沙门氏菌检验标准
沙门氏菌
4.生化试验
在BS、HE或XLD平板上分别挑取2个以上的典型 或可疑菌落。接种Tsi（ 先在斜面上划线，在底层 穿刺。接种针不要灭菌，直接接种。）、赖氨酸 脱羧酶实验培养基和营养琼脂平板。分别于36℃ ±1℃培养18h-24h，必要时可延长至48h。 注：在BS 、HE和XLD上挑选菌落是一定要挑典型 可疑菌落。要不然会影响下面实验。
注：K → 产碱 A → 产酸 性生成→+/－
阳性→+ 阴性→－ 多数阳性少数阴性→ +（－）
阴性生成或阳
如果Tsi和赖氨酸脱羧酶实验培养基的结果符合①②③就继
续接蛋白胨水、尿素琼脂、氢化钾培养基。于36℃ ±1℃ 培养18h-24h，必要时可延长至48h。 注：做过实验的平皿储存于2-5℃，以备必要时复检，实验 步鉴定表
在此过程中要注意的是： ①在前增菌时要把样品发放时间和样品编号都详细的写在
均质袋上，并且在以下的每一步都要把信息写上； ②称取样品时要把样品完全混匀后在称； ③在规定的培养时间内继续往下接种，以防没有增均完全。
2.增菌
轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1ml，转接种于
10mlTTB内，于42 ±1℃培养18 —24h。同时，另取 1ml，转接种于10mlSC内，于36±1℃培养18 —24h。
沙门氏菌在Tsi和赖氨酸脱羧酶实验培 养基内的反应结果
Tsi
斜面 ① K ② K ③ K ④ A ⑤ K 底层 A A A A K 产气 +（－） +（－） +（－） +/－ +/－ 硫化氢 +（－） +（－） +（－） +/－ +/－ 赖氨酸脱羧酶培养基 + － + － +/－ 初步判定 可疑沙门氏菌属 可疑沙门氏菌属 可疑沙门氏菌属 非沙门氏菌 非沙门氏菌
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌，可引起许多动物和人类的肠道感染。
为了检验沙门氏菌的存在，可以采用以下一些常见的方法：1.培养方法：沙门氏菌是一种需氧的微生物，在富含营养成分的寒凝琼脂或低酸性洗涤剂和生物素的培养基上培养。
常用的培养基如VRB （XLD）琼脂、SS琼脂、MS琼脂等。
培养基可以选择均匀地涂布在平板上，也可以用于液体培养。
2.表型特征：沙门氏菌的菌落通常呈现红色或无色，个别品系可能为粉红色。
如在VRB琼脂上，沙门氏菌会变为红色或橙色。
沙门氏菌也可以产生硫化氢，导致MS琼脂呈现黑色。
3.生化特性：沙门氏菌通常可以进行一些常规的生化测试，如产生气泡的气液反应，碳源利用测试和酸碱指示剂变色等。
这些测试可以帮助进一步确认沙门氏菌的存在。
4.血清学方法：采用沉淀试验或血清凝集试验检测血清中的抗生素，以确定是否感染了沙门氏菌。
这些试验通常利用鸡血清，鸡蛋白和羊血清制备的具有特异性的血清反应。
5. 分子生物学方法：沙门氏菌的检验还可以利用PCR技术进行，通过检测沙门氏菌特异性基因如invA基因的存在来确定沙门氏菌的存在。
6.抗生素敏感性试验：通过对沙门氏菌菌株进行抗生素敏感性测试，可以了解菌株对不同抗生素的抗性情况，为临床使用合适的抗生素提供参考。
除了以上提到的方法，还有其他一些检验方法如酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光PCR等也常被用于沙门氏菌的检验。
这些方法不仅可以准确快速地检测沙门氏菌的存在，还可以区分不同菌株和进行进一步的流行病学分析。
总之，通过上述的方法，可以对沙门氏菌进行有效的检验，从而帮助人们及时判断感染情况并及时采取措施进行治疗和预防。
沙门氏菌检验
沙门氏菌检验一、培养基和试剂：1、缓冲蛋白胨水（BP）：按GB4789.28中4.12规定2、氯化镁孔雀绿（MM）增菌液：按GB4789.28中4.13规定3、四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液：按GB4789.28中4.14、4.15规定4、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：GB4789.28中4.16规定5、亚硫酸铋琼脂（BS）：按GB4789.28中4. 19规定6、DHL琼脂：按GB4789.28中4. 20规定7、HE琼脂：按GB4789.28中4.21规定8、WS琼脂：按GB4789.28中4.23规定9、SS琼脂：按GB4789.28中4.22规定10、三糖铁琼脂：按GB4789.28中4.26、27规定11、蛋白胨水靛基质试剂：按GB4789.28中3.13规定12、尿素琼脂（Ph7.2）：按GB4789.28中3.15规定13、氰化钾（KCN）培养基：按GB4789.28中3.16规定14、氨基酸脱羧酶试验培养基：按GB4789.28中3.12规定15、糖发酵管：按GB4789.28中3.2规定16、ONPC培养基：按GB4789.28中3.3规定17、半固体脂：按GB4789.28中4.30规定18、丙二酸钠培养基：按GB4789.28中3.7规定19、沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。
