细胞电融合仪ECM安装操作手册
ECM830多功能型细胞电穿孔 细胞转基因活体导入系统 简介 ...
ECM830多功能型细胞电穿孔细胞转基因活体导入系统简介：ECM830可以满足所有体外和体内电穿孔研究的需要，并可对预处理的动、植物细胞进行融合。
该型号具有精细的电压调节，可监控所有参数，可调整脉冲间隙，这些细节是其优异品质的内在保证。
特别需要指出的是，配合BTX 提供的专用附件，可以轻松进行诸如活体转基因和导入蛋白，多肽及其他药物的研究和治疗。
应用：♦哺乳动物细胞转染♦体外／体内／离体／卵内实验♦核移植♦植物组织和原生质体的转染♦细菌和酵母的转化可靠性：方形波技术保证了更高的效率和哺乳动物细胞存活率。
通用性：利用BTX多种专业电极和新型的BTX MOS多孔板电穿孔仪，可以将仪器运用到各种电穿孔领域。
监控仪选配新的VIP 3000可以允许用户监控和记录下电穿孔过程中的主要电参数。
利用选配的通讯模块，就可以把数据下载到电脑上或在打印机上打印出来。
多孔板电穿孔仪新的MOS-多孔优化系统利用BTX-ECM电源发生器可为研究人员提供先进的多孔技术。
ECM830是为体外和体内电穿孔设计的方形波电穿系统。
BTX方形波技术为研究者提供了更高的细胞转染率和存活率。
ECM830应用范围广泛，包括了哺乳动物细胞和植物细胞转染，胚胎操作，核转移以及细菌和酵母转化。
ECM830的主要特点包括了：5至3000伏的电压范围；精确的电压调进，10微秒至10秒的脉冲范围，可控制的脉冲间隔，电弧淬灭功能（arc Quenching）可显示真实电压及脉冲波长数字显示屏。
更为客户提供了两年的质量保证。
ECM830主机可和BTX的各种专业及配件结合使用，使分子或药物的体外／体内导入实验更加得心应手。
技术规格操作状态：启动后内部自检界面：数字用户界面输入：110V／220V通用充电时间：最大5sec(没有延迟)电压范围：5－500V电压模式／1V分辨率505－3000V高电压模式／5V分辨率波长范围：10μsec─999μsec低电压模式／1μsec分辨率1msec─999msec低电压模式／1msec分辨率1sec─10sec低电压模式／0.1sec分辨率10μsec─600μsec高电压模式／1μsec分辨率多脉冲：1─99脉冲间隔：100msec─10sec电弧控制：电弧淬灭功能安全：脉冲发生器短路保护特点精密度及性能♦高级方波脉冲外形♦低电压模式1V分辨率及0.5％的精确率♦可监视电压、脉冲持续时间、脉冲间隔及脉冲数目安全性能♦电弧淬灭功能♦脉冲发生器短路保护♦外部安全机架可操作性能♦数字用户界面♦单一旋转数字盘控制♦在线帮助系统♦电压范围5V─3000V♦脉冲持续时间范围10msec─10sec优点♦高级的方形波技术产生更高的存活率及效率。
MEC-1000便携式多参数监护仪使用指南
MEC-1000便携式多参数监护仪
监护步骤：
1 接通电源
2 病员准备，清洁皮肤。
安装电极片：R---右臂锁骨下，靠近右肩。
L---左臂锁骨下，靠近左肩。
F---安放在左下腹。
4 连接导线，根据需要选择导联，调整心电图波形大小
3
及滤波位，报警上下线。
维护及清洁消毒：清洁前断开电源，用70%酒精擦拭，自然风干或清洁布清洁
MEC-1000便携式多参数监护仪
监护步骤：
1 接通电源
2 病员准备，清洁皮肤。
安装电极片：R---右臂锁骨下，靠近右肩。
L---左臂锁骨下，靠近左肩。
3
F---安放在左下腹。
4 连接导线，根据需要选择导联，调整心电图波形大小及滤波位，报警上下线。
维护及清洁消毒：清洁前断开电源，用70%酒精擦拭，自然风干或清洁布清洁
3。
细胞融合仪设备安全操作规定
细胞融合仪设备安全操作规定
前言
细胞融合技术是在细胞水平上实现细胞相互融合并合并成为一个新
细胞的技术，广泛应用于生物学、医学、生物技术等领域。
细胞融合
过程涉及到放射线、高电压等危险因素，如果未能正确操作，将对实
验人员及设备造成安全隐患。
因此，为了保障实验人员和设备的安全，制订本操作规定。
一、操作前的准备
在操作细胞融合仪设备之前，应首先进行以下准备：
1.安装和调试设备。
请确保设备已经按照说明书正确安装和
调试，且处于正常工作状态；
2.确定实验目的。
在操作设备之前，应清楚知道实验要达到
的目的，并了解所要使用的材料；
3.了解设备使用说明书。
操作人员必须熟练掌握设备的使用
说明书和安全操作规定，准确了解设备的工作原理和注意事项；
4.组织工作人员。
应有专人负责对设备进行维护保养，并组
织操作人员进行安全操作培训。
细胞电融合电穿孔仪安全操作及保养规程
细胞电融合电穿孔仪安全操作及保养规程1. 引言细胞电融合电穿孔仪是一种用于细胞电融合和电穿孔实验的专用仪器。
正确的操作和保养细胞电融合电穿孔仪对实验结果的准确性和仪器的寿命至关重要。
本文将介绍细胞电融合电穿孔仪的安全操作方法和保养规程，以确保仪器的稳定性和实验室人员的安全。
2. 安全操作规程在使用细胞电融合电穿孔仪之前，务必仔细阅读和遵守以下安全操作规程：2.1 仪器安装•在安装细胞电融合电穿孔仪之前，确保工作台面平稳、干净整洁，以确保仪器的稳定性和安全性。
•将仪器放置在通风良好的地方，远离易燃物和可燃气体，以防止发生火灾或爆炸事故。
•确保电源线和其他连接线符合安全规范并正常连接，确保电路稳定可靠。
•仪器上的开关和控制按钮应合理设置并易于操作。
2.2 个人防护在操作细胞电融合电穿孔仪时，务必采取适当的个人防护措施，以防止意外受伤。
•必须戴好实验室必备的个人防护用具，如实验手套、实验眼镜等。
•避免戴饰品，以防止其被仪器零部件卡住或引起其它危险。
•长发必须绑起来，以防止被仪器零部件绊到。
2.3 实验操作正确的实验操作是确保仪器正常运行和实验顺利进行的关键。
•严格按照操作手册上的实验步骤进行操作，避免盲目操作。
•注意操作仪器时的稳定性，以免仪器倾倒或发生意外。
•当进行高压操作时，确保操作平台上无水珠或水滴，以防触电事故。
•在实验过程中，禁止触摸仪器的电源、高压电极和高压导线等部件，以防电击事故。
2.4 实验结束后实验结束后，应按照以下步骤进行安全处理：•关闭细胞电融合电穿孔仪的电源开关，切断供电。
•将高压电源关闭，并断开与仪器的连接。
•将仪器的工作平台清洁干净并做好记录，以便下次使用。
•将实验室清理干净，确保没有任何潜在危险。
3. 保养规程正确的保养细胞电融合电穿孔仪有助于延长其使用寿命并保持仪器的性能稳定。
3.1 清洁细胞电融合电穿孔仪的外部•使用柔软的湿布清洁仪器的外壳，避免使用过多的水分或化学溶液，以防水进入仪器内部。
电融合法操作步骤
电融合法操作步骤
电融合法操作步骤是一种新型的技术，它可以将电子和机械技术有机地结合在一起，以满足不同的应用需求。
电融合法操作步骤的实施需要经过一系列的步骤，以确保技术的有效性和可靠性。
