血球计数板的使用

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血球计数板的使用通用课件

血球计数板的使用通用课件

在数据解读过程中,某些异常值可能被忽 略或误判,这会影响最终结果的准确性。
05
血球计数板的发展趋势与展望
技术创新与改进
自动化技术
通过引入自动化技术,提高血球 计数板的计数效率和准确性,减
少人为误差。
高分辨率成像
采用高分辨率成像技术,使计数 板能够捕捉更细微的结构和细胞
特征。
智能化分析
利用人工智能和机器学习算法, 实现血球计数板的智能化分析,
提高分析效率和准确性。
应用领域的拓展
临床诊断
血球计数板在临床诊断中发挥着重要作用,随着技术的不断改进 ,其在临床上的应用将更加广泛。
生物研究
血球计数板在生物学、免疫学和病理学等领域的研究中也有广泛应 用,未来将有更多相关领域得到拓展。
药物研发
血球计数板在药物研发过程中可用于监测药物对血细胞的影响,为 新药研发提供有力支持。
操作经验不足
新手操作员可能由于经验不足而忽略 某些操作细节,导致计数结果不准确 。
缺乏培训
未接受过血球计数板使用培训的人员 可能不了解正确的操作步骤和注意事 项,导致操作不规范。
忽略操作细节
某些操作员可能过于自信,忽略了一 些看似微不足道的细节,如清洁计数 板或确保镜筒对准等,这些细节都可 能影响计数的准确性。
未来发展方向
1 2 3
标准化与规范化
未来血球计数板的发展需要进一步标准化和规范 化,以确保不同设备之间的可比性和互操作性。
个性化医疗
随着个性化医疗的发展,血球计数板将更加注重 个体差异和特殊需求,为患者提供更加精准的诊 断和治疗方案。
跨界融合
未来血球计数板的发展将与其他医疗设备和技术 进行跨界融合,形成更为完整的医疗解决方案, 提高医疗服务的整体水平。