二、沙门氏菌检验程序：三、操作步骤：（一）、前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
各称取检样25g，加在装有255ml缓冲蛋白胨水的500ml广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以8000~100000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18~24h）移取10ml，转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18~24h。
同时，另取10ml，转种于100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于36±1℃培养18~24h.。
沙门氏菌检验
实验六食品中沙门氏菌的检验一、概述：1.沙门氏菌的形态特征：革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，周身鞭毛，运动力强，具菌毛。
2.沙门氏菌需氧或兼性，10-42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8-7.8。
3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品，污染肉类食物的几率很高。
冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。
意义：沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。
在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。
因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。
二、操作步骤：1．前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
2．选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。
此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。
3．选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
4．生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌，提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。
5．血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定，确定菌型。
主要沙门氏菌有2000多个血清型，可先用多价血清鉴定，再用单因子血清鉴定，先有常见菌型的血清鉴定，再用不常见菌型的血清鉴定。
三、实验过程：1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后，将棉签上部剪掉，下部放入前增菌培养基BPW中，5个棉签放入150mL前增液中，将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。
（样品液变浑浊即可）2.选择性增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取4mL前增菌液转种于40mL TTB选择性增菌液内，于42 ℃±1 ℃培养18h-24h。
如果菌株生长过慢（TTB 培养基需现配现用，每组制备40ml增菌液，需加入816uL的碘液后再加入前增液）。
新实施：GB 4789.4-2024沙门氏菌——的预增菌变化
新实施：GB 4789.4-2024沙门氏菌——的预增菌变化G B4789.420242024年3月，国家卫健委、市场监管总局联合发布了47项食品安全国家标准和6项修改单，其中包含《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》（G B 4789.4-2024）检验方法标准。
这一新标准对实验设备、材料和试剂、检验程序与操作步骤进行了修改，并将于2024年8月8日实施。
本文就该标准主要修订内容、操作注意事项进行解读。
