志贺菌
肠道杆菌 志贺菌属(病原生物学与免疫学课件)
所致疾病
临床表现为发热、腹痛、里急后重、粘液脓血便等。预后良好。
急性 菌痢
1
慢性 菌痢
3
中毒 菌痢
2
全身中毒症状明显，但肠道症状不明显。病 情凶险，死亡率高。
症状不典型，迁延2个月以上。
防治原则
01 早诊断、早治疗、早隔离。 02 加强饮水、食品安全
03 防蝇灭蝇，消毒排泄物 04 选用敏感抗生素志贺菌属俗称痢ຫໍສະໝຸດ 杆菌， 是人类细菌性痢疾的病 原体。
志贺菌属的分类
痢疾 志贺菌
福氏志贺菌
鲍氏志贺菌
宋内志贺菌
生物学性状
无芽 孢
革兰阴性杆菌
无荚 膜
无鞭 毛
培养特性
痢疾 志贺菌
致病性
侵袭力
内毒素
外毒素
➢菌毛：促进细菌粘附回肠末端和结肠粘膜上。 ➢内毒素：主要致病物质
内毒素血症—发热、神志障碍。 破坏肠粘膜—炎症、溃疡 、粘液脓血便 作用于肠壁植物神经系统，里急后重。 ➢外毒素：可产生志贺毒素ST，具有三 种生物学活性，肠毒性、细胞毒性、神经毒性。
志贺菌属Shigella
生物学性状 致病性 微生物学检查
目的要求
1． 掌握分类，致病物质（菌毛、内毒 素、肠毒素），致病机理、所致疾病。
2． 熟悉标本采集应注意的事项痢疾志贺菌Sh.dysenteriae
福氏志贺菌Sh.flexeri 我国为主
鲍氏志贺菌Sh.boydii 宋内志贺菌Sh.sonnei
小结
致病物质：菌毛、内毒素、肠毒素 临床常见症状：腹痛、腹泻、里急后重
脓血粘液便
THE END
THANKS
生物学性状
1、形态与染色 无荚膜、芽胞、鞭毛 G-杆菌 有菌毛
2、生化反应 分解葡萄糖+ V-P试验 乳糖-
致病性 100 organisms disease
致病物质（1）侵袭力 菌毛 （2）内毒素 （主）
作用于肠壁 通透性↑ 吸收↑
发热、神志障碍、中毒性休克
破坏肠粘膜 炎症 溃疡（脓血便） 破坏肠壁植物NS 腹痛、腹泻、里急后重
stool
(1)急性菌痢 全身中毒症状+肠道症状 腹痛、腹泻里急后重、脓血粘液便
abdominal cramps, diarrheas
（2）慢性菌痢 病程>2个月 迁延不愈、时愈时发
（3）中毒性痢疾 中毒症状
微生物学检查
标本：取粪便注意挑选脓血、粘液部分 立即送检或30%甘油缓冲盐水中保存 中毒性菌痢——肛拭
欲拉不畅，欲罢不能，所排无几
致病性（续）
（3）肠毒素
神经毒性 中枢NS 四肢麻木
细胞毒性 肝C破坏 肠毒性 肠粘膜出血
水样泻
所致疾病
细菌性痢疾（菌痢）
传染源：病人、带菌者 传染方式： 消化道 Four F’s:finger flies food
志贺菌
志贺菌的抵抗力
本菌对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌 为弱。对酸敏感，在外界环境中的抵抗力能 以宋内氏菌最强，福氏菌次之，志贺氏菌最 弱。一般56～60℃经10分钟即被杀死。在 37℃水中存活20天，在冰块中存活96天，蝇 肠内可存活9～10天，对化学消毒剂敏感，1% 石碳酸15～30GN增菌液 培养条件：36±1℃ 6—8h 当培养液出现轻微混浊即中止培养。 操作： 称取检样25g，加入装有225mLGN增 菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器 以8000～10000r/min打碎1min，或用乳钵加 灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研 磨使其乳化，于36℃培养6～8h。培养时间 视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混 浊时即应中止培养。
细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两 季患者最多。传染源主要为病人和带菌者,通 过污染了痢疾杆菌的食物、饮水等经口感染。
志贺氏菌引起的细菌性痢疾，主要通过消化 道途径传播。根据宿主的健康状况和年龄， 只需少量病菌（至少为10个细胞）进入，就 有可能致病。人类对志贺氏菌易感，10～200 个细菌可使10～50%志愿者致病。
2.所致疾病 传染源是病人和带菌者. 传播途径主要为粪一口.人类对志贺氏菌较易 感. 痢疾志贺菌引起病情较重;宋内志贺菌多引起 轻型感染;福氏志贺菌感染易转变为慢性,病程 迁延;福氏和宋内志贺菌是我国常见的流行型 别.