首先，需要确定电融合法操作步骤的目标，以及实施步骤的范围。
这一步骤需要综合考虑电子和机械技术的特点，以及应用需求，确定出最佳的实施方案。
其次，需要确定电融合法操作步骤的具体实施方式。
这一步骤需要考虑电子和机械技术的特点，以及应用需求，确定出最佳的实施方式。
接下来，需要确定电融合法操作步骤的实施细节。
这一步骤需要考虑电子和机械技术的特点，以及应用需求，确定出最佳的实施细节。
最后，需要确定电融合法操作步骤的实施结果。
这一步骤需
要考虑电子和机械技术的特点，以及应用需求，确定出最佳的实施结果。
电融合法操作步骤的实施需要经过一系列的步骤，以确保技术的有效性和可靠性。
在实施过程中，需要综合考虑电子和机械技术的特点，以及应用需求，确定出最佳的实施方案、实施方式、实施细节和实施结果。
此外，还需要定期进行技术检查，以确保技术的有效性和可靠性。
电融合法操作步骤的实施可以帮助企业提高生产效率，提升产品质量，降低成本，提高市场竞争力。
因此，企业应该重视电融合法操作步骤的实施，以确保技术的有效性和可靠性，从而获得更好的经济效益。
北京细胞电转仪操作流程
北京细胞电转仪操作流程
一．准备工作
1. 将设备放置在室内稳定干燥处，以防灰尘污染仪器；
2. 将仪器与220V交流电源接通，打开设备拉开保护杆，仪器开机后可以正常使用；
3. 将需要的池放置好；
3. 确认仪器与计算机的接头连接稳定；
4. 打开计算机，打开文件里的细胞电转仪软件，准备开始实验；
二．操作步骤
1. 确认实验池的位置；
2. 打开细胞电转仪软件，点击“启动细胞”按钮，启动实验；
3. 旋转控制杆，调整池深浅，控制杆右侧点击“脉冲输出”按钮，产生细胞间脉冲；
4. 点击“总览”按钮，屏幕上出现实验池的图像，下方可显示实验池的相关信息；
5. 点击“参数设置”按钮，完成参数设置；
6. 点击“数据录入”按钮，完成数据录入；
7. 点击“数据记录”按钮，完成数据记录；
8. 点击“数据报表”按钮，完成数据报表；
9. 点击“总结”按钮，完成测试结果分析；
10. 完成实验后，录入实验结果，存档，备份；
三．实验结束
1. 将实验池清洗干净；
2. 关闭细胞电转仪软件，关闭计算机；
3. 关闭仪器的供电源；
4. 收好设备；。
单克隆细胞追踪成像仪使用说明书
单克隆细胞追踪成像仪使用说明书单克隆细胞追踪成像仪使用说明书欢迎使用单克隆细胞追踪成像仪，这是一款先进的科研设备，可以帮助您进行细胞追踪和成像分析。
本说明书将全面介绍仪器的组装、操作、维护和注意事项，以确保您能够正确使用和保养仪器，获取准确可靠的实验结果。
第一部分：仪器组装与准备在使用单克隆细胞追踪成像仪之前，您需要确保仪器已经正确组装并准备好使用。
请根据以下步骤进行操作：1. 将仪器包装箱打开并取出仪器及配件。
2. 根据说明书中提供的图文指引，正确安装和组装仪器的各个部件，确保紧固牢固。
3. 接通适当的电源并确保仪器电源开关处于关闭状态。
4. 使用仪器附带的清洁用品对仪器表面进行清洁，以保证实验的无菌环境。
第二部分：操作流程和功能介绍单克隆细胞追踪成像仪具有多种功能和操作模式，以满足不同实验需求。
在正式操作之前，请先熟悉以下操作流程和仪器功能：1. 打开仪器电源，并等待仪器启动和初始化。
2. 根据实验需求选择合适的成像模式，如亮场显微镜和荧光显微镜等。
3. 将待观察的细胞标记并装载至培养皿或载物上。
4. 将培养皿或载物放置在仪器台面上，并调整好观察位置和焦距。
5. 通过仪器控制面板或软件界面进行图像采集和实时观察。
6. 根据实验需要，选择记录时间、图像分辨率和采集频率等参数进行设定。
7. 当实验完成后，关闭仪器电源，并进行仪器的清洁和消毒。
第三部分：维护和注意事项为了保证单克隆细胞追踪成像仪的正常运行和延长使用寿命，以下是一些维护要点和注意事项：1. 定期清洁仪器表面和镜头等重要部件，使用精细的清洁用品避免刮伤。
2. 确保仪器处于干燥、防尘和无菌的环境中，避免灰尘、细菌和液体的侵入。
3. 仪器不适宜长时间暴露在高温、高湿等恶劣环境下，做好温度和湿度控制。
4. 每次使用结束后，及时关闭电源，避免长时间待机和电源浪费。
5. 遵守仪器使用和安全操作规范，避免在不适宜的环境下操作或过度使用仪器。
6. 保持仪器软件和固件的更新和升级，以确保仪器性能处于最佳状态。
AO Smith ECM电动机安装及操作指南说明书
9/06 IOM-AOS-ECM Installation and Operation Manual AO Smith ECM MotorNailor Industries Inc. reserves the right to change any information concerning product or specification without notice or obligation.Page 1 of 1NOTICE:POWER MUST BE REMOVED FROM THE CONTROLLER WHENEVER CONNECTIONS OR DISCONNECTIONS ARE BEING MADE. FAILURE TO DO SO COULD RESULT IN IRREPARABLE DAMAGE.NOTICE:BEFORE PROCEEDING WITH ANY ADDITIONAL TROUBLESHOOTING, ENSURE THAT THE POLARITY OF THE 24 VAC SUPPLY TO THE CONTROLLER IS CORRECT. (SEE FIGURE 1). IF THE POLARITY IS NOT CORRECT, REMOVE THE CONNECTORS AND RECONNECT OBSERVING PROPER POLARITY. RECHECK THE SYSTEM FOR PROPER OPERATION.1.Inspect the unit to make sure that there are no foreign objectsblocking fan operation. Turn the wheel by hand to verify that it moves freely.2.Energize the unit at the unit disconnect switch. Adjust thecontrols to call for the fan motor to run.Setting the Fan Airflow in the Manual Mode 1.Attach the leads of a DC voltmeter to the "METER"and "COM"terminals on the volume controller card. Read the DC