肠杆菌科

微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
志贺菌检验程序

在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、 黏液部分，床边接种或立即送检，不能及 时接种者可用卡-布运送培养基送检，昏迷 不能排便病人可用肛拭取样。
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第五节 耶尔森菌属
一、分类 二、鼠疫耶尔森菌 三、小肠结肠炎耶尔森菌 四、其他耶尔森菌


甲类烈性传染病——鼠疫
常见临床类型： 腺鼠疫 败血型鼠疫 肺鼠疫
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）结果分析与报告
一旦疑为本菌，应立即向本地区疾病控 制中心等部门报告，并将菌种送检验 中心或专业实验室作进一步鉴定。诊 断确立后除对患者进行隔离治疗外， 对疫区及有关人员须采取有效的预防 隔离措施，防止疫情扩散。
H凝集 （1:20～1:1280，效价1:320）
肥达反应(Widal test)
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第四节 志贺菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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志贺菌属分为A、B、C、D 4群： A群为痢疾志贺菌（S. dysenteriae），B 群为福氏志贺菌（ S. flexneri ）， C 群 为鲍氏志贺菌（S. boydii），D群为宋 内志贺菌（S. sonnei）。 在 1989 年 CDC 分类系统中将生化 特征相近的 A 、 B 、 C 群归为一群， 统称为志贺菌 A 、 B 、 C 血清群；而 将生化特性与之相异，即鸟氨酸脱 羧酶和 - 半乳糖苷酶均为阳性的宋 内志贺菌单列一类。
肺炎克雷伯菌检验程序
检验方法
1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定
肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验
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第八节 肠杆菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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产气肠杆菌（E.aerogenes） 阴沟肠杆菌 （E.cloacea） 日勾维肠杆菌（E.gergoviae） 阪崎肠杆菌（E.sakazakii） 中间型肠杆菌（E.intermedium） 泰洛肠杆菌（E.taylorac） 河生肠杆菌（E.amnigenus） 阿氏肠杆菌（E.asburiac） 致癌肠杆菌（E.cancerogenus） 溶解肠杆菌（E.dissolvens） 超压肠杆菌（E.nimipressualis）
肠杆菌科
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 第十节
概述 埃希菌属 沙门菌属 志贺菌属 耶尔森菌属 枸橼酸杆菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属、泛菌属、哈夫尼亚菌属 沙雷菌属 变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属
第一节 概述
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、鉴定原则
鼠疫（烈性传染病）、泌尿道感染、
肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症
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鉴定原则
1. 科间鉴别 2. 将肠杆菌科分为三大类 3. 属、种、群、型的区分 4. 肠杆菌科细菌综合鉴定流程
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肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
苯丙氨酸脱氨酶试验 阳性：绿色 阴性：黄色
第二节 大肠埃希菌
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
细菌特性


形态特征
培养特性


生化反应
抗原结构
志贺菌革兰染色
志贺菌菌落特征(MAC)
志贺菌KIA（K A－－）MIU（－－－）
志贺菌IMViC试验（－＋－－）
临床意义
致病物质
所致疾病
致病物质
Байду номын сангаас
侵袭力 菌毛 内毒素 外毒素 志贺毒素
所致疾病

急性细菌性痢疾 慢性菌痢 带菌者
大肠埃希菌检验程序
检验方法
1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 ETEC EPEC EIEC EHEC EaggEC
O157:H7菌落特征（MAC）
O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）
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第三节 沙门菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
硝酸盐还原试验 阳性：红色 阴性：淡黄色
K 抗原或 Vi 抗原等 菌体抗原 （O 抗原） 鞭毛抗原 （H 抗原）
肠杆菌科细菌抗原模式图
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临床意义
致病物质
所致疾病
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致病物质

