移植免疫及其免疫检测PPT课件
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移植免疫医学免疫学课件(ppt)
Tc Perforin FasL
TNF
靶细胞
Th1 IL-2、IFN-γ
单个核细胞活化
组织损伤
医学免疫学
• 慢性排斥 数周-数年（急性排斥转化）
机制： Th1、Mφ→炎症
非免疫学机制：缺血，神经，血管损伤 及感染
医学免疫学
上海第二医科大学免疫教研室
医学免疫学
五、骨髓移植 • 实为多能干细胞移植，易发生GVHR，
医学免疫学
七、同种异体排斥反应的防治
(一) 供者的选择 1. 血型 2. 检测预存HLA抗体 3. HLA配型
4. 混医学合免疫淋学巴细胞反应（MLR）
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医学免疫学
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医学免疫学
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公认规律： （1）供者与受者HLA-A和B相配位点愈多，移植存活率愈高（4
医学免疫学
1. 直接识别（direct recognition）
受者T直接识别移植物（供者APC）表面的MHC分子 此时MHC本身作为（移植）抗原分子
移植物 供者
X · MHC
TCR T
受者
主要激活Tc 特点：反应速度快、强度大
为早期急性排斥的重要机制
医学免疫学
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医学免疫学
医学免疫学
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医学免疫学
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2. 次要组织相容性抗原（mHS） ➢ 男性H-Y抗原 ➢ 常染色体编码的mH抗原，HA-1，HA-
5 反应弱
医学免疫学
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移植及免疫学检验 ppt课件
源于移植物HLA的抗原肽。
PPT课件 14
二、其他组织相容性抗原
次要组织相容性抗原；
ABO血型抗原系统；
组织特异性抗原
PPT课件
15
（二）、次要组织相容性抗原
供、受体HLA完全相同情况下发生的轻度、慢 mHA是相对于MHA或HLA；
性移植排斥反应，与个体间存在的mHA密切相关；
mHA：有H-Y抗原、线粒体蛋白和病毒蛋白等
PPT课件 20
移植排斥反应的类型
一、超急性排斥反应（hyperacute rejection） 发生于术后数分钟至数小时内（<48h） 由体液免疫介导－－预先抗体存在。 （ABO或Rh血型抗体、抗MHC-I类分子抗体) 反应发生迅速、强烈、不可逆转。
常见于：血型不符，多次妊娠，反复输血或接受过器官移植
Chapter 28 移植免疫及免疫检验
夏医学院附属医院 学实验中心Ⅱ部 陈耀平
PPT课件
1
purpose
Master：HLA配型、移植排斥反应的监测 Be familiar：移植排斥反应的类型 Know：移植类型，移植排斥反应的免疫机制
PPT课件
2
Section 1 概述
移植（transplantation）是用手术或其他方法将健
PPT课件 5
1.自体移植(autograft)
PPT课件
6
2、同种同基因移植(syngraft)
单卵双生间、纯系动物间的移植
PPT课件
7
3.同种异基因移植(allogr源自ft)同种间不同个体的移植，具遗传基因、MHC差异
PPT课件
8
4.异种移植(xenograft)
异种动物间的移植：种间差异性更大
移植免疫学ppt课件
• 受者能否排斥供者移植物由供者 Nhomakorabea织细胞共
显性表达的多态性基因决定。
• 近交系小鼠移植实验
•
-
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（一）诱导移植排斥反应的同种异型抗原
1.主要组织相容性复合体(MHC)
MHC结构十分复杂，呈多态性，是同 种异体移植中引起强烈排斥反应的最重要 同种异型抗原。
HLA抗原的组织分布 HLA-1：所有有核细胞(包括血小板和网织红细胞)
•
在进行同种移植后，由于供、受
者之间的组织相容性抗原不同，故移植
物可刺激受者的免疫系统产生免疫应答，
导致排斥反应。
排斥反应的本质：
T细胞介导的、针对移植抗原的 免疫应答.