主要变化及原因分析变化1：在“预增菌”步骤中新增了在检验乳粉样品时，须将样品倒入225m L B P W 培养基表面，静置60m i n后再进行预增菌。
乳粉类样品经过高温喷雾干燥，其中的沙门氏菌大多处于受损状态；乳粉相对干燥且水活度低，其中受损的沙门氏菌适应了干燥的环境。
在这种情况下，如果受损的沙门氏菌在B P W中快速混匀水化，受损的沙门氏菌会出现渗透压休克；采用浸泡法在室温条件下静置一段时间后再进行预增菌，可以促进受损沙门氏菌的复苏，提高检出率。
变化2：选择性增菌培养基由氯化镁孔雀绿大豆胨（R V S）增菌液代替亚硒酸盐胱氨酸（S C）增菌液，并且B P W接种量改为0.1m L到10m L R V S中，选择性增菌温度为42℃±1℃。
S C增菌液主要适用于伤寒沙门氏菌的选择性增菌，但通过近几年疾病监测发现，我国伤寒、副伤寒沙门氏菌的发病率从10例/10万下降到0.8例/10万左右，而非伤寒沙门氏菌近年来发病率达到560例/10万，在微生物引发的食源性疾病中排前2位。
从培养基成分上看，R V S中含有孔雀绿，能够抑制非沙门氏菌的生长，大豆蛋白胨有利于沙门氏菌的复苏；S C增菌液配置需要的亚硒酸氢钠具有一定毒性，在健康环保方面也存在安全风险，且原料不稳定，过度加热培养基容易变性导致功能失效。
变化3：T T B四硫磺酸钠煌绿增菌液（T T B）选择性增菌改为：低背景菌培养温度为36℃±1℃，高背景菌培养温度为42℃±1℃。
食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验
沙门氏菌检验程序
1 取消样品分类，前增菌液统一为“缓冲蛋白胨 水” 原国标：BPW FDA、AOAC：多种前增菌液 ISO：BPW
2 对所有样品均进行8-18h前增菌 原国标只对冻肉、乳品、蛋品等加工食品进 行前增菌，FDA、AOAC、ISO、Canada MFHPB、CCFRA等组织或国家对所有样品都 进行前增菌。
65.3 81.0 52.0 83.2 80.0 83.0 86.2 106.6 77.7 68.4 98.4 71.6 100.0
I： 进口 C：国产
SS琼脂 上面的志 贺氏菌和 沙门氏菌
C-BS
I-BS
C-HE
I-HE
I-XLD
C-XLD（变形菌落-错误）
I-XLD
样品+BPW+SC+BS
DUPONT Qualicon BAX System 应用DNA分子核酸探针或基因探针技 术制造的全自动PCR分析仪。将已知核 苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法 标记，加入已变性的被检DNA样品中， 在一定条件下即可与该样品中有同源序 列的DNA区段形成杂交双链，从而达到 鉴定样品中DNA的目的。
AOAC 967.25－967.28
处理样品 35℃ 1mL+10mLSC 35℃ 24±2h XLD & HE & BS 35℃ TSI 35℃ 纯培养物 尿素酶＋ 非沙门菌 尿素酶－ 24±2h（BS 24h&48h） & LIA 24±2h 不纯培养物 MAC or XLD or HE 纯培养物 非 沙 门 菌 非 沙 门 菌 24±2h 1mL+10mLTT
35± 1℃ 18~24h & 48h TSI & LIA 血清学试验
欧盟沙门氏菌检验标准
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌，可以导致食物中毒。
为了确保食品安全，许多国家和地区都有相关的食品和饲料中沙门氏菌的检验标准。
欧盟是全球食品安全监管最为严格的地区之一，其对于沙门氏菌的检验标准非常严格。
以下是欧盟对于食品和饲料中沙门氏菌的一般检验标准：
1. 检测方法:欧盟推荐使用ISO 6579:2002、ISO 6579:2007或ISO 6579:2017等国际标准进行沙门氏菌的检测。
2. 样品数量:每个食品或饲料样品的检测数量至少为25克。
3. 检测频率:对于某些高风险食品，如生肉、家禽、蛋类和蛋制品，欧盟推荐在生产、加工、储存和销售过程中进行定期检测。
4. 阳性判定:如果在一个样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被视为阳性。
5. 报告:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么必须立即报告给相关的监管机构。
6. 处理:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被销毁，并且相关的生产或加工设备必须进行清洁和消毒。
需要注意的是，具体的欧盟沙门氏菌检验标准可能会根据食品的种类、来源、加工方法等因素有所不同。
食品中沙门氏菌的检验
