圆二色检测器使用说明
j810圆二色光谱仪操作规程

j810圆二色光谱仪操作规程
操作规程如下:
1. 确保仪器和附件完好,并检查是否有损坏或丢失的部件。
2. 打开光谱仪电源开关,并等待仪器启动和稳定。
3. 准备一个样品,可以是光源或待测物体。
确保样品的稳定性和适应温度。
4. 将样品放入光谱仪所提供的样品台或夹具中,并固定好。
5. 选择合适的开始波长和结束波长范围,并设置波长步进。
6. 选择合适的积分时间,以确保得到清晰、准确的光谱数据。
7. 点击“开始”按钮或相应的操作界面,开始进行光谱扫描。
8. 在扫描过程中,保持操作环境安静,避免震动和干扰。
9. 等待光谱扫描结束,并保存数据。
确保数据保存格式正确、完整。
10. 关闭光谱仪电源开关,并彻底清洁仪器和附件。
11. 报告和记录实验数据,并根据需要进行数据分析和处理。
12. 注意安全事项,尽量避免直接观察光源,避免使用光谱仪
时的电源接地短路等危险操作。
以上是大致的操作规程,具体操作细节和注意事项需要根据具体的J810圆二色光谱仪使用说明书进行操作。
圆二色光谱仪操作流程
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圆二色光谱仪操作流程圆二色光谱仪是一种广泛应用于生命科学领域的仪器,可以用来研究溶液中的有机化合物的结构和构象。
本文将介绍圆二色光谱仪的基本操作流程。
I. 准备工作在开始操作圆二色光谱仪之前,需要完成以下准备工作:1. 样品制备:根据研究目的选择相应的溶剂,将待测的有机化合物溶解于其中,注意控制浓度。
同时,确保样品中没有杂质或者其他干扰物。
2. 刷洗样品池:使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗,以确保无杂质残留。
避免使用有机溶剂,以免对后续实验产生干扰。
3. 仪器预热:启动圆二色光谱仪,并按照厂家的指示预热仪器至指定温度。
通常情况下,建议将仪器预热至室温。
II. 校准仪器在进行实际测量之前,需要对圆二色光谱仪进行校准,以确保测量结果的准确性。
校准的具体步骤如下:1. 空白校准:在样品池中加入相同溶剂但不含有机化合物的空白样品。
按照仪器操作手册的指示,进行空白校准,以消除系统本底的影响。
2. 参考物质校准:选择合适的参考物质,如D-葡萄糖酸钠。
将参考物质溶解于相同溶剂中,加入样品池,按照仪器操作手册的指示进行参考物质校准。
III. 测量样品完成仪器的校准后,可以进行样品的测量。
具体操作步骤如下:1. 操作参数设定:根据样品的性质和研究目的,设置合适的操作参数。
例如,选择适当的波长范围、光强等参数。
2. 样品测量:将待测样品溶液加入样品池中,确保样品池的表面平整没有气泡。
将样品池放入圆二色光谱仪的样品室中。
3. 测量记录:按下开始测量按钮,圆二色光谱仪会自动记录样品的圆二色信号。
在测量过程中,避免干扰,保持实验室环境的稳定。
4. 清洗样品池:在每次测量完毕后,使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗,以避免污染。
IV. 数据处理与分析完成样品的测量后,可以进行数据处理与分析,以获取有关样品结构和构象的信息。
具体步骤如下:1. 数据导出:将测量得到的原始数据导出为适当的格式,如文本文件或Excel文件。
2. 数据校正:根据仪器的响应性能,对数据进行校正,消除背景噪声等。
圆二色光谱测量
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圆二色光谱测量
圆二色光谱(简称CD)是研究稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法,广泛应用于蛋白质的构象研究中。
以下是其测量步骤:
准备样品:确保样品的纯度达到圆二色光谱所要求的纯度(约96%)。
设定仪器参数:在室温下,使用日本产JASCO J-810圆二色谱仪,测定远紫外190-240 nm的光谱。
设定分辨率、带宽、灵敏度和扫描速度等参数。
测定样品:将样品放入样品杯中,设置适当的浓度(例如100 μg/ml)和光径(例如0.2 cm)。
记录数据:按照设定的参数进行测量,并记录光谱数据。
分析数据:使用杨氏算法(Yang. Jsr)等计算方法,将测得的光谱数据与已知的蛋白质二级结构(如Helix、Beta、Turn和Random)的特征谱线进行拟合,结合样品的摩尔浓度进行计算,可以得到溶液中多肽的各种二级结构的含量及比例。
圆二色光谱是研究蛋白质二级结构的主要手段之一,具有快速简便、灵敏度高和对构象变化敏感等优点,对蛋白质的构象研究具有重要意义。
圆二色谱仪使用
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圆二色谱仪使用手册实验前请先阅读第一部分注意事项2011年4月6日整编河北大学理化中心目录一、注意事项二、光源的选择三、MOS 450波长的校正四、电压的调节五、MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程六、MOS 450-SFM 300动力学操作方法一、注意事项1、滴定及变温实验时,需要磁子搅拌。
