松针提取物降血脂作用研究

松针提取物降血脂作用研究3
郑晓珂,王小兰,冯卫生
(河南中医学院,郑州　450008)
摘　要　目的:研究松针的降血脂作用。

方法:雌性大鼠切除卵巢,术后1周开始给药,每周测量一次体重,给药14周剥离子宫称重,计算子宫系数;彻底摘除腹部脂肪并称重,计算腹部脂肪系数;测定大鼠血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(T C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL2C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL2C)。

结果:大鼠去卵巢15周后T C、TG、LDL2C均升高,松针提取物有降低T C、TG、LDL2C的作用,但对HDL2C无影响,松针多糖部位的降血脂作用与其它各部位相比更为显著。

结论:松针提取物有一定的降血脂作用。

关键词　松针提取物;去卵巢大鼠;降血脂
松针在历代本草中均有记载,《别录》谓:其"主风湿疮,生毛发,安五脏"。

《本草纲目》记载:"松柏为百木之长",服之"令人不老,轻身益气,不饥延年"。

现代研究表明松针具有镇静、镇痛、抗炎、延缓衰老、降血脂、降胆固醇等作用[1]。

本实验室在前期对马尾松(Pinus mass oniana La mb)针叶化学成分的系统分离基础上[2～7],结合文献对松针降血脂的研究报道[8～10],采用去卵巢大鼠造成的高血脂模型,探讨了松针不同部位的降血脂作用。

1　材料与方法
1.1　试验药物　干燥马尾松松针(采自河南西峡县)20kg用10倍量水煮提两次,过滤,合并滤液并减压浓缩得浸膏
2.5kg,取1.84kg依次用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,剩余部分低温减压浓缩干燥,得到乙醚211.5g,乙酸乙酯292.8g,正丁醇部位399.4g,水部位694.9g。

剩余660g浸膏水溶后醇沉,离心,弃上清液,真空干燥得多糖部位404.3g,备用。

1.2　动物　W istar雌性大鼠,体重(200±10)g,购自河南省实验动物中心,合格证号为医动字第192020。

1.3　试剂　甘油三酯(TG)试剂盒、总胆固醇(TC)试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇(LDL2C)试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL2C)试剂盒,以上试剂均购自中生北控生物科技股份有限公司,批号为011001。

1.4　方法　大鼠50只随机分成正常组、模型组、松针正丁醇部位组、松针水部位组、松针多糖部位组,每组10只。

除正常组外,其余各组大鼠切除双侧卵巢,正常组重复去卵巢步骤但不切除卵巢。

造模恢复一周后给药,每天灌胃一次,用药剂量相当于临床等效剂量,根据"人和动物体表面积折算和等效剂量比率表[11]"计算每次灌胃2g/kg,连续给药14周,正常组和模型组仅给予等体积蒸馏水。

灌胃14周后取材,取材前各大鼠均禁食12h处死大鼠。

1.4.1　体重的测定　术后每周称一次体重,观察体重增长的趋势。

体重增长=第15周大鼠体重-造模前体重。

1.4.2　腹部脂肪系数和子宫系数的测定　彻底摘除腹腔内全部脂肪,称重,计算腹部脂肪系数(腹部脂肪重量/体重×100%)。

同时立即切取子宫,称重,计算子宫系数(子宫湿重/体重×100%)。

1.4.3　血脂测定　水合氯醛麻醉,断头取血,常规分离血清,2 20℃保存,用T C、TG、LDL2C、HDL2C试剂盒在BT815A半自动生化分析仪上测定相应指标。

2　结果
2.1　松针对体重和腹部脂肪系数的影响　大鼠去除卵巢15周后,模型组体重明显增长,腹部脂肪明显增加。

松针各部位提取物能抑制大鼠体重增长,多糖部位组效果最好,与正常组相比无显著性差异。

松针各部位提取物均能抑制腹部脂肪的增加,也以松针多糖部位组效果最好,见表1。

　表1　松针提取物对去卵巢大鼠体重、腹部脂肪系数和子宫系数的影响( x±s)
组别
鼠数
(只)
15周平均体重
增长(g)
腹部脂肪系数
(%)
子宫系数
(%)
正常对照 860±4331.548±0.695330.112±0.065
模型对照 9147±224.054±0.5240.062±0.019△△松针水部位 991±29332.225±0.67330.076±0.054△
松针正丁醇部位990±20331.611±0.616330.042±0.014△△松针多糖部位　1077±24330.691±0.273330.062±0.026△
与模型组比较3P<0.05,33P<0.01(下同)
2.2　松针对子宫系数的影响　去除卵巢15周后模型组子宫严重萎缩,松针各部位对去卵巢大鼠的子宫萎缩没有抑制作用,说明松针提取物没有雌激素样作用,见表1。

