交叉配血(凝聚胺法)

3.红细胞悬液为5％为宜，过浓或过淡可使抗原抗体比例不适 当，反应不明显易误判。
4.各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时， 可溶性血型物质中和了相应的抗体。
交叉配血（卡式配血）
原理
凝胶具有分子筛效应和亲合效应，在微柱凝胶介质中红细 胞抗原与相应抗体结合，经低速离心，凝集的红细胞悬浮 在凝胶上层，而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部， 试验结果可用肉眼观察。
合；反之，依照不同强度的凝块，试验结果判为阳性， 供受者血液不配合。实验结果必须在3分钟内判读。
异常结果处理：
1. 细胞自凝： 在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷凝 集素而导致交叉配血假阳性；遇此现象可用37℃-40℃生 理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动，观察结果。
2.若病人血清(血浆)含有肝素，如洗肾患者能影响配血，须 多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。
交叉配血（凝聚胺法）
血型鉴定
原理
根据红细胞膜表面有无A抗原和(或)B抗原，将血型分为 A型、B型、AB型和O型4种。可利用红细胞凝集试验， 通过正反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是指用 标准抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗 原和（或）B抗原；所谓反定型，是指用标准A型细胞和 B型细胞来测定血清中有无相应的抗A和（或）抗B。
结果判定（同血型鉴定）
－ 100﹪的红细胞沉在微管的底部 ﹢/ 100﹪的红细胞沉在微管的下端1/3之内 1+ 80﹪的红细胞沉在微管的下端2/3之内 2+ 80﹪的红细胞沉在微管的上端2/3之内 3+ 80﹪的红细胞沉在微管的上端1/3之内 4+ 凝集的细胞全部处于微管的顶部 d.p. 双群 Hemo.. 溶血
结果判定（同血型鉴定）
－ 100﹪的红细胞沉在微管的底部 ﹢/ 100﹪的红细胞沉在微管的下端1/3之内 1+ 80﹪的红细胞沉在微管的下端2/3之内 2+ 80﹪的红细胞沉在微管的上端2/3之内 3+ 80﹪的红细胞沉在微管的上端1/3之内 4+ 凝集的细胞全部处于微管的顶部 d.p. 双群 Hemo.. 溶血
操作步骤 实验前准备： 将所有的样品和试剂平衡至室温， 微柱凝胶卡处理：实验前，将新的ABO卡离心 病人红细胞：取病人抗凝血红细胞 5μl加生理盐水 500μl制成1%的红细胞悬液。
操作步骤
1.平行向后撕拉ABO卡上端的锡纸膜。 2.在主侧孔悬空加入献血员红细胞悬液50μl，病人血浆50μl。 3.在次侧孔悬空加入病人红细胞悬液50μl，献血员血浆50μl。 4.在孵育器内37度下孵育15分钟 5.专用离心机离心。结束后观察结果
原理
凝聚胺（polybrene）法首先利用低离子介质降低溶液的离 子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中 的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳 离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩 短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体 直接凝集红细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特 异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性 凝集则不会分散。
标本采集
标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配 成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细 胞悬液。 标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2
（mg/dz）抗凝标本应无溶血。
操作步骤及结果判断：
1. 供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。加样 量为：血清2滴，红细胞悬液1滴。主侧：受血者血清+ 供者红细胞悬液；次侧：受血者红细胞悬液+供血者血 离子介质0.6ml，混匀置室温1分钟。加凝 聚胺溶液2滴，混匀，置室温15秒。
3.1000g(3000rpm)，离心18秒，弃上清液，管底保留约2 滴液体。轻摇试管，观察是否形成凝块。如未形成凝块， 则重做前面试验。
操作步骤及结果判断：
4. 加入2滴重悬液，轻轻混合，肉眼或显微镜下观察结果。 5.凝块在1分钟内分散，试验结果为阴性，供受者血液配
试剂 微柱凝胶检测卡试剂盒。 A、B标准红细胞。 仪器设备 恒温孵育器，专用离心机
操作步骤 实验前准备： 将所有的样品和试剂平衡至室温， 微柱凝胶卡处理：实验前，将新的ABO卡离心 病人红细胞：取病人抗凝血红细胞 5μl加生理盐水 500μl制成1%的红细胞悬液。
操作步骤
1.平行向后撕拉ABO卡上端的锡纸膜。 2.在A1孔悬空加入50μl标准A1红细胞，在B孔悬空加入50μl 标准B红细胞，再在两孔中各加入50μl样品血浆 3.在A、B、D和质控孔内分别悬空加入病人红细胞悬液50μl （注意加样头不要碰试管壁，防止交叉污染） 4.专用离心机离心。结束后观察结果