实验结束时首先拔掉搅拌电源。
在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。
2、光源(也就是氙灯或汞氙灯)不可频繁开关。
举例而言,如果马上不用仪器,但半个小时后需要使用仪器,就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。
短时间内频繁开关光源反而会缩短光源寿命。
3、光电倍增管移动时(比如从圆二色模式换为荧光模式),注意用软件将Hv (高压)关闭。
4、扫描速度在0.5-5s/nm。
使用手册上写的扫描速度有误,特别注意不要低于0.5秒/nm,过快的扫描速度易造成calibration移位。
5、如需用到emission单色器,就是那个需要用光纤连接的单色器,扫描速度要大于1s/nm,连0.5s/nm都不能用。
6、PMT的HV不要超过1000V.7、使用控温附件进行变温实验时,一定要将地上的那个水浴恒温槽打开,水槽温度设为20度以下即可。
8、TCU上设置为remote; Power supply设置为ARC.9、仪器运行过程中,更换样品时,shutter最好关闭。
二、光源的选择1、电源:图1中的Lamp power supply处有Xe(红色)、Xe(Hg)(红色)、零线(黑色)三个插孔。
零线插头为黑色,直接插到黑色的零线插孔中。
火线插头为红色,在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Xe(红色)插孔中,在做快速动力学测量的时候插在Xe(Hg)插孔中。
2、光源选择:图2中的Vertical setting部位下方的底座上有Xe、Xe(Hg)两个标示前后排列。
手动松开中间的大圆头Screws(图2中),可以拉出或推进Vertical setting。
圆二色光谱仪的使用
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圆二色光谱仪操作步骤仪器型号(法国Bio-Logic:2400304)1.打开光源打开ALX-300光源控制器机箱后部开关,而后按机箱前面板“start"按钮,然后等待15分钟保证ALX-300前面板功率显示稳定,查看是否在150±2,如不是,可用前面板左部旋钮调节至150±2),左旋(逆时针旋转)按钮可使数值变小,右旋(顺时针旋转)按钮可使数值变大;2.在数值稳定在150±2之后,打开MOS-500主机前面板开关;3.打开电脑,双击BioKine图标启动程序;在弹出的界面中,鼠标左键单击菜单栏中的“Install device":在出现的“Device Isallation对话框”中要勾选配置的仪器和附件,这里勾选了“MOS-500”。
若有温控附件则还需勾选Peltier TCU-250(股没有不用选),最后单市“OK"确认:选择菜单栏“Device”,点击Scanming spectrometer(MOS-500)”,在新弹出的小框中,选择是,然后大院等待2分钟。
设置狭缝宽度2nm(输入数值后按enter键),点击窗口上部“Acquisition Setup"在出现的“Scanning Setup对话框”中的Acquisition mode选择“CD”。
其它参数:起始波长(Begin)最低不能低于190nm,否则损伤仪器,End(nm)根据自己的需要一般300-800nm之间。
Step(nm)为扫描速度,数值越大,测样速度越快。
快门选择“常开”其它Options栏都不用勾选,CD parameters不用更改,CD unit选择Elipticity而后单击“OK”确认。
4.Ex输入190enter,点击Shutter off使变成Shutter on,点击HV off使变成HV on,点击Auto 得到330V以下电压值1-2秒后再点击一次Auto使变成灰色。
圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧
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圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer,简称CD谱仪)是一种常用的光谱仪器,广泛应用于生物化学、生物物理、有机化学等领域。
它通过测量物质对环形偏振光的吸收差异,可以研究样品的结构、构象和化学反应等信息。
本文将介绍圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧。
一、圆二色谱仪的使用步骤1. 准备样品:选择适合的样品,如蛋白质、核酸、有机小分子等,按照实验要求进行样品制备。
样品的浓度应该适中,一般在0.1-1.0 mg/mL之间。
2. 调节仪器参数:打开圆二色谱仪,根据实验要求选择合适的仪器参数,如波长范围、光程、扫描速度等。
这些参数会对谱图的质量产生较大影响,需要仔细选择。
3. 参考谱图测定:选择一个与样品相类似的参考物质,并制备成相同浓度的溶液。