三糖铁琼脂（TSI）：该培养基含有乳糖、蔗糖和 葡萄糖，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解 产酸使斜面先变黄，但因量少，生产的少量酸。 因接触空气而氧化，加之细菌生长利用培养基中 含氮物质，生成碱性产物，故斜面后来又变红。 底部由于厌氧状态，酸类不被氧化，仍保持黄色。 而发酵乳糖的细菌，则产生大量的酸，使整个培 养基呈黄色。另外，因某些细菌能分解含硫氨基 酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应 生成黑色的硫化亚铁沉淀。
止加工其他食物时被污染。其次，生的牛肉 、家禽肉、猪肉等都要以可能受污染的食物 对待，并且放置储存时应该与其他食物做好 隔离，防止渗出的血水污染其他食物，如把 新鲜肉装入干净的塑料袋内或盒子内等。
3、保持个人卫生：吃水果时要浸泡和清洗干 净，平时坚决不吃半生不熟的肉类，也不要 吃生鸡蛋和生牛奶。其次，还要养成良好的 卫生习惯，做到饭前、便后洗手，才能更好 的杜绝经口传染沙门氏菌。其次，购买销售 食品时，一定要注意购买日期新鲜、包装完 好和品牌正规的产品。
斜面：A
底层：A
不产气
讨论
硫化氢：＋
在TSI琼脂中有2个指示剂体系： －酚红：在碱性环境中呈红色；在酸性环境中呈黄色。 －硫酸亚铁铵：是硫化氢的指示剂，可与硫化氢反应生成硫化铁呈黑色。
反应序号A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN和赖氨酸脱羧酶3项中有1项异常，按 表四可判定为沙门氏菌。如有两项异常为非沙门氏菌。
GB 4789.4—2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
沙门氏菌食物中毒的主要食物来源为肉类、动 物内脏、牛奶以及鸡蛋类。沙门菌感染会引发 伤寒、副伤寒等。伤寒患者可出现发热、腹痛、 肝脾肿大等典型症状，常规检查血中白细胞低 下。部分患者常伴有玫瑰色的皮疹和相对缓脉 （一般指脉搏不随体温的升高而加快的一种现 象），病情严重者可出现表情淡漠、反应迟钝 等神经系统症状，也可伴有肠出血、肠穿孔等 严重并发症；副伤寒或非伤寒沙门菌感染者除 表现轻型的伤寒症状外，还可出现腹泻、呕吐 等急性胃肠炎症状，病情严重者可伴发脓毒血 症或菌血症。
沙门氏菌的检验国标
沙门氏菌的检验国标沙门氏菌是一类常见的致病菌，引起人和动物的沙门氏菌感染，是一种重要的公共卫生问题。
为了保障食品安全和人民的健康，各国都制定了相应的沙门氏菌检验国标，以确保食品和水源的安全。
沙门氏菌的检验国标是根据沙门氏菌的特性和致病机制制定的，旨在检测食品和水源中是否存在沙门氏菌。
根据国际标准化组织（ISO）和国家标准化组织（CNS）的规定，沙门氏菌的检验国标主要包括以下几个方面。
首先是样品的采集和处理。
在进行沙门氏菌检验之前，需要采集样品并进行处理。
样品的采集应该规范，避免交叉污染。
在样品处理过程中，要注意避免沙门氏菌的繁殖和生长，以防止结果的误判。
其次是培养基的准备和使用。
沙门氏菌的培养需要适当的培养基，以提供菌种生长所需的营养物质。
培养基的制备要符合国家标准，以确保培养过程的准确性和可重复性。
此外，在培养过程中要注意温度、pH值和氧气含量等因素的控制，以保证沙门氏菌能够正常生长。
第三是沙门氏菌的检测方法。
常用的沙门氏菌检测方法包括传统的培养方法和分子生物学方法。
传统的培养方法主要是通过培养基的选择和培养条件的控制，将沙门氏菌培养出来并进行鉴定。
分子生物学方法则是通过检测沙门氏菌的DNA序列来确定是否存在沙门氏菌。
这些方法各有优缺点，可以根据实际情况选择合适的方法进行检测。
最后是结果的解读和报告。
沙门氏菌的检验结果应该进行准确的解读，并进行相应的报告。
根据国家标准，沙门氏菌的检测结果可以分为阴性和阳性。
阴性表示样品中未检测到沙门氏菌，阳性表示样品中存在沙门氏菌。
在报告中，应该详细说明检测的方法、结果和结论，以便相关部门和人员能够及时采取相应的措施。
沙门氏菌的检验国标是保障食品安全和人民健康的重要举措。
通过采集样品、准备培养基、选择合适的检测方法和解读结果，可以有效地检测和防控沙门氏菌感染的风险。
各国应该根据实际情况和国家标准，制定和执行相应的沙门氏菌检验国标，以确保食品和水源的安全，保障人民的健康。
沙门氏菌检验国家标准
沙门氏菌检验国家标准沙门氏菌是一种常见的致病菌，可以通过食物、水源和接触感染等途径传播，引起食物中毒和肠道感染等疾病。
为了保障食品安全和公共卫生，我国对沙门氏菌的检验标准进行了规范，制定了相应的国家标准。
首先，沙门氏菌检验国家标准明确了检验对象和范围。
该标准适用于食品、饮用水、环境样品等的沙门氏菌检验，包括沙门氏菌的定性和定量检验方法。
针对不同的检验对象，标准中规定了具体的检验方法和技术要求，确保检验结果的准确性和可靠性。
其次，标准对沙门氏菌的检验方法进行了详细的描述。
在样品的处理和预处理过程中，标准规定了严格的操作要求，包括样品的采集、保存、运输和处理等。
针对不同的样品类型，标准中还规定了不同的处理方法，以确保样品中沙门氏菌的检出率和准确性。