volts.2.Refer to the Fan Calibration Table inside the line voltageenclosure. Select the voltage that corresponds to the desired airflow (cfm or l/s) set point.3.Adjust the potentiometer on the ECM card to the desiredvoltage.Troubleshooting1.Confirm the jumper on the ECM card is in the correct position. The jumper should be in the "MAN"position for adjustment of fan speed at the unit.2.If the motor does not run, turn off the power to the unit and verify that the power plug and the control plug are firmly and correctly attached to the motor. Then, turn the unit power back on and wait for the motor to start. If it has not started within 20 seconds, turn off power and repeat this step.3.If the motor still does not start, unplug both wiring harnesses from the motor. IMPORTANT: Do not jam the voltmeter leads into the connectors. This will swage out the connectors and cause them to not make contact when the unit is plugged back in.Insert the probes into the plugs until they touch the pins. Do not penetrate the pins.4.Energize the unit. Check the AC voltage at the power plug. You should have full voltage between the neutral and power lines, or between the two power lines in case of 240 VAC. If this is the case, go to step5. If there is not a full voltage signal at this point, check the voltage at the incoming power terminal block. If there is not a full voltage signal at this point, turn off the power to the box and fix the problem with the electrician. If there is a full voltage signal at the incoming terminal block, turn off the power to the box and reinstall the power cable harness.5.If there is a full voltage signal, and if the ground wire is properly connected, check the voltage at the ECM card. Be sure that you have 24 - 28.5 VAC at the 24 VAC terminals. If you do not have voltage at this point, check the transformer.6.If you have the correct input voltage, place meter on the "GND" and "VDC" meter terminals where you should be reading a magnitude between 0 and 10 VDC. Using a screwdriver, move the potentiometer to verify that the magnitude varies.If you do not have the proper voltages, replace the ECM card. 7.If all the voltages check out, it is possible that the pins may not be connecting properly and it may be a good idea to recheck them at the plug near the motor.The ECM card provides a visual airflow indicator. A green LED located on the controller circuit board flashes in response to the airflow indicator pulses provided by the control board located in the motor. Each pulse is 100 cfm (47.2 l/s). The last pulse is scaled.Figure 1. AO Smith ECM Card.Contractors check box to confirm steps 1–7 have been addressed. After addressing 1–7 please return to manufacturerfor warranty action.InspectorsSignature:–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––CABLEPLUGMETERGNDPOTENTIOMETER。
细胞电转仪操作流程
细胞电转仪操作流程
1. 细胞准备：
收集并洗涤细胞，调整细胞浓度至推荐范围，通常在10^6-10^7 cells/mL之间。