将参考物溶液装入样品池,并用去离子水进行基线校正。
4. 样品谱图测定:将样品溶液装入样品池,注意不要产生气泡和表面张力现象。
同样,用去离子水进行基线校正。
扫描仪器并记录谱图。
5. 数据处理和分析:将样品谱图与参考谱图进行比较,分析其差异部分。
常见的数据处理方法包括谱图叠加、拟合曲线等。
二、谱图解读技巧1. 谱图的形态:圆二色谱图一般为正或负对称的峰形,其形态可以提示样品的结构特征。
例如,α-螺旋结构的蛋白质在200-230 nm范围内会出现负吸收峰,而β-折叠结构在190-210 nm范围内会出现正吸收峰。
2. 谱峰的位置:谱峰的位置与物质的手性有关。
一般来说,左旋(L-)物质在200-230 nm范围内表现为负吸收,而右旋(D-)物质则相反。
通过对比实验样品与参考谱图的位置差异,可以了解样品的立体构型。
3. 肩峰的存在:有些样品的圆二色谱图中会出现肩峰,它们通常位于主峰的两侧。
肩峰的存在提示样品可能存在多种构象,可能与蛋白质的不规则结构或转变有关。
4. 拟合曲线:通过将实验谱图与拟合曲线进行比较,可以获得更加精确的结果。
圆二色光谱仪的应用及安装条件 光谱仪操作规程

圆二色光谱仪的应用及安装条件光谱仪操作规程以下由我给您简单介绍圆二色光谱仪的相关信息:圆二色光谱(简称CD)目前讨论蛋白质二级结构的紧要手段之一,并已广泛应用于蛋白质的构象讨论中。
应用:1、在有机化学方面的应用在这一领域里的应用大致分为以下几个方面:A)手性结构测定,如官能团的位置及特定原子在手性分子中的位置的测定;利用对应关系和邻近关系测定紧密相关的一类化合物的相对构型;利用八区律等一类阅历和半阅历的规律,结合其它方法测定jue对构型;构象的测定等。
B)溶剂效应,讨论溶剂溶质间的相互作用及它们的光学活性。
C)温度效应,可获得分子振动或转动能级数变化等方面的信息。
D)手性介质(包括溶剂和手性大分子)诱导的光学活性的讨论。
E)用作光谱分析等等。
2、在分子生物学中的应用生物大分子的光学活性来源于其特有的空间结构。
如多肽和蛋白质的螺旋,折叠;多聚核苷酸及核酸的单股,双股,三股螺旋;以及一些糖的螺旋结构。
这些特有的空间结构是它们表达生物功能的结构基础。
通常由CD谱的形状,谱峰位置,强度及它们随试验条件的变化本身就可以得到这些很紧要的结构信息。
是生物大分子讨论的紧要领域。
3、金属络合物的讨论金属络合物稳定性和外消旋的讨论安装条件:1、试验室要防尘防湿及避开阳光直接照射,室温要求在15—25℃, 相对湿度在70%以下,试验室无磁场干扰,操作环境中不得有粉尘及干扰气体,仪器放置处应避开阳光直射,避开空调、风扇直接吹向仪器。
若使用空调则空调出风口不要正对仪器所在位置。
2、准备一个坚实稳定的试验台用于放置仪器,工作台需避开震动。
仪器所需空间为:长165cm以上,宽90—110cm,高70—80cm。
若需将计算机放置于同一平台,应将长度相应加长。
3、电源的准备:AC 220V+—5%,预置地线接头以备仪器使用时接地。
如到客户处装机,因电源达不到规定标准,或没有接地线而造成仪器显现问题,按原厂规定不予保修。
需插排插孔数量至少10个,另需一个16A插板。
圆二色谱MOS450-SFM300全套详细中文操作方法
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MOS450+SFM300 CD动力学测量操作方法1、调整Xe(Hg)灯为测量光源,具体步骤参照《光源的选择和调整》。
2、确认波长准确度,具体步骤参照《MOS450波长校正》。
3、安装快速动力学检测池及检测器位置的调换,具体步骤参照《MOS450+SFM300动力学实验前准备条件》。
4、打开MPS-70、ALX-250、MM-450、PMS-450电源。
5、打开电脑,点击图标,进入操作软件界面。
6、点击Device—Transient Recorder图1出现如下界面。
图27、点击图2主界面左上方的按钮,进行加样和样品量的定位。
(1)当Syringe1、Syringe2、Syringe3中的注射杆上升到最高位置时,点击图3中的,使软件中Syringe1、Syringe2、Syringe3的量清空。
(2)如图4,把样品装入塑料注射器并赶走注射器中的气泡后,插入Syringe1上口,同时把选择阀扳到R的位置。
(3)点击图3中的Syringe1位置,使Syringe1栏被红框圈定,一直点击,向Syringe1中加入样品。
然后点击几下,推出一部分样品同时推出Syringe1中的气泡,重复加样推样几次,完全赶走Syringe1中的气泡。
然后将选择阀扳到C的位置,点击,同时注意废液口是否有液体流出,有液体流出代表1号样品已充满快速动力学管路,加样完成并准确定量,处于动力学实验准备状态。
图3(4)再按照步骤(2)和(3)所述的方法将Syringe2和3都加好样并都扳到C的位置,充满所有反应管路,处于动力学实验准备状态。
图48、点击,进行样品混合参数的设定,如图5。
Mixing ratio:样品1、2和3的混合比例设定V olume:混合样品的量Total flow rate:混合样品的总流速Start of data acquisition:开始采样的时间注意:当窗口里显示绿色表示参数设定正常,如果显示橙色、红色表示参数设定不正常,需要重新调整。
