝各0.1g(精确至0.0001g),置100m L容量瓶中,加p H6的水到刻度㊂配成水溶液(1.00m g/m L)㊂3.4.2合成着色剂标准使用液(50μg/m L):临用时将标准贮备液加水稀释20倍,经0.45μm微孔滤膜过滤㊂配成每毫升相当50.0μg的合成着色剂㊂4仪器和设备4.1高效液相色谱仪,带二极管阵列或紫外检测器㊂4.2天平:感量为0.001g和0.0001g㊂4.3恒温水浴锅㊂4.4 G3垂融漏斗㊂5分析步骤5.1试样制备5.1.1果汁饮料及果汁㊁果味碳酸饮料等:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100m L烧杯中㊂含二氧化碳样品加热或超声驱除二氧化碳㊂5.1.2配制酒类:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100m L烧杯中,加小碎瓷片数片,加热驱除乙醇㊂5.1.3硬糖㊁蜜饯类㊁淀粉软糖等:称取5g~10g(精确至0.001g)粉碎样品,放入100m L小烧杯中,加水30m L,温热溶解,若样品溶液p H较高,用柠檬酸溶液调p H到6左右㊂5.1.4巧克力豆及着色糖衣制品:称取5g~10g(精确至0.001g),放入100m L小烧杯中,用水反复洗涤色素,到巧克力豆无色素为止,合并色素漂洗液为样品溶液㊂5.2色素提取5.2.1聚酰胺吸附法:样品溶液加柠檬酸溶液调p H到6,加热至60ħ,将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状,倒入样品溶液中,搅拌片刻,以G3垂融漏斗抽滤,用60ħp H为4的水洗涤3次~5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次~5次(含赤藓红的样品用5.2.2法处理),再用水洗至中性,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次~5次,直至色素完全解吸,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5m L㊂经0.45μm微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析㊂5.2.2液-液分配法(适用于含赤藓红的样品):将制备好的样品溶液放入分液漏斗中,加2m L盐酸㊁三正辛胺-正丁醇溶液(5%)10m L~20m L,振摇提取,分取有机相,重复提取,直至有机相无色,合并有机相,用饱和硫酸钠溶液洗2次,每次10m L,分取有机相,放蒸发皿中,水浴加热浓缩至10m L,转移至分液漏斗中,加10m L正己烷,混匀,加氨水溶液提取2次~3次,每次5m L,合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素),用正己烷洗2次,氨水层加乙酸调成中性,水浴加热蒸发至近干,加水定容至5m L㊂经0.45μm微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析㊂5.3仪器参考条件5.3.1色谱柱:C18柱,4.6mmˑ250mm,5μm㊂5.3.2进样量:10μL㊂5.3.3柱温:35ħ㊂5.3.4二极管阵列检测器波长范围:400n m~800n m,或紫外检测器检测波长:254n m㊂5.3.5梯度洗脱表见表1㊂表1梯度洗脱表时间m i n流速m L/m i n0.02m o l/L乙酸铵溶液%甲醇%01.095531.0653571.00100101.0010010.11.0955211.09555.4测定将样品提取液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪,根据保留时间定性,外标峰面积法定量㊂6分析结果的表述试样中着色剂含量按式(1)计算:X=cˑVˑ1000mˑ1000ˑ1000(1)式中:X 试样中着色剂的含量,单位为克每千克(g/k g);c 进样液中着色剂的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样稀释总体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000 换算系数㊂计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留两位有效数字㊂7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂8其他方法检出限:柠檬黄㊁新红㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄均为0.5m g/k g,亮蓝㊁赤藓红均为0.2m g/k g (检测波长254n m时亮蓝检出限为1.0m g/k g,赤藓红检出限为0.5m g/k g)㊂。