如果需要，对细胞进行特定处理，如饥饿或预热等。
2. 核酸准备：
根据实验要求准备好适量的DNA或RNA溶液，计算出每个样品所需的体积和浓度。
3. 混合细胞与核酸：
将细胞悬液与核酸溶液轻轻混匀，按照设备手册建议的比例加入到电转杯中。
4. 设置参数：
打开细胞电转仪，根据细胞类型、细胞数量以及所用仪器的操作手册设置合适的电压、脉冲长度、脉冲次数及脉冲间隔等参数。
5. 装载电转杯：
将含有细胞和核酸混合物的电转杯放入电极板之间，并确保电极接触良好。
6. 执行电击：
启动电转程序，按照预设的条件进行电转化。
7. 恢复培养：
电转完成后，迅速将电转杯中的细胞转移至预冷的含血清或其他营养成分的缓冲液中，以终止电穿孔效应，降低细胞毒性。
8. 孵育与检测：
继续将细胞在适宜温度下孵育一段时间，以便核酸整合入细胞内并表达。
在合适的时间点可以通过荧光显微镜观察、PCR扩增、Western Blot检测、流式细胞术分析等方式验证转染效率。
9. 后续处理：
根据实验目的，可以进一步进行细胞培养、基因表达功能研究、药物筛选等下游实验。
胚胎细胞融合仪器安全操作及保养规程
胚胎细胞融合仪器安全操作及保养规程胚胎细胞融合技术简介胚胎细胞融合技术是一种用于生物学研究、动物育种和植物育种的核移植技术。
它将一个细胞的核移植到另一个细胞中，从而创建一个“合成细胞”。
该技术有助于研究基因调控、发育和疾病等方面的生物学问题。
胚胎细胞融合技术还可以用于将遗传物质进行改良，从而创造出新的物种或改良现有物种。
胚胎细胞融合仪器简介胚胎细胞融合仪器是用于胚胎细胞融合的设备。
一般来说，这些设备使用焊接电流、电极和电流控制系统，将两个或更多细胞的核融合在一起。
胚胎细胞融合仪器通常使用在细胞实验室或育种中心。
使用胚胎细胞融合仪器需要谨慎，因为使用不当可能会对安全造成威胁，甚至导致人身伤害或严重事故。
胚胎细胞融合仪器的安全操作规程为了确保胚胎细胞融合仪器的安全操作，需要遵循以下操作规程：1.掌握仪器使用基础知识在使用胚胎细胞融合仪器之前，必须仔细阅读并理解设备的说明书。
操作人员必须了解设备的主要组件和工作原理，以及如何正确地连接它们。
2.检查设备的运行状态在每次使用胚胎细胞融合仪器之前，都必须仔细检查设备的运行状态。
检查设备的电气部件是否正常，如是否有破损或磨损。
确认设备是否电源连接正确，电压是否符合要求。
3.佩戴个人防护装置在进行胚胎细胞融合实验时，必须佩戴适当的个人防护装置，如手套、安全镜片和实验室外套等。
这些装置可以减少操作人员可能暴露在危险物质或条件下的风险。
4.保持整洁与卫生保持实验室的清洁和卫生是防止危险事故的重要一环。
要尽可能减少实验室里的“杂乱”，例如不要在实验台上留下危险物质或杂物，以减少错误操作的风险。
5.妥善处理废弃物和化学试剂在进行胚胎细胞融合实验期间，必须采取适当的方法来处理废弃物和化学试剂。
特别是有毒或腐蚀性试剂需要格外注意。
操作人员必须知道如何妥善处理实验室废液和实验盒，以减少污染和危险物质暴露的风险。
6.严格遵守实验室安全制度在进行胚胎细胞融合实验时，必须严格遵守实验室安全制度。
植物血凝素-ECM830细胞融合法融合黑色素瘤细胞
植物血凝素-ECM830细胞融合法融合黑色素瘤细胞米蕊芳;刘福生;金贵善【摘要】目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法.方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量.结果荧光标记带有绿色和红色荧光的黑色素瘤细胞,通过PHA-ECM830细胞融合法获得黑色素瘤融合细胞,细胞融合效率较ECM830电融合法从0.50%提升到7.18%,流式分选得到单一的黑色素瘤融合细胞,DNA含量分析显示黑色素瘤融合细胞的DNA含量翻倍,体内外实验表明黑色素瘤融合细胞增殖速度降低.结论运用改良的PHA-ECM830细胞融合法成功高效得到黑色素瘤融合细胞,黑色素瘤融合细胞增殖速度降低.【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2013(035)005【总页数】4页(P515-518)【关键词】植物血凝素;ECM830;细胞融合法;黑色素瘤细胞【作者】米蕊芳;刘福生;金贵善【作者单位】首都医科大学,附属北京天坛医院,北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心,北京,100050;中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所病理学系,北京,100005;首都医科大学,附属北京天坛医院,北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心,北京,100050;首都医科大学,附属北京天坛医院,北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心,北京,100050【正文语种】中文【中图分类】R730.231+3瘤细胞中常见多倍体及瘤巨细胞的现象，并且与疾病的预后呈负相关，如乳腺癌［1］和黑色素瘤［2］等，其中的原因之一是细胞融合所引起的［3］。
细胞融合也是细胞学及肿瘤领域的重要研究手段。
在肿瘤恶性度研究方面，多种肿瘤细胞包括黑色素瘤细胞与正常的成纤维细胞融合后会出现瘤细胞恶性度降低的现象［4］;在肿瘤器官特异性转移研究方面，特异性转移到肺脏的瘤细胞以及特异性转移到骨组织的瘤细胞融合后会特异转移到肺组织和骨组织等［5］。
细胞电融合仪ECM安装操作手册
细胞电融合仪ECM?2001安装/操作手册目录1．检查清点货物及安装2．技术规格3．操作细则4．产生杂交瘤的实验方法5．服务及保修6．附录：电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用第一节检查清点货物及安装1.拆封包装：ECM 2001细胞电融合仪采用纸箱包装，收到货物后，请检查包装完好程度，如果有任何损伤请速与我公司联系。
请小心地拆开包装，将仪器及附件取出，并依据合同清点货物内容及数量，如果有任何外观损伤或者货物与合同有差异，请速与我公司联系。
请保留包装箱，以便满足将来一旦要运送该仪器的需求。
2.电源：该仪器采用220V电源，请确认您的电源为稳定的220V。
如果电源不稳定的话，有可能对仪器造成严重损害！请确认您的电源严格接地，我们提供给您的电源线为三芯带地线电源。
请不要改动该三芯电源线结构，否则有可能对仪器造成严重伤害！3.安装：如果确认仪器包装无问题，且与合同相符，则可以进行安装。
请将仪器安装在一个干燥，水平，常温环境中。
尽量避免灰尘和化学药品对仪器的损害。
仪器与其他物品的距离不少于15厘米，以保证仪器冷却的需求。