血球计数板的计数方法

血球计数板的计数方法

血球计数板的计数方法血球计数板是临床常用的一种实验工具,用于进行血球计数。

正确的计数方法对于获得准确的实验结果至关重要。

下面将介绍血球计数板的计数方法,希望能对大家有所帮助。

首先,准备工作。

在进行血球计数之前,需要准备好所需的实验器材,包括血球计数板、显微镜、计数管、稀释液等。

确保这些器材都是干净的,并且没有污染物。

接着,进行稀释。

将待检测的血液样本与稀释液按照一定比例混合,以便于在计数板上进行观察。

通常情况下,我们会选择将血液与稀释液按1:100的比例混合。

然后,取适量混合液。

用计数管吸取适量的混合液,然后将其滴在血球计数板的计数室中。

注意不要滴得太多,以免影响后续的观察和计数。

接着,观察计数。

将已经滴在计数板上的混合液放在显微镜下进行观察。

通常情况下,我们会选择在显微镜下使用高倍镜进行观察,以便于更清晰地观察血球的数量。

在观察的过程中,需要注意以下几点,首先,要选择一个代表性的计数室进行观察,避免选择边缘位置,以免造成计数误差。

其次,要仔细观察每一个小方格内的血球数量,可以选择一个规定的方向进行观察,比如从左上角到右下角。

最后,要进行多次观察,并取平均值作为最终的计数结果,以提高结果的准确性。

最后,进行计数。

根据观察到的血球数量,按照计数板上的标度进行计数。

通常情况下,我们会选择计算每个小方格内的血球数量,然后根据标度计算出单位体积内的血球数量。

在进行计数的过程中,需要注意以下几点,首先,要保持专注,避免因为粗心大意而造成计数错误。

其次,要按照统一的标准进行计数,避免因为个人主观因素而造成结果的偏差。

最后,要记录下每次的计数结果,以便于后续的数据分析和比对。

通过以上步骤,我们就可以完成血球计数板的计数工作。

在进行实验的过程中,需要严格按照操作规程进行操作,以确保实验结果的准确性。

希望以上内容能够对大家有所帮助,谢谢阅读。

血球计数板的计数方法

血球计数板的计数方法

血球计数板的计数方法血球计数板是临床实验室中常用的一种计数工具,用于进行血细胞计数。

正确的计数方法对于获得准确的结果至关重要。

下面将介绍血球计数板的计数方法。

首先,准备工作。

在进行血球计数之前,需要准备好所需的实验器材和试剂。

包括血球计数板、显微镜、计数用盖玻片、血细胞计数液等。

确保实验器材的清洁和完整,以免影响计数结果。

其次,取样。

取适量的血液样品,使用吸管或注射器将血液滴在计数板的计数室中。

注意避免气泡的产生,以确保计数的准确性。

然后,计数。

将计数板放置在显微镜上,调节镜头至适当倍数。

在计数室的九个小方格中,选择几个进行计数。

根据所选小方格的面积和深度,计算出所选小方格的体积。

然后在显微镜下观察所选小方格中的血细胞数量,并进行计数。

接着,计算。

根据所选小方格的体积和计数结果,计算出每升血液中的血细胞数量。

通常情况下,计数板上的每个小方格代表的体积是已知的,根据这一体积和计数结果,可以得出血细胞的浓度。

最后,记录。

将计数结果准确记录下来,包括所选小方格的数量、计数板的倍数、计数室的体积等信息。

这些记录对于结果的准确性和可复现性具有重要意义。

在进行血球计数板的计数方法时,需要注意以下几点,首先,要保持耐心和细心,避免因匆忙而导致计数错误。

其次,要进行多次计数,并取平均值,以提高结果的准确性。

最后,要严格按照操作规程进行,避免操作失误。

总之,血球计数板的计数方法是临床实验室中常用的一种技术。

正确的计数方法能够确保结果的准确性,对于临床诊断和治疗具有重要意义。

希望本文介绍的计数方法能够对相关人员有所帮助,提高血球计数的准确性和可靠性。

《血球计数板使用》课件

《血球计数板使用》课件

01
02
03
04
计数结果应及时记录并核对, 确保数据的准确性和完整性。
对于异常数据应进行复核或重 新取样,避免误差的积累。
在数据解读时应结合实际情况 进行分析,避免片面或主观的
判断。
对于误差的控制应采取有效的 措施,如采用合适的取样方法
、提高操作技能等。
04
血球计数板应用实例
临床应用实例
诊断疾病
《血球计数板使用》PPT课件
目录
• 血球计数板简介 • 血球计数板操作步骤 • 血球计数板使用注意事项 • 血球计数板应用实例 • 血球计数板的发展趋势与展望
01
血球计数板简介
血球计数板的结构
血球计数板由一块载玻片和两个 盖玻片组成,载玻片上刻有方格 ,每个方格分为9个中格,共计
162个小格。
04
稀释样本
将待测样本进行适当稀释,以 便于计数。
染色处理
根据实验要求,对稀释后的样 本进行染色处理。
滴加样本
使用吸管或移液器将染色后的 样本滴加到血球计数板的凹槽
中。
覆盖盖玻片
轻轻覆盖盖玻片,确保没有气 泡产生,然后进行显微镜检查

数据分析阶段
显微镜检查
使用显微镜观察血球计 数板,记录各种血细胞
提高医疗效率
降低医疗成本
血球计数板的智能化和自动化将大大 提高医疗效率,减轻医护人员的工作 负担。
血球计数板的优化和普及将降低医疗 成本,减轻患者经济负担,促进医疗 服务的普及和公平。
促进医疗技术创新
血球计数板的发展将推动医疗技术的 不断创新和发展,提高医疗质量和安 全性。
THANK YOU
感谢各位观看
药物研发

血球计数板的使用方法

血球计数板的使用方法

血球计数板的使用方法
一、注意事项
1. 血球计数板只能用于血液检查,不能用于测量其他物质;
2. 将血球计数板放置于平面上,确保平稳,防止晃动和碰撞;
3. 在开始测定之前,要根据靶点的电极安装完整;
4. 滴血时要涂抹几种抗凝剂,防止血液沉淀。

如果血液较深,可在计数前用刨子将血液挖出。

二、步骤
1. 将血液精确滴在血球计数板上;
2. 连接血球计数板上的接头,打开电源;
3. 根据靶点调整电位器;
4. 将光学镜头的焦距调节到节点最佳状态;
5. 通过镜头观察血液样本,一次性计数红细胞、白细胞和血小板的数量;
6. 通过刀片移动的方式,进行血球的细致观察和计数;
7. 计数结束后,关闭电源,清理血球计数板上的血液,清洗各个部分,涂抹上抗菌剂。