高效液相色谱法测定食品中的食用合成色素——日落黄
高效液相色谱法测定食品中的食用合成色素——日落黄一实验部分一实验原理食品中人工合成着色素经聚酰胺吸附法，制备成水溶液，注入高效液相色谱仪，经过反相色谱分离，根据保留时间定性及峰面积比较进行定量。
二实验主要仪器和试剂1.仪器高效液相色谱仪，带紫外检测器、0.45um滤膜(1张)、0.5um滤膜（1）、分析天平、量筒1oml(1),250ml(1)、烧杯1000ml(1),300ml(3)、容量瓶250ml(5),5ml(1),100ml(1)、移液管5ml(1)、研钵(1)、温度计100℃（1）、滴管（1）、电磁炉（1）、G3垂融漏斗（孔径60ml）、PH试纸（1—14）试剂瓶1000ml(2)2药品乙酸（分析纯）、甲醇（色谱纯经0.5um滤膜过滤）、聚酰胺粉（尼龙6过200目筛）、氨水（分析纯）、甲酸（分析纯）、柠檬酸（分析纯）、无水乙醇（分析纯）、饱和硫酸钠、无离子水、0.2%硫酸钠、乙酸铵（分析纯）、合成着色标准溶液：日落黄三仪器工作条件高效液相色谱的工作条件：一般可在室温下进行，采用颗粒极细的固定相，柱内压降很大，流动相黏度很高，需采用高入口压，维持一定的流动相线速。
色谱柱：不锈钢柱流动相：甲醇+0.02 mol/L 乙酸铵溶液,梯度洗脱:甲醇+0.02 mol/L 乙酸铵溶液:甲醇20%，乙酸铵80%，0~5min; 甲醇35%，乙酸铵65%，5~11min:甲醇98%，乙酸铵2%，11~16min；甲醇98%，乙酸铵2%，16~17min；甲醇20%，乙酸铵80%，甲醇20%，乙酸铵80%，17~30min流速: 1.0 mL/min进样量：10ul紫外吸收检测器：适用于梯度洗脱，对流动相速度变化不敏感，流动相组成的变化对检测其响应几乎无影响，但是只有检测其所提供的波长下有较大吸收的分子才能进行检测，流动相的选择受一定限制，既具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相。
每种溶剂都有紫外的截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至百分之十以下，因此监测器的工作波长不能小于溶剂的紫外戒子波长。
食品中人工合成着色剂的快速检测
引言：
人工 合成着色剂 就是我 们通常所 说的人 工合成色 素 ，它 们的合成 原料往往 以苯、 甲 苯 、萘等化工 材料为主 。其主要优 点是价格 低廉 、着色 能力强、成分 比较稳定 。但是 ， 这 些人工合成 色素往往 带有一定 的毒性 ，因 此 使Байду номын сангаас快速检 测方法 来检测人工 合成着色剂 的含量对 保证人 民生命健康 、饮 食安全 有着 很重要的作用。
美 国戴安公司生产 的 Ｕ一 ３ ０ ０ ０系列，超声波发 生 器 选 用 昆 山 超 声 仪 器 公 司 生 产 的 ＫＱ． ５ ０ ０ ＧＶＤＶ； 甲 醇选 用 美 国 如 意 化 工 公 司 生产的色谱 纯 ，乙酸锌 溶液 由重 庆 申渝化 学 试剂厂生产 的乙酸锌 （ 分析纯 ）２ １ ． ９ ｇ ＋ 冰乙酸 ３ ｍｌ 加水稀释至 １ ０ ０ ｍｌ 制得 ， 亚铁氰化钾溶液 由武汉市 江北试剂 厂生产 的亚铁氰化钾 （ 分 析纯 ）１ ０ ． ６ ｇ加水稀释至 １ ０ ０ ｍｌ ；溶剂 乙酸铵 溶液 由 ｌ ＿ ５ ４ ｇ乙酸铵＋ １ ０ ０ ０ ｍｌ 水溶解 ， 再使用 ０ ． ４ ５ ｕ ｍ滤膜 过滤 制得， 溶剂色谱纯 甲醇 由美 国如意化工 公司生产 ；合成着色剂 柠檬黄 、 日落黄 、亮 蓝、胭脂 红等的标准储 备液为 国 家标物 中心提供 的 ０ ． ５ ｍｇ ／ ｍｇ标准溶液 ，分别 配成每毫升 ０ ． ５ ｕ １ ｕ ｇ 、２ ｇ 、５ ｇ 、１ ０ ｇ浓度的标准使用液 。 ２ ．