将电源线等附件拆包装，待用，依据后续章节继续操作。
第二节技术规格1.外观尺寸：宽：17＂高：11＂长：＂2.重量：47磅3.电气规格：电源：220V，单相，7A耐熔保险交流：频率固定在1MHZ电压： 0 – 75 V （从零到峰值）脉冲时间：0 – 99 秒直流：高电压模式（HV）电压： 10 – 3000 V （峰值）脉冲时间：1 – 99 毫秒低电压模式（LV）电压： 10 – 500 V （峰值）脉冲时间：1 – 99 毫秒0.01–毫秒脉冲次数：1 – 994.前面板控制介绍：第三节操作细则1.注意事项：请严格按照下述操作细则对ECM 2001进行操作。
在没有连接打印机的情况下，严禁按“PRINT SETTINGS”按钮！否则仪器将会锁死。
如果打开仪器电源的时候，发现“MANUAL START”按钮处于亮灯状态，请马上关闭电源！2.程序或步骤（操作过程）高电压警告：为了实际操作和安全的原因，在手动或自动操作模式中，ECM 2001在施加交流电场或直流脉冲的过程中，请不要接触任何电缆或电极连接处，当需要连接或拆下电缆时，要检查系统不在操作中或处于备用状态。
详述细胞电融合的原理及方法
详述细胞电融合的原理及⽅法简介动物的游离细胞以及植物去壁后的原⽣质体，在电刺激下进⾏细胞融合，且融合率⾼、⽆毒性，操作简便及融合后的细胞继续培养成活率⾼等优点，是细胞⼯程⼿段的⼜⼀进展。
原理当细胞置于⾮常⾼的电场中，细胞膜就变得具有通透性，能让外界的分⼦扩散进细胞内，这⼀现象称为电穿孔或电融合。
运⽤这⼀技术，许多物质，包括DNA、 RNA、蛋⽩质、药物、抗体和荧光探针都能载⼊细胞。
作为⼀种基因转导⽅法，电穿孔已被⼴泛⽤于各种细胞类型，包括细菌、酵母、植物和动物细胞。
基于细胞在⾼电场中细胞膜的变化，将制备的游离细胞或原⽣质体，置于电融合室中，在⾼频交流电场的作⽤下，细胞被极化，成为偶极⼦，造成细胞之间相互连接，如果施加的⾼频交流电压(即正弦波的p-p值)过⾼或作⽤时间过长，则细胞连接成串珠状，应适当控制以上条件，尽量使两细胞处于点接触状态，然后施加⽅波脉冲予以刺激，由于电脉冲的瞬间作⽤，可击破两细胞接触点部位的质膜，此时质膜的脂类分⼦发⽣重组，同时由于细胞表⾯的张⼒作⽤，使两细胞融合逐步完全。
实验⽤品仪器：JCF-I型细胞电融合仪、细胞融合池、普通离⼼机、倒置显微镜(或研究⽤显微镜)，刻度吸管、不锈钢⽹(200⽬)、镊⼦、解剖⼑、解剖剪、注射器、⽑细吸智、刻度吸蕾。
⼩烧杯(10m1)、滴瓶、培养⽫、⽑笔等。
药品：⽢露醇、氧化钠，纤罐索醇(Onozura R-10)、离析酶(Macerozyme R-10)、蜗⽜酶(中科院⽣物物理所产)、CaCl2、2H2O、MES (2-N-吗啉⼄烷磺酸)、葡聚糖硫酸钾等。
植物原⽣质体的制备1、取幼嫩的叶⽚或充分展开的⼦叶，先⽤⽔洗净并吸去表⾯的⽔份，再置⼊⼩烧杯中将叶⽚剪成碎块。
2、将碎块放⼊1.5％纤维素酶、0.3％离析酶、0.5％蜗⽜酶、0.6mol/L⽢露醇、50mmol/L CaCl2·2H20、MES 3mmol/L、葡聚糖硫酸钾0.3％，pH5.6的酶液中，置于25℃暗处游离5h(或15℃过液)，游离时间结束时，可镜检原⽣质体分离情况，如果⼤多数原⽣质体还未从组织中释放出来，需增加在酶液中的游离时间。
基因导入仪、细胞融合仪设备安全操作规程
基因导入仪、细胞融合仪设备安全操作规程为确保实验人员和实验室安全，使用基因导入仪、细胞融合仪设备时，需要遵守以下规程。
一、设备安全操作前的准备工作1.确认实验人员已接受相关实验操作培训，且具有实验操作资质。
2.确认设备的电源接线正确；设备是否接入地线。
3.确认设备工作区域内是否有安全隐患，例如易燃、易爆物品、有害气体等。
4.建议实验人员佩戴耳机或其他防护装备，以保护耳朵和视力。
二、设备安全操作规程1.实验人员应该在设备使用前，认真查阅设备的操作说明书，熟知设备的操作流程和注意事项。
2.实验人员在操作设备时，应该统一穿戴实验服和手套，保持清洁卫生。
3.实验人员应该使用无菌操作技术，以保证操作过程中的样品不被污染。
4.实验人员在操作基因导入仪和细胞融合仪时，应该严格按照设备说明书中的操作流程进行操作。
5.实验人员禁止使用已过期或者未经验证的试剂和材料。
6.操作过程中，实验人员应该时刻注意设备运行状况，如发现异常，应该立即停止操作并排查故障原因。
7.设备操作完成后，实验人员应及时关闭设备电源，在设备内部流动的气体完全排放后再离开设备房间。
三、设备维护与保养1.设备每次使用完毕，应该进行清洁和消毒。
2.定期检查设备电源和地线是否存在短路、漏电等安全风险。
3.设备在长期使用过程中，应进行定期的维修保养工作，以确保设备的稳定可靠性。
4.设备维修保养工作应由具有资质的人员进行，不得私自拆卸或更换设备部件。
四、应急处理1.发生设备故障或者操作失误时，应立即按照应急预案采取相应的应对措施。
2.如发生人员伤害事件，应立即报告实验室主管负责人，并及时扩大报告。
五、总结以上是基因导入仪、细胞融合仪设备的安全操作规程，实验人员应该严格遵守，并始终保持状态，保护好自身安全和实验室安全。
在设备使用过程中，如有任何疑问或者问题，应及时向实验室主管负责人进行咨询和汇报，以便及时处理和解决。
高效液相色谱High Performance Liquid Chromatography
⏹高效液相色谱High Performance Liquid Chromatography型号：Agilent 1100生产厂家：美国安捷伦四元梯度泵：流速范围：0.001～10.00ml/min,可以以0.001ml/min为增量；流速精度：≤0.15%RSD；适用pH范围：1.0～12.5；操作压力：0～40MPa。
检测器●光电二极管阵列检测器：波长范围：190～950nm；光源：氘灯和汞灯；波长准确度：≤1nm；光谱分辨率：1.2nm。
●荧光检测器：光源：氙灯；水的拉曼光谱：≥400；激发波长：200～700nm；发射波长：280～900nm；波长重现性：±0.25nm；波长准确度：±3nm；流通池：8uL。
●示差折光检测器：RI范围：1.00～1.75 RIU；温度控制：5～55°C；基线噪音：±1.5×10-9RIU；漂移：≤±2.0×10-7RIU/hr。
在有机化学、生化、医学、药物临床、化工、食品卫生、环保监测、商检和法检等方面都有广泛的应用，可以从一些复杂的混合物中排除干扰物质，并分析其中微量成分。
放置地点：实验楼114负责人：王晴联系电话：55191648⏹全自动不锈钢发酵罐Automatic Stainless Steel Fermenter型号：L1523生产厂家：瑞士比欧微生物发酵工业是一个重要的工业部门，其产品广泛应用于医药、食品、化工、环境等领域，发酵罐是发酵工业的核心设备。