血球计数板的使用方法

血球计数板的使用方法

血球计数板的使用方法血球计数板是临床实验室中常用的一种设备,用于进行血细胞计数和形态观察。

正确的使用方法对于获得准确的结果至关重要。

下面将详细介绍血球计数板的使用方法。

首先,准备工作。

在进行血球计数之前,需要准备好所需的工具和试剂,包括血球计数板、显微镜、横纹管、生理盐水、乙醇等。

确保这些工具和试剂都是清洁的,并且没有污染。

接下来,进行样本制备。

首先,将一滴血液加入到横纹管中,然后用生理盐水进行稀释,直到样本达到合适的稀释倍数。

将稀释后的样本加入到血球计数板的计数室中,确保填满计数室的每一个小格。

然后,进行计数和观察。

将血球计数板放置在显微镜上,调整倍数和焦距,观察计数室中的血细胞。

使用显微镜的目镜和物镜进行细胞计数和形态观察,记录所观察到的细胞数量和形态特征。

最后,进行数据分析和结果记录。

根据观察到的细胞数量和形态特征,进行数据分析,计算出各种血细胞的数量比例。

将结果记录在实验记录表中,并进行结果的验证和复核。

在使用血球计数板的过程中,需要注意以下几点。

首先,确保血球计数板和显微镜的清洁和干燥,避免污染和误差。

其次,稀释样本时要注意控制稀释倍数,以确保观察到合适数量的细胞。

最后,进行计数和观察时,要认真细致,避免遗漏或重复计数。

血球计数板的使用方法并不复杂,但需要严格按照操作规程进行,以确保结果的准确性和可靠性。

正确的使用方法不仅可以提高实验效率,还可以避免误差和污染,保证实验结果的科学性和可信度。

希望以上介绍对于血球计数板的正确使用有所帮助。

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法1、血球计数板的构造血球计数板是一种生物学或医学仪器,用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数,也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。

血球计数板的形状如图1所示,血球计数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上由4个槽构成3个平台。

中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一方格网,每个方格网共分9个大方格(大方格用三线隔开),中央的一大方格作为计数用,称为计数室,如图2所示。

计数室的规格常有两种:一种叫XXX式(16×25型),是一个计数室分为16个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型),是一个计数室分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。

可是不管计数室是哪种构造,它们都有一个配合特点,即计数室都由400个小方格组成。

计数室的边长常为1mm,则计数室的面积为1mm2,盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格的边长为0.05mm,每个小方格的容积为边长为0.25mm,每其中方格的容积为长为0.2mm,每其中方格的容积为12、血球计数板的使用方法(以计数酵母菌为例)(1)用血球计数板计数培养液中的酵母菌个数。

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌的计数,以每小方格内含有45个酵母菌为好,一般稀释10倍即可。

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室盖上专用的盖玻片。

(4)将稀释后的培养液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗人,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻使酵母菌全部沉到计数室内。

(5)计数时,如果使用16×25型的计数室,要按对角线位,取左上,左下,右上,右下4个中方格(即100个小方格)的酵母菌个数3如果为25×16型的计数室,除了取其4个对角方位外,还需再数屮央的一个中方格(即80个小方格)的酵母菌个数。

血球计数板的使用方法

血球计数板的使用方法

血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。

下面是使用血球计数板的一般步骤:
1. 准备工作:
- 清洁血球计数板:使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁,并确保完全干燥。