3.临床感染类型 (1)急性菌痢 局部症状有脓血便,腹痛,里急后 重. 急性中毒性菌痢,以小儿多见,无明显的消化道 症状,主要表现全身严重的中毒症状.各型志贺 菌都有可能引起.临床主要有高热,神志障碍,休 克,病死率较高. (2)慢性菌痢 病程>2月,迁延不愈,局部症状为 主. 4.病后建立的型特异免疫(SIgA)短暂,不持久, 无交叉
志贺氏菌检测
志贺氏菌的检验（国标法）一、增菌称取检样25g ,加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000-10000r/min打碎lmin ,或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培育6〜8h。
培育时间视细菌生长状况而定，当培育液消失稍微混浊时即应中止培育。
二、分别和初步生化试验取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板1个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板各1个，于36工培育18~24h e志贺氏菌在这些培育基上呈现无色透亮不发酵乳糖的菌落。
挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。
一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培育18~24h ,分别观看结果。
下述培育物可以弃去：a.在三糖铁琼脂斜面上呈扩散生长的培育物；b.在18~24h内发酵乳糖、蔗糖的培育物;C.不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培育物；d.产气的培育物；e.有动力的培育物；f.产生硫化氢的培育物。
凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体），无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。
三、血清学分型挑取三糖铁琼脂上的培育物，做玻片凝集试验。
先用4种志贺氏菌多价血清检查，假如由于K抗原的存在而不消失凝集，应将菌液煮沸后再检查；假如呈现凝集，则用Al、A2、B群多价和D群血清分别试验。
如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。
福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表10可先用群因子血清检查，再依据群因子血清消失凝集的结果，依次选用型因子血清检查。
4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1~15各型因子血清检查。
假如鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3~12型多价血清及各型因子血清检查。
四、进一步的生化试验在做血清学分型的同时，应做进一步的生化试验，即：葡萄糖镀西蒙氏柠檬酸盐赖氨酸和鸟氨酸脱竣酶pH7.2尿素KCN生长水杨昔和七叶昔的分解除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外，志贺氏菌属的培育物均为阴性结果。
大肠沙门志贺菌ppt课件
并发症与后遗症
并发症
大肠沙门志贺菌感染可能引发一系列并发症，如心脏疾病、 肝病、肺部感染等。特别是对于老年人、儿童、孕妇和身体 虚弱的人来说，并发症的风险更高。
后遗症
部分患者感染大肠沙门志贺菌后可能会出现长期的后遗症， 如肠道炎症、肠道功能紊乱等。这些后遗症可能会影响患者 的日常生活和工作。
03
生物学特性
为革兰氏阴性杆菌，无芽 孢、无鞭毛，有的有菌毛 。
抵抗力
对理化因素的抵抗力较其 他肠道杆菌弱，加热60度 经15分钟或巴氏消毒可被 杀死。
发病人的粪便和血液中首次 获得该细菌。
命名
根据其发现地命名为伤寒沙门氏 菌，后来又根据其抗原差异分为 若干个血清型。
大肠沙门志贺菌的实验室检测
检测方法
细菌培养
免疫学检测
通过采集患者的粪便、血液等样本进行培 养，观察是否有大肠沙门志贺菌生长。
利用抗原-抗体反应原理，通过检测血清中 的大肠沙门志贺菌抗体进行诊断。
核酸检测
生物传感器技术
采用聚合酶链式反应（PCR）技术，对样本 中的大肠沙门志贺菌基因进行扩增，以确 定是否存在该细菌。
国际防治经验
01
02
03
04
建立全球合作机制
加强国际合作，共同应对大肠 沙门志贺菌的威胁。
推广先进技术
引进和推广先进的检测、治疗 和预防技术，提高防治效果。
强化法律法规建设
制定和完善相关法律法规，为 防治工作提供法律保障。
提高公众参与度
鼓励公众参与防治工作，形成 全社会共同防控的局面。
04
CATALOGUE
对实验数据进行统计分析，得 出检测结果。
检测结果解读
阴性
未检出大肠沙门志贺菌，患者可能未感染该细菌。
志贺菌生化鉴定方法
志贺菌生化鉴定方法
志贺菌是一种常见的致病菌，它能引起多种疾病，如食物中毒、痢疾等。
因此，对于志贺菌的鉴定方法十分重要。
常用的志贺菌生化鉴定方法包括：