2.3　松针对血清TG和TC的影响　大鼠去除卵巢15周后,模型组血清TG、TC显著升高,松针各部位提取物均有降低血清TG、T C的作用,见表2。

表2　松针提取物对去卵巢大鼠TG、TC的影响( x±s)
组别鼠数(只)TG(m mol/L)　TC(m mol/L)　
正常对照80.43±0.28333.12±0.363
模型对照90.72±0.234.23±0.36
松针水部位90.52±0.2032.58±0.0933
松针正丁醇部位90.49±0.1733.43±0.123
松针多糖部位100.50±0.2132.67±0.6533
2.4　松针对血清HDL2C和LDL2C的影响　大鼠去卵巢15周后,模型组血清HDL2C变化不显著,各组之间均无显著差异。

但模型组血清LDL2C显著升高,松针水部位和多糖部位均有降低LDL2C的作用,见表3。

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中药药理与临床2008;24(3)
3河南省新世纪优秀人才支持计划(2006HANCET-08);教育部科学技术研究重点资助项目(03078)
表3　松针提取物对去卵巢大鼠HDL2C、LDL2C的作用( x±s)组别鼠数(只)HDL2C(m mol/L)LDL2C(m mol/L)
正常对照80.77±0.382.15±0.3833
模型对照90.74±0.363.21±0.36
松针水部位90.78±0.681.62±0.4033
松针正丁醇部位90.70±0.602.51±0.29
松针多糖部位100.80±0.511.53±0.2733
3　讨论
目前研究高血脂的模型分为两种,一种是用高脂乳剂喂养动物造成高脂血症模型,另一种是采用去势大鼠因卵巢摘除导致雌激素分泌减少造成脂代谢紊乱所引起的高脂血症模型。

本研究采用去势大鼠模型,采用松针提取物干预进行对血脂各项指标影响的探讨。

据文献报道[12],松针中的黄酮类物质具降血脂作用,其制备工艺是用乙酸乙酯萃取,而松针其它部位的降血脂作用尚未见报道。

本实验以松针水部位、正丁醇部位,多糖部位提取物来探讨松针降血脂作用。

实验结果表明:松针多糖部位具有显著降低血中TG、TC、LDL2C浓度,抑制体重过度增长和腹部脂肪增加的作用。

据文献报道,多糖可通过细胞膜上的多糖受体途径激活肝和肾上腺细胞膜上LDL受体,能使LDL进入组织的量发生变化,间接地减低血中LDL[13];能通过增强胆固醇代谢关键LC AT酶(卵磷脂胆固醇酰基转移酶)的活性使胆固醇转化为胆固醇酯(CE),通过提高LP L(脂蛋白脂酶)的活性催化甘油三酯(TG)水解成甘油和脂肪酸[14,15],从而降低血清TC和TG;另外,多糖可以增加饱腹感而影响食物的摄入,胃的排空,限制胃肠道对糖和脂肪的消化吸收[16],从而抑制体重增长和腹部脂肪的增加。

松针具有降血脂作用,但在实验中发现松针提取物对去卵巢大鼠的子宫萎缩没有抑制作用,说明松针不含植物雌激素类成分,其降血脂作用机理不是通过提高体内雌激素的水平进行的调节,松针提取物对高脂乳剂喂养动物所造成高脂血症具有降血脂的作用也证明了这一点。

松针提取物,特别是松针多糖的降血脂作用机理有待进一步研究。

参考文献
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15　朱力军,王淑如.脂蛋白脂酶的制备及茶叶多糖对该酶的影响.中国药科大学学报,1992;3(5)∶287～289
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Research of p i n e needles extract on reduc i n g blood li p i ds
Zheng Xiaoke,W ang Xiaolan,FengW eisheng
(Henan College of Traditi onal Chinese Medicine,Zhengzhou　450008)
O bjecti ve:To study the li p id2l owering effect of p ine needles.M ethod:50fe male W istar rats were random ly divided int o5gr oup s:nor2 mal gr oup,model gr oup,n2butanol part gr oup,water part gr oup and polysaccharides part gr oup with10rats in each gr oup.A ll rats were ovariect om ized excep t f or the nor mal gr oup.One week after operati on,the rats were treated with different medicines.Fifteen weeks after trea2 ted the medicines,the rats were killed,the levels of TG,TC,HDL2C,LDL2C were measured.Results:The level of TG,TC,LDL2C in the rat that ovariect om ized increased significantly after15week,the extract of p ine needles can reduce TG,TC,LDL2C,but no effect in HDL2C. Compared with others gr oup,the polysaccharides part gr oup reduce bl ood li p ids more significantly.Conclusi on:Pine needles extract can re2 duce the bl ood li p ids.
Key words　p ine needles extract;ovariect omal rats;reduce bl ood li p ids
28中药药理与临床2008;24(3)。