第三章红细胞检验.ppt

红细胞检验的临床应用 ppt课件

（二）贫血的诊断标准
国内的诊断标准
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男
女
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疾病举例
(1)骨髓造血功能障碍
干细胞分化增殖障碍
再生障碍性贫血
祖细胞分化增殖障碍
纯红再障
骨髓造血组织遭受排挤骨髓病性贫血
骨髓造血功能降低
继发性贫血
(2)造血物质缺乏或利用障碍
铁缺乏
缺铁性贫血
铁利用障碍
铁粒幼细胞性贫血
维生素B12或叶酸缺乏
巨幼细胞性贫血
根
病因和发病机制
疾病举例
据 2)红细胞破坏过多（溶血）
[ 影响造血的因素] (1)造血干细胞﹑微环境异常---引起再生障碍性贫血 (2)造血调控因子分泌不足-----肾病引起EPO分泌↓,
引起继发性贫血 (3)造血功能受到抑制----恶性肿瘤→贫血 (4)造血组织遭到破坏----骨髓病性贫血 (5)生成红细胞的物质缺少------- →贫血
铁---合成Hb的原料原卟啉----合成Hb的原料 VitB12---合成DNA的辅酶蛋白质----合成Hb的原料
病 (1)红细胞内在异常（先天性）
因
红细胞膜缺陷
及
发

红细胞检验方法课件

• 【应用评价】正常情况，血浆中血红蛋白大部分与结合珠蛋白结合，仅有微量游离血红蛋白。测定血浆游离血红蛋白可判断红细胞的破坏程度。
• 1.游离血红蛋白明显增高是判断血管内溶血的指征。蚕豆病、PNH、阵发性寒冷性血红蛋白尿、冷凝集素综合征、溶血性输血反应等明显增高；自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血可轻到中度增高。
• 2.血管外溶血、红细胞膜缺陷不增高。
• 三、血清结合珠蛋白检测
• 【实验原理】血清结合珠蛋白测定（measurement of haptoglobin, Hp)是在待测血清中加入一定量的血红蛋白液，使之与待测血清中的结合珠蛋白（Hp)形成 Hp~Hb复合物。通过电泳法将结合的Hp~Hb复合物与未结合的Hb分开，测定Hp-Hb复合物的量，可测得血清中结合珠蛋白的含量。
• 一、血清维生素B12测定
• 【实验原理】维生素B12测定（measurement of vitamin B12)放射免疫法，用抗氧化剂和氰化钾在碱性环境下（pH>12),将人血淸中的维生素B12从载体蛋白中释放出来。加人57Co标记的维生素B12，与固定在微晶纤维顆粒上纯化的维生素B12结合物竞争结合，检澜其放射活性，其量与受检血淸的维生素含量成反比，与标准管作对照，换算出维生素B12含量。
• 【参考范围】健康人呈阴性。
• 【应用评价】血管内溶血时，血浆中游离血红蛋白大量增加，血浆中可检测出髙铁血红素白蛋白。血清中出现高铁血红素白蛋白是溶血严重的指标。
• 五、尿含铁血黄素试验
• 【实验原理】尿含铁血黄素试验又称Rous试验。当血红蛋白通过肾滤过时，部分铁离子以含铁血黄素的形式沉积于上皮细胞，并随尿液排出。尿中含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体，其中的高铁离子与亚铁氰化钾作用，在酸性环境下产生普鲁士蓝色的亚铁氰化铁沉淀。尿沉渣肾小管细胞内可见直径1〜3μm的蓝色颗粒。