1. 培养基鉴定法：利用不同的培养基来观察菌落形态、生长速度、产生的色素等性质，从而鉴定志贺菌。
2. 生化反应鉴定法：包括氧化酶试验、葡萄糖发酵试验、麦芽糖发酵试验、甘露糖发酵试验、氢化氮试验等，可以通过不同的生化反应来确定志贺菌的种类。
3. 血清学鉴定法：志贺菌产生的特定抗原可以与血清中的特异性抗体结合，形成典型的血清学反应，从而鉴定志贺菌。
以上鉴定方法需要经过专业培训才能熟练掌握，同时还需要注意无菌操作、正确识别菌种、严格控制实验条件等因素，才能确保鉴定结果的准确性和可靠性。
- 1 -。
志贺氏菌属生物危害评估报告
志贺氏菌属生物危害评估报告一、细菌的传播与致病志贺菌属是主要的肠道病原菌之一，也是引起人类细菌性痢疾的病原体。
本属细菌分布于全世界,是炎症性痢疾的典型病原菌,很多地区5%~10%的腹泻性疾病是由该菌属所致。
弗氏志贺菌和宋内志贺菌比鲍氏志贺菌和毒力特别强的痢疾志贺菌分布更广。
美国犹他州所有临床实验室工作者志贺菌病的年发病率为0.7/1 000，而临床微生物学工作者的年发病率为5.4/1 000。
在英国临床实验室，沙门菌病和志贺菌病的年发病率分别为0.137/1 000和0.322/1 000，大多数感染者为微生物学工作者。
感染者和恢复期带菌者的排泄物是传染源,经粪-口途径直接传播,经污染的食物或物体可间接传播。
苍蝇可作为机械性媒介,水源性传播不常见。
卫生条件差的拥挤人群中最易发生流行,流行区的幼儿志贺菌病特别常见,而成人得病较轻。
恢复期和亚临床带菌者是重要传染源,但真正的长期带菌者罕见。
感染很少或不诱导产生免疫性,因此同一菌种的再感染是可能的。
志贺菌可穿入低位肠段的粘膜,引起粘液分泌,充血,白细胞浸润,水肿,并常有表浅粘膜溃疡。
志贺菌感染相关的水泻由内毒素介导所致,因这种内毒素可引起肠道分泌增多。
由志贺菌感染所导致的症状包括：（1）急性细菌性痢疾经潜伏期1~4日,幼儿的起病突然,表现为发热,烦躁不安,嗜睡,厌食,恶心或呕吐,腹泻,腹痛和腹胀以及里急后重。
3日内大便中出现血液,脓液和粘液.大便次数可增加到≥20次/d,体重下降和失水严重。
若不治疗,患儿可在12日内死亡；若患儿存活,则在第2周急性症状消退.成人可表现为无发热的非血性,非粘液性腹泻,很少有或完全没有里急后重.但其最初的症状可为发作性腹绞痛,急于排便,起初排出成形大便并在排便后可缓解腹痛.以后反复发作,并且日趋严重和频繁.腹泻变得明显,系软便或含有粘液,脓及常有血液的水泻。
严重的里急后重可造成直肠脱垂和大便失禁。
成人患病常可自愈：轻者4~8日,重者3~6周。
志贺氏菌ss菌落特征
志贺氏菌ss菌落特征志贺氏菌（Salmonella enterica）是一类革兰阴性杆菌，属于肠道致病菌中的重要代表之一。
志贺氏菌的菌落特征是很多实验室常用的鉴别依据，通过观察菌落的性状可以辅助确定菌株的特征与分类。
首先，志贺氏菌的菌落外观可以呈现多种特征。
在普通琼脂培养基上，常可见到呈乳白色或灰白色的菌落。
这些菌落直径一般为2-3毫米，常呈圆形或稍微不规则的形状。
在某些富含葡萄糖的培养基上，菌落呈现出酸性反应，呈黄色。
其次，志贺氏菌的菌落具有一定的黏附性。
在培养基上生长的菌落可形成一种黏稠的粘液，这有助于它们在肠道黏膜上定居和繁殖。
这种粘稠的外观也为鉴定志贺氏菌提供了一定的参考。
此外，志贺氏菌菌落的质地特征也值得关注。
在某些培养基上，菌落可以表现为比较浓烈的气味，这与其产生的代谢产物有关。
这种特征在实验室中有时被用于初步鉴定菌株。
需要注意的是，志贺氏菌的菌落特征可以受到培养基的差异、环境条件和菌株变异的影响，因此，鉴定志贺氏菌仍需要结合其他实验方法，如生化测试和分子生物学鉴定技术。
最后，志贺氏菌不仅会引起人类的肠道感染，还可以引起一些重要的食物中毒，如沙门氏菌食物中毒。
因此，了解志贺氏菌的菌落特征对于食品安全和公共卫生至关重要。
通过观察和辨识志贺氏菌的菌落，我们可以及早发现潜在的食品污染源，采取相应的措施来确保食品的安全。
综上所述，通过观察志贺氏菌的菌落特征，我们可以了解菌株的性状与分类，提高对志贺氏菌的识别能力。
同时，这也为食品安全和公共卫生工作提供了重要的指导意义。
我们应该继续加强志贺氏菌菌落特征的研究，为菌株的鉴定和食品安全监测提供更可靠的依据。
志贺菌
(三) 免疫性
感染后可获得一定程度的免疫力，但免疫期 短，也不稳固。这可能与菌型多以及型别间缺乏 交叉免疫有关
志贺菌属的感染主要限于肠道，细菌很少入 血。所以其抗感染免疫主要依赖肠道粘膜局部 sIgA 形成等。 sIgA 能阻止志贺菌吸附，于病后 3d左右出现，但维持时间短
三、微生物学检查法
(一) 病原菌的分离和鉴定 1.标本 存活期短，应迅速送检培养。如不能立即 培养，可放于30%甘油缓冲盐水保存液中
2.毒素 (1) 内毒素 各群志贺菌都能形成强烈的内 毒素 内毒素作用机制： * 破坏肠粘膜上皮，造成粘膜下层炎症，并 有毛细血管血栓形成，以致坏死、脱落，形成 溃疡，出现粘液脓血便 * 使肠壁通透性增高，促进毒素吸收，引起 一系列毒血症的症状，如发热、神志障碍，甚 至中毒性休克 * 作用于肠壁植物神经，使肠蠕动失调并痉 挛，尤以直肠括约肌受累明显，因而发生腹痛 、腹泻、里急后重等症状
2.分离培养与鉴定 标本接种于肠道杆菌选择培养基或鉴别 培养基上，常用S-S培养基。 37℃培养 18-24h ，取可疑菌落进行生化反应和血清鉴定，以确 定菌群和菌型