圆二色谱仪使用

圆二色谱仪使用手册实验前请先阅读第一部分注意事项20RR年4月6日整编河北大学理化中心目录一、注意事项二、光源的选择三、MOS450波长的校正四、电压的调节五、M OS-450圆二色光谱扫描操作规程六、MOS450-SFM300动力学操作方法一、注意事项1、滴定及变温实验时,需要磁子搅拌。
实验结束时首先拔掉搅拌电源。
在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。
2、光源(也就是氙灯或汞氙灯)不可频繁开关。
举例而言,如果马上不用仪器,但半个小时后需要使用仪器,就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。
短时间内频繁开关光源反而会缩短光源寿命。
3、光电倍增管移动时(比如从圆二色模式换为荧光模式),注意用软件将Hv (高压)关闭。
6P MT HV1000V.7、使用控温附件进行变温实验时,一定要将地上的那个水浴恒温槽打开,水槽温度设为20度以下即可。
8、TCU 上设置为remote;PowersupplR设置为ARC.9、仪器运行过程中,更换样品时,shutter最好关闭。
二、光源的选择1电源:图1中的LamppowersuppIR处有Re (红色)、Re(Hg)(红色)、零线(黑色)三个插孔。
零线插头为黑色,直接插到黑色的零线插孔中。
火线插头为红色,在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Re (红色)插孔中,在做快速动力学测量的时候插在Re(Hg)插孔中。
2、光源选择:图2中的Verticalsetting部位下方的底座上有Re、Re(Hg)两个标示前后排列。
手动松开中间的大圆头Screws(图2中),可以拉出或推进Verticalsetting。
当Verticalsetting的金属头通过前后移动到下方的哪个标示位置上,也就是那个标示所示的灯正对着光路,为测试用光源。
做快速动力学测量的时候选Re(Hg),做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时选Re,最后再旋紧中间的大圆头Screws。
注:Re(Hg)灯中的Hg元素有一些很强的特征谱线,加强了Re元素发光的强度,对于动力学测量要求一个波长的光源能量要强,才能测量较为精确的谱图。
圆二色光谱仪(cd)表征
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圆二色光谱仪(cd)表征
圆二色光谱仪(CD)表征是一种用于研究分子结构和构象,分析
蛋白质、核酸等生物大分子二级结构的高分辨率技术。
CD技术最早应
用于化学领域,如化学键反应的研究,现已广泛应用于生物学、药物学、医学和材料科学等领域。
基本原理:
CD是强度吸收差谱测量技术,利用手性分子(不能跟其镜像重合的化
合物)的特性,根据其在右旋偏振光和左旋偏振光的不同吸收,来研
究分子的构象。
CD谱从波长190-320 nm可见,用强度差Δ A(CD)
或直接CD值来描述。
实验步骤:
1. 样品制备:将样品置于薄膜中,厚度约为0.1 mm,避免空气泡存在。
2. 光路检查:将样品放入样品室中,进行波长和基线的设置。
3. 监测:加入滴定管,记录CD强度吸收差随波长的变化。
4. 数据分析:通过CD曲线分析获得蛋白质、核酸等分子的二级结构信息。
应用领域:
1. 生物学领域:通过CD表征技术,可分析蛋白质的二级结构、折叠及稳定性等特性,还可以分析酶、抗体、肽、鸟苷酸等分子的构象。
2. 药物学领域:CD表征技术可用于研究药物与其靶点的相互作用,交
互作用、配基特征和构象等。
3. 材料科学领域:CD技术可用于研究由低分子化合物构成的配合物,聚合物和纳米粒子等材料的超分子组装过程。
总结:
CD表征技术是研究大分子结构与构象的重要方法,其广泛的应用领域包括生物学、药物学、医学和材料科学等领域。
通过CD分析获得的分子结构与构象信息对新药研究、药物设计和新材料的开发具有重要的指导意义。
圆二色光谱仪(Chirascan)仪器操作步骤

圆二色光谱仪 Chirascan简明操作步骤1.开通氮气通氮气约10分钟后,再进行开通电源等下述步骤。
2.开启电源2.1按“lamp”开关,接通氩灯(xe)的电源,等待约15秒后,按“start”开关,看到氙灯被点亮,有指示灯光透出。
2.2按“System”开关,仪器开始自检,Status指示灯渐渐变为稳定的绿色,Rx,TX指示灯闪亮。
3.开启电脑及软件3.1开启电脑,选择用户帐号( Chirascan user)3.2点击“Chirasean”软件到ProData Chirasean主界面3.3点击图标快捷键3.4设定文件名、工作文件夹及当前工作目录:在E盘中,点击New folder快捷键,命名新建的文件,并设为当前工作目录(点),接下来的测试数据就被直接保存记录下来了。