(医学课件)红细胞检验的基本方法ppt演示课件

二、血清维生素B12测定 RIA法，用抗氧化剂和氰化钾在碱性环境下（pH＞12）,将人血清中的维生素B12从载体蛋白中释放出来。加入57Co 标记的维生素B12,与固定在微晶纤维颗粒上纯化的维生素B12结合物竞争结合，检测其放射活性，其量与受检血清的维生素B12含量成反比，与标准管作对照，换算出维生素B12含量。成人148～660pmol／L 降低：巨幼细胞贫血。增高：白血病患者\真性红细胞增多症\恶性肿瘤和肝细胞损伤
六、血清转铁蛋白受体测定双抗体夹心法。 1.血清中转铁蛋白受体+抗体 2.抗原抗体复合物+酶抗体； 3.加入底物和显色剂，其颜色的深浅与转铁蛋白受体的量成正比。以不同浓度标准品的吸光度值绘制标准曲线，通过标准曲线查出未知标本的转铁蛋白受体水平。升高：常见于缺铁性贫血和溶血性贫血。降低：见于再障、慢性病贫血、肾功能衰竭等。用于临床观察骨髓增生状况和治疗反应。
四、血浆高铁血红素白蛋白检测高铁血红素白蛋白+硫化铵铵血色原用光谱仪在绿光区558nm 处有一最佳吸收区带。正常人呈阴性血管内溶血时，血浆中游离血红蛋白大量增加，血浆中可检测出高铁血红素白蛋白。
1、原理五、血清结合珠蛋白(Hp)测定1.待侧血清+Hb 液→Hp-Hb复合物+未结合Hb。 2.电泳分离出Hp-Hb复合物。电泳法 0.5－1.6g/L 1.减低：常见于各种溶血，尤其是血管内溶血。排除严重肝病及传单。 2.增高：感染、SLE、创伤、恶肿、妊娠等。
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六、尿卟啉检测尿中卟啉类物质在酸性条件下，经乙醚提取，于405nm处显红色荧光，从而可对尿卟啉进行定性检测。正常人呈阴性 ①增加：先天性红细胞生成性卟啉病、迟发性皮肤型卟啉病、肝红细胞生成型卟啉病等。 ②对缺铁性贫血、铅中毒、铁粒幼细胞贫血和珠蛋白生成障碍性贫血等的诊断有一定价值。

红细胞血型系统及其检测PPT课件

红细胞血型系统及血型检测
红细胞血型系统
主要内容：红细胞血型系统免疫学基础 ABO血型系统 Rh血型系统其他红细胞血型系统多凝集红细胞
一、免疫学基础原理
（一）抗原（antigen）
免疫原(immunogen）是能够刺激机体免疫系统引起特异性免疫应答的非己物质。它可以在体内和体外与其特异性抗体或致敏淋巴细胞结合,产生免疫反应。
抗原抗体反应的特点
高度特异性可逆性比例性两个反应阶段：致敏和凝集阶段
影响红细胞凝集反应的因素
抗原抗体的比例反应温度溶液的pH值孵育时间离子强度红细胞间距离
常用红细胞抗原和抗体鉴定试验
生理盐水法
saline agglutination test
抗球蛋白试验 antiglobulin test , Coombs
抗原抗体反应的特异性
抗原的功能
抗原能够刺激缺乏此物质的机体发生体液免疫（humoral response）或细胞免疫（cellmediated response) 反应。
前者通过浆细胞合成抗体输送到血液或体液中；后者由淋巴细胞介导，出现延迟性超过敏反应或排斥移植物的生物效应。
影响抗原免疫原性的因素
红细胞红细胞
自然状态下的红细胞
黄色表示红细胞表面的负电荷层
红细胞之间保持 24nm的距离
蓝色表示红细胞周围的正电荷层
按抗体与抗原反应的最适温度，分为两种冷型抗体 cold antibody 温型抗体 warm antibody
按照抗体与相应抗原的依存关系
规则抗体不规则抗体（意外抗体）
输血前检查的要求
▪ 输入的红细胞 ▪ 输入的血浆成份
在受血者体内必须不凝集或不溶血