此外，标准还对沙门氏菌的培养和鉴定方法进行了规范。
在培养基的选择和制备过程中，标准明确了培养基的成分和制备方法，以及培养条件和培养时间等。
在沙门氏菌的鉴定过程中，标准规定了生化试剂的选择和使用方法，以及鉴定结果的判定标准，确保鉴定结果的准确性和可靠性。
最后，标准对沙门氏菌的定量检验方法进行了规定。
在定量检验过程中，标准规定了菌落计数方法和计数结果的表达方式，以及检验结果的判定标准。
同时，标准还规定了质控要求和质控方法，确保检验结果的可比性和可靠性。
总的来说，沙门氏菌检验国家标准的制定为我国食品安全和公共卫生提供了重要的技术支撑和保障。
通过严格执行该标准，可以有效地预防和控制沙门氏菌引起的食物中毒和肠道感染等疾病，保障人民群众的身体健康和生命安全。
希望各相关部门和单位能够认真贯彻执行该标准，不断提升沙门氏菌检验工作的水平和质量，为我国食品安全和公共卫生事业作出积极贡献。
GB沙门氏菌检验
沙门氏菌(Salmonella)的检验
• 沙门氏菌：革兰氏阴性肠道杆菌 • 导致胃肠炎、伤寒和副伤寒。 • 蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌病的主要传播媒介。
2
《GB 4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-1
3
《GB/T4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-2
Nutrient Agar
BactiDrop™ Kovacs Indol RapID™ ONE system
靛基质试剂 Indole reagent
R21522
R8311006
商品化的生化鉴定系统
6
结果观察
BS琼脂
• 产硫化氢菌落为黑色有金属光泽、 棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈 黑色或棕色； • 有些菌株不产生硫化氢，形成灰绿 色的菌落，周围培养基不变。
2 days
18
11
How Inhibigens™ Work
The L-AEP Inhibigen
Inhibigen
Substrate (L-alanine) Inhibitor component L-AEP
Uptake via peptide permease
-
X
Free inhibitor in medium is not actively taken up
该方法通过AFNOR（法国标准化协会）的验 证(UNI 03/06 – 12/07)，依照 ISO16140:2003，与ISO 6579:2002的方法 具有等效的结果
17
Precis 沙门氏菌快速培养检测法
增菌 沙门氏菌ONE肉汤
平板分离 Brilliance™ 沙门氏菌显色培养基
食品中沙门氏菌的限量标准
食品中沙门氏菌的限量标准
沙门氏菌是一种常见的食品中毒病原体，能够引起严重的胃肠道感染。
为保障消费者的健康，国家制定了食品中沙门氏菌的限量标准。
根据《食品安全国家标准食品微生物检验普通检验方法》（GB/T 4789.1-2016），各类食品中沙门氏菌的限量标准如下：
1、肉及肉制品类食品：每克不得检出。
2、蛋及蛋制品类食品：每克不得检出。
3、水产品类食品：每100克不得超过100个。
4、水果及果蔬制品类食品：每克不得超过1个。
5、豆制品及其制品类食品：每克不得超过100个。
以上标准仅为参考，不同地区、不同品种的食品可能会有所差异，具体的限量标准应参照国家相关法规和标准。
消费者在购买食品时，要选择有合法生产许可证和质量检测合格证明的食品，避免购买过期或者质量不过关的食品，以减少感染沙门氏菌的风险。
- 1 -。
沙门氏菌药敏试验判定标准
沙门氏菌药敏试验的判定标准如下：首先，根据实验方法的不同，将沙门氏菌药敏试验分为两种判定标准，即琼脂稀释法和肉汤稀释法。
在琼脂稀释法中，当细菌浓度低于1×10^5 cfu/ml时，药物的最小抑菌浓度（MIC）就是其最低杀菌浓度（MBC）；当细菌浓度高于1×10^5 cfu/ml时，需要选择琼脂稀释法中的敏感菌株，通过将药物点种在平板培养基上，待对数期沙门氏菌生长繁殖后，再加入判断敏感性的划痕线，通过观察划痕线处是否生长细菌来判定敏感性。
如果细菌生长，则药物为沙门氏菌的敏感药物。
肉汤稀释法中，实验步骤和判定标准也有详细的说明。
首先，要选择合适的药物浓度进行药敏试验，然后将无菌的沙门氏菌人工培养物液体培养物接种到相应的肉汤培养基中，使其达到一定的细菌数密度。
随后将配制好的药物稀释液进行接种，通常用适当的接种工具挑取适量的细菌混合菌悬液接种于含药平板培养基中混合均匀，在接种前需要注意确保培养基与稀释药液充分混匀，并在4分钟以内完成接种。
完成接种后放在相应条件下培养。
沙门氏菌药敏试验的最后结果判定需要根据细菌生长情况、抑菌圈大小、敏感性带的位置以及是否出现多重耐药性带等因素综合考虑。