3.5设置测试条件参数Wavelength改为400,点击set,High改为400,点set4.开始一个光谱测试实验4.1首先测试系统背景值空气的吸收情况,样品池中不放任何物体直接采集空气的值,点击“Background”。
4.2测试比色皿及buffer的光吸收性质:选择合适的比色皿,用甲醇清洗比色皿,加入400ul 或200ul甲醇,将比色皿按照一定的方式和方向(比色皿上字朝右)放入仪器,盖上盖子,点击改样品名字,在Spectrum输入Meoh,后面为记样次数(改为0),点击OK,点击“Acquire”。
4.3样品测试使用上一步测试buffer的同一个比色皿,清洗比色皿,稀释样品,将比色皿按照一定的方式和方向(比色皿上字朝右)放入仪器,点击改样品名字,在Spectrum输入样品编号,后面为记样次数(改为1),点击OK,点击“Acquire”。
菜单栏点Window,New Window,Absorbance(紫外),紫外不超过3(1~2)。
5.数据处理测试完成后,关闭紫外吸收的窗口,放大CD窗口将甲醇数据从左边拖到图中,点击界面“D”快捷键处理数据点击Meoh ,设基线set baseline,甲醇点击样品,背景扣除Subtract baseline,解除背景设定unset baseline,选中扣除背景后的样品文件subtracted:0,移除其他Remove Others,选中subtracted:0,点smooth,Smooth后,点OK,选中Smooth(s):0,点Remove Others,OK。
圆二色光谱仪操作规程

圆二色光谱仪操作规程一、实验前的准备工作1.检查光谱仪是否正常工作,包括光源、单色器、检测器等。
2.清洁光谱仪内部和外部的透镜和镜片,以确保光的传输和输入的准确性。
二、仪器的设置1.打开光谱仪电源,根据厂家说明进行启动。
2.调整光谱仪的入射、出射、相角器的位置,使其垂直于样品台。
3.调整光谱仪的扫描速度和开始终止角度,根据实验要求进行设置。
三、样品的准备1.准备待测样品,并将其置于样品台上。
2.样品台应与光源、单色器、检测器等配合,确保光通过样品时不会发生漏光和反射。
四、运行光谱仪1.打开光谱仪软件,并进行相应的设置,确保样品台在与单色器、检测器光路对正的位置。
2.点击开始按钮,光谱仪将开始扫描样品。
3.在扫描过程中,观察光谱仪软件上的实时光谱图,并确保采集到清晰的信号。
4.等待扫描结束,并停止程序,保存光谱结果。
五、数据处理与分析1.使用光谱仪软件对保存的光谱数据进行处理和分析。
2.根据实验要求,可以进行波长校准、光谱曲线的平滑和修整等操作。
3.根据光谱数据分析样品的组成、结构和特性等。
六、实验后的操作1.关闭光谱仪电源,并进行相关的清洁和保养工作。
2.将光谱仪的数据存储设备连接到计算机上,导出实验结果并保存。
3.整理实验现场,确保实验室的整洁和安全。
七、注意事项1.在操作光谱仪时,要避免直接接触光源,以防止烫伤。
2.在更换样品时,要注意样品的处理和保护,避免污染和损坏样品台。
3.在操作光谱仪时,要小心使用相关设备和工具,以防止误伤和损坏仪器。
4.实验结束后,要及时关闭光谱仪电源,并进行清洁和保养工作,以延长仪器的使用寿命。
尚伟 圓二色偏光儀 中文操作手冊

[Move Wavelength ] : 改變目前檢視之波長 [CD Detector…] [Light Source…] [Exit…] [Help] 功能表 [Error Information. .] : 顯示錯誤訊息清單 [About...] :顯示軟體版本訊息 : 改變目前檢視之波長 : 設定燈源之開/關並顯示其使用時間 : 離開即時讀值檢視功能
Title bar
Spectrum Measurement ,出現測量畫面
Minimize button 隱藏視窗
功能表
Menu bar
放大至全螢幕 Maximize button 關閉視窗 Close button
即時顯示讀值 Monitor bar
Data display field 測量圖譜
[Measurement] 功能表 [Start] [Parameter...] [Accessory...] [External Trigger] [Exit] [Control] 功能表 [Move Wavelength...] [CD Detector...] [Light Source...] [Shutter...] [Zero Clear] [ORD-M Zero Clear] [Accessory...] [View] 功能表 [Channel 1] [Channel 2] [Channel 3] [Channel 4] [Help] 功能表 [Error Information...] [About...] : 顯示錯誤訊息清單 : 顯示軟體版本訊息 : 顯示或取消第一通道訊號 : 顯示或取消第二通道訊號 : 顯示或取消第三通道訊號 : 顯示或取消第四通道訊號 : 改變顯示波長 : 設定檢知器感度 : 點亮或關閉燈源 : 打開光源閘門 : 讀值歸零 : ORD 讀值歸零 : 改變測量附件參數 : 啟動或停止測量 : 設定測量參數. : 選擇測量附件 : 外部啟動裝置 : 離開測量功能
圆二色谱仪使用.