红细胞检验PPT优质课件

二、血红蛋白测定
血红蛋白测定
在正常人中各种血红蛋白的含量为：成人主要血红蛋白：HbA(α2β2)占95%以上成人次要血红蛋白：HbA2 (α2δ2 ) 占2% - 3% 胎儿主要血红蛋白：HbF (α 2γ2 ) 占1%以下
二、血红蛋白测定
血红蛋白测定血红蛋白存在形式
氧合血红蛋白：oxyhemoglobin, HbO2 还原血红蛋白：reduced hemoglobin, Hbred 碳氧血红蛋白：carboxyhemoglobin, HbCO 高铁血红蛋白：hemiglobin, Hi 其他类衍生物：SHb
第一节红细胞检查
红细胞生理学
红细胞形态特征：双凹圆盘形，平均直径7.2μm，厚约2μm，无核。
红细胞主要成分：血红蛋白占34%---能结合多种气体，主要是O2和CO2 , 并协同维持酸碱平衡。
一、红细胞计数
红细胞计数
血液分析仪法：利用电阻抗和(或)光散射原理。
手工显微镜法：用等渗稀释液将血液稀释一定倍
二、血红蛋白测定
• each heme contains an iron ion (Fe+2) that can combine reversibly with one oxygen molecule
二、血红蛋白测定
血红蛋白分子结构
二、血红蛋白测定
血红蛋白测定
血红蛋白合成的调节
红细胞生成素(EPO)：促进血红素和Hb合成. 雄激素(睾酮)：促进Hb的合成. 高铁血红素：减少血红素的合成.
一、红细胞计数
红细胞计数
红细胞计数的临床意义
(一).生理性变化
1.年龄与性别差异 2.神经与精神因素 3.剧烈的体力运动 4.气压氧含量影响 5.妊娠中后期变化

血液一般检验—红细胞检查(临床检验课件)

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【质量控制】
红细胞正常形态红细胞异常形态红细胞异常结构
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红细胞的异常形态检验
一、红细胞大小异常二、红细胞形态异常三、红细胞染色异常四、红细胞结构异常
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回顾：正常红细胞形态
• 正常成熟红细胞为两面微凹的圆盘形，平均直径7.2µｍ，厚约2µm，无核，经瑞特染色后，红细胞呈粉红色，边缘较深，中央着色较淡。
红细胞的生理红细胞计数稀释液
计数方法
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一、红细胞的发育过程
造血干细胞 EPO 红系祖细胞→原始红细胞
→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞 →网织红细胞→成熟红细胞
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成熟红细胞
120天
衰老红细胞
铁 →铁代谢原卟啉 →胆色素代谢珠蛋白 →蛋白质代谢
血红蛋白结构血红蛋白组成血红蛋白测定
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• 血红蛋白是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，是红细胞内的运输蛋白。
• 每个Hb分子含有4条珠蛋白肽链，每条肽链结合1个亚铁血红素，形成具有四级空间结构的四聚体，以利于结合O2和CO2。
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3. 嗜多色性红细胞红细胞经瑞特染
色后部分或全部呈红蓝混合色，灰红或灰蓝色。见于增生性贫血，急性溶血性贫血时尤为多见。
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四、结构异常
１.点彩红细胞属于尚未完全成熟的

第三章红细胞检验

第三章红细胞检验第一节红细胞生理第二节红细胞计数第三节血红蛋白测定第四节红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义第五节网织红细胞概述第三章红细胞检验第六节红细胞比容测定第七节红细胞直径测定第八节计算红细胞平均数第九节红细胞形态检验第十节点彩红细胞检验学习目标1.概述红细胞的生成、形态与功能以及血红蛋白的结构和吸收光谱。