菌毛或菌毛样结构
荚膜或微荚膜


外膜蛋白
内毒素 外毒素
所致疾病

肠道感染
腹泻、食物中毒、肠热症

肠道外感染
内毒素


肠毒素
所致疾病

伤寒和副伤寒
急性胃肠炎或食物中毒

菌血症（或败血症）
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
、
沙门菌检验程序
检验方法
1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 4.血清学诊断
沙门菌血清学鉴定
O凝集 （1:20～1:1280，效价1:80）
克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低 下的人群，是医院感染中最重要的条件 致病菌。
所致疾病：肺炎、脑膜炎、腹膜炎、 泌尿系统感染、败血症
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
肺炎克雷伯菌易产生超广谱β-内酰胺酶 （ESBL），近年来文献报道我国产酶率已 达30%左右，产酶株对青霉素类、第1、2、 3代头孢菌素及单环β-内酰胺类抗生素均产 生耐药，而仅对头霉素类、碳青霉烯类及 酶抑制剂敏感。ESBL检测现已作为医院细 菌室常规检测项目。
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其他尚有： 假结核耶尔森菌（Y.pseudotuberculosis） 奥氏耶尔森菌（Y.aldouae） 伯氏耶尔森菌（Y.bercovieri） 弗氏耶尔森菌（Y.frederiksenii） 中间耶尔森菌（Y.intermedia）等9种耶尔森菌。 均可从临床标本中分离得到，其相互之间的生 化性状相似，均能在4℃以及在CIN上生长，可 在冷冻食品中增殖，并具有潜在的致病性。
细菌特性


形态特征
培养特性 生化反应
肺炎克雷伯菌革兰染色
肺炎克雷伯菌电镜图
肺炎克雷伯菌荚膜染色
肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）
肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）
肺炎克雷伯菌粘丝试验
肺炎克雷伯菌KIA（A A＋＋ ）、MIU（－－＋）
肺炎克雷伯菌IMViC试验（－－＋＋）
临床意义
枸橼酸杆菌IMViC (＋－＋＋)
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第七节 克雷伯菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）
产酸（催娩）克雷伯菌（K.axytoca） 解鸟氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica） 植生克雷伯菌（K.planticola） 土生克雷伯菌（K.terrigena） 肺炎克雷伯菌又可分为3个亚种： 肺 炎 克 雷 伯 菌 肺 炎 亚 种 （ subsp. pneumoniae ） 肺炎克雷伯菌臭鼻亚种（subsp. ozaenae） 肺 炎克雷伯菌鼻硬结亚种（ subsp. rhinoscleromatis ）
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第六节 枸橼酸杆菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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弗劳地枸橼酸杆菌（C.freundii）
异型枸橼酸杆菌（C.diversus）
无丙二酸盐枸橼酸杆菌
（C.amalonaticus）
细菌特性


形态特征
培养特性 生化反应
弗劳地枸橼酸杆菌菌落特征（MAC）
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
IMViC试验 大肠埃希菌为++-肠杆菌属细菌大多为--++ 动力和鸟氨酸脱羧酶试验 肺炎克雷伯菌为阴性 肠杆菌属多数为阳性
肠杆菌科细菌常产生 AmpC酶，尤以阴 沟肠杆菌最为突出。它是导致革兰阴性菌 尤其是阴沟肠杆菌对 1～3代头孢菌素、单 环β-内酰胺类、头霉素类及含酶抑制剂的 复合制剂耐药的重要原因。 产 AmpC 酶细菌的治疗，首选 4 代头孢 （头孢吡肟）和碳青霉烯类抗生素。近年 来 已 有 质 粒 介 导 的 AmpC 酶 出 现 。
聚团泛菌菌落特征（普通琼脂）
蜂房哈夫尼亚菌菌落特征（MAC）
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第九节 沙雷菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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粘质沙雷菌（S.marcescens） 沙雷菌液化群（S.lique faciens group） 臭味沙雷菌（S.odorifera） 普城沙雷菌（S.plymuthica） 深红沙雷菌（S.rubidaea） 无花果沙雷菌（S.ficaria） 嗜虫沙雷菌（S.entomophila） 居泉沙雷菌（S.fonticola）
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细菌特性


形态特征
培养特性


生化反应
抗原结构
大肠埃希菌革兰染色
大肠埃希菌电镜图
大肠埃希菌菌落特征（血平板）
大肠埃希菌菌落特征（MAC）
大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）
右侧为对照（－－＋＋）
大肠埃希菌抗原结构
临床意义
致病物质
所致疾病
细菌特性