检测过程分析 在对 人工合 成着 色剂做 光谱扫描 时 ，我 们发 现所测 的人 工合成着色 剂不仅 在紫外 区 域存在吸 收现 象 ，而 且在可见光 区域也存 在 吸收 ，通 常紫外 区域 因为存在其 他物质 １ 二 扰 易导致 误判 ，可 见光区域着 色荆吸 收受其他 杂质干扰 很小 ，因此检测波 长选择可 见光区 域 的吸收波长 ，根据人工 合成着色 剂的吸收 光谱 图分别选 择柠檬黄检测 波长为 ４ ２ ８ ｎ ｍ、 苋菜 红为 ５ ２ ０ ｎ ｍ、胭 脂红 ５ １ ０ ｎ ｍ、 日落黄 ４ ８ ０ ｎ ｍ、诱惑红 ５ １ ｌ ｎ ｍ、亮蓝 ６ ２ ８ ｎ ｍ。利 用二 极管阵列 检测器对样 品峰进行判 断定性 ，只 有保 留 时间与 标准 峰 差异 ≤ ±５ ％、波 长 ＞ ２ ２ ０ ｎ ｍ、光 谱图与标 准品差异 ≤±５ ％时，方 可确 定为人工合 成着色剂 。如不能确 定 ，可 加标准物进行实验辅助判断 。 我 们对不 同比例流动 相对 目标化 合物影 响进 行 了对 比 ，发 现 以 下几 种 情 况 效 果最 好 ： ① ＜１ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 乙酸 铵 溶 液 ： 甲醇 ： ８ ： ２ ；② １ ０ １ ３ ． ５ ｍｉ ｎ， 乙 酸 铵 溶 液 ： 甲 醇 ＝ ２ ： ８； ③ １ ３ ． ５ ２ ０ ａｉ ｒ ｎ ， 乙酸 铵 溶 液 ： 甲醇 ＝ ８ ： ２ 。 根 据 己 总结 的人 工合成着 色剂浓度 范围 ，我们 配置 了标准 溶液系 列，通过液相 色谱测定 绘制 出 浓度 与峰面积 的标 准 曲线 ，通过对标 准 曲线 的分析 ， 人工合成着色剂 的线性关系 ≥０ ． ９ ９ ９ ，
食品着色剂检测实验报告
食品着色剂检测实验报告一、实验目的本实验的目的是通过检测食品中的着色剂含量来评估其安全性，并了解食品着色剂对人体健康的潜在影响。
二、实验原理本实验采用了高效液相色谱法（HPLC）来测定食品中的着色剂含量。
HPLC是一种基于液相色谱技术的分析方法，能够快速、准确地检测出样品中的特定化学物质。
在本实验中，我们选择了几种常见的食品着色剂作为目标化合物进行检测。
三、实验步骤1. 样品制备：首先将待检测的食品样品取一定量，然后加入适量的乙酸乙酯进行提取，使目标化合物能够溶解于有机相中。
2. 色谱分析：将提取得到的有机相样品注入高效液相色谱仪中进行分析。
设定一定的流速和梯度条件，使各种着色剂顺序地从色谱柱中洗脱出来。
3. 峰面积计算：通过检测峰面积来确定目标化合物的含量。
根据已知浓度的标准溶液进行定量计算，得出样品中目标化合物的含量。
四、实验结果与分析通过实验我们检测了多种食品样品中的着色剂含量。
在样品A中，检测到红色着色剂的峰面积为XXX，根据标准曲线计算得到它的含量为XXX mg/kg。
同样地，样品B中检测到黄色着色剂的峰面积为XXX，含量为XXX mg/kg。
这些数据表明样品A和样品B中的着色剂含量均低于国家安全标准规定的限制值，属于合格产品。
五、实验结论根据本次实验的结果分析，样品A和样品B中的食品着色剂含量都在国家安全标准规定的限制值之内，属于合格产品。
通过本实验，我们建立了一套基于HPLC的食品着色剂检测方法，具有准确、快速的优点，可用于食品行业的生产监管和质量控制。
六、实验心得本次实验通过实际操作学习了食品着色剂检测的方法和步骤，对于提高我们对食品安全的认知和质量意识具有积极的促进作用。
同时，通过掌握HPLC技术的应用，我们对于高效液相色谱仪的使用和色谱分析方法有了更深入的了解。
通过实验，我们不仅熟悉了实验过程，还加深了对实验原理和数据处理的认识。
七、参考文献[1] XX. 食品着色剂检测技术研究[D].XXXX学术论文，20XX年。
食品检测中合成着色剂的测定方法
食品检测中合成着色剂的测定方法作者：王峰来源：《中国科技博览》2016年第14期[摘要]随着社会的快速进步，经济的迅猛增长，食品行业也迅速的繁荣发展起来，随着人们生活水平与质量的不断提高，食品种类与形态更是形形色色。
许多食品生产厂商为了追求更多的经济效益，满足消费者对食品味觉和视觉的需求，会在食品中增加各种添加剂。
民以食为天，食品的安全问题现今已成为社会的大众关注的重点。
为了保障市场上各种食品不会对消费者的健康造成恶劣的影响，相关部门需要加强管理与监测。
合成着色剂是食品检测环节中的关键环节，其检测、鉴定方式是否科学合理直接影响检测的效果。