- 准备血液样本:采集血液样本,并将其置于抽血管中。

2. 充填血液样本:
- 将橡胶管连接至抽血管的一端,并将另一端放入含有适当
稀释液(例如乙醇,盐水等)的试管中。

- 轻轻压抽血管,让血液与稀释液混合,确保样本适当稀释。

3. 填充计数室:
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。

- 逐渐放松手指,使液体自然充满整个计数室。

4. 观察计数室:
- 使用显微镜,在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。

- 记录计数室内的血球数量。

5. 计算血球数量:
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。

- 根据计数室内的面积和深度,计算总血球数量。

- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积,以得出
总血球数量的近似值。

6. 清洗和储存:
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室,确保无血液残留。

- 将计数室储存在干燥,洁净的地方,以防止污染和损坏。

请注意,使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧,以确保准确性和可靠性。

在进行血液分析时,应遵循实验室的操作指南和安全规定。

血球计数板的计数方法

血球计数板的计数方法

血球计数板的计数方法
血球计数板是一种常用的实验仪器,用于计算血球数量。

具体的计数方法如下:
1. 准备工作:首先,确保血球计数板干净,无污染。

可用洗涤剂和双蒸水进行清洗和冲洗,然后用无纹纸巾擦干。

2. 取血样:使用无菌针头采集一定量的血液样本,通常使用的样本量为0.02毫升。

3. 加样:将血液样本滴入血球计数板的计数区。

滴落的血液应均匀地分布在计数区的每个小方格内。

4. 观察:视觉放大镜或显微镜的帮助下,通过目镜观察计数区的血球数量。

5. 计数:随机选择若干个小方格,计算这些方格中血球的数量。

一般使用的计数面积为3个或4个方格。

6. 计算:将所选方格中的血球数量相加,然后乘以血球计数板的稀释倍数和倒干涉系数。

根据计算公式,可得出血球的浓度,常用单位为每立方毫米的血液中血球的数量。

7. 结果:将最终计算出的血球浓度记录下来,并报告给相关的医务人员或研究人员。

使用血球计数板进行血球计数时,需要严格按照操作规程进行,
避免出现污染或操作错误。

在完成计数后,要及时清洗血球计数板,以备下次使用。

血球计数板使用方法

血球计数板使用方法

血球计数板使用方法
血球计数板介绍
使用方法
1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面通常稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。

5.计数时若计数区是由16个大方格构成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)的菌数。

假如是25个大方格构成的
计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的菌数(即80个小格)。

为了保证计数的准确性,避免重复计数与漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。

如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。

即位于本格上线与左线上的细胞计入本格,本格的下线与右线上的细胞按规定计入相应的格中。

见右图:即本格中计数细胞为3个。

7.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或者抹擦,以免损坏网格刻度。

洗净后自行晾干或者用吹风机吹干,放入盒内储存。

计数公式
细胞数/ml=100小格内细胞个数/100×400×10000×稀释倍数
1、25格×16格的血球计数板计算公式:
细胞数/ml=80小格内细胞个数/80×400×10000×稀释倍数
例1:用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm ×1mm×0.1mm方格,由400个小方格构成,假如一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先稀释后再计数。

若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 5×400×10000×10=2×108 个。

血球计数板使用说明

血球计数板使用说明
②血盖片应具有一定的重量,平整、光滑、无裂痕,厚薄均匀一致,可使用卡尺多点测量(至少在9个点),不均匀度在0.002mm之内。必要时采用平面平行仪进行测量与评价,要求呈现密集平行的直线干涉条纹。最简单的评价方法是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上,若能吸附一定的时间不脱落,落下时呈弧线形旋转,表示盖片平整、厚薄均匀。同时,合格的盖片放置在计数室表面后,与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹。精选出的盖片与其他盖片紧密重合后,在掠射光线下观察,如见到完整平行的彩虹条纹表示另一枚盖片质量也符合要求。
而由于仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确与精密带来的误差称仪器误差;
由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差(filed error)。
仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正,但细胞分布误差却难于彻底消除。质量控制一般需采用以下措施。
n为测定例数,∑d2为双样之差的平方和。
3.人员质量评价一般用两差比值法或双样试验标准差评价法进行质量评价或工作人员自我考核;变异百分数法通常用于评价细胞计数的结果。
(1)两差比值法用于考核实验结果的精密度。采用同一稀释样间隔2h后进行重复计数,求出两次镜下计数值之差(取绝对值)与两次计数值标准差的比值,即两差比值(r)。
评分:score=100-20.1×r,20.1为失分系数(40/1.99)。评级:90-100为优秀,80-89为良好,70-79为中等,60-69为及格,<60时为不及格。
(2)细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒,同时应该保证细胞没有明显的团块。
(3)严格操作,从取样、重悬、稀释、充池到计数都应规范,尤其应注意的是样品稀释及充池时既要作到充分混匀,又要防止剧烈震荡为破坏红细胞。必须一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜。