(二) 快速诊断法 1.免疫染色法 将粪便与志贺菌抗血清混匀，在显微镜观 察有无凝集现象 2.免疫荧光菌球检查法 在含有荧光素标记的志贺菌属免疫血清的 液体培养基中接种标本，培育 4-8h 后发现带有 荧光的菌球为阳性
重组活菌苗由多个型别 (或种型) 的免疫原 组成，具有广谱保护作用 ，已SPA的葡萄球菌标记志贺菌属抗体 ，测定病人粪便中或增菌培养液中细菌及其可 溶性抗原
另外，还有乳胶颗粒凝集试验和PCR检测技 术等
四、防治原则 1 早期发现、早期隔离和早期彻底治疗病人 外，查出带菌者 2 切断传染途径，包括加强粪便管理、水源 管理及食品卫生监督等
志贺菌病的治疗方法有哪些？
志贺菌病的治疗方法有哪些？1.急性菌痢(1)一般治疗：症状明显的患者必须卧床休息，按照肠道传染病消毒隔离。
饮食以流质为主。
病情好转后改用稀饭、面条等。
忌食生冷、油腻及刺激性食物。
有失水者应酌情补液。
对婴儿失水在体重5%～10%范围，可采用世界卫生组织推荐的口服补液盐溶液(ORS)，每升水中含葡萄糖20g、氯化钠3.5g、碳酸氢钠2.5g、氯化钾1.5g，经我国各地试用近2000例，平均有效率为96.9%。
对反复呕吐或严重脱水者，可考虑先静脉补液，尽快改为口服补液。
(2)抗菌治疗：近年来志贺菌对各种药物及抗生素的耐药性逐年增长，目前对常用抗菌药物如磺胺、链霉素、氯霉素与四环素大多耐药，临床疗效相应降低。
细菌可呈多重耐药性。
所以对于菌痢抗生素的选择，应根据当地流行菌株药敏试验或患者大便标本培养的结果进行选择，避免无针对性的滥用。
在一定地区内注意轮换用药。
抗菌药物疗效的考核应以粪便培养阴转率为主，治疗结束时阴转率应达90%以上。
常用药物包括下列几种：①喹诺酮类药物：具有抗菌谱广，口服易吸收等优点，近年耐药株逐渐增多，耐药性也可通过质粒介导。
对志贺菌感染常用环丙沙星400～600mg/d，分2次或3次口服，疗程3～5天。
其他新的喹诺酮类药物，对志贺菌感染也有效。
②磺胺甲?唑/甲氧苄啶(复方磺胺甲?唑)：剂量为2片/次，2次/d，疗程7天。
根据我们使用结果，治愈率可达95%以上。
近年来耐药性逐步增长，疗效有下降趋势。
对有磺胺过敏，白细胞减少及肝、肾功能不全者忌用。
③抗生素：志贺氏菌对常用抗生素如氯霉素、链霉素、氨苄西林大多均已耐药，部分菌株对多西环素仍然较敏感。
多数致病菌体外试验对卡那霉素、庆大霉素仍较敏感，但仅能注射用药，即时效果较好，由于肠壁组织内药物浓度较低，不向肠腔排泌，不易清除细菌，易复发，宜和甲氧苄啶口服合用。
国内外的研究表明，头孢菌素类抗生素亦对志贺氏菌有较好的疗效，必要时也可选用。
在决定应用抗生素时,应考虑到疾病的严重程度,病人的年龄(儿童的治疗参见第265节细菌性感染中的急性感染性胃肠炎的治疗),卫生状况,进一步传播的可能性和造成细菌耐抗生素的可能性.此外,早期用适当的可吸收的抗菌药物治疗,可明显减轻症状和减少志贺菌的排出.对儿童,TMP-SMX中的TMP成分4mg/kg每12小时1次为首选方案;对成人,用双倍加强片(TMP320mg)每12小时1次.成人还可用诺氟沙星400mg口服每日2次或环丙沙星500mg口服每日2次.很多志贺菌株可能对氨苄青霉素和四环素耐药.④中药治疗：小檗碱0.3g/次，4次/d，7天为一疗程。
志贺菌大肠杆菌霍乱
素并引发严重感染。
1982年美国首次证明O157：H7感染与牛肉有关。1996年1
－8月间，日本9000人因O157：H7而中毒，11人死亡。2000年，在江苏、安徽等地暴发
的O157：H7食物中毒事件导致177人死亡，中毒人数超过两万人。
感染O157大肠杆菌的患者，轻者恶心，腹胀腹泻；重者脱水，可发生酸中毒或急性肾 功能衰竭而死亡。
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌 大肠菌群
粪大肠菌群 大肠杆菌
霍乱弧菌 (Vibrio cholerae)
分布：在港湾、海湾 和含盐的水中天然存 在，未必与海水受陆 上污水污染直接相关 联，在温暖季节的海 水环境中大量繁殖。
主要致病种类：
○ 01型——通常所 指的霍乱弧菌
○ 非01型——又成 非凝集性（NAG） 弧菌
切断传播途径
4
提高人群免疫力
5
环境对致病菌分布的影响
北极和较冷气候的地区：肉毒梭菌和李斯特氏菌
1
（嗜冷性细菌）
2
温热带水域：霍乱弧菌和副溶血性弧菌
粪便污染或带菌者的接触：沙门氏菌、志贺氏菌、
3
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等
谢 谢 ！
(Enterohaemorrhagic E. Coli)——O157:H7
肠道致病性大肠埃希氏菌 (EPEC)
具有特定O、K抗原血清型， 可引起婴幼儿腹泻
产肠毒素性大肠埃希氏菌( ETEC)
在小肠定位繁 殖，产生肠毒 素，引起霍乱 样腹泻。
毒素包括：
不耐热肠毒素 LT——60 C， 10min灭活
中毒的食品及其污染途径
引起中毒的食品与沙门氏菌属相似
01
健康人群常带带菌率为：2%-8%
志贺菌大肠杆菌霍乱
诊断与检测方法
志贺菌大肠杆菌霍乱的诊断通常使用病原学检测方法，包括细菌培养和分子生物学检测等。这些方法能够确定 病菌的存在并确定其毒力因子。
治疗与预防措施