[关键词]食品检测；合成着色剂；测定方法中图分类号：F407.44 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）14-0204-01引言在众多的食品安全问题发生之后，食品安全问题已经成为全民关注的热门话题。
双汇，上海福喜，三鹿等著名品牌都曾出现过严重的食品安全问题，这也让公众对食品的安全产生极大的担忧。
结合现今的食品市场的具体情况来看，食品安全的确存在较多的问题，一些不良的商家为了谋取更多的利润，往往忽视食品的品质与安全，违背国家相关规范和标准，在食品中添加超量的食品合成着色剂，这些不符合标准的食品也必然会给消费者带来较大的危害。
一、合成着色剂的简要概述1.1 着色剂的分类着色剂是食品添加剂中的重要一员，按照来源可以分为天然着色剂和合成着色剂两种。
天然着色剂顾名思义就是从动物以及植物中提取的天然色素，大多是植物的色素。
最常见的天然着色剂有辣椒红、红曲红。
姜黄、胡萝卜素以及焦糖色素等。
其特点是不易分散且相溶性不高，一般价格高于合成着色剂。
由于食品行业的发展十分迅速，天然色素的价格、易褪色的性质等方面都无法满足现代食品工业的要求。
十九世纪开始，人工合成着色剂登上了历史的舞台，深受食品生产商的青睐。
由于合成着色剂是化工生产的产品，因此颜色较之天然色素更胜一筹，且颜色持久性更长，价格更低。
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食品中合成着色剂的测定
摘要:食品中合成着色剂高效液相色谱的测定。
方法采用
c18(10?%em,4.6mm??50mm)不锈钢色谱柱，流动相为乙酸铵+甲醇，流速1.0ml/min，检测波长254nm，柱温设为23℃，进样量20?%el。
本检测方法对gb/t5009.35-2003食品中合成着色剂的测定进一步细化，使用着色剂小柱代替gb/t5009.35-2003食品中合成着色剂的测定中色素提取，检测时间缩短，检测结果精确度提高，具有一定的实践指导作用。
关键词:食品合成着色剂
1、前言
食品中合成着色剂是一种已知的有害物质，其随食物被摄入人体内后,很快被肠道吸收。
由于着色剂在人体中具有累积作用,长期过量摄入直接危害到人们的健康特别是对少年儿童的健康危害更为
严重，孩子的肝脏解毒和代谢功能都比较脆弱，如果摄入过多的人工合成色素，会加重肝脏及胃肠道的负担，干扰体内正常的代谢反应，出现不同程度的食欲不振、消化不良、腹痛、腹泻等症状
2、原理
样品经水溶解，通过活化的着色剂小柱吸附色素，用洗脱试剂洗脱，用高效液相色谱分离，紫外检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。
3、试验部分
3.1所用试剂
3.1.1水：符合gb/t6682规定的一级水要求
3.1.2 甲醇：色谱纯。
3.1.3 氨水：分析纯
3.1.4乙酸铵溶液（0.02mol/l）：称取1.54g乙酸铵加水至1000ml 溶解，经0.45?%em滤膜过滤
3.1.5标准品：柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝
3.1.6氨化甲醇5%：95ml甲醇加5ml氨水
3.2仪器与设备
3.2.1高效液相色谱仪
3.2.2色谱工作站
3.2.3紫外检测器
3.2.4 c18(10?%em,
4.6mm??50mm)不锈钢色谱柱
3.2.5固相萃取装置
3.2.6着色剂小柱
3.2.7氮吹仪
3.2.8漩涡混合器
3.2.9高速离心机
3.3方法
3.3.1合成着色剂标准溶液浓度的配制
准确称取标准品着色剂各100mg,置于100 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,该贮备液浓度1mg/ml。
配制50.0?%eg/ml混合使用液，准确吸取储备液各5.0 ml于100 ml容量瓶用水定容至刻度。
3.3.2样品预处理
桔子汁、果味水等：称取20.00g～40.00g，放入100ml烧杯中，含二氧化碳的试样加热驱除二氧化碳
配制酒类：称取20.00g～40.00g，放入100ml烧杯中，加小碎瓷片数片加热驱除乙醇。
硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等：称取5.00g～40.00g粉碎试样放入100ml烧杯中，加30ml水，温热溶解，若试样溶液ph值较高，用柠檬酸调ph值到6左右。
巧克力及着色糖衣制品：称取5.00g～10.00g，放入100ml烧杯中，用水反复洗涤色素，到试样无色素为止，合并色素漂洗液为试样溶液。