2.叙述红细胞显微镜计数原理、试剂、操作、计算、注意事项。

3.比较红细胞计数和白细胞计数的异同。

4.概述红细胞计数的计数误差及质量控制。

第一节红细胞生理一、红细胞的发育过程二、红细胞形态与功能三、血红蛋白结构与吸收光谱一、红细胞的发育过程造血干细胞→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红细胞一、红细胞的发育过程成熟红细胞120天二、红细胞的形态与功能形态：双凹圆盘状；直径：6～９μm，平均7.2μｍ；厚度：边缘部分约2μｍ，中央约１μｍ侧面观呈哑铃形。

在高渗溶液中：红细胞皱缩，边缘呈锯齿状；在低渗溶液中：红细胞肿涨甚至破裂，血红蛋白逸出后形成影细胞。

血涂片经瑞特染色后，细胞呈粉红色，中央着色较淡，有明显的中央淡染区，淡染区的直径约占红细胞直径的1/3～2/5。

红细胞主要成分血红蛋白和水（64％～70％），其余成分为蛋白质、磷脂、无机盐和酶。

功能：1.运输O2和CO22.调节酸碱平衡3.免疫粘附三、血红蛋白结构与吸收光谱Hb的结构：Hb的分子量：64458。

1分子Hb：4个亚铁血红素，4个Fe，可结合4个O2。

1molHb：4mol Fe，可结合4mol O2。

1克Hb：含3.47mg Fe , 结合1.39ml O2。

在正常情况下，外周血中的血红蛋白主要有：氧合血红蛋白（HbO2）还原血红蛋白（Hbred）碳氧血红蛋白（HbCO）高铁血红蛋白（Hi或MHb）。

吸收光谱特征：氧合血红蛋白(HbO2）：呈鲜红色，在578nm（黄色光）和540nm（绿色光）处有两条吸收光带。

还原血红蛋白（Hbred）：呈暗红色，在556nm（黄、绿色光之间）处有一条吸收光带。

红细胞检验的基础理论医学检验专业大专班.精选PPT

血型抗 ❖原物脂质蛋糖蛋白白或在糖脂脂质双层内外两侧分布的不对称性糖酵解是酶将葡萄糖降解为丙酮酸并伴随ATP生成的过程。
（4）糖酵解第四阶段：2-磷酸甘油酸
具有受体反如应、丙糖抗酮原酸蛋性白、信、息传糖递链等功能 ❖ 保证了膜的方向性功能
红细胞膜的功能
1 维持红细胞的正常形态及变形性
红细胞膜的功能
5 受体：激素、递质类、病毒、转铁蛋白
三影响红细胞膜稳定的因素
1 红细胞膜蛋白有遗传性缺陷 2 化学因素药物氧化损伤 3 免疫因素自身抗体 4 酶代谢异常，ATP生成不足 5 生物因素毒素直接破坏RBC膜
第二节血红蛋白
一血红蛋白的组成
❖ 血红素—铁原子、原卟啉
❖ 珠蛋白—肽链αβγδεζ
❖ 生理性血红蛋白种类：
HbA(α2β2)--96%~98% HbA2(α2δ2)--2% HbF(α2γ2 )—2~3%
二影响血红蛋白结构和功能的因素
运输O2、CO2
➢ ➢珠一蛋种白或一基种因以上缺珠失蛋或白肽缺链陷不能合成或合成不足， HbH（β4） Hb
➢
Barts （γ4）某一肽链的某一氨基酸被替换或缺失，影响了Hb的结构的稳定性和功能
红细胞的形状、稳定性和变形性起重要作用。
❖ 转运蛋白：带3蛋白
红细胞膜脂质
❖ 红细胞膜的脂质：磷脂（60％）、胆固醇（33％）、糖脂。
❖ 磷脂的结构特点：磷脂构成了膜脂的基本成分，磷脂具有一个极性的头两个非极性的尾巴。在水环境中，这类分子会自发形成双脂层微囊。
❖ 糖脂: 普遍存在于原核和真核细胞的质膜上，含量约占脂总量的 5％以下，一般是含有低聚糖的脂类。
❖ 膜的流动性和不对称性：