在判断结果时，如果细菌在培养基中生长良好，则表明该药物对沙门氏菌没有抑制作用。
如果细菌在含有药物的平板培养基中不生长或生长较少，则表明该药物对沙门氏菌具有高度敏感性。
如果敏感性带较窄或抑菌圈较小，则表明该药物对沙门氏菌的敏感性较低。
同时需要注意的是，如果沙门氏菌同时表现出多重耐药性，则表明该药物对沙门氏菌的敏感性很低。
综上所述，沙门氏菌药敏试验的判定标准涉及到多个方面，需要综合考虑多种因素进行判断。
因此在进行沙门氏菌药敏试验时，需要严格按照实验方法进行操作，以确保结果的准确性。
同时，对于不同的药物和细菌浓度组合，也需要进行充分的试验和验证，以确保药物的安全性和有效性。
沙门氏菌检测标准、方法及实验关键点
．检验沙门氏菌的原因和意义：据统计我国细菌性食物中毒中70%～80%是由沙门氏菌引起的，人一旦摄入含有大量沙门氏菌(105～(106个/g)的动物性产品，就会引起细菌性感染，进而在毒素作用下发生食物中毒导致胃肠炎、伤寒和副伤寒且沙门氏菌的传播媒介众多，肉、蛋以及食品从加工到出售的过程中都十分容易发生污染。
因此对沙门氏菌的检验事关重大。
二、检测及鉴定：沙门氏菌的检测要在二级生物安全实验室及二级生物安全柜(在负压情况下防止致病微生物气溶胶飘离实验室对实验人员及环境造成污染)中进行。
沙门氏菌典型菌落形态：生化鉴定显示：API20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法，广泛应用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
限值要求：参考CAC、ICMSF、欧盟、澳大利亚和新西兰、美国、加拿大、香港、台湾等国际组织、国家和地区的即食食品中沙门氏菌限量标准及规定，《GB29921-2013食品中致病菌限量》按照二级采样方案对所有11类食品设置沙门氏菌限量规定，具体为n=5，c=0，m=0（即在被检的5份样品中，不允许任一样品检出沙门氏菌）。
三、沙门氏菌传统检测方法的关键控制点1、样品处理尽可能缩短解冻时间，使竟争菌群生长最少，并减小对沙门氏菌的损伤致病菌取样一定要均匀并具有代表性（蛋黄蛋清混匀取样）。
2、培养基及培养方面（1）没有一种培养基可疑准确无误的筛选出沙门氏菌，必须选择多种选择性培养基同时筛选，只能说显色培养基综合选择性更强。
（2）试剂和培养基的配置一定要严格按照说明书配置，是否需要高压灭菌，添加剂用量及培养基保存条件。
（3）有1%沙门氏菌乳糖发酵阳性，为了避免漏检乳糖阳性菌必须选择不依赖乳糖的培养基，目前BS 培养基认为是最适合的。
（4）BS培养基是分离沙门氏菌的高效培养基，特别适用于伤寒类的沙门氏菌，不是所有的选择性培养基都能有效分离出伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌，BS是分离伤寒类沙门氏菌的首选培养基。
沙门氏菌检验PPTGB4789.4-2016 -JW
BS琼脂：某些非典型菌株产生绿色菌落， 其周围培养基稍微或不呈暗色。如果BS平 板培养24±2小时后，没有出现典型菌落， 则不挑取任何菌落，让平板继续培养24±2 小时。如果经48±2小时培养后，仍没有典 型或可疑的菌落出现，则挑取2个或更多个 非典型的菌落。
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赖氨酸脱羧酶试验
赖氨酸脱羧酶试验培养基：蛋白胨、酵母浸 膏、葡萄糖、溴麝香草酚蓝（紫）。 原理：细菌使氨基酸脱羧，产生胺类，使培 养基变碱，颜色不改变。 沙门菌的反应：阳性。 意义：柠檬酸杆菌、志贺菌 均为阴 性；埃 希氏菌不定。
亚硫酸铋琼脂（BS）：含有煌绿、亚硫酸铋能抑制大 肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长，但对伤寒、 副伤寒等沙门菌的生长无影响。伤寒杆菌及其他沙门 菌能利用葡萄糖将亚硫酸铋还原成硫酸铋，形成黑色 菌落周围绕有黑色和棕色的环，对光观察可见有金属 光泽。该培养基制备过程不宜过分加热，以免降低其 选择性，应在临用时配制，超过48h不宜使用。陆桥 的说明书要求提前一天配置？
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四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)：含有胆盐， 抑制革兰氏阳性球菌和部分大肠埃希氏菌 的生长，而伤寒与副伤寒沙门氏菌仍生长
亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）：可对伤寒 及其他沙门氏菌作选择性增菌，亚硒酸与 蛋白胨中的含硫氨基酸结合，形成亚硒酸 和硫的复合物，影响细菌硫代谢，从而抑 制大肠埃希氏菌、肠球菌和变形杆菌的增 殖。