25格×16格的血球计数板使用方法介绍

25格×16格的血球计数板使用方法介绍

25格×16格的⾎球计数板使⽤⽅法介绍25格×16格的⾎球计数板使⽤⽅法介绍⾎球计数板介绍⽤优质厚玻璃制成。

每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。

计数池两侧各有⼀⽀持柱,将特制的专⽤盖玻⽚覆盖其上,形成⾼0.10mm的计数池。

计数池画有长、宽各3.0mm的⽅格,分为9个⼤⽅格,每个⼤格⾯积为 1.0mm。

容积为0.1mm(ul),其中,中央⼤⽅格⽤双线分成25个中⽅格,位于正中及四⾓5个中⽅格是红细胞计数区域,⽤单线划分为16个⼩⽅格。

四⾓的4个⼤⽅格是⽩细胞计数区域,⽤单线划分为16个中⽅格。

根椐国际标准局(NBS)规定,⼤⽅格每边长度允许误差为±1%。

使⽤⽅法:1.视待测菌悬液浓度,加⽆菌⽔适当稀释(斜⾯⼀般稀释100倍),以每⼩格的菌数可数为度。

2.取洁净的⾎球计数板⼀块,在计数区上盖上⼀块盖玻⽚。

3.将菌悬液摇匀,⽤滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻⽚的下边缘摘⼊⼀⼩滴(不宜过多),让菌悬液利⽤液体的表⾯张⼒充满计数区,勿使⽓泡产⽣,并⽤吸⽔纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。

也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻⽚后,造成计数区深度的升⾼),然后加盖盖玻⽚(勿使产⽣⽓泡)。

4.静置⽚刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。

将⾎球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换⾼倍镜观察并计数。

由于细胞的折光率和⽔的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。

5.25个⼤⽅格组成的计数区,除数上述四个⼤⽅格外,还需数中央1个⼤⽅格的菌数(即80个⼩格)。

为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统⼀的规定。

如菌体位于⼤⽅格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。

即位于本格上线和左线上的细胞计⼊本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计⼊相应的格中。

1血球计数板操作规程

1血球计数板操作规程

耶赛明(南通)保健有限公司目的 Purpose规范计数板的标准操作,确保设备的操作有章可循。

范围 Scope适用于计数板的日常使用。

职责 Responsibility质检部的检验员负责遵守该规程,质检部负责人负责监督与管理。

内容Procedure1 概述1.1 测定微生物细胞和动物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。

1.2 显微直接计数法:将小量待测样品悬浮液置于计菌器上,于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。

显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如酵母、细菌、霉菌孢子等1.3 血球计数板1.3.1 是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。

1.3.2 中间平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个方网格(图1)。

图1:血细胞计数板构造(一) 图2:血细胞计数板构造(二)1.3.3 每个方网格分为9个大方格,正中间的大方格为计数室,计数室内的刻度有两种:一种是每个计数室内分为16个中方格(中方格用三线隔开),而每个中方格又分成25个小方格(图2);另一种是每个计数室内分成25个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成16个小方格。

但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数室内都由400个小方格组成。

1.3.4 计数室边长为1mm,则计数室的面积为lmm2,每个小方格的面积为1/400mm2。

盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。

1.3.5 使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物或细胞的数量,再换算成每毫升样液(或每克样品)中微生物或细胞的数量。

已知:1cm3体积=10mm×10mm×10mm=1000mm3=1ml;所以:1cm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格,即系数K=4×106。

血球计数板的使用-图文

血球计数板的使用-图文

对每个样品计数三次,再取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
N1=(n1-1+n1-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n1-1
n1-2
N1=(n1-1+n1-2)/2
x个 = N/(5×16) ×16×25个
1cm3
(1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm)
=50000 N
②用血球计数板对藻细胞进行计数 的方法与步骤:
ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净
如果规格为25格×16格的计数板统计计数池中央 大方格内四角及中央中格内(即80个小方格)的单 胞藻数,并记录。
计数时,小心移动载物台,从上到下,由左及右 又由右及左依次计数各小格内的细胞数。一般可 采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则 处理。凡压方格的上线和左线的细胞,统一算此 方格内的细胞,而压方格的下线和右线的细胞, 统一不算此方格内的细胞。
。若有污物,则需用清水清洗,吹干,用擦镜纸 擦拭干净。
盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中,使用时用 眼科镊取出,放在滤纸上吸水,用擦镜纸擦拭干 净。
将盖有盖玻片的计数板放在显微镜的载物台上, 调焦,用低倍镜找到计数区检查是否干净。
从试管中吸出培养液进行计数之前,要将 试管轻轻震荡几下,这样使单胞藻分布均 匀,防止单胞藻凝聚沉淀,提高计数的代 表性和准确性,求得的培养液中的单胞藻 数量误差小。