志贺菌大肠杆菌霍乱的治疗主要是通过补液和抗生素治疗。预防措施包括饮 用安全水源、食用熟食、保持个人卫生和加强环境卫生等。
全球霍乱疫情与统计数据
全球霍乱疫情非常严重，每年有数十万人感染，其中数万人死亡。发展中国家的偏远地区和落后地区是霍乱高 发区。
霍乱特点与历史背景
霍乱是一种高传染性的急性肠道感染疾病，曾在历史上造成多次大规模疫情。19世纪的伦敦霍乱疫情是其中 最严重的之一。
结论与展望
志贺菌大肠杆菌霍乱仍然是全球公共卫生问题，需要进一步加强预防控制措施和疫苗研发。只有共同努力，才 能有效遏制这一疾病的传播。
志贺菌大肠杆菌霍乱
志贺菌霍乱，又称为大肠杆菌霍乱，是一种由志贺菌引起的肠道传染病。它 的传播途径主要是经过饮Fra bibliotek被污染的水和食物。
病因与传播途径
志贺菌大肠杆菌霍乱的主要病因是志贺菌感染，传播途径包括饮用被污染的水和食物，尤其是海鲜类食物。此 外，人与人之间的直接接触也是一种传播途径。
症状与临床表现
志贺菌属-PPT课件
生化反应
氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、不分解乳糖，（个别菌株 迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：KA－－ MIU：－ ＋/－ － IMViC：－/＋ ＋ － － 除A群外，均能发酵甘露醇
抗原结构
只有O、K抗原，无H抗原 K抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集 根据O抗原分4群和44型
志贺菌抗原分类
与EIEC的鉴别
生化反应鉴别试验 粘质酸盐产酸 醋酸盐利用 赖氨酸脱羧 EIEC ＋ ＋ ＋ 志贺菌 － － －
与类志贺邻单胞菌的鉴别
鉴别试验 氧化酶 动力 半乳糖苷渗透酶 （ONPG） 类志贺菌 ＋ ＋ ＋ 志贺菌 － － －
与动力不明显、H2S阴性沙门菌的鉴别
鉴别试验 沙门菌诊断血 清玻片凝集试 验
志贺菌鉴定
初步鉴定 ●挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基 ●若符合KIA：KA－－；MIU：－ ＋/－ －， 再作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验 最后鉴定：全面生化反应和单价血清玻片凝集 试验 若出现生化反应符合，血清学不凝集现象，应 考虑K抗原的阻断作用，可将菌液加热 100℃15～30min后，重复凝集试验，仍不凝集 可考虑EIEC，需进行鉴别。
肠道杆菌
志贺菌属
志贺菌属
是引起人类细菌性痢疾的病原菌 包括四群 ,共44个血清型 A群--痢疾志贺菌 B群--福氏志贺菌 C群--鲍氏志贺菌 D群--宋内志贺菌
形态染色
革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、无鞭 毛，多数菌株有菌毛
志贺菌
培养特性
兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌 落菌落 SS平板－－无色菌落 Mac平板－－无色菌落 EMB平板－－无色菌落 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落，个别菌 株可迟分解乳糖
菌种
志贺菌属微生物学检验
志贺菌属微生物学检验1.1形态与染色：志贺菌为革兰阴性杆菌，有菌毛，无芽胞，无荚膜，无鞭毛。
1.2培养特性：志贺菌除宋内志贺菌个别菌株外，均不分解乳糖，故在肠道选择性培养基上形成乳糖不发酵、中等大小、无色半透明的光滑型菌落。
1.3生化反应：志贺菌发酵葡萄糖产酸不产气；除宋内志贺菌个别菌株可迟缓发酵乳糖外，其余均不发酵乳糖；志贺菌不分解尿素、不产H2S；IMViC试验结果为－／++－－。
1.4抗原构造：志贺菌有O抗原，耐热，部分菌株有K抗原，能阻止O凝集，无H抗原。
O抗原分为型特异性(特异性较高)和群特异性(特异性较低)两类。
根据生化反应及O抗原的不同，可将志贺菌分为四个血清群；进一步按型特异性和群特异性O抗原，可将各群志贺菌分为40余种血清型及亚型。
我国以B群志贺菌感染最为常见，其次为D群。
表志贺菌的分类1.5抵抗力：志贺菌抵抗力较弱，加热至60℃保持10 min可杀死。
对酸和一般消毒剂敏感。
在粪便中，由于其他肠道菌产酸可使志贺菌在数小时内死亡，故在运送标本时应使用含有缓冲液的培养基。
1.6变异性：宋内志贺菌最易发生S－R变异，同时伴有生化特征、抗原构造及致病性的变异，而出现非典型菌株。
在菌痢恢复期或慢性菌痢患者中常可分离得到非典型菌株。
志贺菌属细菌对磺胺类药物、四环素、氨苄西林均表现出耐药性变异。
志贺菌的多重耐药已成为一个严重的医学问题。
2临床意义2.1致病物质侵袭力：志贺菌借助菌毛黏附于回肠末端和结肠黏膜上皮细胞，继而穿入上皮细胞内生长繁殖，引起炎症反应。
内毒素：志贺菌可产生毒性较强的内毒素，除引起内毒素血症外，还可破坏肠黏膜，形成炎症、溃疡、出血，临床表现为典型的脓血黏液便。
内毒素还可作用于肠壁自主神经系统，导致肠功能紊乱、肠蠕动失调、肠道平滑肌痉挛，尤以直肠括约肌最为明显，常出现腹痛、里急后重等症状。
外毒素：A群志贺菌能产生志贺毒素，又称Vero毒素。
具有神经毒性、细胞毒性、肠毒性，可引起中枢神经系统麻痹、上皮细胞损伤和水样腹泻。