圆二色谱仪使用手册实验前请先阅读第一部分注意事项2011年4月6日整编河北大学理化中心目录一、注意事项二、光源的选择三、MOS 450波长的校正四、电压的调节五、MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程六、MOS 450-SFM 300动力学操作方法一、注意事项1、滴定及变温实验时,需要磁子搅拌。
实验结束时首先拔掉搅拌电源。
在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。
2、光源(也就是氙灯或汞氙灯)不可频繁开关。
举例而言,如果马上不用仪器,但半个小时后需要使用仪器,就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。
短时间内频繁开关光源反而会缩短光源寿命。
3、光电倍增管移动时(比如从圆二色模式换为荧光模式),注意用软件将Hv(高压)关闭。
4、扫描速度在0.5-5s/nm。
使用手册上写的扫描速度有误,特别注意不要低于0.5秒/nm,过快的扫描速度易造成calibration移位。
5、如需用到emission单色器,就是那个需要用光纤连接的单色器,扫描速度要大于1s/nm,连0.5s/nm都不能用。
6、PMT的HV不要超过1000V.7、使用控温附件进行变温实验时,一定要将地上的那个水浴恒温槽打开,水槽温度设为20度以下即可。
8、TCU上设置为remote; Power supply设置为ARC.9、仪器运行过程中,更换样品时,shutter最好关闭。
二、光源的选择1、电源:图1中的Lamp power supply处有Xe(红色)、Xe(Hg)(红色)、零线(黑色)三个插孔。
零线插头为黑色,直接插到黑色的零线插孔中。
火线插头为红色,在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Xe(红色)插孔中,在做快速动力学测量的时候插在Xe(Hg)插孔中。
2、光源选择:图2中的Vertical setting部位下方的底座上有Xe、Xe(Hg)两个标示前后排列。
手动松开中间的大圆头Screws(图2中),可以拉出或推进Vertical setting。
圆二色谱仪操作规程培训

4)比色皿:
石英比色皿由于加工过程产生形变可显示圆二色性,故需使用低CD信号的比 色皿。
比色皿清洗:保证测试重复性。禁止超声清洗,Pierced等专门清洗剂(清洗 剂洗后建议用2M)、碱溶液、50%硝酸等。
for protein:近紫外区使用光程长≥5mm的,远紫外区使用1mm-0.1mm。
3D数据分析:
需进行2D数据提取后方可进行有关分析。点击Interval Data Analysis软
件,打开.jwb格式3D数据文件。
5、关机与测试注意事项
1)关机程序: 关闭软件、关闭电脑和J-1500主机电源、关闭水循环、通气10min后关 闭氮气。
2)样品架确认:仪器开机前确认安装的是何种样品支架,若是变温支架必 须先开循环水才能开机。
HT<170可损坏PMT检测器。
பைடு நூலகம்
4、数据分析
1)数据类型: 2D数据:.jws格式,光谱分析软件以及二级结构分析软件都是需要这种 格式数据文件。 3D数据:.jwb格式,需根据需要提取2D数据后进行相关分析。
2)蛋白质二级结构软件分析:CD单位需为摩尔浓度,故需已知蛋白浓度( mg/ml),氨基酸残基平均分子量(未知时,一般取110)。
JASCO J-1500圆二色谱仪操作培训
----食品科技学院 中心实验室 唐老师
目录
1、圆二色谱仪基本原理与应用 2、 JASCO J-1500 基本组成与附件 3、开机与基本操作规程 4、数据分析 5、关机与试验注意事项
1、圆二色谱仪基本原理
圆二色性(CD):活性物质对左、右旋圆偏振光的吸收率差值,将传播的左右圆偏振光 变成椭圆偏振光。
多功能圆二色光谱仪参数特点光谱仪操作规程

多功能圆二色光谱仪参数特点光谱仪操作规程紧要用于手性光学活性物质的讨论Q可用于有机立体化学讨论、光学活性物质纯度测试、药WU定量分析、天然有机化学、生物化学与宏观大分子、金属络合物化学、聚合物化学、蛋白质折叠讨论、蛋白质构象讨论、物理化学等。
技术参数:M0S—450/AF—CD-STP-A圆二色光谱仪1)光源:同时装置两个光源150W制灯及150W汞筑灯。
2)检测功能:紫外吸取光谱,圆二色光谱,总荧光谱,光散色谱,线二色谱及荧光各相异性谱。
3)波长范围:165~900nm4)波长精准度:0.1nm(165—900nm)5)光学系统:双光栅(1200条∕mm)6)杂散光:2X10—4%(200nm)7)噪声:荧光检测:水拉曼峰信噪比>2000:1紫外检测:5X10-Urms圆二色检测:0∙Olmdeg8)基线稳定性:0.0Imdeg/hr9)采样频率:10U秒./每点1000秒/每点。