-
6
一、机体针对同种异型抗原的应答特点
• 抗原特异性
• 宿主和供者之间的血缘关系越近，移植
物被排斥的可能性越小。自体移植物 （autograft）成活率可达100%。遗传 基因相同的成员（如同卵双胞胎或者同
15
NK细胞参与的排斥应答机制：人NK细胞表达 KIR，正常情况下，当此类受体与自身细胞 MHC-I类分子或自身抗原肽-自身MHC-I类分子 复合物结合时，可产生负调节信号，从而抑 制NK细胞的杀伤活性。当同种器官移植后， 受者NK细胞的KIR不能识别移植物细胞表面的 非己MHC抗原，从而被激活，并参与排斥反 应的发生
（1）组织特异性抗原：不同组织和器官移植 后发生排斥反应的强度各异，提示不同类型 细胞可表达各自组织特异性抗原。
（2）血型抗原：ABO血型抗原不仅分布于红 细胞表面，也表达于血管内皮细胞和其他某 些组织细胞的表面。
（3）种属特异蛋白：这类糖蛋白也表达在血 管内皮细胞上，与血型抗原非常相似，具有 种属特异性，属异种抗原。是异种移植最大 的障碍。
显性表达的多态性基因决定。
• 近交系小鼠移植实验
•
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（一）诱导移植排斥反应的同种异型抗原
1.主要组织相容性复合体(MHC)
MHC结构十分复杂，呈多态性，是同 种异体移植中引起强烈排斥反应的最重要 同种异型抗原。
HLA抗原的组织分布 HLA-1：所有有核细胞(包括血小板和网织红细胞)
•
在进行同种移植后，由于供、受
者之间的组织相容性抗原不同，故移植
物可刺激受者的免疫系统产生免疫应答，
导致排斥反应。
排斥反应的本质：
T细胞介导的、针对移植抗原的 免疫应答.
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一、机体针对同种异型抗原的应答特点
• 抗原特异性
• 宿主和供者之间的血缘关系越近，移植
物被排斥的可能性越小。自体移植物 （autograft）成活率可达100%。遗传 基因相同的成员（如同卵双胞胎或者同
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NK细胞参与的排斥应答机制：人NK细胞表达 KIR，正常情况下，当此类受体与自身细胞 MHC-I类分子或自身抗原肽-自身MHC-I类分子 复合物结合时，可产生负调节信号，从而抑 制NK细胞的杀伤活性。当同种器官移植后， 受者NK细胞的KIR不能识别移植物细胞表面的 非己MHC抗原，从而被激活，并参与排斥反 应的发生
（1）组织特异性抗原：不同组织和器官移植 后发生排斥反应的强度各异，提示不同类型 细胞可表达各自组织特异性抗原。
（2）血型抗原：ABO血型抗原不仅分布于红 细胞表面，也表达于血管内皮细胞和其他某 些组织细胞的表面。
（3）种属特异蛋白：这类糖蛋白也表达在血 管内皮细胞上，与血型抗原非常相似，具有 种属特异性，属异种抗原。是异种移植最大 的障碍。
免疫学移植免疫 ppt课件
肾移植10年生存率达到60%
肺和肝
5年生存率 40-50%
同种同基因移植
移植物抗原刺激受者的免疫系统/受者组织抗原刺激移
植物中的免疫细胞诱发的免疫应答称为移植排斥反应
自体移植
同种异基因移植
异种同移种植 异型移 植排斥反应
第一节 同种异体移植排斥反应的类型
宿主抗移植物反应（Host versus graft
识别方式
间接识别
直接识别
受者的同种反应性T细胞可以直接识别供者 APC表面呈现的MHC分子，产生免疫应答引 发排斥反应，是一种移植所特有的抗原提呈 和识别方式
特点：发生快，强度大。在早期急性反应中 起主要作用
CD8+CTL细胞起主要作用
直接识别
受者T细胞
同种抗原反应性的T细胞克隆约占T细胞库总数
移植免疫
河南科技大学免疫学教研室 李智涛
公元4世纪罗马教堂
概述
植 Transplantation
用正常的细胞、组织或器官置换病变的或 功能缺损的细胞、组织或器官，以维持和重 建机体的生理功能的一种医疗手段。
是目前治疗多种终末期疾病的有效手段。
已经取得巨大进步
肾、心、骨髓和角膜 5年生存率 70-90%
些内分泌腺、胸腺
免疫赦免区的机制
缺失输入血管或淋巴管 特殊的屏障：如血脑屏障 免疫原性较弱：如软骨 组织细胞高表达FasL
第二节 同种异体移植排斥反应的发生机制
一、引起同种异型移植排斥反应的抗原
主要组织相容性抗原（MHC） 次要组织相容性抗原（minor
histocompatibility antigen，mHA抗原）
（passenger leukocyte）
移植免疫ppt优秀课件
移植排斥反应机制
T 细胞是介导排斥反应的关键 ➢ 裸鼠不产生排斥反应 ➢ B细胞缺陷鼠可产生排 斥反应 ➢ 排斥反应能够通过T细胞 被动转移
Role of CD4+ versus CD8 T+ cells
CD40+ Th1 细胞是主要的效应细胞
T细胞识别同种抗原的机制
1. 直接识别 指受者的同种反应性T细胞直接识别供者APC表面
