重庆大学生物化学实验_实验五 蛋白质pI测定
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原理
NH2
H+
P
COO- OH-
NH3+
H+
P COO- OH-
NH3+ P
COOH
当溶液的 pH 达 到一定数值时，Pr 便 呈兼性离子形式，此
pH pK lg [ A ] [ AH ]
时的 pH 称 Pr 的 pI；
在溶液的 pH = pI 时， Pr 的黏度、渗透压、 膨胀系数及溶解度等 均降低；
1 pI 2 ( pK1 pK2 )
主要器材
操作
试管编号
1
2
3
4
加 0.1N醋酸钠 2
2
2
2
入液
的 0.1N醋酸 0.25
0.50
2.0
/
试
剂 1N醋酸
/
/
/
源自文库
0.8
ml 蒸馏水
3.75
3.50
2.0
3.2
1%白明胶 2
2
2
2
溶液最终PH值 沉淀出现的情况
实验五、蛋白质 pI 的测定
问 题：
1、为什么说蛋白质是两性电解质？ 2、什么叫等电点？ 3、我们依据什么方法来检测，其原理是什 么？ 4、我们检测的材料是什么？怎样才知道其 等电点？
Pr 为两性电解质，除了含有自由 羧基、氨基外，还有酚基(Tyr)、巯 基(Cys)、胍基(Arg)、咪唑基(His) 等可解离基团。