GCMS法检测铁皮石斛茎中挥发性成分

Ｓｈｏｕ－ｊｉｎｌ＋，ＨＵ Ｊｉａｎｇ—ｍｉａ０２，ＳＵＮ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ
Ｙｕ—ｚｈｅｎ９１
（１．Ｍｏｄｅｒｎ Ｈｅｆｅｉ
Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｏｆ Ａｎｈｕｉ
Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｏｌｌｅｇｅ
ｉｎ Ａｎｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｏｆ
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ，
２３００３８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ
等，据报道都有一定的抗动脉粥样硬化的作用＂ｊ， 对保护心血管有一定的作用，此外铁皮石斛茎中含 量高的长链烷烃和甾体类据报道也有保护心血管的 作用。本文ＧＣ—ＭＳ分析结果，为进一步开发铁皮石 斛的饮品提供了一定科学支持。同时通过对铁皮石 斛茎的挥发性成分的研究分析，为进一步开发和利、
［７］
张倩倩，刘守金，方成武，等．铜皮石斛花挥发性成分 的ＧＣ—ＭＳ分析［Ｊ］．中国现代中药，２０１１，１３（６）：
植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室，云南
［摘要］
目的：研究铁皮石斛茎中挥发性化学成分。方法：采用正己烷蒸馏法从铁皮石斛中提取挥发性成分，
并用气相色谱一质谱（ＧＣ—ＭＳ）联用技术，对铁皮石斛茎中的挥发性成分进行了测定。结果：共鉴定出３１种化学成 分，其中含量较高的主要有亚油酸甲酯（５．８５２％）、二十五烷（１０．１３２％）、２２，２３－二氢豆甾醇（１１．０９３％）和己二 酸二辛酯（２１．１１５％）等。结论：铁皮石斛茎的挥发性成分中含有多种化学成分，主要包括烷烃、酸、烯烃、酯、 甾醇、二萜、蒽醌等类化学成分。该研究为进一步开发利用铁皮石斛茎资源提供了科学依据。 ［关键词］ 铁皮石斛茎；挥发性成分；定量分析；ＧＣ・ＭＳ
２．８２１ ２．６７３ Ｏ．８４６ ０．４３７ １．２３２
ｅｓｔｅｒ
Ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ Ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ ａｃｉｄ Ｓｔｅａｒｉｅ ａｃｉｄ Ｔｒｉｃｏｓａｎｅ Ｅｉｅｏｓｅｎｅ ｍｅｔｈｙｌ
ｍ¨抡”Ｍ ｂ
２９．６８９ ３１．９８１ ３２．９ｌｌ ３４．４６０ ３５．２２４ ３６．０８９ ３８．６３２ ４０．７９ｌ ４１．５７６ ４６．８９２ ４８．２７０ ５１．１７１ ５２．８９１ ５３．４０９ ５７．４８０ ５９．４６７
２．３结果
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５．００
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图１铁皮石斛挥发性成分的总离子流图 表１铁皮石斛挥发性化学成分的ＧＣ－ＭＳ分析结果
５
中国现代中药Ｍｏｄｅｍ
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｍａｙ
wk.baidu.com
２０１３
Ｖ０１．１５
Ｎｏ．５
ｏＣ・ｍｉｎ～；柱流量：１．０ ｍＬ－ｍｉｎ～；进样Ｅｌ温度： ｏＣ；柱前压：１００ ｋＰａ；进样量：０．４ ｔｒＬ；分流