注：此培养基在制作过程中过分加热可使培养基的选择性降 低，与TTB或SC合用可获得更高的检出率。
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沙门菌的分离培养基
XLD琼脂：培养基中含有去氧胆酸钠作指示剂， 在该浓度下的去氧胆酸钠也同时作为大肠埃 希氏菌的抑制剂 ，而不影响沙门菌属和志贺 菌属的生长。
XLD培养基分离沙门菌和志贺菌的敏感性超过 了传统的培养基，如：EMB、SS、BS。因这些 培养基尚有抑制志贺菌属生长的潜在因素， 故本培养基是分离鉴定沙门菌及志贺菌属的 可靠培养基。在国外广泛使用。
肠道沙门氏菌检测标准
肠道沙门氏菌检测标准涉及多个方面，包括样本采集、处理、培养、鉴定以及确认等步骤。
以下是一些关键的检测标准和指南：
1. 样本采集：应按照适当的程序采集肠道样本，比如粪便样本，以避免污染。
采集的样本应当妥善保存，并尽快送至实验室进行分析。
2. 预处理：样本到达实验室后通常需要进行预处理，如稀释、富集等，以便于后续的培养和检测。
3. 培养：使用选择性培养基进行培养，以分离和增殖沙门氏菌。
培养条件需要严格控制，以确保沙门氏菌的生长。
4. 筛选与初步鉴定：通过观察菌落的形态、颜色以及生化试验对分离出的菌株进行初步筛选和鉴定。
5. 血清学鉴定：利用血清学方法对疑似沙门氏菌进行进一步鉴定，确定其血清型。
6. 分子生物学鉴定：在必要时，可以通过PCR等分子生物学技术对沙门氏菌的特定基因进行检测，以提高鉴定的准确性。
7. 抗生素敏感性测试：为了指导临床治疗，需要对分离出的沙门氏菌进行抗生素敏感性测试，以确定其对抗生素的敏感性。
8. 确认：最终的鉴定结果需要由具备资质的实验室确认，并出具相应的检测报告。
沙门氏菌检测的具体标准和操作流程可能因国家和地区的法规、实验室的技术能力以及检测目的的不同而有所差异。
因此，执行检测时应遵循当地的法规和指南，并使用经过验证的检测方法和试剂。
在食品安全和公共卫生领域，沙门氏菌检测尤为重要，以确保食品的安全性并防止疾病的传播。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种能够引起食物中毒的细菌，它会在食品生产和加工过程中引起污染，导致食品中毒事件的发生。
对食品中的沙门氏菌进行检验及分析是非常重要的，可以保障食品安全，保护消费者的健康。
一、沙门氏菌的检验方法1. 检验样品的选择要进行沙门氏菌的检验，首先需要选择检验样品。
常见的样品包括生鲜肉类、禽类、蛋类、奶制品、水产品、蔬菜和水果等。
2. 检验方法沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。
传统培养法：通过在适宜的培养基上培养样品中的沙门氏菌，并进行培养时间、培养温度和培养后的观察来进行检验。
分子生物学方法：包括PCR、实时荧光PCR、蛋白质芯片技术等。
3. 检验过程（1）样品的制备：将样品进行预处理，如样品减容、均质化、稀释等。
（2）沙门氏菌的分离：将样品在培养基上进行分离培养，并进行相应的筛选和鉴定。
（3）菌落的计数：通过计数方法，对沙门氏菌的数量进行测定。
（4）沙门氏菌的鉴定：对分离出的沙门氏菌进行鉴定，确认其种属和毒力类型。
4. 结果分析通过检验分析得到的结果，对样品是否超标、是否存在沙门氏菌污染等进行判断和分析。
二、沙门氏菌的分析意义2. 生产质量对食品中的沙门氏菌进行检验和分析，可以对生产工艺进行控制，确保生产过程的卫生安全，保障产品的质量。
3. 公共卫生及时对食品中的沙门氏菌进行检验和分析，可以帮助卫生监管部门掌握食品安全情况，及时采取措施，有效保护公共卫生。
4. 营养健康保障食品安全，避免食品中毒事件的发生，对促进人们的营养健康具有重要意义。
三、沙门氏菌的预防控制为了有效预防和控制沙门氏菌污染，可以采取以下措施：1. 生产环节控制合理设计食品生产线，加强生产卫生管理，确保生产过程中的卫生安全。
2. 原料筛选选择优质原料，确保原料的卫生安全性。
3. 加工控制加强食品加工的卫生监管，保障食品加工过程中的卫生安全。
4. 检验监控加强对食品中沙门氏菌的检验监控，确保食品质量和食品安全。
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范围
• 本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella） 的检验方法。
• 本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。
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设备和材料