志贺氏菌的危害程度评估报告
志贺氏菌的危害程度评估报告一、生物学特性志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌人类对痢疾杆菌有很高的易感性。
在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。
志贺氏菌和大肠杆菌都属于肠杆菌科，根据DNA杂交研究结果表明，志贺氏菌属的四个种和大肠杆菌属在生化上是难以区分的，因为有产气的志贺氏菌，也有乳糖阴性、不产气、不运动的大肠杆菌，有些大肠杆菌也能引起痢疾状的腹泻。
志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μ m ,宽0.5-0.7μ m。
不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，不运动，有菌毛。
志贺氏菌需氧或兼性厌氧。
营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。
37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。
在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。
根据抗原构造的不同，按最新国际分类法，将本属细菌分为四个群、39个血清型。
二、危害程度分类根据中华人民共和国卫生部制定《人间传染的病原微生物名录》该菌危害程度为第三类。
三、致病性和感染剂量志贺氏菌引起的细菌性痢疾，主要通过消化道途径传播。
根据宿主的健康状况和年龄，只需少量病菌（至少为10～100个细胞）进入，就有可能致病。
致病因素：志贺氏菌的致病作用，主要是侵袭力、菌体内毒素个别菌株能产生外毒素。
志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类一类是急性细菌性痢疾：又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型；二类是慢性细菌性痢疾：又分慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型三型。
病后有一定的免疫力，但免疫期短，也不稳定。
四、暴露的潜在后果暴露后可能引起感染，菌量大时可使实验人员显性感染，菌量很少时常呈暂时的带菌状态。
被感不染后，成为传染源，可能对周围及环境造成污染，应及时得到控制。
五、感染途径通过污染食品和水源经口传播，无其它感染途径。
志贺菌属
鼠疫杆菌
生化反应 分解葡萄糖、甘露醇产酸不产气， 不分解其他糖；还原硝酸盐；苯丙氨酸脱氢酶、 脲酶、H2S阴性；无动力。 抵抗力 100℃ 1min 死亡，对一般消毒剂敏感， 但可耐日光1～4小时，在干燥咯痰和蚤粪中存 活数周，在冻尸中能存活4～5个月。对链霉素、 卡那霉素及四环素敏感。
二、致病性与免疫性
3. 动力不明显、H2S阴性的沙门菌的鉴别： 沙门菌继续培养后产H2S
血清学鉴定： 先与多价血清凝集
再与单价血清凝集 国内最多见的是B群,达70%以上,其次是D群,A群中除1 型（痢疾志贺菌）和2型（史密斯志贺菌）外，其余少见。
复习思考题
1. 志贺菌在SS、KIA等培养基上的生长情况
如何？与大肠埃希菌比较有何不同？
二、致病性与免疫性
致病物质：
1. 侵袭力：菌毛可粘附回肠和结肠粘膜上皮 细胞， 并侵入细胞内生长繁殖，在粘膜固有层形成感染灶引起 炎症反应。 2. 内毒素： ①作用于肠粘膜使其通透性增高，促 进内毒素吸收，形成内毒素血症（高热、意识障碍、中 毒性休克）；②直接破坏肠粘膜。形成炎症溃疡、出血， 呈典型的脓血粘液便；③还可以作用于肠壁植物神经， 使其肠蠕动失调和痉挛（直肠括约肌最明显）出现腹痛、 里急后重的症状。
培养特性 兼性厌氧，最适温度27-30；最适 PH6.9-7.7；营养要求不高。
普通平板上：生长缓慢，24h长成肉眼可见的小 菌落； 血平板上：生长良好， 28℃48小时后，长成不 透明的，不溶血，中央隆起，边缘呈花边样菌落， 为本菌的特征48h长成粗糙型菌落； 肉汤中：开始为浑浊，24h后成菌膜，48小时液 体表面形成薄菌膜，菌膜向长出下垂菌丝，呈钟乳
（二）检验程序
粪便、直肠拭子 分离培养
SS、EMB、MAC
志贺氏菌菌落形态特征
志贺氏菌菌落形态特征志贺氏菌菌落形态特征引言•志贺氏菌是一种革兰氏阴性菌，属于肠道细菌的一种。
它最早由日本科学家志贺满在1892年发现并命名，因此得名志贺氏菌。
•志贺氏菌是引起痢疾的主要致病菌之一，对人类健康带来了重大威胁。
菌落形态特征•菌落直径：3-5毫米。
•菌落形态：饼状或莲座状。
•菌落颜色：通常为淡黄色至黄色，偶尔呈浅粉红色。
•菌落质地：光滑，有时略带凹陷。
•菌落边缘：整齐，有时呈波浪状。
•菌落密度：较大，表面有时有不规则皱褶。
细菌形态特征•志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌。
•细胞形态：呈短杆状。
•细胞大小：约为微米× 微米。
•细胞数量：通常呈单个或成对分布，有时也可呈短链或簇集分布。
革兰染色特征•革兰染色结果：革兰阴性。
•细胞壁特征：内层细胞胞壁薄，外层双层膜结构。