经ＧＣ．ＭＳ对铁皮石斛挥发性成分进行分析，总 离子流图见图１。对各峰做质谱扫描后得到质谱图， 经计算机质谱数据系统检索，最终确定了３１个化学 成分，见表１。
３ ３
２５０
比：１０：ｌ；载气为高纯氦气。
２．１．２
ＭＳ条件
电离方式ＥＩ；电子能量：７０
ｅＶ；
传输线温度：２５０ ｏＣ；离子源温度：２３０℃；四极杆
温度：１５０ ｏＣ；质量范围ｍ／ｚ：３５～５００；采用
２ ２
ｗｉｌｅｙ７ｎ．１标准谱库计算机检索定性。 ２．２供试品溶液的制备 称取干燥的铁皮石斛茎１００ ｇ，粉碎后加入正己 烷（分析纯）５００ ｍＬ回流提取两次，减压蒸馏浓 缩，即得供试品膏状物０．５３１
Ｐａｌｍｉｔｉｅ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌ Ｐａｌｍｉｔｉｃ ａｃｉｄ
３．０８３ ０．７３０ １．３４５ ５．８５２ ３．６９１ １．６０３
Ｍａｐｐｉｎｇ—ｐｉｎｅ－８（１４），１５一ｄｉｅｎｅ
ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌ Ｍｅｔｈｙｌ ｏｌｅａｔｅ Ｐｈｙｔｏｌ Ｍｅｔｈｙｌ
ｓｌｅａｒａｔｅ ｅｓｔｅｒ
Ｈｅｐｔａｃｏｓａｎｅ
０ｃｔａｃｏｓａｎｅ Ｓｑｕａｌｅｎｅ Ｎｏｎａｃｏｓａｎｅ Ｔｒｉａｃｏｎｔａｎｅ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ Ｒａｐｅｓｅｅｄ ｓｔｅｒｏｌ Ｓｔｉｇｍａｓｔｅｒｏｌ ｙ—Ｓｉｔｏｅｍｌ ２２，２３一ｄｉｈｙｄｒｏ—ｓｔｉｇｍａｓｔｅｍｌ
Ｍ＂堰垮加扒丝”Ｍ笛拍＂勰凹∞
３１
６３．２８７ ６３．２７８
・３６３・
万方数据
２０１３年５月
第１５卷第５期
中国现代中药Ｍｏｄｅｒｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｍａｙ
２０１３
Ｖ０１．１５
Ｎｏ．５
３结论与讨论
用铁皮石斛资源的其他应用也提供了科学依据。 参考文献
［１］徐琼，陈素红，吕圭源．３种不同石斛的化学成分及相关 药理学研究进展［Ｊ］．亚太传统医药，２０１０，６（４）：
铁皮石斛茎的挥发性成分中含有多种化学成分， 主要包括烷烃、酸、烯烃、酯、甾醇、二萜、蒽醌 类等化学成分。其中含量较高的有亚油酸甲酯 （５．８５２％）、二十五烷（１０．１３２％）、２２，２３一二氢豆 甾醇（１１．０９３％）和己二酸二辛酯（２１．１１５％）等。 近年来铁皮石斛被用于开发饮品，通过ＧＣ．ＭＳ
分析得出其中含量较高的亚麻酸、亚油酸、棕榈酸
［５］ ［６］ ［４］ ［３］
潘仕萍，李世宗，杨宝明．云南珍稀植物铁皮石赫研究初
报［Ｊ］．林业调查规划，２０１１，３６（２）：５０．５ ２．
中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［Ｍ］．
第１９卷．北京：科学出版社，１９９９：１１７． 宋经元，郭顺星，肖培根．近１０年来石斛属植物的研 究进展［Ｊ］．中国药学杂志，２００４，３９（１０）：７２５－７２７． 殷放宙，陆兔林，蔡宝昌，等．铁皮石斛药材ＨＰＬＣ指 纹图谱研究［Ｊ］．中草药，２００８，３９（３）：４３３－４３５．
３４．３５．
［８］
周鸿，山杉公男．亚油酸对大白鼠血胆固醇浓度及磷脂 分子组成的影响［Ｊ］．江西科学，２００２，２０（４）：２０７－２１２．
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｆｒｏｍ Ｓｔｅｍ ｏｆ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ ｂｙ ＧＣ－ＭＳ
ＹＡＮＧ Ｌｉｕｌ，ＬＩＵ
２方法与结果