3.3.3 色素提取
聚酞胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调ph值到6，加热至60℃，将1g聚酞胺粉加少许水调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，以g3垂融漏斗抽滤，用60℃ph=4的水洗涤3～5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3～5次再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3～5次，每次5ml收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5ml经滤膜(0．45?%em)过滤，取10?%el进高效液相色谱仪。
液-液分配法(适用于含赤藓红的样品)：将制备好的样品溶液放入分液漏斗中，加2ml盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5％)10～20ml，振摇提取，分取有机相，重复提取，至到有机相无色，合并有机相，
用饱和硫酸钠溶液洗2次，每次10ml，分取有机相，放蒸发皿中，水浴加热浓缩至10ml，转移至分液漏斗中，加60ml正己烷，混匀，加氨水提取2～3次，每次5ml合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗2次，氨水层加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至5ml经滤膜(0.45?%em)过滤，取10?%el进高效液相色谱仪。
3.3.4色谱条件
流动相:a相为乙酸铵溶液,b相为甲醇；梯度洗脱：甲醇20%～35%，3%/min;35%～98%,9%/min;98%继续保持6 min。
流速1.0ml/min;柱温23℃,进样20?%el;紫外检测波长为254nm;以色谱峰面积外标法定量。
在此条件下，测得保留时间，样品溶液中主峰和其它杂峰达到完全分离。
3.3.5样品的测定
用干净的25ml比色管称取混匀试样约5g，加少量水混匀溶解静置过夜。
用水定容至刻度，离心10min。
加3ml甲醇3ml水活化着色剂小柱，注意此时不要干柱应立即向着色剂小柱加入5ml样品，加3ml水3ml甲醇进行淋洗，然后加2ml5%氨化甲醇进行解析，着色剂小柱下接塑料小试管收集解析液。
氮吹仪吹干塑料小试管，注意氮气流量不要开太大以免把样液吹出。
再加1ml水，在混匀器上混匀1min，此时注意混匀时样液不要触碰试管盖，处理好进样备用。
3.4样品测定结果
取试样溶液20?%el,注入高效液相色谱仪,记录色谱图,获取峰面
积,用外标法进行计算，获得合成着色剂含量结果。
4、结果与分析
4.1线性关系考察
在3.3.2色谱条件下,将不同浓度的标准工作液依次从低浓度到高浓度进样,以对照品溶液浓度为横坐标(x),峰面积为纵坐标(y)绘制标准曲线,并计算标准曲线的回归方程及相关系数。
其线性回归方程为：y=2??08x+31012,相关系数r=0.9992,其结果表明线性良好。
4.2检测限考察及方法精密度实验
以产生信号(峰高)为基线噪音标准差3倍的样品浓度作为该方法的检出限即0.24mg/kg。
以同一加标的样品重复测定5次，测得其峰面积的rsd为2.68%，表明本法的精密度良好。
4.3回收率实验
为考察方法的准确度,以现场样品中加入低、中、高三种含量的标准液,然后测定样品溶液和标准溶液计算加标回收率,设计10?%eg、25?%eg、50?%eg三个添加浓度,每个浓度作为2平行,测得回收率为98%。
5、本文测定方法特点
5.1对国家标准gb/t5009.35-2003食品中合成着色剂的测定检测步骤上进行了取代，比如3.3.3中的色素提取用着色剂小柱代替，节省了检测时间，该方法经过反复试验总结而来。
对食品测定合成着色剂实际操作具有一定的指导作用。
5.2在液相色谱仪上设置梯度洗脱条件时，20%～35%，3%/min需要5min; 3%/min,35%～98%需要7min; 98%继续保持6 min,总共
18min采集完毕。
梯度洗脱条件对样品检测结果的准确性非常重要，因此色谱峰的分离重在色谱条件上。
参考文献:
[1]gb/t5009.35-2003食品中合成着色剂的测定。