形态特征
培养特性 生化反应
阴沟肠杆菌革兰染色
阴沟肠杆菌菌落特征(MAC)
产气肠杆菌IMViC试验（－－＋＋）
临床意义
肠杆菌属是肠杆菌科中最常见的环
境菌群，医院感染的重要病原菌。在临
床微生物室检出率最高的是阴沟肠杆菌
和产气肠杆菌，可引起泌尿道感染、呼 吸道感染、伤口感染以及败血症。
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细菌特性


形态特征
培养特性


生化反应
抗原结构
伤寒沙门菌革兰染色
伤寒沙门菌菌落特征（MAC）
伤寒沙门菌菌落特征（SS）
伤寒沙门菌菌落特征（血平板）
伤寒沙门菌KIA（K A－＋）MIU（＋－－）
沙门菌IMViC试验（－＋－－）
临床意义
致病物质
所致疾病
致病物质

侵袭力 Vi-Ag
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泛菌属与哈夫尼亚菌属
一、泛菌属 （一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验 二、哈夫尼亚菌属 （一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验
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聚团泛菌（P.agglomerans） 弥散泛菌（P.dispersa）
聚团泛菌包括以前的典型聚团肠杆菌、草生 欧文氏菌和鸡血藤欧文氏菌。
鼠疫耶尔森菌检验程序
标本采集
1. 临床标本 淋巴结穿刺液、血液或痰标本 2. 非临床标本 尸检取病变组织，鼠标本应严 格消毒体表，再进行采集
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小肠结肠炎耶尔森菌
（一）细菌特性 （二）临床意义 （三）微生物学检验
细菌特性


形态特征
培养特性 生化反应
小肠结肠炎耶尔森菌革兰染色
小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（MAC）
小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（CIN琼脂平板)
临床意义

致病物质 侵袭力 肠毒素 所致疾病 小肠炎、结肠炎、胆囊炎 腹膜炎、菌血症

小肠结肠炎耶尔森菌检验程序

KIA：AA--或KA-枸橼酸盐（-） 脲酶（+） 吲哚（-/+） 鸟氨酸脱羧酶（+） 动力、V-P反应结果与孵育温度有关（22℃～ 25℃阳性，35℃～37℃阴性） 根据菌落特征，菌体形态染色特点、嗜冷性及 典型生化结果即可初步诊断本菌。
致病物质

侵袭力 菌毛、K抗原 内毒素 肠毒素 耐热肠毒素（ST） 不耐热肠毒素（LT）
所致疾病

肠道外感染 泌尿道感染（最常见）
胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎

肠道感染
ETEC、EPEC、EIEC、 EHEC、EaggEC
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
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肠杆菌科的共同特性
1. 形态染色相似 革兰阴性杆菌
2. 培养特性相同 普通培养基上生长良好 3. 生化反应活泼 发酵葡萄糖，氧化酶阴性， 触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，O/F试 验为发酵型。 4. 抗原构造复杂 5. 抵抗力弱 6. 易变异
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发酵型
氧化型
产碱型
O-F试验
氧化酶试验 阳性：紫红色 阴性：无色
粘质沙雷菌菌落特征（普通琼脂平板）

粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌都 是已证实的条件致病菌，其中粘质沙雷菌 是医院感染的重要条件致病菌之一，是引 起肠道外感染的主要病原菌，可导致肺部 感染、脑膜炎、心内膜炎、泌尿道感染、 败血症、输血和外科手术后感染等。
鼠疫耶尔森菌
（一）细菌特性 （二）临床意义 （三）微生物学检验
细菌特性


形态特征
培养特性 生化反应
鼠疫耶尔森菌镜下形态（Wayson染色）
鼠疫耶尔森菌菌落特征（MAC）
临床意义
致病物质
所致疾病
致病物质

侵袭力 FI抗原（封套抗原） V/W抗原（毒力抗原） 内毒素 鼠毒素

所致疾病