其他形态特征•志贺氏菌具有鞭毛，可以通过鞭毛的摆动进行运动。
•在适宜的环境下，志贺氏菌也可形成孢子，帮助其在恶劣条件下存活。
结论•了解志贺氏菌菌落形态特征对于病原菌的鉴定和病情评估具有重要意义。
•志贺氏菌的形态特征可通过革兰染色等实验方法进行观察和分析。
•在实验室育种中，准确判断志贺氏菌菌落形态特征对于痢疾的早期检测和治疗具有重要作用。
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•志贺氏菌菌落的形态特征是对该菌进行初步鉴定的重要依据之一。
•由于志贺氏菌引起的痢疾会对人类健康造成威胁，因此及早鉴定它的菌落形态特征对于早期预防和治疗具有重要意义。
•进行菌落形态观察时，我们可以通过裸眼或放大镜观察菌落的外观特点。
菌落直径•志贺氏菌的菌落直径一般在3-5毫米之间，这是通过在琼脂培养基上培养后的初步观察得出的。
菌落形态•志贺氏菌的菌落形态通常为饼状或莲座状，形态整齐有规律。
这种形态特征是志贺氏菌与其他菌种的重要区别之一。
菌落颜色•志贺氏菌的菌落颜色通常为淡黄色至黄色，偶尔也会呈现浅粉红色。
这种颜色特征有助于初步判断菌落中是否存在志贺氏菌。
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2.所致疾病 传染源是病人和带菌者. 传播途径主要为粪一口.人类对志贺氏菌较易 感. 痢疾志贺菌引起病情较重;宋内志贺菌多引起 轻型感染;福氏志贺菌感染易转变为慢性,病程 迁延;福氏和宋内志贺菌是我国常见的流行型 别.
3.临床感染类型 (1)急性菌痢 局部症状有脓血便,腹痛,里急后 重. 急性中毒性菌痢,以小儿多见,无明显的消化道 症状,主要表现全身严重的中毒症状.各型志贺 菌都有可能引起.临床主要有高热,神志障碍,休 克,病死率较高. (2)慢性菌痢 病程>2月,迁延不愈,局部症状为 主. 4.病后建立的型特异免疫(SIgA)短暂,不持久, 无交叉
1、增菌培养
培养基：GN增菌液 培养条件：36±1℃ 6—8h 当培养液出现轻微混浊即中止培养。 操作： 称取检样25g，加入装有225mLGN增 菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器 以8000～10000r/min打碎1min，或用乳钵加 灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研 磨使其乳化，于36℃培养6～8h。培养时间 视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混 浊时即应中止培养。
志贺菌的分类
志贺氏菌的抗原有K和O抗原而无H抗原。 K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表 面抗原，不耐热，加热100℃1小时被破坏。 K抗原在血清学分型上无意义 根据志贺氏菌菌体（O）抗原和分解甘露 醇的能力，将其分为4群，即痢疾志贺氏菌 （A群），福氏志贺氏菌（B群），鲍氏志 贺氏菌（C群）和宋内氏志贺氏菌（D群）
•志贺氏菌病相关的食品包括色拉（土豆、 金枪鱼、虾、通心粉、鸡），生的蔬菜， 奶和奶制品，禽，水果，面包制品，汉堡 包，和有鳍鱼类。 •食源性志贺氏菌流行的最主要原因是从事 食品加工行业人员患菌痢或带菌者污染食 品，食品接触人员个人卫生差，存放已污 染的食品温度不适当等。
志贺菌生物学特性
革兰染色阴性杆菌 无鞭毛,有菌毛. 在肠道鉴别培养基上形成无色,半透明 的菌落.均能分解葡萄糖只产酸不产气, 除宋内志贺菌迟缓发酵乳糖外,均不分 解乳糖. 营养要求不高在普通琼脂平板上经 24h生长形成直径达2mm大小半透明的光 滑性菌落志贺菌属中的宋内菌常出现扁 平的粗糙型菌落
防治措施
♠主要预防措施是夏秋季加强食品卫生管理， 严格执行卫生制度，食品企业和食堂中的 工作人员息细菌性痢疾或带菌者应予治疗， 并暂时不从事接触食品的工作。 ♠主要使用抗菌药物治疗，口服氯霉素或映 喃陛酮，有失水现象者要及时补液。
微生物检测
检验步骤 检样→样品处理→增菌培养→SS、HE平板 分离培养→初步生化鉴定→最后血清学鉴 定→报告
谢谢观赏
判定为志贺氏菌属五项生化试验： 5%乳糖发酵实验 甘露醇实验 棉子糖实验 甘油发酵实验 靛基质试验
6、结果报告： 综合生化和血清学的试验结果判定 菌型并作出报告。
其他检测方法 脉冲场凝胶电泳 荧光菌球法 协同凝集试验 PCR法
检验操作要点 • 志贺氏菌在常温中生存的时间较短，应尽快 进行试验。 • 如24h内不能检验，样品应在冰箱内 • 长时间不能检验，放在低温冰箱内。
志贺菌的抵抗力
本菌对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌 为弱。对酸敏感，在外界环境中的抵抗力能 以宋内氏菌最强，福氏菌次之，志贺氏菌最 弱。一般56～60℃经10分钟即被杀死。在 37℃水中存活20天，在冰块中存活96天，蝇 肠内可存活9～10天，对化学消毒剂敏感，1% 石碳酸15～30分钟死亡。
志贺菌的致病性
志贺菌的检测
组长：温东方
小组分工
温东方
陈继春 马丽丽 杨露 郭丽 冷娟
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பைடு நூலகம் 志贺菌的介绍