实验—血球计数板的使用

实验—血球计数板的使用

一、血球计数板的使用原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数,然后推算出含菌数的一种方法。

血球计数板是常用的计菌器之一。

血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。

中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。

方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室。

这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其容积为0.1mm3,即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板;大方格的长和宽各2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3,即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。

在血球计数板上,刻有一些符号和数字,其含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板分25个中格;0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的高;1/400mm2表示计数室面积是1mm2,分400个小格,每小格面积是1/400 mm2。

计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。

但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。

1.16×25型的计数板将计数室放大,可见它含16中格,一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格)计数。

将每一中格放大,可见25个小格。

计数重复3次,取其平均值。

计数完毕后,依下列公式计算:酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/100 ×400×10000×稀释倍数2.25×16型的计数板中央大方格以双线等分成25个中方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用。

《血球计数板使用》课件

《血球计数板使用》课件

血球计数板使用心得:如何提高计数准确性和效率
血球计数板使用心得:如何避免常见错误和问题
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计数室:有网格线,便于计数细胞
网格线:横竖交叉,形成小方格,便于定位细胞
计数室底部:有凹槽,便于液体流动和细胞分布均匀
计数室侧面:有刻度,便于测量细胞大小和数量
血球计数板的原理
血球计数板是一种用于计数血液中红细胞、白细胞和血小板的工具。
血球计数板的原理是利用光学显微镜观察血液样本,通过计数板上的网格线来计算血液中的细胞数量。
血球计数板使用前需要清洁,避免污染
血球计数板使用过程中,避免用力过猛,以免损坏
血球计数板使用后,需要及时清洗,避免细菌滋生
血球计数板使用过程中,如果出现计数不准确,需要重新调整计数板位置或更换计数板
血球计数板使用实例
05
实验方案设计
实验注意事项: a. 确保血样和染色剂的浓度合适 b. 避免血样和染色剂的污染 c. 确保显微镜的焦距和照明条件合适 d. 计数时要准确、细致,避免遗漏或重复计数
细胞染色
准备血球计数板和染色液
将染色液倒入血球计数板中
将血液样本滴入染色液中
轻轻搅拌,使血液样本与染色液充分混合
静置一段时间,使细胞染色
观察染色后的细胞,进行计数和分类
计数操作
准备血球计数板和血液样本
将血液样本滴入血球计数板
轻轻晃动血球计数板,使血液均匀分布
观察血球计数板,记录红细胞、白细胞和血小板的数量
血球计数板的网格线分为主网格线和次网格线,主网格线用于计数红细胞和白细镜和血液样本,通过观察和计数来获取血液中的细胞数量。
血球计数板的种类
手动血球计数板:需要人工操作,适合初学者使用
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18
②用血球计数板对藻细胞进行计数 的方法与步骤:
ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净。
若有污物,则需用清水清洗,吹干,用擦镜纸擦 拭干净。
盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中,使用时用 眼科镊取出,放在滤纸上吸水,用擦镜纸擦拭干 净。
将盖有盖玻片的计数板放在显微镜的载物台上, 调焦,用低倍镜找到计数区检查是否干净。
N小格平均每小格内的细胞数=N/(5×16) 设每毫升中有x个单胞藻
x个 1cm3
N小格×16×25个 (1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x个 = N/(5×16) ×16×25个
1cm3
(1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm)
血球计数板的使用
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1
①血球计数板的原理和构造 ②方法与步骤
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2
①血球计数板的原理和构造
Ⅰ构造 血球计数板是一种专门用于计算较大单细
胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻 片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下 凹的槽,构成三个平台。
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3
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4
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔 为两半,每半边上面刻有一个方格网。方 格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一 个大方格为计数室。这一大方格的长和宽 各为1mm,深度为0.1mm,其容积为 0.1mm3,即1mm×1mm×0.1mm方格的计数 板。
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5
1mm×1mm×0.1mm=0.1mm3
20mm×20mm×0.25mm=100mm3
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6