快速动力学停流装置1)混合模式:三一四路混合,各路独立步进电机掌控。
2)zui小注射体积:IOuL3)每路流量范围:0.011.OmL/秒4)混合比:可连续变化由1:1至1:1005)混合器:球型gao效率混合池。
6)注射针体积:10ml7)ZUi小死畴0.25毫秒(用微量检测池附件时)8)扩充本领:冷冻淬灭,超低温停流,温度跳动变化(Temp.Jump)及自动滴定,原位微电导检测等。
9)软件:单一软件可自动掌控停流反应及光谱测量紧要特点:1)一机多功能可检测:紫外吸取光谱,圆二色光谱,总荧光谱,光散色谱,线二色谱及荧光各相异性谱。
2)各路独立步进电机掌控快速动力学停流装置。
直读光谱仪的测量1、使用环境:放置光谱仪的试验室应当防震,干净,通风干燥(如南京麒麟生产的QL-5800A型直读光谱分析仪的环境要求:温度23正负5之间,适度在15—70%之间),一般来说直读光谱仪的相对适度应当小于80%,室内温度应当保持在0—50度之间,在同一个校准周期内室内温度变化不超过5摄氏度。
J-1500型圆二色光谱仪操作规程

J-1500型圆二色光谱仪操作规程1.开氮气,并将流量计调到2-4L/min。
2.打开J-1500和计算机电源,开机。
3.点击SpectraManager桌面图标进入SpectraManager软件操作界面。
4.点击Spectra Measurement,开始仪器初始化,初始化结束后出现光谱扫面Sp ectra Measurement界面。
5.点击氙灯图标,倒计时结束后氙灯打开,氙灯预热15min后开始实验。
氙灯预热时可以点击Measure下的Parameter setting,进入测量参数的设定界面。
6.参数选择和设定General菜单下:Channels中选择测量模式。
Start(nm):扫描起始波长End :扫描结束波长。
Start mode :开始模式选择。
Scanning mode :扫描模式选择。
Scanning speed :扫描速度选择。
Sensitiveity :根据样品测量信号的振幅选择测量CD的灵敏度。
D.I.T : Digital Integration Time,响应时间选择。
Band width :标准操作时,谱带宽度选为1 nm。
Slit width : 狭缝选择,对于高分辨率测量,要用较窄的狭缝宽度。
Accumulation/Repeat :扫描次数设定。
Acquisition Duration:采点时间(0.05S~20S)。
Control选项里将shutter is opened and closed automatically选上。
7.样品的测量(1)放入空白样品,点击Baseline Measurement进行基线测量。
测量结束后,把Parameter settings中control下的baseline选中,可以进行空白的扣除。
(2)放入待测样品,点击Sample Measurement进行样品的测量。
(3) 固体粉末样品测试时,要尽可能地研磨获得细小均匀的样品,夹在石英片中间是用力要均匀,样品架旋紧即可,不可以用力过度,以免损伤石英片和样品架。
(完整word版)圆二色光谱仪操作规程

MOS-450圆二色光谱扫描操作规程1. 测量波长小于210nm,需要对仪器进行氮气吹扫处理。
打开氮气,调整流量计流速为16.6L/min,通氮气几分钟。
确认ALX-250的电源线插在氙灯的位置,并且氙灯已对准光路,具体操作见光源的选择操作说明。
然后打开ALX-250光源开关,将氮气流量计流速设为6.6L/min,预热15分钟后,查看ALX-250面板显示,微调旋钮,将功率确定在150W,光源准备完毕。
2. 测量波长大于210nm如果无需氮气吹扫,直接打开ALX-250电源,等待功率稳定在150W后进行下一步操作。
3. 打开ALX-250的同时,打开MM-450和PMS-450电源,一起预热15分钟。
4•将装有待测样品空白溶液(如水或缓冲盐)的石英池放入样品仓,盖上盖子,(所用的石英池必须经过仔细的清洗)。
5. 点击电脑桌面上的节£图标,进入BioKine软件操作主界面。
BicKiaH. LNL6. 点击图1主界面的Device/Scanning Spectrometer进入光谱扫描界面,如图2。
图1 图27. 在要测量波长的范围内取一个波长数值,输入到图2下方的Ex处,点击Enter键。
这时确认I八山按钮变为I皿3,然后点击壬—,自动调整HV电压,然后再点击上三按钮,锁定此电压值。
8. 点击主界面上方的「一按钮,选择光谱测量方法,如图3。
图3Acquisition mode:选择测量模式CD。