• 志贺菌属的细菌通称痢疾杆菌是人类细菌 性痢疾的病原菌以病人和带菌者为传染源 无动物宿主 • 人和灵长类是志贺氏菌的适宜宿主，营养 不良的幼儿、老人及免疫缺陷者更为易感。 • 细菌性痢疾是其导致的常见的肠道传染病, 夏秋两季患者最多。传染源主要为病人和 带菌者,通过污染了痢疾杆菌的食物、饮水 等经口感染。
5、进一步的生化试验 在做血清学分型的同时，应做进一步的生化试验， 即：葡萄糖铵，西蒙氏柠檬酸盐，赖氨酸和鸟氨酸 脱羧酶，ｐＨ７．２尿素，ＫＣＮ生长，以及水杨 苷的分解。除宋内氏菌和鲍氏１３型为乌氨酸阳性 外，志贺菌属的培养物均为阴性结果。必要时还应 做革兰染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的 革兰阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与 某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志 贺氏菌属的培养物。已判定志贺菌属的培养物，应 进一步做５％乳糖发酵，甘露醇、棉子糖和甘油的 发酵和靛基质试验。志贺菌属４个生化群的培养物， 应符合该群的生化特性。但福氏６型的生化特性与 Ａ群或Ｃ群相似。
志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类
A、急性细菌性痢疾：又分急性典型、 急性非典型、急性中毒性菌痢三型。 B、慢性细菌性痢疾：又分慢性迁延型、 慢性隐伏型、慢性急性发作型三 型。
志贺菌的致病物质
1.致病物质主要是侵袭力和内毒素,有的菌 株尚产生外毒素. (1)侵袭力 借菌毛粘附,穿入回肠末端和结 肠粘膜上皮细胞，在上皮细胞内繁殖,形成 感染灶,引起炎症反应.细菌一般不进入血 流.志贺菌穿透上皮细胞的能力,由基因所 控制.志贺菌只有侵入肠粘膜后才能致病.
(2)内毒素 1)作用于肠粘膜,使通透性增高,促进对内毒 素的吸收,引起发热,神志障碍等. 2)破坏肠粘膜,形成炎症,溃疡,呈现典型的 脓血粘液便.内毒素还能作用于肠壁植物神 经系统,使肠功能发生紊乱,肠蠕动失调和痉 挛.尤其是直肠括约肌痉挛最明显,因而出现 腹痛,里急后重等症状. (3)外毒素 A群志贺菌I型和II型还能产生外 毒素,称志贺毒素.使蛋白质合成中断(上皮 细胞损伤).
细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两 季患者最多。传染源主要为病人和带菌者,通 过污染了痢疾杆菌的食物、饮水等经口感染。
志贺氏菌引起的细菌性痢疾，主要通过消化 道途径传播。根据宿主的健康状况和年龄， 只需少量病菌（至少为10个细胞）进入，就 有可能致病。人类对志贺氏菌易感，10～200 个细菌可使10～50%志愿者致病。
2、分离培养
•强选择性平板：SS或HE •弱选择性平板：麦康凯或伊红美蓝平板 (EMB)在工作中36±1℃培养 18—24h •菌落特征：无色透明，中等大小，光滑 圆形菌落
3、初步生化试验： 挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和 葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落，以 防遗漏，经36℃培养18～24h，分别观察结果。 原理：本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观 察细菌对糖的利用和硫化氢（变黑）的产生。该 培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为 10:10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分 解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量 酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中 含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红， 底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以 仍保持黄色。
4、血清学分型： 凡凝为志贺氏菌，挑取三糖铁琼脂上的培养物，做 玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的 存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查； 如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分 别试验。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多 价1、2、3分别检查，并进一步用1～15各型因子血 清检查。 如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3～ 12型多价血清及各型因子血清检查。