L1523型发酵罐是瑞士比欧公司生产的实验室专用发酵罐，采用原位灭菌方式，配备有pH、溶氧、温度、消泡电极和专用控制器，可实现参数设定、显示和发酵过程全自动控制，运行稳定、参数采集方便可靠。
该设备适用于微生物好氧发酵和细胞培养的小型试验和科学研究。
罐体：玻璃罐体，12.8升总体积，8.6升工作体积。
驱动：交流变频马达，转速范围100~1500转/分。
电融合仪操作手册讲解
Multiporator®电转化仪使用说明书目录1 简介 (1)2 应用范围 (1)3 安全警示 (1)4 仪器介绍4.1 包装 (2)4.2 开始………………………………………………………………………………4.3 电击杯插槽……………………………………………………………………4.4 键区………………………………………………………………………………4.5 键及键组合………………………………………………………………………4.6 屏幕显示…………………………………………………………………………4.7 真核细胞和细菌／酵母的电转化………………………………………………4.7.1 连接外接电极（电转化/电融合）插件……………………………………4.8 细胞融合（可选择）……………………………………………………………4.8.1 优化细胞融合（镜下监测）………………………………………………4.8.2 清洗微融合杯………………………………………………………………4.8.3 螺旋融合杯…………………………………………………………………4.8.4 螺旋融合杯的上样及置入…………………………………………………4.8.5 融合及细胞悬液提取…………………………………………………………4.8.6 螺旋融合杯的清洗和消毒…………………………………………………4.9 打印连接／打印机（可选择）…………………………………………………5 操作模式5.1 真核细胞模式……………………………………………………………………5.2 细菌和酵母模式（可选择）……………………………………………………5.3 细胞融合模式（可选择）………………………………………………………5.3.1 功能：细胞排列………………………………………………………………5.3.2 细胞融合步骤…………………………………………………………………6 错误提示……………………………………………………………………………7 仪器的维护7.1 消毒………………………………………………………………………………7.2 清洗………………………………………………………………………………8 技术数据……………………………………………………………………………9 订购信息…………………………………………………………………………1 简介Multiporator®为真核细胞的电转染而设计，因为由有多种模式可选，也可进行细胞融合实验以及细菌和酵母的电转实验。
bio电转仪使用手册
bio电转仪使用手册一、简介与概述本手册旨在为您提供bio电转仪的使用方法、操作步骤以及维护保养等方面的详细指导。
电转仪是一种高效、便捷的将生物大分子、细胞等样本转移到靶细胞或试剂上的设备。
通过使用电转仪，您可以实现实验室研究、药物筛选、基因转移等多方面的应用。
在开始使用电转仪之前，请务必仔细阅读本手册，以确保安全、正确地操作设备。
二、操作步骤1.准备工作a.设备开机：将电源线插入电源插座，按下设备开关，待设备启动后进行下一步操作。
b.样本准备：根据实验需求，将待转染的样本（如细胞、质粒、寡核苷酸等）制备好，放入电转杯中。
c.设置参数：根据实验需求，设置电转参数，如电压、电流、时间等。
您可以参考设备说明书或预先设定的参数进行调整。
2.电转过程a.细胞转染：将电转杯放入设备上，按照设定的参数进行电转。
电转过程中，请确保细胞紧密排列，以获得更好的转染效果。
b.质粒转染：将质粒DNA与转染试剂混合后，放入电转杯中，按照设定的参数进行电转。
注意在转染过程中，保持试剂盒的稳定性。
c.其他样品转染：根据样品性质，选择适当的转染方法，如脂质体介导转染、慢病毒转染等，并按照相应步骤进行电转。
3.转染后处理a.清洗设备：实验结束后，及时关闭设备电源，用清水冲洗设备表面，避免残留物影响设备性能。
b.样品收集与检测：根据实验需求，收集转染后的样品，并进行相应检测，如细胞活力、基因表达等。
三、设备维护与保养1.定期检查设备电源线、插头、开关等部件，确保设备正常运行。
2.保持设备工作环境干燥、通风，避免阳光直射。
3.严禁在设备表面放置重物或尖锐物品，以免损坏设备外观。
4.实验过程中，请勿让儿童、宠物接近设备，确保实验安全。
四、安全与注意事项1.操作设备时，请务必佩戴实验室防护用具，如手套、口罩等。
2.遵循实验室安全规程，避免触电、火灾等事故。
3.如有异常情况，请立即关闭设备电源，并及时联系售后服务。
五、故障排除与售后服务1.如遇设备故障，请先检查电源、电缆、插头等是否正常。
诱导细胞融合——电 场 法
诱导细胞融合——电场法实验目的本实验学习掌握电场法诱导细胞融合的方法。
实验原理电融合技术的原理是：在短时间强电场(高压脉冲电场，场强为kV／cm量级，脉冲宽度为卜q量级)的作用下，细胞膜发生可逆性电击穿，瞬时地失去其高电阻和低通透特性，然后在数分钟内恢复原状。
当可逆电击穿发生在两个相邻细胞的接轴区时，即可诱导它们的膜相互融合，导致细胞融合。
该方法具有直观、定向、高效的优点。
实验材料、用品材料：小麦叶片原生质体，烟草叶片原生质体。
）试剂：1%(W／V) 纤维素酶,1% (W／V)果胶酶,0.7mol／L甘露醇;10mmol/L CaCl2.2H2O,0.7mmol/L KH2PO4,pH 6.8～7.0。
***用具：离心机，振荡器，电融合仪，细胞融合池。
实验步骤1、将制备原生质体悬液以1000r／min离心5min，用超纯水配制的0.6 M甘露醇清洗，重复两次。
2、吸去上清夜，再用0．6 M甘露醇将细胞密度调整成5*104个／ml混匀。
3、开启电融合仪电源，将正弦交变电场频率选择在1～1．30MHz 左右，正弦交变电场电压峰值为15V左右，占空比为50％，直流脉冲电压为200V，电脉冲宽度为10～100 μs，脉冲个数为2个。
4、用移液枪将原生质体悬液吸入电融合室中，置于显微镜下接上电极，待观察。
5、给原生质体悬液施加正弦交变电场，由低到高分别调节交变电场频率和电压，直流脉冲可调节参数为电压、脉冲宽度、间隙时间、脉冲个数等，在原生质体相互成串后，发生有效接触后，立即庙低到液施以电脉冲。
高在显微镜下观察，可见原生质体迅速排列成串。
6、静止片刻在显微镜下观察原生质体在被施加电脉冲前后的变化及融合的情况选择确定。
7、用移液器向电融合室中吸出原生质体悬液滴片，马上进行台盼蓝染色，观察并计算原生质体的融和率和成活率，计三个视野，取其平均数。
作业1.将观察到的细胞融合绘图。
2.计算用倒置显微镜观察的细胞融合率。