Begin(nm):扫描初始波长End(nm):扫描结束波长Scan Repeat :扫描次数Acquisition duration:每个nm的测量持续时间,范围0.05s-20so圆二色扫描推荐值20s,建议最小大于1 s。
ShutterAutomatic mode:选择Always open,挡板处于始终打开的状态。
PM gai n*10 :当在非常低的信号测量,可选择此项,进行信号的增益。
圆二色谱方法
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圆二色谱方法一、基础知识介绍圆二色谱是一种用于研究分子旋光性的光谱技术,通过测量样品在圆偏振光照射下的吸收光谱,可以获得关于分子手性、构象和动态行为等信息。
圆二色谱广泛应用于化学、生物学、药学等领域。
二、实验原理当左旋圆偏振光和右旋圆偏振光以一定比例混合时,形成椭圆偏振光。
当这种椭圆偏振光通过手性分子时,左旋和右旋偏振光会被不同吸收,导致透射光的强度和旋光性发生变化。
通过测量透射光的强度和旋光性,可以获得样品的圆二色谱。
三、实验步骤1.准备样品:制备适当浓度的样品溶液,确保样品在手性环境中。
2.安装仪器:将样品放入圆二色谱仪器的样品池中,确保密封良好。
3.设定参数:设置实验参数,如波长范围、扫描速度等。
4.开始实验:启动仪器,开始测量样品的圆二色谱。
5.数据分析:处理实验数据,提取相关信息。
四、数据分析在圆二色谱实验中,通过测量透射光的强度和旋光性,可以绘制出样品的圆二色谱图。
通常情况下,圆二色谱图以波长为横坐标,以旋光度差值ΔOD(或ΔA)为纵坐标。
通过分析圆二色谱图的峰位、峰形和峰强等信息,可以推断出样品的构象、手性和动态行为等。
五、影响因素影响圆二色谱实验结果的因素很多,主要包括温度、浓度、溶剂极性等。
这些因素可能会影响分子的构象和手性,从而影响实验结果。
因此,在实验过程中需要控制这些因素,以确保实验结果的准确性。
六、应用领域圆二色谱方法在多个领域中有着广泛的应用,例如:在手性识别与拆分领域中,可以用于检测手性化合物的纯度;在化学反应监控领域中,可以用于研究化学反应的机理和动力学;在生物学领域中,可以用于研究生物分子的结构和功能等。
七、实验注意事项1.在实验过程中要保持恒温,避免温度波动对实验结果的影响。
2.确保样品的浓度和纯度符合要求,避免杂质干扰实验结果。
3.正确选择溶剂和浓度,以确保分子处于合适的构象状态。
4.在数据分析过程中要注意峰位的准确性,避免由于仪器噪声等因素引起的误差。
八、展望随着科技的不断发展和进步,圆二色谱方法的应用前景也越来越广泛。
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一. 圆二色检测的检测原理及特点
当一束平面偏振光通过光学活性物质时,由于左右圆偏振光的折射率不同,偏振面将旋转一定的角度,这种现象称为旋光(Opticalrotation),偏振面旋转的角度称为旋光度。
若光学活性物质含有生色团对左、右圆偏振光的吸收能力也不同,则造成通过的左、右圆偏振光不仅速度不同,而且振幅也不一样。
因此,叠加产生的偏振光将不再是平面偏振光,而是椭圆偏振光,这种现象称为圆二色性。
圆二色检测器的响应信号与旋光物质对左、右圆偏振光的吸收差成正比,圆二色性与波长有关,以偏振光的吸光度差△ε为纵坐标,波长A为横坐标做图,便得到圆二色谱图。
由于△ε占绝对值很小,常用摩尔椭圆度θ代替,其中[θ]=3300ε。
当圆二色检测器与液相色谱联用时,一般来讲,对于单一对映体,在色谱图中可能出现正峰或负峰;而外消旋体不出峰,如果对映体含量不同,则色谱图上表现出的是占优势百分含量对映体的信号峰。
圆二色检测器选择性高,只对旋光活性化合物有响应,而无旋光活性的化合物不干扰测定;检测器在温度和溶剂变化时比较稳定,具有梯度兼容性;另外,圆二色检测器与其他检测器的结合使用,能在部分或无手性分离条件下测定对映体的纯度,大大降低了分离要求;圆二色谱图包含信息量大,结果更直接
HPLC-CD技术的应用:
在非手性色谱条件下测定对映体纯度手性化合物绝对构型测定复杂基质中手性化合物分析
HPLC-CD技术的优点:
不需要对样品进行高温气化和衍生化处理不需要手性固定相直接测定对映体纯度被用于不对称合成中高通量的筛选催化剂
二.使用程序:
1.打开检测器,打开电脑进入chromNAV control,输入用户名Administrator密码root
2.双击sun选中123进入
3.点击Edit Method输入条件,建立方法
4.选择建立好的方法开始
5.待基线平以后,点击start,马上进样,进样时手柄一定要对准inject,进样完恢复到load
位置
6.检测完毕后,关闭仪器。