25×16型的计数板
计数池中央的大格又 被双线划分成25个中 格,其中的每个中格 又被单线划分成16个 小格,中央大方格由 25×16=400个小方格 组成。
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7
在血球计数板上,刻 有一些符号和数字(见 图一),其含义是: XB-K-25为计数板的型 号和规格,表示此计 数板分25个中格; 0.10mm为盖上盖玻片 后计数室的高; 1/400mm2表示计数室 面积是1mm2,分400 个小格,每小格面积 是1/400 mm2。
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28
样品添加到计数池后,静置5min。使藻细胞沉降, 否则,细胞呈悬浮状态,不处于同一平面上,给 计数造成不便。待单胞藻全部沉降到计数室底部 后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下 找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察,仔 细调焦,同时调节光栅,必要时调节光源和反光 镜角度,直至细胞和纵横格线都清楚。计数并记 录。
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19
从试管中吸出培养液进行计数之前,要将 试管轻轻震荡几下,这样使单胞藻分布均 匀,防止单胞藻凝聚沉淀,提高计数的代 表性和准确性,求得的培养液中的单胞藻 数量误差小。
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注意,当藻液浓度高时,为了便于计数,可 将藻液用消毒海水稀释后进行计数。
在计数有鞭毛或有运动性的藻类时,可先吸 取定量的藻液,滴加鲁哥氏碘液(1000毫升 藻类用15毫升的鲁哥氏液固定)进行固定, 然后添加消毒海水稀释后计数。
n1-1
n1-2
N1=(n1-1+n1-2)/2
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N2=(n2-1+n2-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n2-1
n2-2
N2=(n2-1+n2-2)/2
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15
N3=(n3-1+n3-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n3-1
n3-2
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8
把中央大方格的中方格再分 成小方格的分割线并不只 局限于中央大方格内,而 是一直延伸到正方形凹槽 的边缘,所以在其延长线 上的4个大方格中分割线 显得密集。
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9
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10
25×16型的计数板一般 计数四个角和中央的 五个中方格(5×16=80 个小方格)的细胞数。
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11
Ⅱ血球计数板的原理
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计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算,
对每个样品计数三次,再取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
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13
N1=(n1-1+n1-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
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21
将计数板连同盖玻片一起取下,用细口胶 头滴管吸取稀释后的摇匀的单胞藻悬液, 迅速将吸管尖靠在计数池上盖玻片的边缘, 略挤胶头滴管让培养液利用液体的表面张 力,自行渗入。
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27
样品流入的量以充满盖玻片下面的空间为 宜,盖玻片下面不能有气泡存在,否则会 造成计数不准。多余的藻液会流入H形的凹 沟中。
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32
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算,将计数板及盖玻片用流水 冲洗,吹干,擦净,重复上述步骤,对每 个样品计数三次,再取其平均值。
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N1=(n1-1+n1-2)/2
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如果一个小方格内单胞藻过多,难以数清,应当 对培养液进行稀释以便于单胞藻的计数。
具体方法是:摇匀试管,取1mL单胞藻培养液, 加入成倍的无菌水(消毒海水)稀释,稀释n倍后, 再用血球计数板计数,所得数值乘以稀释倍数。 以每小方格内含有4—5个单胞藻细胞为宜。特别 是在培养后期的样液需要稀释后计数。
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29
如果规格为25格×16格的计数板统计计数池中央 大方格内四角及中央中格内(即80个小方格)的单 胞藻数,并记录。
计数时,小心移动载物台,从上到下,由左及右 又由右及左依次计数各小格内的细胞数。一般可 采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则 处理。凡压方格的上线和左线的细胞,统一算此 方格内的细胞,而压方格的下线和右线的细胞, 统一不算此方格内的细胞。
N3=(n3-1+n3-2)/2
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将计数板及盖玻片用流水冲洗,擦干,重 复上述步骤,对每个样品可计数三次,再 取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
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将同一样品的计数结果,取平均值。代入下式, 求算单胞藻的密度:
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