８４种２变种”Ｊ。其中铁皮石斛主要分布于安徽西南 部的大别山区；浙江东部的鄞县、天台、仙居；福 建西部的宁化；广西西北部的天峨；四川；湖南新 宁良山世界自然遗产地；云南东南部的石屏、文山、 麻栗坡、西畴、西双版纳和曲靖的阔叶林中‘４ ｏ。多 生长于海拔近千米的山地半阴湿岩石上，一般均能
耐一５℃的低温。
ＧＣ指纹图谱奠定基础。 １仪器和药材
兰科石斛属多年生附生草本植物。有资料显示，石
斛具有增强人体免疫力、抗氧化、抑制肿瘤细胞等
活性…。药用始载于《神农本草经》，列为上品， 称其“主伤中、除痹、下气、补五脏、虚劳赢瘦、 强阴”，历代本草和《中国药典》均有记载，《中国 药典》２０１０年版收载了石斛属３种植物的新鲜或干 燥茎作为石斛使用，分别是金钗石斛（Ｄ．ｎｏｂｉｌｅ）、鼓 槌石斛（Ｄ．ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｕｍ）、流苏石斛（Ｄ．ｆｉｍｂｒｉａｔｕｍ）， 铁皮石斛单独列出旧ｊ。早在宋代《名医别录》中就 记载“石斛生六安、山谷、水旁、石上”，后有 《本草图经》载称“今荆州、充州、寿州、庐州、 江州、温州、台州亦有之，以云南广南者为佳。” 目前石斛属（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ）植物有１ ５００多种， 是兰科（Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ）植物中最大的属，分布于亚
０．４１２ ２．３７８ ２１．１１５ １０．１３２ ０．９６０ ０．９３８ ０．４０８ １，０６３ １．７５６ ３．４５０ ０．８７５ １．６４８ ３．１３８ ４．１２６ １１．０９３
１８一ｄｉｈｙｄｍｘｙ一３・ｍｅｔｈｙｌ＠，１０一ａｎｔｈｍｑｕｉｎｏｎｅ
Ｄｉｏｃｔｙｌ ａｄｉｐａｔｅ Ｐｅｎｔａｃｏｓａｎｅ Ｈｅｘａｃｏｓａｎｅ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ａｃａｄｅｍｙ
ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｉｎ Ｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ，
ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ
ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０２０１，Ｃｈｉｎａ） ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ
ｓｔｅｍ ｂｙ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ＧＣ—ＭＳ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ
２０１３年５月第１５卷第５期
中国现代中药Ｍｏｄｅｍ
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｍａｙ
２０１３
Ｖ０１．１５
Ｎｏ．５
ＧＣ．ＭＳ法检测铁皮石斛茎中挥发性成分△
杨柳１，刘守金ｈ，胡江苗２，孙煜铮１ （１．安徽中医学院药学院安徽省现代重点实验室，安徽 合肥 ２３００３８；２．中国科学院昆明 昆明 ６５０２０１）
２，６－ｄｉ—ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌ－４一ｍｅｔｈｙｌ—ｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ
相对含量／％
０．７３８ ０．４７７ ０．４５７ ０．７１４ ３．８５８
ｅｓｔｅｒ
Ｍｙｒｉｓｔｉｃ ａｃｉｄ
Ｎｅｗ ｐｌａｎｔ ｄｉｅｎｅ ６，１０，１４一ｔｒｉｍｅｔｙｌ－２—１５ ｏｘａｚｏｌｉｄｉｎｏｎｅ
Ｐｅｎｔａｄｅｅａｎｏｉｃ ａｃｉｄ
峰号 保留时间／ｒａｉｎ
１６．３５０ ２１．８９５ ２３．４５０ ２３．６９８ ２５．１９１ ２５．９８７ ２６．２２２ ●２，４，６，８ ９ ２８．４１８ ２８．５３６ ２８．８２４ ２８．９９０ ２９．２１９ ２９．３１６ Ｃ１８Ｈ３４０２ Ｃ１８Ｈ３６０２ Ｃ２０Ｈ３６０ Ｃ１８Ｈ３８０ｚ Ｃ１８Ｈ３２０２ Ｃ１８Ｈ３２０ Ｃ１８Ｈ３６０２ Ｃ２３Ｈ４８ Ｃ２０Ｈ４００２ Ｃ１４Ｈ１００４ Ｃ２２Ｈ４１０４ Ｃ２５Ｈ３２ Ｃ２６Ｈｓ４ Ｃ２７Ｈ５６ Ｃ２８Ｈ５８ Ｃ３０Ｈ５０ Ｃ２９Ｈ６０ Ｃ３ｌＨ６４ Ｃ２９Ｈ５００２ Ｃ２６Ｈ４ｓ０ Ｃ２９Ｈ４８０ Ｃ２９Ｈ５００ Ｃ２９Ｈ５。０ Ｃ１８Ｈ３６０ Ｃ１５Ｈ３００２ Ｃ１６Ｈ３４０２ Ｃ１６Ｈ３２０２
铁皮石斛Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ
Ｋｉｍｕｒａ
ｅｔ
Ｍｉｇｏ为
由于铁皮石斛对生长条件要求十分苛刻，加上 人为长期无节制采挖及不合理利用，其野生资源已 濒临绝迹Ｈｊ，行业内出现了一些以假乱真、以次充 好的混乱局面。目前，已采用组培快繁技术对铁皮 石斛进行繁殖，而有关铁皮石斛真伪和质量优劣的 鉴别方法鲜有报道Ｍｊ。指纹图谱是一种综合、可量 化的鉴别手段，可以判断药材真伪，区分不同品种、 同一品种不同来源、不同产地的药材，已被广泛应 用于中药的质量标准研究。引。本研究为初步建立其
２．１色谱条件的选择
２．１．１ ０．２５
ＧＣ条件
ＨＰ－５ＭＳ石英毛细管柱（３０
ｍｍ×
ｍｍ，０．２５斗ｍ）；柱温８０～２６０ ｏＣ，程序升温：
△［基金项目］ ＋［通讯作者］
・３６２－
中科院西部之光人才培养计划（２００９－２０１２） 刘守金，Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｈｏｕｊｉｎｌｉｕ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
万方数据
２０１３年５月第１５卷第５期
分子式
Ｃ１５Ｈ２４０ Ｃ１４Ｈ２ｓＯｚ
化合物名称 ２，６－二叔丁基４一甲基苯酸 肉豆蔻酸 新植二烯 ６，１０，１４一三甲基－２一十五烷酮 十五烷酸 棕榈酸甲酯 棕榈酸 对映一海松－８（１４），１５一二烯 亚油酸甲酯 油酸甲酯 植醇 硬脂酸甲酯 亚油酸 亚麻酸 硬脂酸 二十三烷 二十碳烯甲酯 １，８．二羟基－３．甲基．９，１０一蒽醌 乙二酸二辛酯 二十五烷 二十六烷 二十七烷 二十八烷 鱼鲨烯 二十九烷 三十烷 维生素Ｅ 油菜甾醇 豆甾醇 ７・谷甾醇 ２２，２３一二氢豆甾醇
１１５．１１８．
通过对铁皮石斛茎中挥发性成分的ＧＣ—ＭＳ分 析，在总离子流图中共得到约４０个以上的色谱峰， 根据质谱信息，经计算机Ｗｉｌｅｙ７质谱图库检索，共
鉴定了３１个化合物，占色谱流出峰总面积 的７７．５％。
［２］
国家药典委员会．中国药典［ｓ］．一部．北京：中国医药 科技出版社．２０１０：２６５－２６６．
洲、欧洲及澳大利亚等热带和亚热带地区，我国有
１．１仪器
美国Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ公司ＨＰ６８９０ＧＣｙ５９７３ＭＳ
气相色谱一质谱联用仪。
１．２药材
干燥的铁皮石斛茎，由普洱市民族药物研究所 付开聪所长提供并鉴定，采自普洱市民族药物研究 所种植基地。标本保存在中科院昆明植物所植物化 学与西部植物资源持续利用国家重点实验室。