电融合法制备骨肉瘤融合细胞瘤苗的特性分析(一)
电融合法制备骨肉瘤融合细胞瘤苗的特性分析(一)【摘要】目的本研究旨在制备骨肉瘤融合细胞瘤苗并检测其体外生物学特性。
方法应用电融合技术制备细胞与大鼠巨噬细胞的融合细胞，经过磁性分选后，流式细胞仪检测融合细胞的DNA含量和表面抗原的表达。
细胞培养检测融合细胞的克隆形成能力，并体外测定其诱导CTL的杀伤活性。
结果电融合与磁性分选技术相结合可获得95%的融合细胞纯度。
流式细胞仪测定表明，融合细胞可表达较高的Ⅰ、Ⅱ类抗原。
其软琼脂克隆形成能力明显降低（融合细胞，17.6±5.1,P＜0.05）,而诱导CTL细胞杀伤的能力则显著提高（100∶1时，融合细胞42.9±7.5,P＜0.05）。
结论骨肉瘤融合细胞可稳定生长，在体内诱导CTL细胞产生较强的抗肿瘤活性，可用于动物模型以检测其所诱导的抗骨肉瘤效果。
【关键词】骨肉瘤瘤苗细胞融合CharacterizationofOsteosarcomaVaccineCellsPreparedbyElectricalCellFusionAbstract：ObjectivePreparetheosteosarcomavaccinebycellfusionanddetectitsbiologicalproperties.MethodsTheDNAandsurfaceantigenexpressionoffusioncellspurifiedbymagneticcellsortingunitwereassayedw ithflowcytometry.ThecolonyassayofthecellsandtheanalysisofCTLactivityinducedbyfusioncellsinviv owerealsoperformed.ResultsThehighercellfusionefficiencycanbeobtainedwithelectroporatoranda bout95%purityoffusioncellsachievedbymagneticcellssortingunit.Thefusedosteosarcomacellsexpre Ⅰ、Ⅱan06cellsaswell.ConclusionTheproliferationoffusedosteosarcomacellswasstableandthehighlevelCTLa ctivitywasinducedbythem.Thecellscanbeusedasvaccineinosteosarcomatreatmentevaluationonani malmodels.Keywords：Osteosarcoma;Tumorvaccine;Cellfusion0引言复发和肺转移是威胁骨肉瘤患者生命的主要矛盾〔1〕,为此，有必要探讨主动性免疫治疗在骨肉瘤患者中应用的可能性。
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细胞电融合仪ECM®2001安装/操作手册目录1．检查清点货物及安装2．技术规格3．操作细则4．产生杂交瘤的实验方法5．服务及保修6．附录：电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用第一节检查清点货物及安装1.拆封包装：ECM 2001细胞电融合仪采用纸箱包装，收到货物后，请检查包装完好程度，如果有任何损伤请速与我公司联系。
请小心地拆开包装，将仪器及附件取出，并依据合同清点货物内容及数量，如果有任何外观损伤或者货物与合同有差异，请速与我公司联系。
请保留包装箱，以便满足将来一旦要运送该仪器的需求。
2.电源：该仪器采用220V电源，请确认您的电源为稳定的220V。
如果电源不稳定的话，有可能对仪器造成严重损害！请确认您的电源严格接地，我们提供给您的电源线为三芯带地线电源。
请不要改动该三芯电源线结构，否则有可能对仪器造成严重伤害！3.安装：如果确认仪器包装无问题，且与合同相符，则可以进行安装。
请将仪器安装在一个干燥，水平，常温环境中。
尽量避免灰尘和化学药品对仪器的损害。
仪器与其他物品的距离不少于15厘米，以保证仪器冷却的需求。
将电源线等附件拆包装，待用，依据后续章节继续操作。
第二节技术规格1.外观尺寸：宽：17＂高：11＂长：17.5＂2.重量：47磅3.电气规格：电源：220V，单相，7A耐熔保险交流：频率固定在1MHZ电压： 0 – 75 V （从零到峰值）脉冲时间：0 – 99 秒直流：高电压模式（HV）电压： 10 – 3000 V （峰值）脉冲时间：1 – 99 毫秒低电压模式（LV）电压： 10 – 500 V （峰值）脉冲时间：1 – 99 毫秒0.01– 0.99 毫秒脉冲次数：1 – 994.前面板控制介绍：编号名称功能1 SET AC VOLTAGE 此旋钮用于设置交流电压（0-75V）。
调整的数值显示在左侧的显示屏上。
2 AC DURATION SECONDS 此按钮用于设置自动模式下交流电被激活时间的长度。
时间用“+”和“-”按钮设置，最大到99秒。
3 POST FUSION AC SECONDS 此按钮用于设置自动模式下脉冲施加后作用的时间。
最大到9秒，使融合后的细胞聚集在一起。
4 SELECT THE MODE 此旋钮用于选择电穿孔模式：HV高压模式（10-3000伏/1-99微秒）；LV低压模式（10-500 伏 /0.01-0.99毫秒）；LV低压模式（50-500 伏/1-99毫秒）。
一旦模式选择好，相应的指示灯就会亮起。
5 PULSE LENGTH 此按钮用于控制电穿孔/电融合方形脉冲的脉冲长度，设定选择用Lower(+)和Upper(-)按键。
6 SET VOLTAGE 此旋钮用于调节脉冲电压。
HV高压模式下，电压显示单位为千伏，设定范围为10-3000伏； LV低压模式下，设定范围为10-500伏。
顺时针旋转电压增加，逆时针旋转电压减小7 NUMBER OF PULSES 此按钮用于设定脉冲个数（1-99）。
“+”和“-“按钮用来选择所需脉冲个数。
每向融合池发送一个脉冲，黄灯就会亮一下，同时发出一声嘟嘟声8 WAIT 当仪器运行到一个循环结束时，出于安全原因放掉电容器中的所有电荷，此灯会亮。
当此灯亮起的时候，绝对不能操作主机。
9 AUTOMATIC START 按一下并释放此按钮，可根据预先设定的电压、脉冲长度、脉冲个数激发一个排列和电穿孔循环。
第三节操作细则1.注意事项：请严格按照下述操作细则对ECM 2001进行操作。
在没有连接打印机的情况下，严禁按“PRINT SETTINGS”按钮！否则仪器将会锁死。
