细胞化学染色

1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.原始单核细胞，呈阳性；
3.原始单核细胞精选，PP呈T 弱阳性；其他原幼单核细胞呈阴性
18
6、临床意义 （1）正常分布 粒系:早期原粒阴性，晚期原粒及以下各阶段呈 不同程度阳性。 单核系:早期原单阴性，其它阶段皆呈弱阳性。 淋巴、红系、浆细胞、巨核均呈阴性。
精选PPT
核清楚 “4+” 4分，胞浆中含有丰富粗大的颗粒，
但胞核不清楚
精选PPT
26
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
1.中性成熟粒细胞（+）；2.中性成熟粒细胞（++）；3.中性成熟粒细胞（+++）；
4.中性成熟精粒选细PPT胞（++++）；5.淋巴细胞 （-）
27
精选PPT
28
N精A选PPPT分级
29
7.临床意义
精选PPT
3131
（三）酯酶染色
概述 特异性酯酶染色 非特异性酯酶染色
精选PPT
32
概述
根据各类细胞所含酯酶特异性高低分为特异性 酯酶(SE)和非特异性酯酶(NSE)；特异性酯酶是指 氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）；非特异性酯酶 根据水解基质液的PH不同，又分为中性NSE（α-醋 酸萘酚酯酶 ），酸性NSE（酸性α-醋酸萘酚酯酶 ），碱性NSE（α-丁酸萘酚酯酶）。
精选PPT
33
2.细胞化学染色的目的 （1）辅助判断急性白血病的类型 （2）辅助血液系统等疾病的诊断与鉴别诊断
精选PPT
4
3.细胞化学染色的基本步骤：包括固定、显色反应、 复染。 （1）固定：为了保持细胞结构及化学成分的稳定性而 选用的方法。根据染色的目的，最常用的固定剂有甲 醛、甲醇、乙醇等。
精选PPT
2121
2.试剂
（1）固定剂：10％甲醛甲醇溶液
（2）Tris-Hcl缓冲液的配制：Tris粉〔三胺基甲
烷〕4.85克溶于200ml蒸馏水中,加浓HCL1-2滴，PH调
至9.2，4℃保存！
（3）作用(基质液): 磷酸萘酚钠
5mg
N-N二甲基酰胺 1ml
Tris-Hcl液
4ml
坚固蓝RR盐
过氧化物酶染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 糖原染色 非特异性酯酶染色 特异性酯酶染色 骨髓铁染色
精选PPT
77
（一)过氧化物酶(POX)染色
1、原理：
pox
H2O2
O
联苯胺
联苯胺蓝 +
亚硝基铁氰化钠
蓝黑色颗粒
精选PPT
88
2.试剂 (1)联苯胺酒精溶液： 取0.3g联苯胺加亚硝基铁氰化钠饱合液（36%）1ml, 再加95%乙醇至100ml，存在于棕色瓶中，可存一年。 (2) 稀过氧化氢（新鲜配制）：取50ml蒸馏水加 30%H2O21滴。 （3）瑞吉氏复染液
增高：细菌感染、类白、AA、急淋、慢 粒急变、骨髓增殖性疾病，恶性淋巴瘤。
降低：慢粒、急粒、PNH、MDS、恶组
精选PPT
3030
8.鉴别诊断
慢粒与类白：前↓；后↑。 PNH与AA：前↓；后↑。 急粒与急淋：前↓；后↑。 MDS与慢性再障：前↓；后↑。 病毒感染与细菌感染：前者无明显变化，后者↑。 恶组与反应性组织细胞增多：前↓；后↑。
精选PPT
99
3、染色方法 1、新鲜干燥涂片加联苯胺酒精溶液10滴，覆盖整
个髓膜，固定1-2min。 2、再加等量的稀H2O2，混匀后染色4－5min,勿倒
去染液直接流水冲洗。 3、瑞氏染液复染。
精选PPT
1010
4、注意事项 （1）H2O2要新鲜配制，注意有效性 （2）标本要新鲜，最长不超过一周，时间长了酶活 性减弱。 （3）POX染色后，一定要冲洗干净，否则染料堆积 或浮于表面，影响瑞氏染色结果观察。
5mg
（4）复染液：1%中性红
精选PPT
2222
3.操作步骤 1、新鲜、干燥的外周血或骨髓涂片（标本片及 对照片）加固定剂作用30秒（染缸），水洗待干； 2、滴加作用液，室温染色15min，水洗待干； 3、1%中性红复染1min
精选PPT
2323
4.注意事项 (1) 重氮盐以坚固蓝RR盐为最佳； (2) 坚固蓝RR盐应适量：过多易造成染色失败， 过少使反应减弱； (3) 每次都要做阳性对照； (4) 作用液新鲜配制，配好后要立即使用
1919
（2）急性白血病的鉴别诊断 幼稚细胞POX阳性率≥3% ：急非淋（AML) 幼稚细胞POX阳性率＜3% ：急淋（ALL)
精选PPT
2020
（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色
1.原理
（偶氮偶联法）
NAP
磷酸奈酚钠
磷酸+萘酚
PH9.2～9.8
偶联 萘酚+重氮盐
(坚固蓝RR盐)
不溶性有色沉淀物定位于胞浆
急性粒细胞白血病（M2a) 的POX染色 原始粒细胞均呈阳性
精选PPT
15
急性淋巴细胞白血病的POX染色
1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；其他原始淋巴细胞均呈阴性
精选PPT
16
急性早幼粒细胞白血病的POX染色
１.原始红细胞，呈阴性；其他早幼粒细胞均呈强阳性
精选PPT
17
急性单核细胞白血病的POX染色
精选PPT
2424
5.结果观察:(对照片成熟中性粒细胞中出现棕
黑色颗粒为阳性细胞，说明染色成功) 正常人除成熟中性粒细胞NAP可见阳性外，其 它血细胞均为阴性。且正常阳性率＜40%，积分 值30～130分。
精选PPT
2525
来自百度文库
6.NAP阳性结果及积分判断标准
“－” 0分，胞浆中无阳性颗粒 “+” 1分，胞浆中含有少量颗粒 “2+” 2分，胞浆中含有中等量颗粒 “3+” 3分，胞浆中含有丰富的颗粒，但胞
细胞化学染色检验
申家辉
精选PPT
11
一、概述 二、细胞化学染色的基本方法 三、临床应用
精选PPT
22
一、概 述
1、概念： 细胞化学染色是细胞学和化学相结合而成的一门
科学，以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的 原理对血细胞内的各种化学物质（包括酶类、脂类 、蛋白质、糖类、铁、核酸等）作定性、定位、半 定量分析的方法。
精选PPT
55
（2）显色：通过不同的化学反应，最终形成稳定的 有色沉淀，使被监测的化学物质显示出来。包括 偶氮偶联法：如NAP、ACP及各种脂酶染色 普鲁氏蓝反应：如铁染色 雪夫（shiff）反应：如PAS染色 联苯胺法：如POX染色 （3）复染：使各种目的细胞能显示出来更便于观察
精选PPT
66
二、细胞化学染色的基本方法
精选PPT
1111
5、结果判定：中性粒细胞杆状及分叶核呈强阳 性是染色成功的标志(设对照片）。 在细胞的胞浆中出现蓝绿色或蓝棕色颗粒为阳 性反应。
精选PPT
1212
1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.晚幼红细胞，呈 阴性；3.单核细胞，呈弱阳性；4.浆细胞，呈阴性
精选PPT
13
精选PPT
1414