2.1 冰箱:2 ℃～5 ℃。 2.2 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃，42 ℃±1 ℃。 2.3 均质器。 2.4 振荡器。 2.5 电子天平:感量 0.1 g。 2.6 无菌锥形瓶:容量 500 mL，250 mL。 2.7 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度） 或微量移液器及吸头。 2.8 无菌培养皿:直径 90 mm。 2.9 无菌试管：3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。 2.10 无菌毛细管。 2.11 pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。 2.12 全自动微生物生化鉴定系统。
沙门氏菌属显色 培养基
表1 沙门氏菌再不同选择性琼脂平板上的菌落特征 选择性琼脂平板 沙门氏菌
菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑
色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。
BS 琼脂
HE 琼脂 XLD 琼脂
蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为黄 色，中心黑色或 几乎全黑色。 菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽 的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落， 带或不带黑色中心。 按照显色培养基的说明进行判定。
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3.9 蛋白胨水、靛基质试剂 3.10 尿素琼脂（pH 7.2） 3.11 氰化钾 （KCN） 培养基 3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基 3.13 糖发酵管 3.14 邻硝基酚 β-D 半乳糖苷（ONPG）培养基 3.15 半固体琼脂 3.16 丙二酸钠培养基：见附录 A 中 A.15。 3.17 沙门氏菌 O 和 H 诊断血清。 3.18 生化鉴定试剂盒。
3
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培养基和试剂
缓冲蛋白胨水（BPW） 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液 亚硫酸铋（BS）琼脂 HE 琼脂 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂 沙门氏菌属显色培养基 三糖铁（TSI）琼脂
第一法 定性检验5• •操作步骤• • • • •
5.1 前增菌 称取 25 g（mL）样品放入盛有 225 mL BPW 的无菌均质杯中，以 8 000 r/min～10 000 r/min 均质 1 min～2 min，或置于盛有 225 mL BPW 的无菌均 质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min。若样品为 液态，不需要均质，振 荡混匀。如需要，测定 pH 值，用 1 mol/mL 无菌 NaOH 或 HCl 调 p H 至 6.8±0.2。 无菌操作将样品转至 500 mL 锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进 行培养，于 36 ℃±1 ℃培养 8 h～18h。 如为冷冻产品，应在 45 ℃以下不超过 15 min，或 2 ℃～5 ℃不超过 18 h 解冻。 5.2 增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取 1 mL，转种于 10 mL TTB 内，于 42 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。 同时，另取 1 mL，转种于 10 mL SC 内，于 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。 5.3 分离 分别用接种环取增菌液 1 环，划线接种于一个 BS 琼脂平板和一 个 XLD 琼脂 平板（或 HE 琼脂平 板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于 36 ℃±1 ℃分 别培养 18 h～24 h （XLD 琼脂平板、HE 琼脂平板、 沙门氏菌属显色培养基平 板） 或 40 h～48 h （BS 琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，各个平 板 上的菌落特征见表 1。