如果打开仪器电源的时候，发现“MANUAL START”按钮处于亮灯状态，请马上关闭电源！2.程序或步骤（操作过程）高电压警告：为了实际操作和安全的原因，在手动或自动操作模式中，ECM 2001在施加交流电场或直流脉冲的过程中，请不要接触任何电缆或电极连接处，当需要连接或拆下电缆时，要检查系统不在操作中或处于备用状态。
Automatic自动操作模式：1.连接Chamber（融合池）和位于ECM 2001背面的输出插口。
2.如果使用打印机的话，把打印机电源电缆插到ECM 2001背面的打印电源接口上(J4)。
3.如果使用打印机的话，用串口线缆将打印机连接到ECM 2001背面的打印机输入口上。
4.如果使用Enhancer 400（示波器）的话，将Enhancer 400的电源线插在市电上。
5.如果使用Enhancer 400（示波器）的话，先用电缆将Enhancer 400的输入插口与ECM6. 2001背面的输出插口连接，然后用电缆把融合池连接在Enhancer 400上的输出插口上。
7.把ECM 2001的电源线插到合适的电源插座上（220伏）。
8.打开ECM 2001背面上的电源开关。
9.设定所需的AC Voltage (1) 即交流电压。
10.设定所需的AC Duration Seconds (2) 即交流持续时间。
11.选择HV或LV模式(4)。
12.设定DC Pulse Length (5) 即直流脉冲长度。
13.设定DC Voltage(6) 即直流电压。
14.设定Number of Pulses (7) 即脉冲个数。
15.设定Post-Fusion AC Seconds (3) 即融合后交流时间到所需的脉冲长度。
16.把细胞悬液/试剂倒入BTX Chamber（融合池）中。
17.检查所有的设置。
18.按下Automatic Start(9) 即自动按钮，ECM 2001发出一声嘟嘟声，把预先设置的所有参数送到Chamber（融合池）上。
19.仅对电穿孔来讲，设置AC Voltage (1)、AC Duration (2)和Post-Fusion AC (3)为零，其余步骤不变。
Manual手动操作模式：1．其余步骤同1-11，按一下Manual Start(12) 即手动按钮，手动模式中，ACDuration (2) 即交流持续时间按钮不再起作用，持续施加交流电场。
在显微镜下观察Chamber中细胞，当细胞相互接近成二聚体时，再次按一下ManualStart(12) 即手动按钮，结束交流场。
ECM 2001发送电穿孔脉冲。
注意：交流电压的值不能在指示器上调节。
3.仪器设置：与打印机的连接方式：1.将ECM 2001的电源线插在市电插线板上。
（220伏）2.把打印机电源电缆插到ECM 2001背面的打印电源接口上(J4)。
3.用串口线缆将打印机（501型）连接到ECM 2001背面的打印机输入口上。
4.使用5343型连接电缆或者464型连接电缆（适用于Microslide 450，450-1，450-2，5. 450-3）或者465型连接电缆（适用于Microslide 453，453-10）连接ECM 2001与6. Microslides, 将连接电缆插入到ECM 2001背面的输出插口中。
630B安全操作池或7.者其他电极针的连接与此类似。
与Enhancer 400的连接方式：1.仔细阅读Enhancer 400的使用手册。
2.将ECM 2001的电源线插在市电插线板上。
（220伏）3.将Enhancer 400的电源线插在市电插线板上。
（220伏）4.将红/黑高电压电缆两端分别依照颜色插入ECM 2001的相对应的输出和Enhancer5. 400的相对应的输入插口中。
6.连接电击设备。
（参见与打印机连接的第四步）4.操作：自动操作1.打开ECM 2001背面的电源开关。
2.设置所需的交流脉冲时间（2）。
3.选择高压模式（HV）或低压模式（LV）（4）。
4.设置直流脉冲长度（5）。
5.设置直流电压（6）。
6.设置直流脉冲个数（7）。
7.设置融合后所需的交流脉冲时间（3）。
8.把细胞悬浮液/试剂倒入BTX Chamber中。
9.检查所有的设置。
10.按一下自动按钮（9）会发出一声嘟嘟声，ECM 2001输送设置的所有参数到融合槽中。
11.对于电穿孔，设置AC Voltage (1)、AC Duration (2)和Post-Fusion AC (3)为零，其余步骤不变。
手动操作：1.其余步骤同自动操作中的1-9步。
2.按一下Manual Start(12) 即手动按钮（指示灯只亮90秒）。
手动模式中，AC3. Duration (2) 即交流持续时间按钮不再起作用，持续施加交流电场。
在倒置显微镜下观察载玻片上的细胞时，可以变动AC幅值，以得到最优的排列（串）结果。
4.当细胞近似成串时，再次按一下手动按钮，撤掉交流电场，加上所设置的直流参数。
打印数据：1.从ECM 2001打印输出，按打印按钮两次（2）。
2.从Enhancer 400打印输出，按Enhancer 400上的打印按钮一次。
5.操作参数的选择：1.排列参数：AC Voltage：设置交流电压。
AC Pulse Length：设置脉冲长度。
2.电穿孔参数：选择高压模式（HV）或低压模式（LV）（4）Pulse Length ：设置直流脉冲长度。
DC Voltage：设置直流电压。
Number of Pulses：设置脉冲次数。
3.融合后交流参数：6.显微镜和载玻片的使用用464连接电缆或465 连接电缆连接载片与ECM 2001 ，用461连接电缆连接464连接电缆或465连接电缆与 1269同轴电缆接头连接。
（参见前述章节）选择AC Voltage使细胞缓慢向载片电极移动，建议用胶带固定同轴电缆在显微镜载物台上来防止电缆线过重使载波片移动。
用微量移液吸头或注射器加入或吸出细胞悬液。
选择AC Voltage，使细胞向向载片电极缓慢移动。
按10%比率逐渐增加融合电压和脉冲长度，使融合率增加。
靠近电极的电场最强，融合首先在这里发生，如果电场太强，细胞会立即解体。
如果细胞不移动和电压的增加导致培养基的沸腾，说明细胞溶液的作用象电解使用新鲜的甘露醇配置准备0.3 M甘露醇（0.2微孔过滤）（pH 7-7.3），用无菌0.1 N NaOH 调节pH。
在融合前调节甘露醇的pH。
缓冲液在融合前程序5.3.1中说明。
其它低分子量糖类如蔗糖和葡萄糖也已得到成功的应用。
在显微镜下操作载玻片时，使用手动模式更有利。
这样，只要排列已经成功立即停止使用秒表测量所需的排列时间。
当使用更大一些的融合池时，在自动模式中设定相同的或更长一点的时间。
如果演示给许多人，使用带有电视摄象机和显示器的显微镜。
第四节产生杂交瘤的实验方法本章节中的相关具体步骤请参照英文版说明书，以英文说明书为准！下面只是一种推荐的方法，每个研究者应根据不同的细胞密度、融合培养基和融合前和融合后的不同处理进行实验，并参考相关文献。