移植排斥反应的效应机制
针对移植物的体液免疫应答 受者体内产生针对同种异型抗原的特异性抗
体，抗体发挥调理作用、ADCC和CDC作用等，通过激活 补体、损伤血管内皮细胞、介导凝血、血小板聚集、 溶解移植物细胞和释放炎性介质等多种机制参与排斥 反应。
Rejection Response
Rejection Response
移植免疫
基本概念
移植：在医学上应用自体或异体的正常细胞、组织或 器官置换病变的或功能缺损的细胞、组织、器 官，以维持和重建机体生理功能，这种治疗方 法称为细胞/组织/器官移植。
移植排斥反应：移植术后，受者免疫系统可识别移植 物抗原并产生应答，移植物中的免疫细胞也可 识别受者组织抗原并产生应答，称为移植排斥 反应。是机体的免疫应答反应。
间接识别在急性排斥反应中晚期 和慢性排斥反应中起重要作用
移植排斥反应的效应机制
针对移植物的细胞免疫应答
➢ 受者T细胞通过直接或间接途径识别移植物抗原并被激活； ➢ 移植物局部出现Th1和巨噬细胞为主的细胞侵润； ➢ 活化的Th1细胞、巨噬细胞等释放多种炎性细胞因子，导致
迟发型超敏反应性炎症，造成移植物组织的损伤。 ➢ 活化的CD8+CTL 杀伤移植物靶细胞
移植排斥反应的效应机制
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2. PCR-SSO分型法
序 列 特 异 性 寡 核 苷 酸 - 聚 合 酶 链 反 应 （ PCRsequence specific oligonucleotide, PCR-SSO）是以 PCR为基础，将凝胶上扩增的HLA基因DNA转移 至硝酸纤维膜或尼龙膜，进而用放射性核素或酶、 地高辛等非放射性物质标记的寡核苷酸探针与之 进行杂交，从而对扩增产物作出HLA型别判断。
本法不能判断型别，只能说明供、受体HLA抗原配合程度
2பைடு நூலகம்21
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（三）分子生物学分型法
分子生物学技术的迅速发展，使得HLA的 DNA分型技术应运而生，并在开展DNA限制性 片段长度多态性分析、DNA指纹图、等位基因特 异性寡核苷酸杂交等基础上，引入多聚酶链反应 技术，使HLA分型得以在更精密的水平上进行。
一、器官和组织移植的一般规律
1.移植器官或组织的抗原性异物属性
2.排斥移植物的记忆特性
3.负向免疫调节的必要性
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二、HLA是诱导排斥反应最强的靶抗原
主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）编码的人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA），是不同个体间进行器官或组织 细胞移植时发生排斥反应的主要成分，这种代表个体特异 性的同种抗原又称组织相容性抗原(histocompatibility)或 移植抗原(transplantation antigen)。
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HLA的遗传特征
HLA是人体多态性最丰富的基因系统。
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HLA分型要比ABO血型复杂的多，每个人不是从父母分别得到一个 基因，而是得到一串基因(HLA单倍型)。每人遗传到二串“冰糖葫芦 ，其上的“红果”(基因)以A、B、C、D、DR、DQ和DP为序。 A有28种红果(分别记为A1、、A2、A3、A9...)， B有61种(记为B5、B7、B8、B12...)， DR有24种(记为DR1、DR2、DR3、DR4...)等。 七彩红果共有164种编号，如不同遗传排列的红果随机组合，按理论推 算，“冰糖葫芦”有五亿多种变化，能组合33亿多种HLA分型。 理论推测的HLA分型数量巨大，但对一个具体的民族来说并非如此。
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1. RFLP与PCR-RFLP分型法
➢限制性片断长度多态性（restriction fragment length polymorphism, RFLP）分析：最早建立 的研究HLA多态性的DNA分型技术
➢PCR-RFLP 分 型 法 ： 对 DNA 片 段 进 行 体 外 扩 增，然后再用限制性内切酶进行酶切分析，可 使限制性长度分析的敏感度大大增加
1．阴性分型法 根据选用的刺激细胞类型分为：
2．阳性分型法
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2. 双向MLC
遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合培养 时，由于两者HLA不同，能相互刺激导致对方淋巴 细胞增殖，故称双向MLC。在此试验中，各自的 淋巴细胞既是刺激细胞，又是反应细胞，反应后形 态上呈现的细胞转化和分裂现象，可通过形态法计 数转化细胞 。
异种动物间
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人的单卵双生子间的器官移植 同品系小鼠的皮片移植
人与人之间的肾移植 不同品系小鼠间的皮片移植
狗的器官移植给猩猩 猪的器官移植给狗
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第一节 器官移植与移植免疫的特点
移植手术后移植物能否存活取决于： 1.移植器官在移植过程中活力的保存； 2.手术时血管吻合和血液循环重建的质量； 3.移植排斥反应的控制。
MLC分为单向MLC和双向MLC
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1. 单向MLC
将已知HLA型别的分型细胞用丝裂霉素C或X线照射预处 理，使其失去增殖能力仅作为刺激细胞；而以具有增殖能 力的受检者外周血单个核细胞为反应细胞。两者混合培养 时，反应细胞可对刺激细胞发生应答而增殖，用3H-TdR掺 入法测定细胞增殖强度，从而判断受检细胞的HLA型别。
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➢耗时长 ➢不同批号抗血清结果 常有不同
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用于HLA分型的微量细胞毒试验
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微量细胞毒试验判定标准
死（着染）细胞（%）
0～10 11～20 21～50 51～80
>80
记分
结果判断
1
阴性
2
可疑阴性
4
弱阳性
6
阳性
8
强阳性
0
未试验或不能读数
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（二）细胞学分型法
以混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte culture, MLC）或称混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction, MLR）为基本技术的HLA分 型法。能用本法测定的抗原称为LD抗原 （lymphocyte defined antigen）,包括HLA-D、-DP。
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移植的类型
自体移植
根据移植物来源同分系类移植
同种异体移植 异种移植
原位移植
根据移植部位分类
异位移植
器官移植
移植物种类分类 支架组织移植
细胞移植
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移植种类和命名
移植名称
自体移植
供者、受者关系
同一个体
举例
自体皮片移植
同系或同基因移植 同种异基因移植 异种移植
同系或同基因 的个体间
同种不同基因 的个体间
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在三类HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ类分子是触发移植排斥 反应的首要抗原，尤其是HLA-DR位点的抗原分子
HLA发挥双重作用： ➢介导宿主抗移植物反应(HVGR); ➢参与移植物抗宿主反应(GVHR)。
HLA的识别方式： ➢直接识别 ➢间接识别
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第二节 HLA配型与应用分析
一、HLA配型
第二十六章 移植免疫及其免疫检测
移植（transplantation）是指将健康细胞、组织 或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、 用以替代或补偿机体所丧失的结构和（或）功能的 现代医疗手段。被移植的细胞、组织或器官称移植 物（graft），提供移植物的个体称为供体(donor)， 接受移植物的个体称为受体（recipient）。
HLA分型方法的改进和不断完善，使得HLA 复杂的多态性更加显现，亦推动了HLA与群体 及自然选择关系的研究，更促进了人们对疾病 本质的认识。
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（一）血清学分型法
应用一系列已知抗HLA的特异性标准分 型血清与待测淋巴细胞混合，借助补体的 生物学作用介导细胞裂解的细胞毒试验。
➢操作简便易行 ➢节约试剂、结果可靠、重复性好 ➢无需特殊设备